免费文献传递   相关文献

南紫薇、福建紫薇和37个栽培品种亲缘关系的AFLP分析



全 文 :分子植物育种,2010年,第 8卷,第 4期,第 730-735页
Molecular Plant Breeding, 2010, Vol.8, No.4, 730-735
研究报告
A Letter
南紫薇、福建紫薇和 37个栽培品种亲缘关系的 AFLP分析
顾翠花 1* 包志毅 1 王守先 2 张启翔 3 田苗 4
1浙江农林大学园林学院,临安, 311300; 2浙江农林大学信息工程学院,临安, 311300; 3北京林业大学园林学院,北京, 100083; 4中国林业出版
社,北京, 100009
*通讯作者, gchwsx11@126.com
摘 要 本研究以南紫薇、福建紫薇以及 37 个栽培品种为材料,利用 AFLP分子标记分析其亲缘关系。
PCR 实验结果表明,清晰计数的条带共有 270 条,多态性条带占了 220 条,百分比最高为 80.98%;单对
引物组合扩增出的可计数条带最高 81条,最少 32条,五对引物组合扩增出的多态性条带平均 54条,多态性
百分比最高为 84.5%,最低为 74.47%;种质资源相似系数为 0.540 7~0.915 1,平均相似系数为 0.684 6。UPGMA
聚类结果显示 39个材料可划分成三大部分,其中南紫薇及南紫薇与紫薇产生的杂交品种被划分为第Ⅰ
组,福建紫薇及福建紫薇与紫薇产生的杂交品种划分为第Ⅱ组,所有紫薇种间的杂交品种划分到第Ⅲ
组。本实验表明 AFLP标记技术能从分子水平上较为准确地体现紫薇种质资源的亲缘关系。
关键词 紫薇,种质,亲缘关系, AFLP标记
AFLP Analysis on the Genetic Relationship of Lagerstroemia subcostata,
Lagerstroemia limii and 37 Cultivated Varieties
Gu Cuihua 1* Bao Zhiyi 1 Wang Shouxian 2 Zhang Qixiang 3 Tian Miao 4
1 School of Landscape Architecture, Zhejiang Agriculture and Forestry University, Linan, 311300; 2 School of Information Engineering, Zhejiang Agri-
culture and Forestry University, Linan, 311300; 3 School of Landscape and Architecture, Beijing Forestry University, Beijing, 100083; 4 Chinese Forestry
Publishing House, Beijing, 100009
* Corresponding author, gchwsx11@126.com
DOI: 10.3969/mpb.008.000730
Abstract The genetic relationship of Lagerstroemia subcostata, Lagerstroemia limii and 37 cultivated varieties
was analyzed by AFLP markers. Result of PCR experiment showed that among the 270 polymorphic bands obtained
from 5 selective primer pairs, 220 was polymorphic, accounting for 80.98%. The average number of DNA bands
per primer pair was 54 ranging from 32 to 81, with a maximum polymorphic rate of 84.5% and a minimum rate of
74.47%. The genetic similarity among all 39 accessions evaluated ranged from 0.540 7 to 0.915 1, with an average
of 0.684 6. Based on the UPGMA dendrogram, all the materials could be divided into three types. The first category
included Lagerstroemia subcostata together with the hybrids of Lagerstroemia subcostata and Lagerstroemia; The
second category included Lagerstroemia limii as well as the hybrids of Lagerstroemia limi and Lagerstroemia; The
third category included all the hybrids between Lagerstroemia indica cultivars. This study revealed that AFLP ap-
proach was efficient in generating accurate information on the genetic diversity and relationship of Lagerstroemia
germplasm resources.
