全 文 ：头花蓼治疗变应性接触性皮炎小鼠的疗效及
作用机制探讨
张 伟1，余珊珊2，陈爱明1
(1． 江苏省苏州市第一人民医院，江苏 苏州 215006;2． 江苏省南通市通州区人民医院，江苏 南通 226300)
［摘要］ 目的 探讨头花蓼治疗变应性接触性皮炎(ACD)小鼠的疗效及机制。方法将
36 只 Balb /C小鼠随机分成正常组、模型组、头花蓼低浓度组、头花蓼中浓度组、头花蓼高浓度
组及地塞米松组 6 组，每组 6 只。除正常组外，其余组均采用异硫氰酸荧光素(FITC)诱导小
鼠 ACD模型。造模成功第 2 天后，头花蓼低、中、高浓度组分别灌胃 2. 5%，5%，10%头花蓼
溶液 0． 4 mL，地塞米松组灌胃 0． 4 mL地塞米松溶液，均连续 7 d。观察各组小鼠皮损形态、组
织病理改变以及血清白细胞介素 －4(IL －4)、干扰素 － γ(IFN － γ)和肿瘤坏死因子 － α(TNF －
α)水平变化。结果 治疗 7 d后，头花蓼低、中、高浓度组和地塞米松组小鼠的皮损形态和组
织病理结构较治疗前明显改善;与模型组比较，头花蓼低、中、高浓度组和地塞米松组右耳厚
度、中性粒细胞数、单核细胞数、血清 IL － 4 和 TNF － α水平均显著降低(P 均 ＜ 0． 05) ，但血清 IFN － γ 水平比较差异
均无统计意义(P均 ＞ 0． 05)。结论 头花蓼对 ACD小鼠有显著治疗作用，可能与降低 IL － 4 和 TNF － α水平有关。
［关键词］ 头花蓼;变应性接触性皮炎;小鼠
doi:10． 3969 / j． issn． 1008 － 8849． 2015． 18． 007
［中图分类号］ Ｒ －332 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1008 － 8849(2015)18 － 1958 － 04
Study on effect and mechanism of Polygonum capitatum on allergic contact dermatitis in mice
ZHANG Wei1，YU Shanshan2，CHEN Aiming1
(1． The First People’s Hospital of Suzhou City，Suzhou 215006，Jiangsu，China;2． Tongzhou District people’s Hospital of
Nantong City，Nantong 226300，Jiangsu，China)
Abstract:Objective It is to observe the effect and mechanism of Polygonum capitatum on allergic contact dermatitis
(ACD)of mouse model． Methods Thirty-six BALB /c mice were randomly divided into normal group，model group，Polygo-
num capitatum low does group，middle does group and high does group，and dexamethasone group，6 cases in each group． Ex-
cept the normal group，the ACD models were induced on the abdomen and ear with Fluorescein isothiocyanate in the other
groups． The second day of successful model，the animals in Polygonum capitatum low does group，middle does group and high
dose group were intragastriced administration with 2． 5%，5% and 10% Polygonum capitatum solution for 0． 4mL respectively，
and with 0． 4mL dexamethasone in dexamethasone group，treatment for 7 days． The effect and mechanism of Polygonum capita-
