全 文 :文章编号:1001-7380(2001)02-0020-03
黄脉爵床快速繁殖技术研究
李玉巧1 ,徐勤明2 ,仲 磊1 ,吴 纲1
(1.江苏省林业科学研究院 ,江苏 南京 211153;2.无锡市园林管理局 ,江苏无锡 214035)
摘要:黄脉爵床组织培养快速繁殖 , 基本培养基以 MS 和 1/ 2MS 为好 , 植物激素为 BA 和 NAA , BA 质量浓度为 1.0
mg/ L左右 , NAA质量浓度为 0.1 mg/ L左右。在扩大繁殖过程中将单芽和分丛生芽法改用微型短枝扦插法 ,可加快
繁殖和提高移栽成活率。
关键词:黄脉爵床;基本培养基;植物生长激素;微型扦插;移栽
中图分类号:S685;S687 文献标识码:A
Studies on the techniques of rapid propagation
of Sanchezia nobilis Hook.f.in vitro
LI Yu-qiao1 ,XU Qin-ming2 ,ZHONG Lei1 ,WU Gang1
(1.Jiangsu Academy of Forestry , Nanjing 211153 , China;2.Wuxi City Bureau of Garden ,Wuxi 214035 , China)
Abstract:Rapid propagation of Sanchezia nobilis Hook.f.in vitro could be achieved well by the use of basic medium MS &1/2
MS supplemented with around BA 1.0 mg/L and NAA 0.1 mg/L.And by improving cultural methods of mini-cuttage from single
bud and buds grown thickly in the process of proagation , it can significantly increase the coefficient of seedling culture , the speed
of seedling propagation and its survival of transplantation.
Key words:Sanchezia nobilis Hook.f.;Basic medium;Plant growth hormone;Minicuttage;Transplantation
黄脉爵床(Sanchezia nobilis Hook.f.)为爵床科常
绿小灌木 ,是珍稀名贵的观花观叶植物之一 ,其茎短
粗。叶脉初期银白色 ,后逐渐变为金黄色。花金黄
色 ,开放时呈宝塔型 ,温度适宜可常年开放。株型美
观自然 ,特别受到人们的喜爱 。
黄脉爵床生长很慢 ,由于种源受到限制 ,不能保
证市场的需求。为此 ,用组织培养快速繁殖技术 ,已
达到了预期的效果。
1 材料与方法
1.1 材料选取
从荷兰引进的黄脉爵床 2年生盆栽苗上 ,剪取
茎尖或幼嫩的短枝 ,用自来水将表面灰尘冲洗干净
后 ,用无菌水加“84”消毒液按体积比(100∶1)配成溶
液 ,浸泡 20 ~ 30 min ,倒去残液待用 。
1.2 灭菌与接种
在无菌条件下 ,将待用的材料先用 70%酒精漂
洗 10 ~ 15 s ,立即取出置 0.1%升汞液中灭菌 10 min
左右 ,灭菌时应不停地搅动材料 ,彻底灭菌 ,然后用
无菌水冲洗 4 ~ 5次 ,再用灭菌滤纸吸干表面水 。
灭菌后的黄脉爵床 ,用手术刀切去大的叶片和
接触灭菌液处的伤口 ,再将留下的材料切成 0.5 cm
大小 ,分别接种到新鲜的固体培养基上。
1.3 培养条件
将接种好的材料置于 1 500 lx 的光照条件下培
养 ,光照时间为 10 h/d 左右 , 培养温度为(28 ±
2)℃,培养基加绵白糖 30 g/L ,卡拉胶 6.5 g/L , pH
5.8 ~ 6.0。
第 28 卷第 2 期 江 苏 林 业 科 技 Vol.28 No.2
2001 年 4 月 Journal of Jiangsu Forestry Science &Technology Apr.2001