Keywords Lagerstroemia, Germplasm, Genetic relationship, AFLP marker
www.molplantbreed.org/doi/10.3969/mpb.008.000730
基金项目:本研究由国家十五科技攻关项目(2004BA525B11)和浙江林学院科研启动基金(2009FR070)共同资助
紫薇俗称百日红,因为它的花期达百日以上,是
我国千屈菜科(Lythraceae)紫薇属(Lagerstroemia)一种
非常有潜力的观赏花灌木,其它花灌木相比较,它的
优点在于在炎热少花的夏季盛开,色彩丰富,枝干光
滑,对污染有较强的抗逆性等(Zhang, 1991),如今在
我国的大部分城市绿化中均有广泛应用,且应用方
式非常丰富,既可以用来做行道树,还可以在庭院种
植,也可作盆栽等等,是未来有开发价值的园林应用
树种之一。
紫薇是中国原产的植物,已经有一千五百多年
的栽培历史,自从唐代开始就已经被用来进行观赏,
在我国的唐、宋时期紫薇品种较少,通过几百年的人
工选择和栽培,出现了一些新的紫薇品种,20世纪
90年代就具有四十多个紫薇品种,主要是将自然界
中的野生紫薇资源引入人工栽培后选育出来的新品
种。根据文献,紫薇属在全世界共分布大约五十五种,
主要分布在亚洲东部以及东南部;菲律宾、新几内亚
岛以及澳大利亚等地区(Zhang, 1991)。根据《中国植
物志》的相关记载,我国自然分布的紫薇属野生种有
18个,从东南亚地区引入 3种进行栽培,现在一共包
括 21种(王献, 2004)。其中紫薇(Lagerstroemia indica)、
南紫薇(Lagerstroemia subcostata)和福建紫薇(Lager-
stroemia limii)这三个种分布非常广泛。尤其是紫薇这
个种在我国自南到北的大部分省份均有自然分布或
人工栽培(Zhang, 1991)。
AFLP分子标记可以在遗传关系非常近似的材
料中产生多态性,在实验样品较少的情况下,也可得
到较为满意的结果,它是在 RFLP和 RAPD这两种技
术的基础上改良后得到的 (邹喻苹等,编著, 2001,科
学出版社, pp.112-135),它不需要预先知道基因组的
序列就可以检测某种植物的多态性(周延清, 2005),同
时它吸取了 RAPD和 RFLP技术二者各自的优点,即
检测出的多态性位点具有和 RAPD标记相同的覆盖
基因组的能力,还具有和 RFLP技术的可靠与稳定优
点(邹喻苹等,编著, 2001,科学出版社, pp.112-135),在
用于花卉品种鉴定和指纹图谱的构建方面,已有牡丹
品种和芍药品种(朱红霞, 2004)的研究;在花卉亲缘关
系和遗传多样性这些研究方面,AFLP 分子标记目
前在牡丹品种(侯小改等, 2006)、紫薇品种(王献等,
2005)等植物上获得了一些研究成果。
王献等(2004)也选用幼嫩的紫薇叶片来进行实
验,提取 DNA时采用了酚-氯仿改良法,得到的
DNA纯度较高,没有降解现象和弥散的情况,建起
了紫薇、南紫薇与 20个紫薇品种之间的 AFLP银染
扩增优良体系。第一次在 AFLP实验过程中的每一
步骤获得了较大的成功,得到紫薇品种清晰的 AFLP
指纹图谱,这一成功为以后建立紫薇种质库、新优紫
薇品种选育和其它相关的研究提供了参考;同时利
用 AFLP分子标记,选取了 MseⅠ-PstⅠ双酶切组
合、7对引物组合来分析 30个紫薇品种之间、这些品
种和紫薇、南紫薇、福建紫薇之间的亲缘关系(王献,
2004),研究结果为:矮生的紫薇品种亲缘关系很近其
中‘粉润’和‘矮生垂枝粉’这两个矮生品种最近;其
次相同花色的品种亲缘关系较近,例如‘白云映霞’
和‘紫爪银薇’这两个白色品种很近,聚类在一起,还
有‘白蝶飞舞’和‘层云积雪’这两个白色品种聚集、
但是白色的香花品种‘白密香’与其他白色品种亲缘
关系比较远,但是也存在例外的情况,比如不同花色
