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藏荆芥挥发油抗炎与镇痛作用研究



全 文 :基因 Kv1. 5 细胞主要是电压门控钾通道(Kv1. 5
钾通道) ,其培养的细胞均为单钾通道,阻止该通道会
影响钾电流,从而与心律失常密切相关。Kv1. 5 钾通
道电流是引起心肌细胞动作电位复极的主要电流及Ⅲ
类抗心律失常药的主要靶点。
本实验选取转基因 Kv1. 5 HEK293 细胞进行观察
研究,HEK293 细胞来源于人胚胎肾上皮细胞,也是常
用的人心肌细胞离子通道基因体外表达系统。研究表
明,HEK293 细胞无内源性 Kv1. 5 通道 mRNA 的转
录,其细胞膜上无 Kv1. 5 通道表达[7-8],作为 Kv1. 5 钾
通道体外细胞模型,可以排除内源性 Kv1. 5 电流对实
验的干扰,超快速延迟整流钾电流(ultrarapid delayed
rectifier current,IKur)离子通道的分子基础是 Kv1. 5 钾
通道[9],并且 IKur是仅在心房肌发现的钾通道电流,房
颤时 Ikur的变化非常重要,是潜在的心房选择性抗房颤
药物的高敏靶点。由于 HEK293 是源于人的细胞系,
以其为模型取得的实验结果与人心肌细胞差异会更
小。因此,药物对转基因 Kv1. 5 钾通道 HEK293 的电
流有抑制作用,那么它可能有抗房颤作用。
从本实验结果可以看出,8-羟基松脂醇苷对转基
因 Kv1. 5 钾通道电流有抑制作用,说明其可能通过抑
制 IKur,延长有效不应期,而达到抗房颤的作用,不致室
性心律失常,有一定研究前景。当然人的心肌细胞主
要有钠、钾、钙 3 种离子通道,不同于本实验只选用转
基因 Kv1. 5 细胞单个钾通道作研究,该药对人体心肌
细胞多个通道作用机制还有待于进一步进行。
[DOI] 10. 3870 /yydb. 2011. 10. 001
[参考文献]
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藏荆芥挥发油抗炎与镇痛作用研究*
黄山1,2,江春艳2,龙飞3
(1.青岛科技大学化工学院药学系,青岛 266042;2.西藏天知药业有限责任公司,日喀则 857000;3.成都中
医药大学生药学教研室,611137)
[摘 要] 目的 评价藏荆芥挥发油的抗炎、镇痛作用。方法 小鼠或大鼠 50 只,随机分为 5 组,即空白对照组
(给予纯化水)、阳性对照组(分别给予泼尼松溶液 5 mg或阿司匹林溶液 8 mg) ,藏荆芥高、中、低剂量组(给予藏荆芥挥
发油溶液 0. 125,0. 250,0. 500 mL·kg-1) ,二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验、小鼠棉球肉芽肿
实验考察藏荆芥挥发油的抗炎作用,小鼠醋酸扭体法和热板法考察藏荆芥挥发油的镇痛作用。结果 藏荆芥高、中、低
剂量组、泼尼松组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制率分别为 24. 73%,21. 45%,15. 83%,27. 63%;对小鼠棉球肉芽肿抑
制率分别为 42. 72%,34. 70%,25. 37%,55. 93%。随着致炎时间的延长,空白对照组足跖肿胀程度不断显著增加,而藏
荆芥挥发油各剂量组足跖肿胀程度均未明显增加。藏荆芥高、中、低剂量组,阿司匹林组,空白对照组小鼠扭体分别为
(13. 08±4. 64) ,(14. 83±6. 03) ,(17. 75±4. 35) ,(5. 17±2. 52) ,(21. 92±4. 14)次,藏荆芥高、中、低剂量组均能在给药后
30,60,90,120 min提高小鼠的痛阈值,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0. 01)。结论 藏荆芥挥发油有明显
的抗炎、镇痛作用。
[关键词] 藏荆芥挥发油;抗炎作用;镇痛作用
[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1004-0781(2011)10-1262-04
·2621· Herald of Medicine Vol. 30 No. 10 October 2011
Anti-Inflammation and Analgesic Effect of Volatile Oil from Nepeta Angustifolia
HUANG Shan1,2, JIANG Chun-yan2,LONG Fei3 (1. Department of Pharmacy, College of Chemical
Engineering,Qingdao University of Science and Technology,Qingdao 266042 ,China;2 . Tibet Tianzhi
Pharmaceutical Co.,Ltd ,Rikeze 857000 ,China;3. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,
Chengdu 611137 ,China)
ABSTRACT Objective To study the anti-inflammatory and analgesic effect of volatile oil from Nepeta angustifolia.
