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欧李组培苗增殖扩繁培养基筛选试验



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程度存在差异。对于西洋参胚轴启动脱分化而言,NAA 与
IBA具有贡献优势,对于脱分化愈伤组织诱导而言,NAA 与
6 - BA 的效应作用相对最强,而对于愈伤组织动态积累变化
过程而言,2,4 - D则表现出优势调控作用。西洋参胚轴脱分
化诱导愈伤组织是一个复杂的生理调控过程,涉及到各种生
长调节因子的综合作用,诱导结果也表现在多方面的效应指
标变化,因此实际操作过程中,往往需要对变量的效应进行简
约化、统一化处理,综合分析各种因变量的综合效应,协调考
虑、优势互补,筛选综合效应相对最佳的生长调节因子组合配
比。通过 3 种因变量归一化处理,综合效应最高的生长调节
因子组配为 2,4 - D 1. 0 mg /L + NAA 3. 0 mg /L + IBA
1. 0 mg /L + 6 - BA 1. 0 mg /L。另外,不同生长调节因子对西
洋参胚轴外植体诱导形成的愈伤组织的质地、生长能力、胚性
程度与分化潜力等方面还有待进一步研究。
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刘 洋. 欧李组培苗增殖扩繁培养基筛选试验[J]. 江苏农业科学,2013,41(8):57 - 58.
欧李组培苗增殖扩繁培养基筛选试验
刘 洋
(吉林农业科技学院,吉林吉林 132101)
摘要:以芽培养的欧李组培苗为试验材料,研究 4 个基本培养基配比、6 个 TDZ 激素浓度配比、5 种 pH 值配比对
欧李组培苗增殖扩繁的影响。结果表明,基本培养基选用 B5 最好,添加 TDZ的浓度以 0. 4 mg /L最好,培养基 pH 值
调节至 5. 4 最好。
关键词:欧李;基本培养基;激素浓度;pH值
中图分类号:S662. 304 + . 3 文献标志码:A 文章编号:1002 - 1302(2013)08 - 0057 - 02
收稿日期:2013 - 01 - 16
作者简介:刘 洋(1979—),女,吉林吉林人,硕士,讲师,主要从事园
艺植物学方面的教学与研究工作。E - mail:82642444@ qq. com。
欧李(Prunus humilis)为蔷薇科李属落叶灌木,高 1 ~
1. 5 m,主要分布于我国山西、河北、陕西、内蒙古、东北等中
西部地区。果实为核果,近球形,直径约 1. 5 cm,熟时鲜红
色,花期 4 ~ 5 月,果期 6 ~ 7 月[1]。该果实营养丰富,含有多
种对人体有益的矿质元素,尤其是钙元素的含量较高,因此有
商品名称“中华钙果”。果实可生食,亦可酿酒、制作果酱或
饮料等,具有广阔的市场前景。目前欧李生产上常见的繁殖
方法为扦插、播种和组织培养,扦插和播种的繁殖速度比较
慢,规模化生产有一定的困难,另外培育出的苗木无论是苗木
的长势还是果实品质都不及组培繁殖苗木[2 - 3]。在欧李的组
织培养过程中,组培苗增殖扩繁的速度是规模化生产的保证,
本试验以芽培养的欧李组培苗为材料,通过比较不同的基本
培养基、添加 TDZ 激素浓度、培养基 pH 值对增殖扩繁的影
响,为欧李组培苗增殖扩繁培养提供了依据。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
欧李组培苗以芽为外植体,由吉林农业科技学院花卉组
培室培养[4]。从培养室中挑选生长健壮、旺盛、无任何污染
及玻璃化的苗木若干,备用。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 基本培养基配方的筛选 选用 MS、White、N6、B5 等 4
种基本培养基作配比,每个配比分别添加 0. 2 mg /L TDZ 激
素,添加 30 g /L 糖、6 g /L 琼脂,培养基 pH 值调节至 5. 8,进
行基本培养基筛选试验。
1. 2. 2 激素浓度的筛选 经过“1. 2. 1”基本培养基的筛选,
选择最佳的基本培养基,分别添加 0(对照)、0. 2、0. 4、0. 6、
0. 8、1. 0 mg /L TDZ,6 个配比中添加的糖均为 30 g /L,琼脂为
6 g /L,培养基 pH值调节至 5. 8,进行激素浓度筛选试验。
1. 2. 3 配方 pH值的筛选 经过“1. 2. 2”激素浓度的筛选,
在最佳基本培养基及该激素浓度下,把 pH 值分别调整至
5. 2、5. 4、5. 6、5. 8、6. 0,5 个配比中添加的糖均为 30 g /L,琼
脂为 6 g /L,进行 pH值筛选试验。
—75—江苏农业科学 2013 年第 41 卷第 8 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2013.08.124
