全 文 ：5种狼毒大戟提取物对结核杆菌抗菌作用的比较
赵奎君 1 , 杨　隽 1 , 张蒲芝 2
( 1.中国人民解放军北京军医学院　 100071;　 2.南京胸科医院　 210009)
摘要:对狼毒大戟根的水、甲醇、醋酸乙酯、氯仿、石油醚 5种提取物进行了结核杆菌的体外抑菌试验。结果表明 , 5种
提取物均有不同程度的抑菌作用 ,其中以石油醚部分抑菌作用最强。
关键词:狼毒大戟 ;　结核杆菌 ;　抗菌作用
中图分类号: R285. 5　　文献标识码: A　　文章编号: 1008-0805( 2000) 07-0589-01
Comparative Observation on the Inhibitory Effects
against Tuberculous Bacillus of 5 Extracts of the Roots of Euphorbia f ischer iana
ZHAO Kui-jun
1
, YAN G Jun
1
, ZHANG Pu-zhi
2
( 1. Beij ing Mili tary Medical Col lege of PL A , Beij ing 100071, China;
2. N anjing Chest Hospital , Nanjing , 210009, China )
Abstract: This paper presents th e experimental results o f the inhibitor y effects ag ainst tuberculous bacillus o f 5
ex tra cts of the ro ots of Euphorbia f ischeriana. All 5 kinds of ex trac ts tested have the antibacterial activi ty ag ainst
tuberculous bacillus in var ying deg ree and of them, pe tro leum ex tra ct is the most effectiv e.
Key words: Euphorbia fischeriana;　 Tuberculous bacillus;　 Antibacterial eff ect
　　狼毒应用于结核病的治疗 ,早在《神农本草经》 [1 ]中就有记载:
狼毒治“鼠瘘” (“鼠瘘”即为淋巴结核 )。近年来 ,临床上应用狼毒治
疗结核病已有不少报道 [2, 3 ]。 其所使用的品种 ,经考证多为大戟科
的狼毒大戟 Euphorbia fischeriana Steud.。为此 ,我们对狼毒大戟
根的水、甲醇、醋酸乙酯、氯仿、石油醚 5种提取物进行了结核杆菌
的体外抑菌试验 ,以寻找其抗结核杆菌的活性部位。
1　材料和方法
1. 1　材料: 狼毒大戟 Euphorbia f ischeriana Steud.根 ,采自辽宁
抚顺 ,经作者严格鉴定。
1. 2　药液的制备 :取狼毒大戟根粉末 ( 60目 ) 10 g ,分别依次用石
油醚、氯仿、醋酸乙酯、甲醇、水提取 ,回收溶剂后得各提取物。将各
提取物定量溶于 100 ml容量瓶中 ,加无水乙醇至刻度 ,制成 10%
(W /V )浓度的药液 ,置冰箱中备用 ( 4℃ )。
1. 3　培养基制备: 采用改良苏通氏半固体琼脂培养基。组成为:天
门冬素 6. 0 g ,枸橼酸 3. 0 g ,磷酸二氢钾 0. 75 g ,硫酸镁 0. 75 g ,枸
橼酸铁铵 0. 075 g ,甘油 15 ml,蒸馏水 1 500 ml。加热溶解后 ,以浓
氨水调 p H至 7. 2。 过滤 ,加 250 mg琼脂 , 2. 0× 104 Pa , 20 min灭
菌。
1. 4　含药培养基的制备: 取上述各药液 0. 8 ml,分别加入含
1. 5% (W /V ) Tw een-80的培养基 7. 2 ml,即成 1 /100稀释度 ;再
取 1 /100稀释度的培养基 4 ml,加入培养基 (不含 Tween-80) 4
ml,混匀即成 1 /200稀释度 ;如此稀释 ,分别制成 1 /400, 1 /800, 1 /
1 600, 1 /3 200, 1 /6 400, 1 /12 800共 8个浓度 ,每个浓度装两个试
管 ,然后以 1. 1× 104 Pa , 20 min灭菌备用。
收稿日期: 1999-01-21;　修订日期: 2000-02-28
作者简介: 赵奎君 ( 1959-) ,男 (满族 ) ,辽宁省抚顺市人 ,现任中国
人民解放军北京军医学院药学系副教授 ,硕士学位 .