品种的红色的‘红蝶飞舞’与紫色的‘蓝色妖姬’聚类
在一起,有较近的亲缘关系。上述的已有研究说明在
进行紫薇亲缘关系研究的时候,可以采用 AFLP技
术(王献等, 2005)。
作者采用 AFLP标记初步分析了南紫薇、福建
紫薇和栽培品种共 39份实验样品的亲缘关系,目的
在于为紫薇属的品种分类研究、资源的收集、保存、
创新和有效利用提供参考。
1结果与分析
1.1紫薇DNA检测结果
DNA电泳检测结果显示,提取出的紫薇 DNA
条带完整清晰,没有降解现象。同时应用紫外分光光
度计对其进行检测, OD260/OD280值均在 1.8 左右,得
到的 DNA符合 AFLP技术所要求的质量和纯度(邹
喻苹等,编著, 2001,科学出版社, pp.112-135)。
1.2 AFLP扩增多态性
由表 1可见,5对引物组合对 39份样品扩增出
条带 270条,其中 220条为多态性条带,不同组合的
引物扩增出不同的多态性条带数,扩增出最少的条
带为 32条,扩增最多的条带为 81条。扩增的多态性
条带平均到每个引物组合为 54条,多态性平均值达
到 80.98%,5对不同的引物组合多态性都达到 74%以
上。其中多态性最高的引物组合是M-TCA/P-GAT,扩
增多态性 84.5% (图 1),其次的引物组合分别为
M-TGG/P-GAT、M-GGT/P-GAT、M-TGG/P-CAT,最
低的是M-TCA/P-CAT,扩增多态性 74.47%。
1.3聚类分析
通过计算样本间的相似系数, 并以此建立矩阵,
紫薇种质资源相似系数为 0.540 7~0.915 1,平均相似
系数为 0.684 6。相似系数最高的为‘垂枝粉’和‘垂枝
紫’,约为 0.915 0,亲缘关系最近。
南紫薇、福建紫薇和 37个栽培品种亲缘关系的AFLP分析
AFLPAnalysis on the Genetic Relationship of L. subcostata, L. limii and 37 Cultivated Varieties
731
分子植物育种
Molecular Plant Breeding
利用 NtSys 2.1软件对采用 AFLP实验扩增出的条带
进行分析,获得遗传距离矩阵,利用非加权配对算术
平均法(UPGMA)得到 39个实验样品紫薇属种质资
源的聚类图(图 2)。
在图 2中,遗传相似性指数 D为 0.745时,可以
把紫薇品种及三个种 39个实验样品划分成三大组,
第一大组包含了南紫薇、紫薇与南紫薇的杂交种,第
二大组包含了福建紫薇、紫薇与福建紫薇的杂交种,
第三大组为紫薇的品种。用分子标记的结果说明将种
源作为紫薇品种分类时的一级标准是较为准确的。
第三大组中,遗传相似性指数 D为 0.779时,又
可以把紫薇的品种分为两个小组,第一个小组包括
紫薇单色品种,第二组包括了紫薇复色品种。这说明
花瓣单色还是复色也可以作为紫薇品种分类的一个
重要性状。
在第一小组中,最高相似系数约 0.915 0,表现在
‘垂枝粉’和‘垂枝紫’两个垂枝品种之间,推测原因
在于这两个垂枝品种性状大多表现相同,只有花瓣
颜色、爪的颜色及一些数量性状存在一些不同之处,
说明紫薇植株的株型也是在品种分类时可以运用的
分类性状,而‘平枝紫’和‘平枝粉’这两个平枝的紫
薇品种相聚在相似系数 0.908 0之处,也可证明紫薇
品种分类时可以运用株型这一性状,以上为枝型相
同的品种聚类在一起;那么从图 2中还可以看出花
瓣颜色是紫薇品种分类的重要性状之一,例如紫薇
的白花品种全部聚类在相似系数 0.816这一位置,同
样其他颜色的紫薇品种也是相同花色聚类在一起;
‘香雪云’是一个白色的香花紫薇品种,图 2中可以
表 1不同的引物组合扩增的条带数目
Table 1 Number of polymorphic bands with different primer combinations
编号
Serial No.
