全 文 ：第19卷 第5期
Vol.19 No.5
2013年 5月
May.2013Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
互叶白千层水提物药理作用研究*
李燕婧，钟正贤，林 霄，刘布鸣
（广西中医药研究院,广西中药质量标准研究重点实验室，广西 南宁 530022）
[摘要] 目的：观察互叶白千层水提物的药理作用。方法：采用巴豆油致小鼠耳廓肿胀法、微量2倍稀释法、小鼠热板法、
小鼠被动皮肤过敏试验、豚鼠磷酸组胺致痒试验等试验方法观察互叶白千层水提物的药理作用，并对其进行急性毒性试验。
结果：互叶白千层水提物能抑制巴豆油引起小鼠耳廓肿胀；提高小鼠热刺激疼痛的痛阈值；对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球
菌、大肠埃希杆菌、白色念珠菌有较强抑菌作用；抑制小鼠被动皮肤通透性；增加豚鼠耐受磷酸组胺的致痒阈；互叶白千层水
提物的最大给药量为225.62 g生药/kg。结论：互叶白千层水提物具有抗炎、镇痛、抗菌、抗过敏、止痒等药理作用，且毒性小。
[关键词] 互叶白千层；水提取物；药效学；急性毒性试验
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2013）05-0086-03
Study on Pharmacological Action of Aqueous Extract from Melaleuca Ahemifolia
LI Yan-jing, ZHONG Zheng-xian, LIN Xiao, LIU Bu-ming
(Guangxi Institute of Chinese Medicine and Pharmaceutical Sciences，Guangxi Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine
Quality Standards,Nanning 530022,China)
[Abstract] Objective: To observe the pharmacological action of aqueous extract from Melaleuca Ahemifolia. Methods: The
experiments concluded mice ear-swollen induced by croton oil, double broth dilution method, hot plate test, passive cutaneous
anaphylaxis (PCA)in mouse, cavy itch test by histamine phosphate and acute toxicity test to observe the pharmacological action
of aqueous extract from Melaleuca Ahemifolia. Results: Aqueous Extract from Melaleuca Ahemifolia can inhibit the mice ear-
swollen induced by croton oil, enhance the threshold of pain in mice due to hot stimulation, provide obvious bacteriostatic ac－
tion on staphylococcus aureus, staphylococcus epidermidis, bacillus coli and albicans Saccharomyces, reduce the PCA and im－
prove cavy itch-threshold by histamine phosphate. The acute toxicity test showed that maximum tolerance of water extract of
melaleuca alternifolia was 225.62 g crude drug/kg. Conclusion: Aqueous Extract from Melaleuca Ahemifolia can provide obvious
anti-inflammatory, analgesic, antimicrobial, anti-allergic and antipruritic effects, with low toxicity.