收稿日期:2000-10-25
作者简介:李玉巧(1953- ),女 ,江苏沭阳人 ,高级工程师 ,大学本科毕业 ,主要从事林木花卉组织培养技术工作。
2 结果与分析
2.1 黄脉爵床灭菌时加“84”消毒液的作用
黄脉爵床取得无菌材料比一般材料较难 ,它的
体内(特别是幼嫩组织)随剪口会流出胶质状的液
体 ,接种的材料极易污染 ,用“84”液可除去大部分粘
液。接种分切后的材料 ,用“84”消毒液擦伤口 ,也可
降低污染率 ,对材料成活无负面影响。
2.2 不同基本培养基应用试验
将黄脉爵床无菌材料转入不加任何植物激素的
MS ,1/2MS , LS ,N6 ,H 等的基本培养基中 ,试验培养
结果见表 1。从表 1中可以看出 ,MS 和 1/2MS 基本
培养基对黄脉爵床分化生长效果明显 , MS 优于
1/2MS。
2.3 不同植物激素应用试验
2.3.1 激素种类试验 在相同条件下 ,应用适宜的
植物激素是植物分化生长的关键 。试验表明 ,细胞
分裂素 BA对黄脉爵床的增殖生长效果优于 KT 和
4pu ,KT 与 4pu的效果大致相同;细胞生长素 IBA和
IAA对黄脉爵床试管苗生长的促进作用较差;NAA
对试管苗生长的作用最好(见表 2)。从表 2可以看
出 ,NAA与细胞分裂素配合使用的作用均优于 IBA
和 IAA与细胞分裂素的配合使用效果 ,并以与 BA
的组合效果最好。
表 1 基本培养基对黄脉爵床试管苗分化生长的影响
基 本
培养基
分化期
/ d
分化率
/ %
苗高
/ cm 生长势
MS 61 82 2.5 叶色深绿 , 叶脉油亮 , 茎粗 ,苗壮
1/2MS 72 80.5 2.1 叶色深绿 ,叶脉亮 ,苗较粗壮
N6 85 41 1.8 叶色浅绿 ,叶脉亮 ,苗较细
LS 105 26 1.8 叶色浅绿, 叶脉乳白色 , 苗较细
H 121 21 0.9 叶色黄绿 ,叶脉乳白色 ,苗弱
表 2 不同激素的配比对黄脉爵床试管苗生长的影响
分裂素 植物组织
生长素/(mg/ L)
IBA IAA NAA
0.01 0.1 0.2 0.5 0.01 0.1 0.2 0.5 0.01 0.1 0.2 0.5
BA
茎 + ++ ++ + + ++ ++ + ++ +++ +++ ++
根 + + ++ + + + ++ ++ ++ +++ +++ ++
TK
茎 + + + + + + + + + ++ ++ +
根 + + + ++ + + + ++ + ++ ++ ++
4pu
茎 + + + + + + + ++ + ++ ++ ++
根 + + + + + + + + + + + ++
“ +”表示差 , “ ++”表示一般 , “ +++”表示好 ,分裂素的质量浓度均为 0.5 mg/ L。
2.3.2 激素质量浓度试验 试验证明 ,NAA质量浓
度为 0.1 ~ 0.2 mg/L 与 BA 为 1.0 mg/L 左右的组
合 ,最有利于黄脉爵床试管苗的增殖生长(见表 3)。
表 3 说明 , NAA 质量浓度高于或低于 0.1 ~ 0.2
mg/L ,试管苗的增殖生长均受到不同程度的影响 ,
当NAA质量浓度为 0.4 ~ 0.6 mg/L 时 ,苗基部出现
大量的愈伤组织;当BA的质量浓度超过2 mg/L时 ,
芽的增殖虽高 ,但有效芽数量减少 ,苗的质量降低 ,
当低于 1.0 mg/L时 ,增殖系数小。
表 3 BA与 NAA不同质量浓度组合对黄脉爵床增殖生长的影响
NAA
/(mg/L)
BA/(mg/ L)
0 0.5 1.0 2.0 3.0
增殖/倍 苗高/ cm 增殖/倍 苗高/ cm 增殖/倍 苗高/ cm 增殖/倍 苗高/ cm 增殖/倍 苗高/ cm
0 0.2 0.9 1.5 1.2 3.0 1.6 3.2 1.4 3.8 0.8
0.01 0.1 1.9 2.0 2.0 3.1 2.9 3.2 2.6 4.0 2.0
0.1 0.2 2.5 2.2 2.4 3.4 4.2 3.4 3.0 3.7 2.0
0.2 0.2 2.5 1.8 2.7 3.5 3.8 3.4 2.9 3.1 2.5
0.4 0.1 2.4 1.6 2.4 2.0 2.9 3.0 2.9 3.1 2.6
0.6 0.1 2.1 1.5 2.4 1.8 2.5 2.1 2.4 2.9 2.4