tum were evaluated by form lesions，pathological changes in tissue and the levels of serum interleukin －4 (IL －4)，interferon －
γ (IFN － γ)and tumor necrosis factor (TNF － α)in mice． Ｒesults After seven days of treatment，the lesions form and his-
topathological of Polygonum capitatum low does group，middle does group and high does group，and dexamethasone group were
improved significantly compared with that before treatment． Compared with the model group，the right ear thickness，neutro-
phil，monocytes，serum IL － 4 and TNF － α were significantly lower in groups of Polygonum capitatum low does，middle does，
high does group and dexamethasone group (all P ＜ 0． 05) ，but there was no significance difference in serum IFN － γ levels
(all P ＞ 0． 05)． Conclusion Polygonum capitatum has significant therapeutic effect on ACD，this may be related to lower the
levels of IL － 4 and TNF － α．
Key words:Polygonum capitatum;allergic contact dermatitis;mouse
［作者简介］ 张伟，女，硕士研究生，研究方向为皮肤病与性病学。
［通信作者］ 陈爱明，E － mail:china2006angela@ sina． com
变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis，ACD)又称
接触性过敏，是皮肤、黏膜接触致敏物后，由 T 细胞介导的Ⅳ
型迟发型超敏反应而引起的炎症性皮肤病［1］。ACD 的发病
过程为:半抗原接触皮肤后与体内蛋白结合形成完全抗原，完
全抗原被朗格汉斯细胞摄取后提呈给初始 T 细胞，并使其活
化产生特异性 T细胞;当机体再次接触相应抗原时就会发生
强烈的超敏反应，从而引起接触性皮炎。研究证明 ACD的发
病受多种炎症细胞因子和化学递质的调控［2］。头花蓼(Po-
lygonum capitatum)是蓼科蓼属多年生草本植物的全草，其主
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要成分为黄酮类化合物和没食子酸类化合物［3 － 4］，为贵州苗
族用药。头花蓼具有清热利湿、和血散瘀和解毒止痛的功效，
既往动物实验和临床研究已经证实其对于膀胱炎、前列腺炎
等泌尿系统感染具有较好的疗效［5 － 7］。近年来研究发现，头
花蓼对皮炎可能也有一定的作用［8］。为进一步证明头花蓼
的抗皮炎活性，同时寻找 ACD 的有效治疗药物，本研究拟通
过建立小鼠 ACD模型，观察头花蓼对 ACD 模型小鼠的影响，
并对其作用机制进行初步探讨。
1 实验资料
1. 1 实验动物 Balb /c 雌性小鼠 36 只，6 ～ 8 周龄，体质量
18 ～ 24 g，动物合格证号:2007000555679，由中国科学院上海
实验动物中心提供。SPF级实验室适应性饲养 5 ～ 7 d后再进
行实验。
1. 2 药品与试剂 丙酮(中国上海试剂总厂) ;酸氢二钠(长
沙唐华化工贸易有限公司) ;头花蓼药物粉末(头花蓼浸膏
粉，贵州威门制药股份有限公司提供) ;地塞米松溶液(仙居
制药有限公司，批号:1405086021) ;0． 9%氯化钠注射液(中国
大冢制药有限公司，批号:H12020025) ;白细胞介素 － 4(IL －
4)、干扰素 － γ(IFN － γ)、肿瘤坏死因子 α(TNF － α)ELISA
试剂盒(北京嘉美纽诺生物科技有限公司) ;微测量卡尺(日