[Key words] Melaleuca Ahemifolia; Aqueous extract; Pharmacodynamics; Acute toxicity test
互叶白千层 (Melaleuca alternifolia (Maiden etBetehe)
Chee1)为桃金娘科(Myrtaceae)白千层属（MelaleucaL.）的一种
植物，原产于澳大利亚的新南威尔士州和新西兰的部分地
区[1]。20世纪90年代，我国广东、广西、福建等地开展了生产性
种植，其中广西为主要产区，资源十分丰富。互叶白干层是经
济价值很高的作物，其新鲜枝叶可提取精油，称为茶树油，是
互叶白千层的主要产物，可起到消炎、抑菌、止痛、止痒的作
用且对皮肤灼伤的治疗有效。国内有关茶树油的研究日益活
跃，已经初步建立了我国茶树油的质量标准[2]。除此之外，国
内有关互叶白千层其它化学成分及其药理作用的研究却鲜
见报道。为加强互叶白千层的物质基础研究和应用研究，开
发新产品，我们对互叶白千层水提取物进行药理作用的实验
研究，以其为互叶白千层的开发利用提供实验依据。
1 实验材料
1.1 药物 互叶白千层水提物（每克浸膏含15.23 g生药），由
广西中医药研究院中药质量标准重点实验室提供；阿司匹林
肠溶片为武汉远大制药集团股份有限公司产品，批号：101004；
息斯敏为西安杨森制药有限公司产品，批号：090218967；盐
酸苯海拉明为河北磁州制药厂产品，批号：110512。
1.2 动物 昆明种小鼠，体重18-22 g，豚鼠40只，体重250-
280 g，均由广西医科大学实验动物中心提供，清洁级，许可证
号：SCXK桂2003-0003。小鼠分性别饲养于空调实验室内，室
温：（22±2）℃；相对湿度：（60±20）%；喂颗粒标准饲料，自由
饮水和摄食。
1.3 实验菌种 金黄色葡萄球菌（staphylococcus aureus）、表
皮葡萄球菌（staphylococcus epidermidis）、大肠埃希杆菌（Es－
cherichia coli）、乙型副伤寒沙门菌（Salmonella paratyphi B）、
*基金项目：广西科学基金资助项目(2010GXNSFBOI3085)
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2013.05.052
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福氏志贺氏菌（Shigella flexneri）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas
aeruginosa）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、白色念珠菌
（Candida albicans）由广西药物检验所提供。
1.4 试剂与仪器 伊文思兰为上海化学试剂采购供应站分
装厂产品，批号：010516；印度墨汁为北京西中化工厂产品，
批号：010326；MH琼脂，杭州天和微生物试剂有限公司产品，
批号：090817；MH肉汤，杭州天和微生物试剂有限公司产品，
批号：09052；磷酸组胺为美国Sig公司产品；细菌培养箱；高压
蒸汽灭菌器；722型光栅分光光度计；超净工作台。
2 方法与结果
2.1 统计学方法 采用SPSS 10.0统计软件分析数据。所得实
验数据以均数±标准差（x±s）表示，采用单因素方差分析，两
组间比较用q检验。
2.2 抗炎试验[3] 取昆明种雄性小鼠50只，随机分为正常对
照组，阿司匹林（0.2 g/kg）组，互叶白千层水提物高、中、低剂
量（22.6、11.3、7.5 g生药/kg）组，每组10只小鼠。每天灌胃给药
1次，正常对照组给予等体积蒸馏水，连续7 d。于末次给药后
1 h，用微量注射器取0.05 mL 2%巴豆油涂于小鼠右耳，待4 h
后通过拉颈椎处死小鼠。立即用口径为6 mm的打孔器，沿小
鼠左右耳廓相同部位打孔取材，然后分别称重，以两耳片重
量（mg）的差值作为肿胀程度指标，计算百分抑制率（%）。结
果见表1。
结果表明，与正常对照组比较，互叶白千层水提物高、中、
低剂量组均能显著抑制巴豆油引起的小鼠耳廓肿胀（P<0.05或
P<0.01），提示互叶白千层水提物对早期炎症具有抑制作用。
表1 互叶白千层水提物对巴豆油引起小鼠耳廓肿胀的影响
（x±s，n=10）
组别 剂量（g/kg） 两耳重量差（mg） 抑制率（%）
正常对照组 - 23.7±2.8 -
阿司匹林 0.20 14.6±3.6b 38.24