Methods Fifty mouse or rats were randomly divided into five groups,as the control (treated with distilled water) ,positive
control (with prednisone 5 mg or aspirin 8 mg) ,Nepeta angustifolia groups(with volatile oil of Nepeta angustifolia at 0. 125,
0. 250,0. 500 mL·kg-1 as high-dose,medium-dose and low-dose). Models of mouse ear edema induced by xylene,rat paw
edema induced by carrageena and mouse granuloma were used to study the anti-inflammatory effects. The acetic acid caused
writhing and hot-plate test in mouse were taken to study the analgesic effects. Results The inhibitory rates of volatile oil from
Nepeta angustifolia at high,medium and low doses and the prednisone group on the xylene-induced mouse ear edema were
24. 73%,21. 45%,15. 83%,27. 63%,respectively,which on granuloma in mouse were 42. 72%,34. 70%,25. 37%,
55. 93%,respectively. With the inflammation prolonged,paw swelling increased continually and significantly in the control
group,but not in the volatile oil of Nepeta angustifolia groups. The writhing were (13. 08±4. 64) ,(14. 83±6. 03) ,(17. 75±
4. 35) ,(5. 17±2. 52) ,(21. 92 ±4. 14)times in high-dose,medium-dose and low-dose group,aspirin group,the control
group,respectively. And the pain threshold in the high-dose,medium-dose and low-dose group of volatile oil were extended at
30,60,90,120 min after administration,compared with the control group (P<0. 01). Conclusion The volatile oil from
Nepeta angustifolia possesses obviously anti-inflammatory and analgesic effects.
KEY WORDS Volatile oil of Nepeta angustifolia;Anti-Inflammation;Analgesia
藏荆芥(藏药名萨都那保)为唇形科植物藏荆芥
Nepeta angustifolia C. Y. Wu 的全草,味苦,性凉,开窍
醒神,主治神昏惊厥、卒中、癫 、出血性脑梗死、创伤
及疼痛等症[1]。藏荆芥与荆芥为同科同属的植物,但
是为西藏独有的药材,主要产于西藏拉萨、江孜等地。
作为藏医常用药之一,藏荆芥在临床上有着良好的疗
效。但是,目前对该药的研究仍较少,这也妨碍对该药
的进一步开发,限制了其应用。笔者以藏荆芥挥发油
为研究对象,对其抗炎、镇痛作用进行实验研究。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 试药 藏荆芥(Nepeta angustifolia C. Y. Wu) ,
西藏日喀则地区天知药业有限责任公司提供,经成都