1
2
3
4
5
总计
Total
平均值
Mean
引物对和序列
Primer combinations and squences
M-GGT (5-GATGAGTCCTGAGTAAGGT-3)
P-GAT (5-GACTGCGTACATGCAGAT-3)
M-TCA (5-GATGAGTCCTGAGTAATCA-3)
P-CAT (5-GACTGCGTACATGCACAT-3)
M-TCA (5-GATGAGTCCTGAGTAATCA-3)
P-GAT (5-GACTGCGTACATGCAGAT-3)
M-TGG (5-GATGAGTCCTGAGTAATGG-3)
P-CAT (5-GACTGCGTACATGCACAT-3)
M-TGG (5-GATGAGTCCTGAGTAATGG-3)
P-GAT (5-GACTGCGTACATGCAGAT-3)
-
-
总条带数
Total bands
32
47
58
52
81
270
54
多态性条带数
polymorphic bands
26
35
49
42
68
220
44
多态性百分率(%)
Percentageof polymorphic loci (%)
81.25
74.47
84.50
80.77
83.95
-
80.98
图 1引物组合M-TCA与 P-GAT扩增产物在 6%聚丙烯酰胺凝胶上电泳银染
Figure 1 The silver-stained results of selective amplification reaction in 6% denaturing polyacrylamide gel by the primer combinations
M-TCA&P-GAT
www.molplantbreed.org
DOI: 10.3969/mpb.008.000730
732
复色品种‘紫云’和‘晚紫’在相似系数 0.89处发生聚
集,推测这样聚类的主要原因为这两个聚类的紫薇
复色品种之间,花瓣大部分的颜色、边缘颜色都一
致,这说明在对紫薇的复色花品种进行分类时花瓣
的边缘颜色也可以作为紫薇品种分类性状之一;另
外紫薇的两个白色品种‘白云映霞’和‘红日映雪’聚
集在相似系数 0.89这个位置,首先二者具有相同的
花色,其次花瓣边缘都发生皱褶,皱褶程度有所差
异,还有它们的瓣爪颜色均为紫红色,因此分析两者
聚类的原因在于这几个相似的表型性状;紫薇的复色
品种‘六月飞雪’表现性状比较特殊,它与其它的品种
相比较性状表现极大的差异,因此在聚类图中反映出
来‘六月飞雪’和其它品种相似性系数是最低的。
2讨论
本文实验中利用 5对不同引物组合扩增了南紫
薇、福建紫薇和紫薇的品种,实验设置了多次的重
复,得到的条带比较清晰,适合最后的分析,多次实
验都得到较为清晰的图谱,由此可以看出实验过程
中得到的紫薇种质的指纹图谱具有较强的稳定性和
可靠性,可以用来鉴定紫薇品种以及探析种间与品
种间亲缘关系。
本研究对南紫薇、福建紫薇以及 37个紫薇栽培
品种进行亲缘关系分析的结果表明,对 39个样品 5
对引物组合进行 AFLP分子标记实验,结果共得到
可以计数的条带 270条,其中多态性条带 220条,
多态性 80.98%。实验中只有一对引物组合与已有的
引物组合相同(王献等, 2005);实验也采用了王献等
(2005)用到的不同引物组合对 39个实验样品进行了
扩增,但是得到的指纹图谱清晰程度比较低,推测造
成这种明显差别的原因是实验样品的采集地以及品
种不同产生的。
通过与前人研究相比,在对紫薇亲缘关系的研
究中我们进一步验证了 AFLP分子标记是一种优良
的分子检测技术(邹喻苹等,编著, 2001,科学出版社,
pp.112-135),在鉴定紫薇品种以及对品种进行分类
中具有非常重要的作用;但同时也存在一些不足,一
方面是紫薇品种的混乱以及命名不统一的问题,需
要我们在今后继续开展大量的紫薇资源调查工作来
改进这一不足,在实验材料方面力求达到同名同物,
这样得出的实验结果才能真正做到对比分析,体现我
国紫薇资源的实际遗传多样性丰富程度;同时实验中