本 Mitutoyo 公司)。异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocya-
nate，FITC)致敏剂配制:250 mg FITC中加入 1∶ 1 体积比的丙
酮与分析纯混合液 50 mL，配成 0． 5%的 FITC 溶液。头花蓼
灌胃液配制:取头花蓼粉末溶解于蒸馏水中，配成 2． 5%，
5%，10%的头花蓼溶液。地塞米松灌胃液配制:取地塞米松
3 mg，溶解于蒸馏水中配制成 20 mL地塞米松溶液。
1. 3 实验方法
1. 3. 1 实验分组和 ACD 模型的建立 36 只 Balb /c 小鼠随
机分成正常对照组、模型组、头花蓼低浓度组、头花蓼中浓度
组、头花蓼高浓度组、地塞米松组，每组 6 只。正常对照组未
做任何处理。其他组小鼠于实验前 1 d 腹部备皮，面积约 2
cm × 2 cm，第 1 天和第 2 天分别于备皮部位涂布 0． 04 mL
0. 5% FITC溶液致敏 1 次，建立腹部 ACD 模型;同时，第 1 天
和第 2 天也分别于小鼠右耳背涂布 0． 04 mL 0． 5% FITC溶液
致敏 1 次，建立耳部 ACD 模型;通过皮损部位形态学特征和
皮损病理表现判断 ACD模型是否成功建立。
1. 3. 2 给药方法 正常对照组、模型组每日给予 0． 4 mL 蒸
馏水灌胃;头花蓼低浓度组、头花蓼中浓度组、头花蓼高浓度
组、地塞米松组于造模成功第 2 天后，分别给予 0． 4 mL 2． 5%
头花蓼溶液、0． 4 mL 5%头花蓼溶液、0． 4 mL 10%头花蓼溶液
和 0． 4 mL地塞米松溶液灌胃，均连续 7 d。
1. 4 观察指标 ①第 2 次激发后 24 h 和治疗 7 d 后观察各
组小鼠激发部位皮肤的形态变化。②采用微测量卡尺测量诱
发前、诱发后 24 h和治疗 7 d 后小鼠右耳中部的厚度。③各
组末次灌胃 24 h后处死，摘眼球取血，静置 5 min后，12 000 r /
min离心分离血清，采用 ELISA法测定血清中 IL － 4、IFN － γ、
TNF － α 水平;同时立即剪下小鼠右耳廓，使用直径 0． 6 cm
的金属打孔器在右耳中部打孔，取一定耳组织进行常规 HE
染色，切片，光镜下计算每视野中性粒细胞和单核细胞数。
1. 5 统计学方法 采用 SPSS 20． 0 软件对数据进行统计分
析。计量资料采用均数 ±标准差表示，多组均数整体比较采
用单因素方差分析，两两比较采用 SNK － q检验;计数资料采
用率和构成比等相对数进行描述，采用 2 检验。P ＜ 0． 05 为
差异有统计学意义。
2 结 果
2. 1 各组皮肤形态学表现 第 2 次激发后 24 h，与正常对照
组比较，各模型组小鼠腹部激发部位皮损发红、轻度水肿伴渗
出;组织病理结果显示，表皮角化过度、增厚，颗粒层及棘层肥
厚，细胞间与细胞内轻度水肿，真皮层炎症细胞浸润，真皮浅
层毛细血管扩张、增生，符合小鼠 ACD 皮损与组织病理学典
型表现。小鼠右耳肿胀、充血，血管扩张，组织病理显示表皮
角化过度，表皮细胞间水肿，发现较多单一核细胞浸润;真皮
结缔组织水肿，血管周围可见轻度细胞浸润。治疗 7 d 后，头
花蓼低浓度组小鼠腹部皮损仍可见少量结痂，角质层角化正
常，炎症细胞有所减少;头花蓼中浓度组小鼠腹部皮损处较正
常组小鼠皮肤略厚，仍可见少量丘疹，渗出、结痂消失，角质层
角化正常，炎症细胞明显减少;头花蓼高浓度组、地塞米松组
小鼠腹部皮损处皮肤恢复正常，潮红、渗出、结痂均消失，表皮
与正常小鼠相比厚度基本相当，真皮层无炎症细胞。
2. 2 各组诱发前后右耳厚度比较 诱发前各组小鼠右耳厚
度比较差异无统计学意义;诱发后 24 h，模型组、头花蓼低浓
度组、头花蓼中浓度组、头花蓼高浓度组、地塞米松组小鼠右
耳厚度大于正常对照组(P均 ＜ 0． 05) ;治疗 7 d后，头花蓼低
浓度组、头花蓼中浓度组、头花蓼高浓度组、地塞米松组小鼠
右耳厚度均低于模型组(P ＜ 0． 05) ，头花蓼中浓度组低于头
花蓼低浓度组(P ＜ 0． 05) ，头花蓼高浓度组低于头花蓼中浓
度组(P ＜ 0． 05)。见表 1。
表 1 各组诱发前后右耳厚度比较(珋x ± s，mm)
组别 n 诱发前 诱发后 24 h 治疗 7 d后
正常对照组 6 1． 899 ± 0． 145
模型组 6 1． 905 ± 0． 120 4． 105 ± 0． 276① 3． 005 ± 0． 220①③
头花蓼低浓度组 6 1． 911 ± 0． 163 4． 011 ± 0． 183① 2． 511 ± 0． 263①②③