中医药大学生药学教研室龙飞博士鉴定符合药用。藏
荆芥挥发油按《中华人民共和国药典》2010 年版一部
甲法提取,得淡黄色、透明油状液体,无水硫酸钠充分
脱水后,密闭贮存于棕色瓶中,4 ℃ 保存备用。实验
时用 0. 5%聚山梨酯 80 溶液配制使用。二甲苯、冰醋
酸均为市售化学纯试剂。泼尼松(天津药业集团新郑
股份有限公司,批号:080825)、阿司匹林(山东新华制
药股份有限公司,批号:20090610)。角叉菜胶(Sigma
[收稿日期] 2010-12-28 [修回日期] 2011-02-28
[基金项目] * 科技部科技型中小企业技术创新基金项
目(基金编号:10C26215405154)
[作者简介] 黄山(1975-) ,男,四川德阳人,讲师,博士,
主要从事新药研究开发工作。电话: (0)13608985051,E-mail:
huangshan1975@ 163. com。
公司,批号:122K1444)。
1. 1. 2 动物 昆明种小鼠(清洁级) ,体质量 18 ~
22 g,雌雄兼用,随机分组,每组 10 只,动物合格证号:
医动字第 0214-07 号。SD 大鼠(清洁级) ,雄性,体质
量 150 ~ 170 g,随机分组,每组 10 只,动物合格证:医
动字第 0158-07 号。以上实验动物均由成都中医药大
学实验动物中心提供,在自由摄食、饮水环境中适应
1 ~ 2 d后,用于实验。
1. 1. 3 仪器 JA1203 型电子天平(上海天平仪器
厂) ,YLS-6A 型智能热板仪(山东医学科学院设备
站) ,YLS-7A型足跖容积测量仪(山东省医学科学院
设备站)。
1. 2 方法
1. 2. 1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 小鼠 50 只,
随机分为 5组,即空白对照组(给予纯化水)、泼尼松组
(给予泼尼松溶液 5 mg) ,藏荆芥低、中、高剂量组(给予
藏荆芥挥发油 0. 125,0. 250,0. 500 mL·kg-1) ,分别灌胃
给药,连续5 d,第5天给药1 h后,将二甲苯涂于小鼠右
耳前后两面,每鼠 0. 1 mL,左耳作对照。1 h后处死动
物,用直径 8 mm打孔器分别在两耳同一部位打下圆耳
片,用电子天平称定质量。计算耳廓肿胀率和肿胀抑制
率。肿胀率(%)=(右耳质量-左耳质量)/左耳质量×
100%[2];肿胀抑制率(%)=(对照组耳肿胀率-给药组
耳肿胀率)/对照组耳肿胀率×100%[2-3]。
1. 2. 2 对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响 大鼠 50
只,分组及给药同“1. 2. 1”项。分别灌胃给药连续5 d,
第 5 天给药 1 h后,将 1%的角叉菜胶 0. 1 mL 注入大
鼠右后足跖皮下,然后用足跖容积测量仪分别测量致
·3621·医药导报 2011 年 10 月第 30 卷第 10 期
炎前、致炎后 1,2,3,4,6 h 大鼠足跖至踝关节部的容
积,计算足跖肿胀率和肿胀抑制率。肿胀率(%)=
(致炎后足跖容积-致炎前足跖容积)/致炎后足跖容
积×100%[4-5]。
1. 2. 3 对小鼠棉球肉芽肿的影响 小鼠 50 只,分组及
给药同“1. 2. 1”项。乙醚麻醉后,在每只小鼠左侧腹股
沟处埋入高压灭菌棉球 3 mg,手术过程严格无菌操作,
并在局部注入 16万 U·mL-1青霉素 0. 1 mL。术后灌胃
给药,连续 7 d。第 8 天处死小鼠,取出棉球,剔除脂肪
组织,称定质量,60 ℃烘干 24 h,称定质量,并计算抑制
率。抑制率(%)=(对照组肉芽肿干质量-给药组肉芽
肿干质量)/对照组肉芽肿干质量×100%[6]。
1. 2. 4 小鼠醋酸扭体法镇痛实验 小鼠 50 只,随机分
为5组,即空白对照组(给予纯化水)、阿司匹林组(给予
阿司匹林 8 mg) ,藏荆芥低、中、高剂量组(给予藏荆芥
挥发油溶液 0. 125,0. 250,0. 500 mL·kg-1)。各组均灌
胃给药 1 h后腹腔注射0. 7%的醋酸溶液,每只 0. 2 mL,
记录 10 min内各组小鼠出现扭体反应的次数[7]。
1. 2. 5 小鼠热板法镇痛实验 将筛选合格的雌性小
鼠 50 只随机分为 5 组,分组及给药同“1. 2. 4”项,分
别测定给药前痛阈值。各组分别于灌胃给药后 30,
60,90,120 min测定痛阈值。若小鼠超过 60 s 仍无反
应,按 60 s计算[8]。