也存在一些不可避免的误差,在实验操作的过程中以
图 2紫薇品种聚类图
注:编号同表 2
Figure 2 The dendrangram of Lagerstroemia cultivars
Note: The number see the table 2
看出香花品种‘香雪云’与小花品种‘阳春白雪’有比
较近的亲缘关系,分析原因可能是首先二者均为白
色,其次这两个品种花蕾的表型性状非常相似;另外
图 2还显示,直枝类紫薇品种、垂枝类紫薇品种与紫
薇白花品种聚类在一起,紫色的紫薇品种与平枝类
紫薇品种聚类在一起,推测产生上述这两种混合聚
类的原因,白花品种的原始亲本、直枝紫薇品种的原
始亲本、垂枝紫薇品种的原始亲本三者之间可能具
有较近的亲缘关系,同时平枝紫薇品种的原始亲本
与紫色品种的原始亲本之间有较近的亲缘关系。
在第二小组里,在相似系数 0.90处,两个紫薇的
复色品种‘豆蔻年华’和‘绯云’发生聚类,另外两个
南紫薇、福建紫薇和 37个栽培品种亲缘关系的AFLP分析
AFLPAnalysis on the Genetic Relationship of L. subcostata, L. limii and 37 Cultivated Varieties
733
分子植物育种
Molecular Plant Breeding
及最后统计扩增条带的时候都可能产生误差。
本文的研究把南紫薇、福建紫薇这两个近缘种
与收集到的紫薇品种一起实验,分析它们之间亲缘
关系的远近。本实验得出的结论在实际的育种应用
中可以指导紫薇育种进行合理的亲本选配,选择亲
缘关系较远的亲本,可以增加其杂种后代的遗传和
变异,可以选育出杂种优势更强,观赏性状以及其它
综合性状更好的紫薇新品种。因此本研究结果对紫
薇的育种工作具有直接的理论指导和借鉴意义。
3材料与方法
3.1实验材料及来源
实验在 2009年 5月至 2009年 11月进行,实验
样品为南紫薇、福建紫薇以及 37个紫薇品种,一共
包括了 39个样品,对这 39个样品进行 AFLP分子
标记实验。实验材料的来源和名称见表 2。
3.2紫薇 DNA提取
DNA提取用改良的 CTAB法进行(王献等, 2004)。
取样品 10 μL用 0.8%的琼脂糖凝胶检测 DNA,1×
TAE电泳缓冲液,电压 80 V,电泳 40 min,电泳完成
后利用紫外凝胶成相系统对电泳产物进行拍照(王
献, 2004)。
3.3酶切反应
酶切连接体系采用 20.0 μL 反应体系 , 其中
ddH2O 14.4 μL、DNA (200 ng/μL) 2.0 μL、PstⅠ接头
(50 μmol/L) 0.4 μL、MseⅠ接头(5 μmol/L) 0.4 μL、
10×T4 buffer 2.0 μL、PstⅠ (10 U/μL) 0.2 μL、MseⅠ
(10 U/μL) 0.2 μL、T4 DNA连接酶(400 U/μL) 0.4 μL。
在 37℃恒温条件下酶切连接 5~8 h。
表 2紫薇属实验材料及来源
Table 2 Materials and resources of Lagerstroemia
序号
No.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
品种 /种名
Cultivars/Species
‘红蝶飞舞’
Hongdie Feiwu’
‘层云积雪’
‘Cengyun Jixue’
‘多花粉’
‘Duohufen’
‘福建杂种白’
‘Fujian Zazhongbai’
‘红日映雪’
Hongri Yingxue’
‘白云映霞’
Baiyun Yingxia’
‘红爪堇薇’
‘Hongzhua Jinwei’
‘红霞’
‘Hongxia’
‘堇薇’
‘Jinwei’
‘紫晶’
‘Zijing’
‘芙蓉面’
‘Furongmian’
‘粉蝴蝶’
Fenhudie’
‘红锦’
‘Hongjin’
来源
Source
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
序号
No.