1. 2. 4 培养条件 3 个阶段的培养均在培养室进行,培养温
度约为 25 ℃,光照 2 000 lx,光照时间 14 h /d,组培室的相对
湿度为 80%[5]。
2 结果与分析
2. 1 基本培养基配方对不定芽增殖的影响
把挑选出的欧李组培苗转接至 4 个基本培养基的配比
中,转接时将茎段切割成 1. 5 cm 长,每瓶转接 4 个茎段。转
接后定期观察,培养 18 d 时,发现茎段下面开始萌发出愈伤
组织,培养 28 d开始分化出大量的不定芽,随着培养天数的
增加,不定芽的数量逐渐增多,培养 48 d 后从瓶中取出统计
增殖情况。
由表 1 可以看出,B5 配方的鲜重、干重分别达到
88. 7 mg /株、18. 4 mg /株,显著高于其他 3 个配方;从萌发出
的芽数看,B5 芽数平均为 7. 1 个 /株,显著高于 MS 配方,MS
配方和 N6 配方差异不显著。总之,无论从萌发的芽数,还是
从萌发芽的重量看,以 B5 作为基本培养基最为合适。
表 1 培养基种类对不定芽增殖的影响
基本培养基
添加激素 TDZ量
(mg /L)
鲜重
(mg /株)
干重
(mg /株)
芽数
(个 /株)
B5 0. 2 88. 7a 18. 4a 7. 1a
MS 0. 2 55. 8b 9. 8b 5. 0b
N6 0. 2 21. 2c 5. 4c 4. 2b
White 0. 2 4. 8d 2. 1d 1. 8c
注:同列数据后不同小写字母表示差异显著(P < 0. 05)。下
表同。
2. 2 TDZ激素浓度对不定芽增殖的影响
选择 B5 作为基本培养基,把挑选出的欧李组培苗转接
到 6 个不同浓度的激素配比中,茎段切割成 1. 5 cm,每瓶转
接 4 个茎段,定期进行观察,转接后 18 d 发现茎段基部形成
愈伤组织,进而形成不定芽,转接后 48 d 从瓶中取出统计增
殖情况。
由表 2 可以看出,在 6 个激素配比中,0. 4 mg /L TDZ 配
比鲜重、干重都显著高于其他激素配比;从芽数来看,0. 4 mg /L
TDZ配比最多,高于 0. 6 mg /L TDZ配比,显著高于其他配比。
表 2 不同激素浓度配方的不定芽增殖情况
添加激素 TDZ量
(mg /L)
鲜重
(mg /株)
干重
(mg /株)
芽数
(个 /株)
0 13. 1e 4. 3e 1. 2d
0. 2 160. 7b 36. 8c 4. 8b
0. 4 245. 2a 54. 1a 7. 0a
0. 6 176. 8b 46. 3bc 6. 2ab
0. 8 97. 9c 18. 2d 2. 4c
1. 0 45. 6d 11. 6d 2. 0c
开始时随着激素浓度升高,鲜重、干重、芽数均呈上升趋势,当
激素浓度达到 0. 4 mg /L时,三者均达到最高,进而随着浓度继
续升高,鲜重、干重、芽数反而呈下降趋势。因此,添加 TDZ
的量以 0. 4 mg /L 最好。
2. 3 配方 pH值对不定芽增殖的影响
以 B5 作为基本培养基,添加 0. 4 mg /L TDZ,把挑选出的
欧李组培苗转接到 5 个不同 pH值配比的配方中,每瓶转接 4
个茎段,定期进行观察,转接后 48 d 从瓶中取出统计增殖
情况。
由表 3 可以看出,pH 值为 5. 4 的配方中无论鲜重、干重
还是芽数均显著高于其他 pH值配方,说明配方 pH值调节为
5. 4 最有利于不定芽的增殖。
表 3 不同 pH值配方对不定芽增殖的影响
pH值 配方 鲜重
(mg /株)
干重
(mg /株)
芽数
(个 /株)
5. 2 B5 + 0. 4 mg /L TDZ 128. 1d 18. 6c 4. 9c
5. 4 B5 + 0. 4 mg /L TDZ 286. 2a 44. 8a 12. 2a
5. 6 B5 + 0. 4 mg /L TDZ 185. 8bc 28. 7b 7. 6b
5. 8 B5 + 0. 4 mg /L TDZ 165. 2c 27. 0b 5. 6c
6. 0 B5 + 0. 4 mg /L TDZ 98. 2e 15. 6c 3. 2d
3 小结与讨论
本试验探讨了基本培养基、激素浓度、pH 值对欧李组培
苗增殖扩繁的影响。结果表明,选择 B5 作为基本培养基最适
合,添加 TDZ激素的浓度以 0. 4 mg /L最适宜,pH调节至 5. 4
时,所增殖的不定芽无论鲜重、干重还是芽数均达到最大。因
此,本试验得出最佳的欧李组培苗增殖扩繁培养基为添加
0. 4 mg /L TDZ的 B5 培养基,其中加入 30 g /L糖、6 g /L琼脂,
pH值调节至 5. 4。由于采用的是单因素试验,且在激素浓
度、pH值的选择方面不同配比的数据间差距略大,有一定的
跳跃性,因此有待于进一步的研究进行精确。
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