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云南及海南产珠子草化学成分的初步研究



全 文 :DNCB诱导的小鼠迟发型超敏反
应;而对 SRBC 诱导的小鼠血清
溶血素及脾空斑形成细胞溶血能
力以及小鼠血清 IgM和 IgG含量
等没有明显影响 。揭示夏塔热片
合用其软膏 , 能增强机体的非特
异性免疫功能 , 降低机体在应激
状态时处于过高水平的细胞免疫
功能 , 即具有免疫调节作用 。这
可能是该药内服外用同时治疗银
屑病等皮肤病的内在机理之一。
表 4 对小鼠脾空斑形成细胞溶血能力的影响 (x±SD)
组 别 动物数
n
剂量
(ig.g/kg , 外涂 g/只) OD值
对照组 14 - 0.2 (基质) 0.83±0.0 8
夏塔热片合用其软膏 12 2.5 0.1 0.84±0.03*
14 5.0 0.2 0.84±0.07*
12 10.0 0.3 0.85±0.03*
环磷酰胺组 12   0.1 (sc) - 0.65±0.06***
  注:与对照组比较*P>0.05 , ***P<0.01
表 5 对小鼠血清 IgM、 IgG含量的影响 (x±SD)
组 别 动物数 剂量(ig.g/kg , 外涂 g/只)
IgM
(mg/ml)
IgG
(mg/ ml)
对照组 14 - 0.2 (基质) 0.41±0.13 1.58±0.60
夏塔热片合用其软膏 12 5.0 0.4 0.33±0.15* 1.93±0.50*
11 5.0 0.5 0.43±0.13* 1.91±0.33*
环磷酰胺组 12   0.1 (sc) - 0.093±0.069*** 0.84±0.26***
  注:与对照组比较*P>0.05 , ***P<0.01
参考文献
1 中华人民共和国卫生部药典委员会
.中华人民共和国卫生部药品标准, 维吾
尔药分册 , 1998:124
2 斯拉甫 , 等.夏塔热片合用夏塔热
软膏的抗菌 、 消炎作用研究.维吾尔医药
杂志 , 1998.4:39
3 武建国.实验临床免疫学检验.江
苏科学技术出版社 , 1989:180
4 卫生部药政局.新药 (西药)临床
前研究指导原则汇编 , 药学 、 药理学毒理
学分册 , 1993:122~ 135
5 陈奇 , 等.中药药理研究方法学.
北京:人民卫生出版社 , 1994:750
6 徐叔云 , 等.药理学实验方法学.
北京:人民卫生出版社 , 1991:1230
(收稿日期:1999年 10月 8日)
云南及海南产珠子草化学成分的初步研究
成都军区昆明总医院药剂科 (650032)徐贵丽 舒万里 邹 静 尹玉琴 张美义
  珠子草 (Phyllanthus amarus
Schumet Thonn)又名苦味叶下
珠 、 月下珠 , 为大戟科月下珠属
植物 , 广泛分布热带 、亚热带地
区。自 1988 年印度和美国学者
联合报道此植物能使慢性乙型肝
炎病毒携带者之 HBsAg 阳性转
阴率达 59%以来 , 引起了全世
界的广泛重视 。珠子草为印 度
与我国的传统草药 , 印度早在
2000年前阿育王朝文献记载谓
其可 “饮用” 。我国对月下珠属
植物药用已久 , 该植物主要盛产
于云南及海南等亚热带地区 , 为
这些地区的民族药物 。一般认为
其有清肝 、 明目 、渗湿利水等作
用。民间也因其味苦性寒 , 可清
热健胃 , 暑热时用作家用凉茶以
防暑清热 。基于珠子草民间食用
习惯 , 进行一些化学成分的定性
分析及营养成分的定量分析 , 以
期对珠子草的食用途径进行营养
学评价。
1 材料与方法
86 中国民族民间医药杂志 2000年总 43期
1.1 材料
1.1.1 仪器
氨基酸分析仪器:HITACHI
MODEL 835-High speed;原子吸
收分光光度计:沈阳分析仪器
厂;53W 紫外可见分光光度计:
上海光学仪器厂;UV-4型多功
能四用紫外分析仪:江苏南通三
甲物理仪器厂。
1.1.2 药材及化学试剂
珠子草:分别采自云南及海
南亚热带地区 , 经美国加州大学
Davia分校 Grady Wedster 教授鉴
定植物标本;其它化学试剂均为
市售分析纯试剂 。
1.2 方法
分别按文献〔2〕〔3〕方法和有关
仪器分析方法进行定性分析及氨
基酸 、 维生素 C 、 微量元素 、 糖
分 、果胶质的定量分析。
2 结果
2.1 主要化学成分预试