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
品种 /种名
Cultivars/Species
‘晚紫’
‘Wanzi’
‘小花紫’
‘Xiaohuazi’
‘垂枝粉’
‘Chuizhi fen’
‘小花白’
‘Xiaohuabai’
‘阳春白雪’
‘Yangchun Baixue’
‘杂种粉’
‘Zazhongfen’
‘朝云暮霞’
‘Zhaoyun Muxia’
‘豆蔻年华’
‘Doukou Nianhua’
‘皱瓣堇薇’
‘Zhouban Jinwei’
‘紫玉’
‘Ziyu
‘紫霞’
‘Zixia’
‘朝露’
‘Zhaolu’
‘六月飞雪’
‘Liuyue Feixue’
来源
Source
北京
Beijing
北京
Beijing
重庆
Chongqing
河南鄢陵
Yanling, Henan
河南鄢陵
Yanling, Henan
河南鄢陵
Yanling, Henan
河南鄢陵
Yanling, Henan
河南鄢陵
Yanling, Henan
河南鄢陵
Yanling, Henan
河南鄢陵
Yanling, Henan
河南鄢陵
Yanling, Henan
河南鄢陵
Yanling, Henan
河南鄢陵
Yanling, Henan
序号
No.
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
品种 /种名
Cultivars/Species
‘直枝白’
‘Zhizhibai’
‘垂枝紫’
‘Chuizhizi’
‘粉晶’
‘Fenjing’
‘紫云’
Ziyun’
‘香雪云’
‘Xiangxueyun’
‘平枝粉’
Pingzhifen’
‘平枝紫’
‘Pingzhizi’
‘银边红’
‘Yinbianhong’
‘绯云’
Feiyun’
‘俏佳人’
‘Qiaojiaren’
‘二八年华’
‘Erba Nianhua’
福建紫薇
Lagerstroemia limii
南紫薇
Lagerstroemia subcostata
来源
Source
浙江杭州
Hangzhou, Zhejiang
浙江杭州
Hangzhou, Zhejiang
浙江杭州
Hangzhou, Zhejiang
浙江杭州
Hangzhou, Zhejiang
浙江杭州
Hangzhou, Zhejiang
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
北京
Beijing
www.molplantbreed.org
DOI: 10.3969/mpb.008.000730
734
3.4预扩增反应
预扩增反应的质量好坏对最终指纹图谱的质量
影响较大,预扩增实验的模板为稀释 5倍后的酶切连
接产物。预扩增反应采用 20 μL的反应体系,其中
ddH2O 12.1 μL、DNA模板 3.0 μL、10×Buffer 2.0 μL、
dNTP 0.4 μL、P00 1 μL、M00 1 μL、0.5 μL Taq酶。预
扩增反应的程序为 94℃条件下反应 5 min→94℃反
应 35 s→56℃反应 35 s→72℃反应 1 min,前四步进
行 30次循环,循环结束之后 72℃反应 5 min,放置
于 4℃的条件下备用。
把上一步预扩增反应的产物进行 10倍的稀释
之后做为选择性扩增反应的模板。选择性扩增反应
采用 20.0 μL 的反应体系,包括 ddH2O 12.2 μL,
DNA 6.0 μL,10×Buffer 2.0 μL,dNTP 0.3 μL,PstⅠ
引物 1 μL,MseⅠ引物 1 μL,Taq酶 0.5 μL。选择性
扩增程序为 94℃条件下反应 5 min→94℃反应 35 s
→65℃反应 30 s→72℃反应 1 min,前四步进行 12
次循环(每进行一次循环递减 0.7℃),12次循环完成
后进行下一个反应流程:94℃反应 35 s→56℃反应
35 s→72℃反应 1 min,这三步共进行 30次循环,完
成之后保持 72℃ 5 min,放置于 4℃的条件下备用。
3.5扩增产物的检测
通过 6%的聚丙烯酰胺凝胶电泳来检测最后的扩
增产物。首先在恒定功率 80W条件下预电泳 35 min,
预电泳结束后去除气泡、杂质等,插入梳子,在每条
泳道中加入 6 μL变性后的扩增产物,在恒定功率
80 W条件下电泳 1.5~2 h。统计条带类型在相同片段
位置上的谱带,同一片段位置上凡是在板上有带
的,用“1”来表示,表明有此条带,没有条带的用“0”
来表示,表示没有此片段,最后建立一个 0与 1的数
据矩阵。该实验中全部数据处理采用 NTSYS-PC2.1
软件分析,匹配系数采用 SM系数进行计算,聚类分
析采用非加权配对算术平均法(UPGMA) (黎海利和
董丽, 2009)。
依据不同实验材料同一条水平线上有无一致的
DNA片段标记来体现这组材料多态性的变化这一
原理,在统计条带的时候,一般仅统计较清晰、容易