互叶白千层 22.6 15.1±2.8b 36.05
互叶白千层 11.3 16.0±2.5a 32.37
互叶白千层 7.5 16.5±3.1a 30.18
注：与对照组比较，aP<0.05，bP<0.01。
2.3 镇痛试验[4] 在室温18 ℃-20 ℃，电热恒温水浴箱温度
控制在（55±0.5）℃的条件下进行。给药前每只小鼠测痛阈值
两次，以出现痛反应(舔后足)的潜伏期(两次平均值)为基础痛
阈值，筛选出痛阈值5-30 s的合格雌性小鼠50只，随机分为正
常对照组，阿司匹林（0.2 g/kg）组，互叶白千层水提物高、中、
低剂量（22.6、11.3、7.5 g生药/kg）组，每天灌胃给药1次，正常
对照组给予等体积蒸馏水，连续7 d。末次给药1 h后15、30、
60 min分别测定各鼠痛阈值，如药后痛阈值超过60 s，按60 s
计，最后求出各组平均痛阈值。（见表2）
结果表明，与正常对照组比较，互叶白千层水提物高、中、
低剂量组在一定时间范围内可明显延长小鼠热刺激性疼痛
的潜伏期（P<0.05或P<0.01），提示互叶白千层水提物具有镇
痛作用。
表2 互叶白千层水提物对小鼠热刺激性疼痛的镇痛作用
（x±s，n=10）
组别 剂量 给药前痛阈值 15 min 30 min 60 min
(g/kg) (s) (s) (s) (s)
正常对照组 - 22.7±3.3 23.5±2.9 22.9±3.0 23.6±2.1
阿司匹林 0.20 23.1±2.6 26.0±2.6a 30.5±3.0b 32.9±3.6b
互叶白千层 22.6 23.0±2.0 26.0±2.6a 27.7±3.0a 30.6±3.0b
互叶白千层 11.3 23.1±3.0 25.6±1.8a 28.4±3.3a 31.2±3.0b
互叶白千层 7.5 23.0±2.5 24.6±2.7 27.6±2.8a 29.0±3.1a
注：与对照组比较，aP<0.05，bP<0.01。
2.4 微量2倍稀释法测定MIC[5] 用MH营养肉汤对保存菌种
进行接种，然后在培养箱中37℃培养16-18 h，复活菌种。在微
孔板第一行每孔加入MH营养肉汤50 μL和0.5 g生药/mL药物
50 μL。混合均匀后，吸取50 μL至下一个孔中，以此类推，最后
至第7孔时，混匀后弃去50 μL液体。以此方法使每1列从上到
下各孔的药物浓度为2倍稀释系列。在无菌离心管中加入麦
氏比浊度的菌液和适量0.05%TTC无菌溶液，混匀后分别吸取
50μL加入到上述对应的微孔中，使每孔终体积约为100 μL。最
终，从第1行至第7行的药物浓度就分别被稀释成125、62.5、
31.25、15.63 mg.mL-1……的2倍浓度梯度。在第8行设立菌液
对照、溶剂对照和肉汤对照。将上述微孔板置于37 ℃恒温箱
培养24 h后取出观察，肉汤显红色则有细菌生长，以无红色显
示的最低药物浓度判定为MIC。（见表3）
结果表明，互叶白千层水提物对金黄色葡萄球菌、表皮
葡萄球菌、大肠埃希杆菌、白色念珠菌有较强抗菌作用；对福
氏志贺氏菌、铜绿假单胞菌、具有中度的抗菌作用；对乙型副
伤寒沙门菌具有低度的抗菌作用；对枯草芽孢杆菌没有抗菌
作用。
表3 互叶白千层水提取物体对8株菌种MIC的测定
药物最低抑菌浓度(MIC)
稀释度 药物浓度(mg/mL)
金黄色葡萄球菌 26003 1:32 3.91
表皮葡萄球菌 26069 1:32 3.91
大肠埃希杆菌 44102 1:32 3.91
乙型副伤寒沙门菌 50094 1:4 32.25
福氏志贺氏菌 51572 1:8 15.63
铜绿假单胞菌 10104 1:8 15.63
枯草芽孢杆 63501 1:1 -
白色念珠菌 10104 1:32 3.91
注：“-”表示在最高浓度时仍然有红色出现，即无抑菌效
果。
2.5 对小鼠被动皮肤过敏试验[6] 抗原：医用天花粉。佐剂：
4%氢氧化铝凝胶。临用时以3.75 mg天花粉溶于1.5 mL氢氧化
铝凝胶中。致敏：健康小鼠10只，将上述天花粉氢氧化铝凝胶
混悬液脚掌注射，两只后脚掌各注入0.05 mL，共注射0.1 mL。
15 d后，断头取血，离心取抗血清备用。被动皮肤致敏：另取小
鼠50只，随机分为正常对照组，息斯敏（10 mg/kg），互叶白千
试验菌株 菌号
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层水提物高、中、低剂量（22.6、11.3、7.5 g生药/kg）组，每天灌
胃给药1次，正常对照组给予等体积蒸馏水，连续给予5 d。取
上述的血清（10只致敏小鼠的混合抗血清）加生理盐水稀释