珠子草全株提取液按文献〔2〕
方法进行化学成分预试 , 其结果
见表 1。
2.2 珠子草营养成分定量分析
2.2.1 珠子草中氨基酸含量测
定结果
将珠子草全株提取后 , 测定其
酸性氨基酸的含量 , 其结果见表2。
表 1 珠子草化学成分预试结果
产 地
酚 类
有机酸
生物碱 糖
氨基酸
皂 甙
鞣 质
黄 酮
蒽 醌
强心甙
木质素
内酯
香豆素
植物甾醇
三 萜
挥发油
油酯
氰 甙
云南 + + + + + ± + + - - + - + - -
海南 + + + + + ± + + - - + - + - -
  注:+、 -、 ±符号分别表示阳性反应 、 阴性反应、 不能确定。
表 2 珠子草氨基酸含量测定结果
氨基酸
种 类
样品 1
(云南)
(mg/100g)
样品 2
(海南)
(mg/100g)
ASP天门冬氨酸 683.98 1056.93
THR苏氨酸 351.72 540.51
SER丝氨酸 340.14 517.22
GLU 谷氨酸 939.40 1495.05
GLY甘氨酸 391.43 601.93
ALA 丙氨酸 435.44 655.91
CYS 胱氨酸 38.25 55.61
VAL缬氨酸 432.30 647.81
MET蛋氨酸 47.30 64.50
ILE 异氨酸 348.70 509.19
LEU亮氨酸 622.93 968.94
TYR络氨酸 237.13 358.56
PHE苯丙氨酸 352.83 551.12
LYS 赖氨酸 421.63 665.38
NH3氨 145.40 185.56
HIS 组氨酸 141.87 241.31
ARG精氨酸 398.91 663.01
PRG 脯氨酸 597.35 820.49
总 合 6927.14 10579.68
2.2.2 珠子草维生素C含量测定
按文献〔3〕介绍的 2 , 4-二硝
基苯肼分光光度法 , 用活性炭将
样品中草酸提取物原型VitC氧化
为脱氢Vit C , 再与2 , 4-二硝基
苯肼作用 , 生成红色的脎 , 在
500nm波长处测定 , 在标准曲线
上查得其含量 , 结果见表 3。
2.2.3 微量元素含量测定
表 3 珠子草 VitC 含量测定结果
产地 样品重 (g)光密度 浓度μg/g
云南 2 0.298 8.514
海南 2 0.115 4.910
将磨碎试样用酸消化后 , 用
原子吸收分光度计测定微量元
素 , 其结果见表 4。
2.2.4 果胶质测定
表 4 珠子草微量元素测定结果
产地 Zn(μg/g)
Cu
(μg/g)
Fe
(μg/g)
Ge
(%)
Mn
(%)
Mg
(%)
Se
(%)
云南 110.4 4.5 569.1 <0.0005 0.015 0.28 <0.0001
海南 158.4 9.0 214.4 <0.0005 0.013 0.37 <0.0001
  按文献〔3〕所述果胶酸钙沉淀
法测定 , 其结果见表 5。
2.2.5 糖分含量测定
按文献〔3〕介绍的铜量法测
定 , 即以费林试剂测定总糖量 、
还原糖与蔗糖 , 其结果见表6。
3 讨论
通过对珠子草 (除根)的系
统定性分析 , 表明两种产地珠子
草所含主要成分基本相同 , 为酚
类 、有机酸 、生物碱 、糖 、氨基
酸 、 黄酮 、植物甾醇 、 三萜 、木
质素等 , 与国外文献报道基本一
致。
通过对云南及海南珠子草的
营养成分测定 , 得知珠子草中含
有较高的氨基酸含量 , 分别为
7%及 10%;维生素 C 的含量也
比较丰富 , 其中云南产珠子草明
显高于海南产珠子草;果胶质含
量为海南高于云南;此外 , 珠子
草中还含有对人体有益的微量元
87中国民族民间医药杂志 2000年总 43期
素Zn 、 Cu 、 Fe 、 Mn 、 Mg 等及糖 分 , 两产地含量基本一样 。
表 5 珠子草果胶质含量测定结果
产地 样品重(g)
水溶性果胶
(%)
原果胶质
(%)
总果胶质
(%)
云南 5 0.423 5.458 5.881
海南 5 0.249 8.561 8.811
表 6 珠子草糖分含量
产地 总糖量(%)
还原糖
(%)
蔗糖
(%)
云南 3.215 2.478 0.700
海南 2.351 1.515 0.800
参考文献
1   Thygaragan Sp , Subramanian S ,
Thirunalasundari T , Venkateswaran P.S , et al.