分辨的条带,对于模糊、无法清晰辨认的条带忽略不
计;迁移率相同但是迁移的强度强弱不同的条带,当
迁移较强的条带超过迁移较弱的条带的两倍时,已经
不能作为一致的条带来看待(邹喻苹等, 编著, 2001,
科学出版社, pp.112-135)。
参考文献
Hou X.G., Yin W.L., Li J.Y., and Wang H.F., 2006, Phylogenetic
relationship of dwarf tree peony cultivars by AFLP analysis,
Beijing Linye Daxue Xuebao (Journal of Beijing Forestry U-
niversity), 28(5): 84-88 (侯小改,尹伟伦,李嘉珏,王华芳,
2006,牡丹矮化品种亲缘关系的 AFLP分析,北京林业大
学学报, 28(5): 84-88)
Li H.L., and Dong L., 2009, Relationship of Hemerocallis spp.
wild species and cultivars by AFLP marker, 2009, Yuanyi
Xuebao (Acta Horticulturae Sinica), 36(8): 1203-1208 (黎海
利,董丽,萱草部分野生种和栽培品种亲缘关系的 AFLP
分析,园艺学报, 36(8): 1203-1208)
Wang X., Zhang Q.X., Yang Q.S., and Chai Y.S., 2005, Genetic
relationship of Lagerstroemia indica by AFLP, Beijing Linye
Daxue Xuebao (Journal of Beijing Forestry University), 27(1):
59-63 (王献, 张启翔, 杨秋生, 柴永生, 2005, 利用 AFLP
技术研究紫薇的亲缘关系 , 北京林业大学学报 , 27(1):
59-63)
Wang X., Chai Y.S., Zhi Y.P., and Zhang Q.X. ,2004, Extraction
of DNA and construction of AFLP fingerprinting in leaves
of Lagerstromi indica, Henan Nongye Daxue Xuebao (Jour-
nal of Henan Agricultural University), 38(2): 189-192 (王献,
柴永生,职永普, 2004,紫薇叶片 DNA的提取及 AFLP反
应体系的建立,河南农业大学学报, 38(2): 189-192)
Wang X., 2004, Studies on the germplasm resources of Lager-
stroemia in China and their relationships, Dissertation for Ph.
D., Beijing Forestry University, Supervisor: Zhang Q.X., pp.
75-95 (王献, 2004,我国紫薇种质资源及其亲缘关系的研
究 , 博士学位论文 , 北京林业大学 , 导师 : 张启翔 , pp.
75-95)
Zhang Q.X., 1991, Lagerstroemia species classification and its ap
plication in the garden, Journal of Beijing Forestry University,
13(4): 57-66 (Chinese Journal in English)
Zhou Y.Q., ed., 2005, DNA molecular marker applications in
plant research, Chemical Industry Press, Beijing, China, pp.
5-10 (周延清,编著, 2005, DNA分子标记技术在植物研究
中的应用,化学工业出版社,中国,北京, pp.5-10)
Zhu H.X., 2004, Preliminary study on DNA fingerprinting of peony
curtivars, Thesis for M.S., Beijing Forestry University, Super-
visor: Yuan T., pp.17-31 (朱红霞, 2004,牡丹芍药品种 DNA
指纹图谱绘制的初步研究,硕士学位论文,北京林业大学,
导师:袁涛, pp.17-31)
南紫薇、福建紫薇和 37个栽培品种亲缘关系的AFLP分析
AFLPAnalysis on the Genetic Relationship of L. subcostata, L. limii and 37 Cultivated Varieties
735