成1∶5，每鼠腹壁皮内注射两个点（相距0.2 cm）,每点0.03 mL。并
再连续给药2 d，于末次给药12 h后，每只小鼠进行抗原攻击，
尾静脉注射天花粉2.5 mg/mL（用1%伊文思蓝-生理盐水配
制）0.2 mL/只，20 min后处死动物，剪下腹部蓝斑皮肤（0.5 g），剪
碎，浸泡于丙酮生理盐水溶液（7∶3）5 mL中48 h，离心取上清
液，用分光光度计610 nm波长测定吸收度，并做组间比较，评
价药物的抗过敏作用。（见表4）
结果表明，与正常对照组比较，互叶白千层水提物高、中、
低剂量组均能明显降低小鼠皮肤蓝斑吸光度（P<0.05或P<
0.01）,提示互叶白千层水提物具有抗皮肤过敏作用。
表4 互叶白千层水提物对小鼠被动皮肤过敏反应的影响
（x±s，n=10）
组别 剂量(g/kg) 光密度值
正常对照组 - 0.469±0.096
息斯敏 0.01 0.211±0.063b
互叶白千层 22.6 0.245±0.040b
互叶白千层 11.3 0.276±0.053a
互叶白千层 7.5 0.290±0.032a
注：与对照组比较，aP<0.05，bP<0.01。
2.6 对磷酸组胺引起豚鼠致痒反应的影响[7] 选取健康豚鼠
40只，雌雄兼用，随机分为正常对照组，盐酸苯海拉明组，互
叶白千层水提物高、中、低剂量（11.3、7.5、3.8 g生药/kg）组，每
组8只。每天灌胃给药1次，正常对照组给予等体积蒸馏水，连
续给予3 d。盐酸苯海拉明组实验前1 h皮下注射盐酸苯海拉
明8 mg/kg。按文献方法，于给药第3天用剪刀剪去豚鼠股外侧
毛，面积约1 cm2，用剃须刀剃净绒毛，再用粗砂纸擦伤至渗
血。末次给药后1h，开始在创面处滴0.01%磷酸组织胺0.05mL/只，
此后每隔3 min依0.02%、0.03%、0.04%……^递增浓度，每次均
为0.05 mL/只。直至出现豚鼠回头舔擦伤处，以引起的豚鼠出
现回头舔右股外侧所给予的磷酸组胺总量为致痒阈，最后求
出各组平均致痒阈。（见表5）
结果表明，与正常性对照组比较，互叶白千层水提物高
剂量和中剂量组的致痒阈明显增加（P<0.05或P<0.01），而低
剂量组的致痒阈无明显变化（P>0.05），提示互叶白千层水提
物具有止痒作用。
表5 互叶白千层水提物对磷酸组胺引起豚鼠致痒反应的
影响 （x±s，n=8）
剂量 致痒阈
(g/kg) （磷酸组胺总量.μg）
正常对照组 - 65.3±13.9
苯海拉明 15.4 mg/d 320.7±46.0b
互叶白千层 11.3 210.6±33.6b
互叶白千层 7.5 136.2±27.2a
互叶白千层 3.8 79.6±27.1
注：与对照组比较，aP<0.05，bP<0.01。
2.7 急性毒性试验（最大给药量的测定）[8] 取小鼠预试后，
另选取40只小鼠，分为两组，雌雄各半。以互叶白千层水提物
的最大给药浓度（1.88 g生药/mL）和最大给药体积（40 mL/kg）
给小鼠灌胃给药，24 h给药3次，连续观察7 d，记录小鼠活动
行为，大小便和饮食情况。结果：观察7 d，未见动物有行为异
常、死亡等情况，体重增长正常。计算互叶白千层水提物最大
给药量为225.62 g生药/kg，体重增长为35.69%。
3 讨 论
为了探讨和开发互叶白千层水提物的药用价值，本文采
用多种动物模型及实验方法，对其进行了抗炎、镇痛、抗菌、
抗过敏、止痒等药效学及毒理作用的实验研究。结果表明，互
叶白千层水提物能抑制巴豆油引起小鼠耳廓肿胀，对早期炎
症有抑制作用；对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、白色念珠
菌、大肠埃希杆菌、福氏志贺氏菌、铜绿假单胞菌有明显的抗
菌作用，具有广谱抗菌作用；提高热刺激致小鼠疼痛的痛阈
值，对中枢神经疼痛有抑制作用；抑制小鼠被动皮肤通透性，
对速发型过敏反应有抑制作用；提高磷酸组胺刺激豚鼠的致
痒阈，有止痒的作用。因此，提示互叶白千层水提物具有明显
的抗炎、镇痛、抗菌、抗过敏、止痒等作用，且毒性小。互叶白
千层在我区药用资源非常丰富，是一个很有开发前景的药用
植物。本文仅对互叶白千层水提物进行了初步的药理作用研
究，我们将对其有效部位作进一步提取分离，对其药理活性
有待作深入研究，可望获得活性更强的有效成分。
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（收稿日期：2012-11-06 编辑：朱民）
组别
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