2 结果
2. 1 藏荆芥挥发油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
结果见表 1。藏荆芥挥发油对二甲苯所致小鼠耳廓
肿胀有明显的抑制作用。
2. 2 藏荆芥挥发油对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影
响 结果见表 2。藏荆芥挥发油能抑制角叉菜胶致大
鼠足跖肿胀,减轻肿胀程度,与空白对照组比较差异有
统计学意义;而且,随着致炎时间的延长,空白对照组
足跖肿胀程度不断显著增加,而藏荆芥挥发油各剂量
组足跖肿胀程度均未明显增加。
2. 3 藏荆芥挥发油对小鼠棉球肉芽肿的影响 结果
见表 3。给药组均具有抑制小鼠肉芽肿生长的作用,
与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0. 01)。
2. 4 小鼠醋酸扭体法镇痛实验 结果见表 4。藏荆
芥低、中、高剂量组醋酸所致小鼠扭体次数均明显减
少,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0. 01)。
2. 5 小鼠热板法镇痛实验 结果见表 5。藏荆芥高、
中、低剂量组均能在给药后 30,60,90,120 min 延长小
鼠的痛阈值,与空白对照组比较差异有统计学意义
(P<0. 01)。
3 讨论
藏荆芥挥发油高、中、低剂量对二甲苯致小鼠耳廓
肿胀及角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的炎症反应均有明显
表 1 5 组小鼠二甲苯致耳廓肿胀情况
Tab. 1 Results of xylene-induced ear edema in 5 groups of mice x±s
组别
剂量 /
(mL·kg-1)
小鼠 /

左耳质量 右耳质量 差值
mg
肿胀率 抑制率
%
藏荆芥挥发油
低剂量组 0. 125 10 16. 05±1. 72 31. 80±2. 12 15. 75±1. 85 99. 54±17. 93 15. 83
中剂量组 0. 250 10 16. 13±1. 41 30. 98±3. 14 14. 85±2. 95 92. 89±21. 08* 1 21. 45
高剂量组 0. 500 10 16. 04±1. 22 30. 23±2. 53 14. 19±2. 32* 1 89. 02±16. 07* 1 24. 73
泼尼松组 5 mg 10 15. 81±1. 50 29. 15±4. 29 13. 34±4. 21* 1 85. 59±31. 62* 1 27. 63
空白对照组 … 10 15. 47±1. 21 33. 65±3. 24 18. 18±3. 02 118. 26±22. 18 …
与空白对照组比较,* 1P<0. 01
Compared with blank control group,* 1 P<0. 01
表 2 5 组大鼠角叉菜胶致足跖肿胀率测定结果
Tab. 2 Results of carrageena-induced paw edema in 5 groups of rats %,x±s
组别
剂量 /
(mL·kg-1)
大鼠 /

1 h 2 h 3 h 4 h 6 h
藏荆芥挥发油
低剂量组 0. 125 10 32. 10±11. 10 40. 08±12. 36 51. 64±13. 86 62. 32±13. 62* 1 67. 49±12. 95* 1
中剂量组 0. 250 10 27. 75±6. 35 39. 24±9. 92 48. 82±9. 95* 1 57. 27±14. 49* 1 63. 46±17. 40* 1
高剂量组 0. 500 10 22. 70±6. 35* 1 34. 06±19. 14* 1 43. 01±13. 15* 1 52. 97±17. 95* 1 58. 27±12. 57* 1
泼尼松组 5. 00 mg 10 19. 76±6. 39* 1 30. 26±6. 95* 1 41. 21±7. 84* 1 51. 89±8. 49* 1 58. 72±9. 57* 1
空白对照组 … 10 35. 45±10. 94 53. 91±18. 76 65. 63±17. 56 80. 72±14. 96 92. 78±15. 32
与空白对照组比较,* 1P<0. 01