表 1　 5种狼毒大戟提取物抑制结核杆菌的比较
物质 2周
Aa B C D E F G H
3周
A B C D E F G H
4周
A B C D E F G H
1b - - - - - - + + - - - - - - + + - - - - - - + +
2 - - - - - + + + - - - - + + + + - - - - + + + +
3 - - - + + + + + - - - + + + + - - - +
4 - - - - - - - - -
5 - - - - - - - - -
6
7
　　注: A～ H,提取物浓度: A= 1 /100,B = 1 /200,C= 1 /400, D= 1 /800, E= 1 /1 600, F= 1 /3 200, G= 1 /6 400, H= 1 /12 800
1～ 5, 5种提取物: 1.石油醚提取物 , 2.氯仿提取物 , 3.乙醚提取物 , 4.甲醇提取物 , 5.水提取物 , 6.乙醇对照 , 7.空白对照
判断标准:以 2次实验综合结果为准 ,结果不一致者按“+ ”计。“ -” ,未见菌落生长 ;“+ ” ,菌落数 1～ 2个 ;“+ + ”菌落数 2～ 8个 ;“+ + + ” ,菌落数 8个
以上 ,或少于 8个但液面有菌膜生长
1. 5　菌液制备及接种方法: 供试菌株为在改良罗氏 ( Low enstein
Jensen )培养基上生长良好的强毒人型结核杆菌 ( H37Rv )。 取上述
菌种适量 ,置盛 0. 5 ( v /v ) Tw een-80生理盐水的试管中 ,研磨成
混悬液 ,用比浊法将浓度调整至 1 mg /ml,再用生理盐水稀释 ,使
之浓度为 4× 10- 2 ,供接种用。取该菌液 0. 1 ml,在无菌条件下分别
接种于不同浓度的各含药培养基中 ,使接种菌量约为 1× 10- 3mg /
ml。 放入 37℃恒温箱中培养 4周 ,从第 2周起开始观察 ,观察到第
4周。
1. 6　空白及溶剂对照: 取试管两只 ,分别加入纯培养基 4 ml,做空
白对照用。 另取无水乙醇 0. 8 m l代替药液 ,按含药培养基制备方
法进行稀释 ,每个浓度两只试管 ,共计 8个浓度。 各试管同样按上
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LISHIZHEN M EDICINE AND M A TERIA M EDICA RESEARCH 2000 VO L. 11 NO. 7 时珍国医国药 2000年第 11卷第 7期
葛根素对兔脑循环及脑代谢的 影响
王福文 1 , 王磊一2 , 徐淑兰 1 , 柴象枢 1
( 1.山东省医学科学院药物研究所 ,山东 济南　 250062;　 2.山东医科大学附属医院 ,山东 济南　 250012)
摘要:观察了葛根素对兔脑循环及脑代谢的影响。 结果表明 ,葛根素可以明显增加兔脑血流量 ,并显著提高兔脑耗氧
量和葡萄糖摄取量 ,且呈剂量依赖性。 提示葛根素具有改善脑循环和脑代谢的双重作用。
关键词:葛根素 ;　脑血流量 ;　脑代谢
中图分类号: R285. 5　　文献标识码: A　　文章编号: 1008-0805( 2000) 07-0590-02
Effect of Puerarin on Cerebral Circulation and Cerebral Metabolism in Rabbit
W ANG Fu-w en
1
, W ANG Lei-yi
2
, XU Shu-lan
1
, CHAI X iang-shu
1
( 1. Insti tute of Materia Medica , Shandong Academy of Medical Sciences , J inan 250062, China;
2. Aff iliated Hospital of Shandong University of TCM , J inan 250012, China )
Abstract: This pape r studied the effect o f puera rin on cer ebral circula tion and cerebra l metabolism in rabbit. The
r esults show ed puer arin significantly incr ea sed ce rebral blo od flow (CBF ) a nd elev ated cer ebral metabolic ra te fo r
o xygen (CMRo2 ) and g lucose (CMRglu ) in a concentra tion-response fashion. This suggests pue rarin had double
func tion o f improv ing cerebro cir culation and cer ebr ome tabo lism.