头花蓼中浓度组 6 1． 796 ± 0． 136 4． 060 ± 0． 236① 2． 387 ± 0． 236①②③④⑤
头花蓼高浓度组 6 1． 856 ± 0． 150 3． 996 ± 0． 235① 2． 196 ± 0． 193①②③④
地塞米松组 6 1． 896 ± 0． 105 4． 131 ± 0． 254① 2． 376 ± 0． 250①②③④⑤
注:①与正常对照组比较，P ＜ 0． 05;②与模型组比较，P ＜ 0． 05;
③与诱发后24 h比较，P ＜0． 05;④与头花蓼低浓度组比较，P ＜
0. 05;⑤与头花蓼高浓度组比较，P ＜ 0． 05。
2. 3 各组右耳中性粒细胞和单核细胞计数比较 头花蓼低
浓度组、头花蓼中浓度组、头花蓼高浓度组、地塞米松组中性
粒细胞计数和单核细胞计数均明显低于模型组(P 均 ＜
0. 05) ，头花蓼高浓度组、地塞米松组明显低于头花蓼低浓度
组和头花蓼中浓度组(P均 ＜ 0． 05) ，头花蓼中浓度组明显低
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于头花蓼低浓度组(P均 ＜ 0． 05) ，地塞米松组明显低于头花
蓼高浓度组(P均 ＜ 0． 05)。见表 2。
表 2 各组右耳中性粒细胞和单核细胞数
比较(珋x ± s，个 /mm2)
组别 n 中性粒细胞 单核细胞
正常对照组 6 20． 35 ± 8． 95 118． 99 ± 70． 95
模型组 6 135． 52 ± 54． 37① 927． 05 ± 351． 20①
头花蓼低浓度组 6 55． 06 ± 23． 21①② 402． 11 ± 189． 63①②
头花蓼中浓度组 6 51． 40 ± 21． 34①② 357． 61 ± 154． 36①②
头花蓼高浓度组 6 46． 96 ± 20． 50①②③④ 313． 53 ± 150． 50①②③④
地塞米松组 6 31． 43 ± 18． 50①②③④⑤ 201． 38 ± 107． 50①②③④⑤
注:①与正常对照组比较，P ＜ 0． 05;②与模型组比较，P ＜ 0． 05;
③与头花蓼低浓度组比较，P ＜ 0． 05;④与头花蓼中浓度组比
较，P ＜ 0． 05;⑤与头花蓼高浓度组比较，P ＜ 0. 05。
2. 4 各组血清 IL － 4、IFN － γ和 TNF － α水平比较 头花蓼
低浓度组、头花蓼中浓度组、头花蓼高浓度组、地塞米松组血
清 IL － 4、TNF － α 水平均低于模型组(P 均 ＜ 0． 05) ，头花蓼
高浓度组、地塞米松组低于头花蓼低浓度组、头花蓼中浓度组
(P均 ＜ 0． 05) ，头花蓼中浓度组低于头花蓼低浓度组(P均 ＜
0． 05) ，地塞米松组低于头花蓼高浓度组(P 均 ＜ 0． 05) ;各组
间 IFN － γ水平比较差异无统计学意义。见表 3。
3 讨 论
ACD是以 T细胞及巨噬细胞为主要效应细胞的迟发型
超敏反应，是一种以单核细胞浸润及组织细胞损害为主要病
理特征的炎性反应。Th1 与 Th2 细胞失衡是变态反应类疾病
发病过程中的一个重要环节，正常情况下，两者通过各自分泌
的细胞因子(Th1 型细胞因子包括 IL － 2、TNF － α、IFN － γ
等;Th2 型细胞因子包括 IL － 4、IL － 5、IL － 10 等)的相互抑制
作用而处于动态平衡［9］。一旦在某些因素的作用下，Th1细
表 3 各组血清 IL － 4、IFN － γ和 TNF － α水平比较(珋x ± s)
组别 n IL － 4 /(ng /mL) IFN － γ /(pg /mL) TNF － α /(ng /mL)
正常对照组 6 0． 20 ± 0． 11 0． 13 ± 0． 09 1． 89 ± 0． 50
模型组 6 1． 05 ± 0． 56① 0． 10 ± 0． 08 13． 25 ± 2． 75①
头花蓼低浓度组 6 0． 51 ± 0． 20①② 0． 11 ± 0． 07 9． 11 ± 2． 63①②
头花蓼中浓度组 6 0． 46 ± 0． 21①②③ 0． 11 ± 0． 06 7． 96 ± 2． 46①②③
头花蓼高浓度组 6 0． 31 ± 0． 18①②③④ 0． 13 ± 0． 09 6． 96 ± 1． 52①②③④
地塞米松组 6 0． 26 ± 0． 12①②③④⑤ 0． 12 ± 0． 08 6． 32 ± 1． 61①②③④⑤
注:①与正常对照组比较，P ＜ 0． 05;②与模型组比较，P ＜ 0． 05;③与头花蓼低浓度组比较，P ＜ 0． 05;④与头花蓼中浓度组比较，P ＜ 0． 05;⑤