The Lancet , 1988, 11:164
2 中草药有效成分的研究.第 1 分
册.人民卫生出版社 , 1972
3 成品茶检验.中国财政经济出版
社.1981
(收稿日期:1998年 8月 24日)
离子对萃取光度法测定雪上一枝蒿总生物碱含量
              玉溪市中医医院 (653100)高继武
中科院上海药物研究所 蒋山好
摘 要 目的:解决雪上一枝蒿总生物碱含量测定。 方法:以雪上一枝蒿甲素为对照品 , 溴麝香草酚蓝为
反离子 , 氯仿为萃取溶剂 , 建立了雪上一枝蒿药材 、 针剂中雪上一枝蒿总生物碱含量测定法。结果:测定波长
415±0.5nm , 线性范围 2~ 10μg·ml-1 。方法平均回收率 , 纯品法100.35±1.12 (%), RSD=1.12%(n=9);加样
法 98.55±1.34 (%), RSD=1.36% (n=6)。结论:针剂中氯化钠不干扰测定。本法具有简便 、 迅速 、 准确之特
点。
关键词 雪上一枝蒿总生物碱 含量测定 溴麝香草酚蓝
  从毛莨科植物雪上一枝蒿
(Aconitum brachypodium Diels)药
材中提取的雪上一枝蒿总生物
碱 , 系含雪上一枝蒿甲素等多种
二萜类生物碱的混合物 , 其盐酸
盐注射液为一抗风湿镇痛新药。
根据有机生物碱类在一定 HP 介
质中 , 可与某些酸性染料定量地
结合生成有色离子对缔合物 , 该
有色缔合物可定量地被适宜的有
机溶剂萃取的原理 , 报道利用溴
麝香草酚蓝与雪上一枝蒿总生物
碱形成的有色离子对缔合物用氯
仿萃取后进行比色测定。
1 实验材料
1.1 试药 、 仪器:雪上一枝蒿
甲素 (下简称雪甲素)对照品 ,
C22H33 O2N , m 343 , mp 250 ~
252℃, 结构 , 光翠雀碱 (de-
nudatine);雪上一枝蒿总生物碱
(下简称雪总碱 , 为原料药);雪
上一枝蒿总碱盐酸盐注射液 , 规
格:2ml:0.784mg 〔总碱按甲素
计算〕 (下简称雪总碱注射液);
雪上一枝蒿生药 9号粉 (下简称
一枝蒿细粉 , 粉碎前经基源鉴定
与药典收载品相符)。以上由东
川药检所 、 东川制药厂提供。其
余试剂均为分析纯。紫外分光光
度计:岛津 UV —250 型 , UV —
53WB (上海光学仪器厂)。
1.2 试药配制:
1.2.1  溴麝香草酚蓝试液:
0.5mg·ml-1 , 精密称取溴麝香草
酚蓝0.1g , 加0.1mol·L-1氢氧化
钠液 3.5ml使溶解 , 用水定量转
入 200ml 量瓶中 , 并稀释至刻
度 , 摇匀 , 滤过 , 用 40ml 氯仿
萃取 1次 , 分离氯仿层弃去。
1.2.2   PH 4.6 缓 冲 液:取
0.2mol·L-1邻苯二甲酸氢钾液
50ml , 置 200ml 量 瓶 中 , 加
0.2mol·L-1氢氧化钠液 11.1ml ,
加水稀释至刻度 , 摇匀 。其余不
同PH缓冲液按中国药典和美国
药典附录配制 。
1.2.3  雪甲素对照品液:取
105℃干燥至恒重的雪甲素对照品
约 20mg , 精密称定 , 加盐酸的乙
醇液 (1→20)0.6 ~ 0.9ml使溶解 ,
用水定量转入 100ml量瓶中 , 并稀
释至刻度 , 摇匀 , 作对照品贮备
液。精密吸取此贮备液 10.0ml ,
置100ml量瓶中加水稀释至刻度 ,
摇匀 , 作对照品液。
2 方法
88 中国民族民间医药杂志 2000年总 43期