Key words: Puera rin;　 Cerebra l blood flow;　 Cerebral metabolism
　　葛根素是从植物野葛 Puera rin lobata (Wild. ) Ohwi的根中
提取的一种异黄酮单体 ,我们以前的工作已经证实了葛根素具有
β -受体阻断作用 [1] ,以及对大鼠急性不完全性脑缺血及局灶性脑
缺血有保护作用 [2 ] ,并且可以延缓易中风型自发型高血压大鼠缺
血性痉挛的发作和死亡 [3]。为此 ,进一步研究了葛根素对兔脑循环
及脑代谢的影响。
1　材料
1. 1　动物: 新西兰兔 32只 ,体重 2. 0～ 3. 0 kg,雌雄兼用 ,由山东
医科大学实验动物中心提供。
1. 2　药品:葛根素注射液 ,由山东省医学科学院药物研究所提供 ,
批号 951008。 尼莫地平 ,山东新华制药厂 ,批号 950710。
1. 3　仪器: M F-1200型电磁流量计 ,日本产。 STAT-PROFILE-5
型电解质分析仪 ,美国产。
2　实验方法
2. 1　动物制备: 动物经乌拉坦 ( 1. 0 g /kg )耳缘静脉注射麻醉 ,行
气管插管 ,分离二侧股动脉 ,一侧记录血压 ,另一侧抽取动脉血。同
时分离一侧颈总动脉及颈内动脉和颈外动脉 ,结扎颈外动脉及其
分支以备在颈总动脉处安放电磁流量计探头。 将兔头固定于立体
定位仪上 ,切开颅顶皮肤 ,暴露后囟人字缝处 ,在窦汇上方钻孔以
备抽取脑静脉血。
2. 2　动物分组: 将动物随机分为 4组 ,即葛根素大剂量组 ( 48 mg /
kg )、葛根素小剂量组 ( 24 mg /kg )、尼莫地平组 ( 3μg /kg )和生理盐
水对照组。 每组动物 8只。 耳缘静脉注射给药。
2. 3　血流动力学测定:左侧股动脉插管经压力换能器连于 AP-
621 G载波放大器记录血压 ,用 AT-611 G心率计数器对心率进行
积分记录。
2. 4　颈内动脉血流量测定 [4 ]:应用测定颈内动脉血流量的方法来
判断脑血流量 (CB F )。将口径适宜的探头置于一侧颈总动脉上 ,并
连接于 M F-1200型电磁流量计 ,由颈内动脉血流量来判断 CB F。
收稿日期: 2000-01-24;　修订日期: 2000-03-03
作者简介:王福文 ( 1966-) ,男 (汉族 ) ,山东省莱阳人 ,现任山东省
医学科学院药物研究所药理室助理研究员 ,学士学位 ,主要从事生
理药理学研究 .
述方法灭菌、接种、培养、观察。
2　结果与讨论
2. 1　狼毒大戟根的 5种溶剂提取物在 1 /400稀释度下均有抑菌
作用 (见表 1) ,而溶剂对照管在 1 /100稀释度下结核杆菌即生长
良好 ,说明乙醇浓度在 10%以下无抑菌作用。 抑菌作用最强的为
石油醚提取物 ,M IC为 1 /3 200。
2. 2　我们同时用罗氏长斜面培养基对 5种狼毒大戟根提取物的
1 /200稀释度作抑菌试验 ,结果各提取物的含药试管中 ,斜面上无
结核杆菌菌落生长 ,表现了很强的抑菌作用 ,这与前述实验结果相
吻合。
2. 3　从第 2周到第 4周 ,除氯仿提取物的 1 /1 600稀释度由“ - ”
转为“+ ”外 ,其余无明显变化 ,说明各种提取物的抑菌作用较为稳
定。
参考文献:
[1]　魏吴普述 .孙星衍 ,孙冯翼辑 .神农本草经 [ M ] .上海: 商务印书馆 ,
1995∶ 110.
[2 ]　包头市第二医院 .用狼毒注射液治疗肺结核 40例疗效观察 [ J] .中医
药通迅 , 1974, ( 1)∶ 62.
[ 3 ]　抚顺机床厂医院 .复方狼毒静脉注射治疗结核病 [ J ].辽宁医药 ,
1977, ( 1)∶ 37.
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时珍国医国药 2000年第 11卷第 7期 LISHIZHEN M EDICIN E AND M ATERIA MEDICA RESEA RCH 2000 VO L. 11 N O. 7