与头花蓼高浓度组比较，P ＜ 0． 05。
胞与 Th2 细胞之间的平衡状态被打破，则会导致包括过敏性
皮肤病在内的多种疾病的发生，其中 Th2 占优势是 ACD发病
的重要机制之一［10］。
目前对于 ACD的研究报道较多，但运用头花蓼治疗 ACD
的报道较少。本研究结果显示，ACD 小鼠经头花蓼治疗后，
皮损部位形态基本恢复正常，皮肤角质层明显变薄，表皮厚度
接近正常，毛囊结构基本恢复，真皮层中中性粒细胞和单核细
胞等炎症细胞显著减少，且血清 IL － 4 和 TNF － α 水平显著
降低，同时，上述效应随着头花蓼浓度的增加逐渐增强。表明
头花蓼对 ACD具有明显的治疗作用。
头花蓼治疗 ACD的机制可能为:头花蓼富含的黄酮类化
合物和没食子酸类化合物具有抗炎、抗氧化和抗突变等生物
活性，能够明显抑制 TNF － α及 IL －4的升高［11 －12］。而 TNF －
α主要由 Th1 细胞分泌，它在 ACD的发病过程中发挥着促进
炎性反应、改变血管内皮通透性、增加渗出等作用［13］。IL － 4
主要由 Th2 细胞分泌，其能够增加内皮细胞表面黏附分子 － 1
以及嗜酸细胞活化趋化因子基因的表达，进而促进嗜酸性粒
细胞迁移至皮损，嗜酸性粒细胞脱颗粒释放嗜酸性粒细胞阳
离子蛋白(ECP)等炎症递质促进 ACD的炎症反应［14］。头花
蓼通过抑制 IL － 4 和 TNF － α的水平，从而抑制炎性反应，对
ACD产生治疗作用。
综上所述，头花蓼能够降低 IL － 4 和 TNF － α 水平，从而
对 ACD小鼠产生明显的治疗作用，值得进一步进行临床应用
研究。
［ 参 考 文 献 ］
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了 HEＲ －2 的高度表达，特别是乳腺癌，表达率 10% ～ 35%，
其表达与乳腺癌的分化程度以及临床分期之间有着十分紧密
的联系［6］。本研究结果显示 HEＲ － 2 蛋白的表达率为
13. 27%，与既往的研究结果一致。
有学者指出胃窦部胃癌相比于胃体部胃癌的 HEＲ － 2 表
达阳性率更高［7］。而本研究发现，HEＲ － 2 阳性表达率与肿
瘤位置无关，而肠型胃癌相对于弥漫性以及混合型胃癌的表
达率更高，这与文献［8］报道相一致，而混合型以及弥漫性胃
癌的表达率比较差异无统计学意义，这可能是由于肠型胃癌
其特定的细胞亚群生长发育所导致的，但是 HEＲ － 2 在肠型
胃癌中的表达机制又是十分复杂的，并不是所有的肠型胃癌
其表达水平均会升高，在胃癌中，HEＲ － 2 基因的扩增与钙黏
蛋白的基因突变水平呈负相关，钙黏蛋白基因突变是弥漫性
胃癌的标志，而 HEＲ － 2 基因与弥漫性胃癌的预后无
关［9 － 11］。本研究结果显示，HEＲ － 2 表达与胃癌的浸润深度
及其淋巴结转移均无明显关系，但是与胃癌的分化程度密切
相关，高、中分化的胃癌 HEＲ － 2 的表达明显高于低分化、未
分化胃癌，提示 HEＲ － 2 与胃高分化腺癌之间有着紧密的联
系，其机制有待进一步研究。
对于乳腺癌 HEＲ － 2 基因高度表达的单克隆抗体 Her-
ceptin目前已经在临床上得到了应用，且收到了良好的效果，
那么胃癌的 HEＲ －2 高度表达是否可以作为一个胃癌治疗的
靶点，这是国内外学者研究的热门话题［12 － 13］。但是国内对此
研究不多，国外有研究指出 Herceptin可以在体外起到抑制胃
癌细胞生长的作用［9］。对于老年胃癌患者，Herceptin 治疗可
以起到独特的效果，有研究报道了 1 例 HEＲ － 2 高度表达的
老年胃癌合并肝脏转移患者，应用 Herceptin 治疗后，其抗肿
瘤效果明显，患者治疗后生存了 3 年时间［14］，提示靶向治疗
可以特异性抑制癌细胞的异常传导通路，而对正常细胞的作
用极小，对于无法耐受化疗的老年患者尤为适用。所以，HEＲ －
2 可以作为胃癌诊断以及治疗的重要指标，可以为胃癌的靶
向治疗提供一个新的理论依据。
HEＲ －2()的免疫组化结果尚不确定，其阳性判定标
准缺乏理论依据，其与胃癌的关系以及基因扩增的联系以及
Herceptin的治疗效果尚未有报道，值得深入探讨。
［ 参 考 文 献 ］
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·3691·现代中西医结合杂志 Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine 2015 Jun，24(18)