Compared with blank control group,* 1 P<0. 01
·4621· Herald of Medicine Vol. 30 No. 10 October 2011
表 3 5 组小鼠棉球肉芽肿测定值
Tab. 3 Results of tampon - induced granuloma in 5
groups of mice x±s
组别
剂量 /
(mL·kg-1)
小鼠 /

肉芽肿湿重 肉芽肿干重
mg
抑制
率 /%
藏荆芥挥发油
低剂量组 0. 125 10 76. 87±9. 53* 1 18. 80±3. 66* 1 25. 37
中剂量组 0. 250 10 62. 15±14. 66* 1 16. 45±2. 86* 1 34. 70
高剂量组 0. 500 10 52. 73±12. 70* 1 14. 43±2. 80* 1 42. 72
泼尼松组 5. 00 mg 10 40. 35±7. 91* 1 11. 10±3. 26* 1 55. 93
空白对照组 … 10 97. 57±18. 98 25. 19±3. 63 …
与空白对照组比较,* 1P<0. 01
Compared with blank control group,* 1 P<0. 01
表 4 5 组小鼠醋酸所致扭体次数测定值
Tab. 4 Results of writhing times of mouse induced by
acetic acid in 5 groups of mice x±s
组别
剂量 /
(mL·kg-1)
小鼠 /

扭体次数 /

藏荆芥挥发油
低剂量组 0. 125 10 17. 75±4. 35
中剂量组 0. 250 10 14. 83±6. 03* 1
高剂量组 0. 500 10 13. 08±4. 64* 1
阿司匹林组 8. 00 mg 10 5. 17±2. 52* 1
空白对照组 … 10 21. 92±4. 14
与空白对照组比较,* 1P<0. 01
Compared with blank control group,* 1 P<0. 01
表 5 5 组小鼠对热板所致疼痛潜伏期的测定值
Tab. 5 Results of the pain latency of mouse induced by hot plate in 5 groups of mice x±s
组别
剂量 /
(mL·kg-1)
小鼠 /

给药前
给药后
30 min 60 min 90 min 120 min
藏荆芥
低剂量组 0. 125 10 15. 26±3. 83 17. 57±2. 92 17. 82±2. 73 22. 12±2. 82* 1 26. 10±3. 62* 1
中剂量组 0. 250 10 15. 31±2. 66 18. 56±2. 94 22. 83±3. 86* 1 25. 75±5. 35* 1 28. 91±4. 04* 1
高剂量组 0. 500 10 15. 27±3. 18 21. 17±2. 78* 1 25. 27±3. 51* 1 28. 53±2. 74* 1 30. 77±8. 94* 1
阿司匹林组 8 mg 10 15. 30±4. 30 18. 06±2. 73 23. 19±3. 35* 1 28. 41±5. 49* 1 34. 78±5. 32* 1
空白对照组 … 10 15. 14±3. 03 15. 25±3. 33 15. 09±2. 36 15. 86±3. 49 15. 56±3. 33
与空白对照组比较,* 1P<0. 01
Compared with blank control group,* 1 P<0. 01
的抑制作用,对小鼠棉球肉芽肿慢性炎症模型也有明
显的抑制作用。说明藏荆芥挥发油对炎症早期毛细血
管通透性增加、炎症物质渗出、组织水肿,以及炎症后
期肉芽组织增生均有较强的拮抗作用,提示该药对炎
症有较强的防治作用。
藏荆芥挥发油对小鼠醋酸扭体反应有明显的抑制
作用,并能明显延长热刺激小鼠痛阈值。说明藏荆芥
挥发油对化学和物理刺激引起的疼痛均有良好的镇痛
效果,可缓解临床炎症反应引起的疼痛。
上述实验结果表明,藏荆芥挥发油有良好的抗炎
镇痛作用,为其临床应用提供了药效学基础,而藏荆芥
的其他药理作用也有待于进一步研究。
[DOI] 10. 3870 /yydb. 2011. 10. 002
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