表中数字均系平均值。
21第 2 期 李玉巧等:黄脉爵床快速繁殖技术研究
2.4 微型短枝扦插试验
黄脉爵床属小灌木植物 ,切单芽扩大繁殖影响繁
殖速度 ,且成活率低 ,分丛生芽法扩大繁殖较单芽法
好 ,但繁殖系数仍较低 ,改变糖的质量浓度 ,由高降
低 ,对促进其生长的效果不太明显。采用微型短枝扦
插法试验 ,试管苗的各项指标均高于其他几种方法
(见表4)。
表 4 方差分析及多重比较
项目 方 法
A B C D F
F
增殖
系数
均值 3.84 3.10 2.87 1.05
-D 2.79 2.05 1.82
-C 0.97 0.23
-B 0.74
F=1 918
F 0.05=4.070(下同)
F 0.01=7.590∠SD0.05=0.106∠SD0.01=0.16 5
平均
苗高
均值 3.16 2.36 2.00 1.73
-D 1.43 0.63 0.27
-C 1.16 0.36
-B 0.80
F=9.20
∠SD0.05=0.239
∠SD0.01=0.37 4
叶长
均值 0.88 0.83 0.78 0.62
-D 0.26 0.21 0.16
-C 0.10 0.05
-B 0.05
F=150.8
∠SD0.05=0.0234∠SD0.01=0.0374
叶宽
均值 0.45 0.35 0.32 0.24
-D 0.16 0.11 0.08
-C 0.08 0.03
-B 0.05
F=50
∠SD0.05=0.062∠SD0.01=0.040
表4中A:微型短枝扦插法 ,B:分切丛生芽法 ,
C:降低糖质量浓度 ,D:对照(单芽:1芽 1叶法)。各
处理均重复 3次 ,每处理调查 10 瓶进行统计分析 。
表 4说明 ,微型短枝扦插法的效果明显。 ①微型短
枝扦插法:即丛生芽根芽同长 。有根的丛生芽生长
速度提高 。当苗长到 3 cm左右时 ,将苗从最下部叶
片的上面剪下 ,使芽从最下部的叶腋间重新萌发 。
将剪下的苗整株扦插到新鲜培养基上培养 ,待根生
出后 ,再将苗上部剪下扦插;②单芽扩大繁殖:将试
管苗剪成带1个腋芽的茎段培养 。应用此法不易发
芽 ,转移后会变黄坏死;③分丛生芽法:是将分化成
丛状的芽从基部切成单芽培养。由于芽小 ,受伤后
影响生长 ,因此苗的生长速度较慢;④降低糖质量浓
度:将原来 30 g/L 降到 20 g/L ,可促进苗木生长健
壮 。
3 移栽试验
当黄脉爵床试管苗长至 3 ~ 4 cm 高时 ,就可直
接移栽 。
3.1 基质试验
选用河沙 、珍珠岩 、蛭石 、砻糠灰和松林表土等
配制成 16种基质(见表 5)。
3.2 移栽
将可移栽的黄脉爵床试管苗从三角瓶中取出 ,
轻轻洗净基部的培养基 , 移栽到准备好的基质中。
移栽前 ,应将基质充分湿润 ,移栽后 ,用喷雾器喷湿
小苗的叶片和小苗基部 ,禁用喷壶浇水 。然后盖上
薄膜 ,7 d内不需补充水分。如要补充水分 ,仍用喷
雾方法。保持空气湿度在 90%以上 ,成活率可达
80%以上(见表 5)。
表 5 不同基质对黄脉爵床试管苗移栽成活率的影响
编号 基 质 成活率/%编号 基 质
成活
率/ %
1 细河沙 88.9 9 砻糠灰与松林表土(1∶1) 40.5
2
细河沙与砻糠灰
(1∶1) 88.7 10 蛭石 61.2
3
细河沙与蛭石
(1∶1) 80.4 11
蛭石与珍珠岩
(1∶1) 62.0
4
细河沙与珍珠岩
(1∶1) 80.2 12
蛭石与松林表土
(1∶1) 31.2
5
细河沙与松林表土(1∶1) 42.0 13 珍珠岩 58.1
6 砻糠灰 84.0 14 珍珠岩与松林表土(1∶1) 39.2
7
砻糠灰与蛭石
(1∶1) 80.1 15 松林表土 29.1
8
砻糠灰与珍珠岩
(1∶1) 72.0 16
松林表土与细河沙
(1∶2) 35.8
表 5中的成活率是移栽 25 d 后统计的。从统
计结果看 ,用细河沙和细河沙与蛭石 、珍珠岩等基
质 ,以及用基质砻糠灰 、砻糠灰与蛭石 ,移栽成活率
均在 80%以上 。但用细河沙效果最好 ,既便宜且成
活率又高 。用松林表土效果最差 ,可能透气性差。
砻糠灰透气性能好 ,但在浇透水后 ,保水时间太长易
造成苗根部变褐色 ,对根的生长有一定的影响。
22 江 苏 林 业 科 技 第 28 卷