全 文 :农业与技术 第 33 卷 第 8 期 2013 年 8 月
6 AGRICULTURE AND TECHNOLOGY
基本培养基种类TDZ浓度及PH值对欧李组培苗增殖扩繁的影响
孙 铭
(吉林农业科技学院,吉林 吉林 132101)
摘 要:以芽培养的欧李组培苗为试验材料,研究 4个基本培养基配比、6个 TDZ激素浓度配比、5种 PH值配比对欧李组培苗增殖
扩繁的影响,结果表明,基本培养基选用 B5 为最好,添加TDZ的浓度以 0.4mg/L 为最好,培养基 PH值调节到 5.4 为最好。
关键词:欧李;基本培养基;激素浓度;PH值
中图分类号:S565.201 文献标识码:A
欧李(Prunus humilis),蔷薇科李属,落叶灌木,高 1 ~
1.5m,主要分布于我国中西部地区的山西、河北、陕西、内
蒙和东北地区。其果实为核果,近球形,直径约 1.5cm,熟
时鲜红色,花期 4 ~ 5 月,果期 6 ~ 7 月 [1]。该果实营养丰富,
含有多种对人体有益的矿质元素,尤其是钙元素的含量比较高,
所以商品名称为“中华钙果”。果实可生食,亦可酿酒、制作
果酱或饮料等,具有广阔的市场前景。欧李目前生产上常见的
繁殖方法为扦插、播种和组织培养,扦插和播种的繁殖速度比
较慢,规模化生产有一定的困难,另外培育出的苗木无论从苗
木的长势、还是果实品质方面都不及组培繁殖苗木 [2-3]。而在
欧李的组织培养过程中,组培苗增殖扩繁的速度是规模化生产
的保证,本试验通过以芽培养的欧李组培苗为材料,通过比较
不同基本培养基、添加 TDZ 激素浓度、培养基的 PH 对增殖扩
繁的影响,为欧李组培苗增殖扩繁培养提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
欧李组培苗采用以芽为外植体,由吉林农业科技学院花卉
组培室培养 [4]。从培养室中挑选生长健壮、旺盛、无任何污染
及玻璃化的苗木若干,备用。
1.2 试验方法
1.2.1 基本培养基配方的筛选
选用 MS、White、N6、B5 四种基本培养基作为配比,每
个配比分别添加 0.2mg/LTDZ 激素,添加的糖为 30g/L,琼脂
6g/L,培养基 PH 值调节到 5.8。
1.2.2 激素浓度的筛选
经过1.2.1基本培养基的筛选,选择出最佳的基本培养基,
分别添加0mg/L(对照)、 0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L、
1.0mg/L 的 TDZ,六个配比中添加的糖均为 30g/L,琼脂 6g/L,
培养基 PH 值调节到 5.8。
1.2.3 配方 PH 值的筛选
经过 1.2.2 激素浓度的筛选,在最佳基本培养基及该激素
浓度的添加下,把 PH 值分别调整到 5.2、5.4、5.6、5.8、6.0,
五个配比中添加的糖均为 30g/L,琼脂 6g/L。
1.2.4 培养条件
三个阶段的培养均在培养室进行,培养温度为25℃左右,
光照 2000Lx,光照时间 14h/d, 组培室的相对湿度为 80%[5]。
2 结果与分析
2.1 基本培养基配方对不定芽增殖的影响
把挑选出的欧李组培苗转接到四个基本培养基的配比中,
转接时将茎段切割成 1.5cm 长,每瓶转接 4 个茎段。转接后定
期观察,培养 18d 时,发现茎段下面开始萌发出愈伤组织,
28d 开始分化出大量的不定芽,随着培养天数的增加,不定芽
的数量逐渐增多,培养 48d 后从瓶中取出进行统计增殖情况,
具体见表 1。
表 1 培养基种类对不定芽增殖的影响
基本培养基添加激素 TDZ量(mg/L) 鲜物重(mg/株)干物重(mg/株)芽数(个 /株)
B5 0.2 88.7a 18.4a 7.1a
MS 0.2 55.8b 9.8b 5.0b
N6 0.2 21.2c 5.4c 4.2b
White 0.2 4.8d 2.1d 1.8c
由表 1 可以看出, B5 配方的鲜物重、干物重分别达到
88.7mg/ 株、18.4 mg/ 株,极显著高于其他 3 个配方;从萌发出
的芽数看,B5 芽数平均为 7.1 个 / 株,极显著高于 MS 配方,
MS 配方和 N6 配方不显著。总之,无论从萌发的芽数,还是
从萌发芽的重量看,以 B5 作为基本培养基最为合适。
2.2 TDZ激素浓度对不定芽增殖的影响
经过 2.1 的筛选,选择 B5 作为基本培养基。把挑选出的
欧李组培苗转接到 6 个不同浓度的激素配比中,茎段切割成
1.5cm,每瓶转接 4 个茎段,定期进行观察,转接 18d 发现茎
段基部形成愈伤组织,进而形成不定芽,在转接第 48d 从瓶中
取出进行统计增殖情况,具体见表 2。
表 2 不同激素浓度的配方中不定芽增殖情况
添加激素 TDZ
量(mg/L) 基本培养基 鲜物重(mg/株)干物重(mg/株)芽数(个 /株)
0 B5 13.1e 4.3e 1.2d
0.2 B5 160.7b 36.8c 4.8b
0.4 B5 245.2a 54.1a 7.0a
0.6 B5 176.8b 46.3bc 6.2ab
0.8 B5 97.9c 18.2d 2.4c
1.0 B5 45.6d 11.6d 2.0c
由表 2 可以看出,6 个激素配比中,从鲜物重、干物重方
面,0.4mg/L TDZ配比都极显著高于其他激素配比,从芽数来看,
0.4mg/L TDZ配比最多,显著高于0.6mg/L TDZ配比。从鲜物重、
干物重、芽数的量来看,随着激素浓度的增加,三者的量均呈
上升趋势,当激素浓度达到 0.4mg/L 时,三者均达到最高,进
而随着浓度的增加,鲜物重、干物重、芽数的量反而呈下降趋
势。因此,添加 TDZ 的量以 0.4mg/L 为最好。
2.3 配方 PH值对不定芽增殖的影响
由 2.1 及 2.2 可知,B5 作为基本培养基,添加 0.4 mg/
LTDZ 为最合适。把挑选出的欧李组培苗转接到 5 个不同 PH
值配比的配方中,每瓶转接 4 个茎段,定期进行观察,转接第
48d 从瓶中取出进行统计增殖情况,具体见表 3。
表 3 不同 PH值配方对不定芽增殖的影响
PH值 配方 鲜物重(mg/株)干物重(mg/株)芽数(个 /株)
5.2 B5+0.4mg/LTDZ 128.1d 18.6c 4.9c
5.4 B5+0.4mg/LTDZ 286.2a 44.8a 12.2a
5.6 B5+0.4mg/LTDZ 185.8bc 28.7b 7.6b
5.8 B5+0.4mg/LTDZ 165.2c 27.0b 5.6c
6.0 B5+0.4mg/LTDZ 98.2e 15.6c 3.2d
由表 3 可以看出,PH 值为 5.4 的配方中无论鲜物重、干
物重还是芽数均大于其他 PH 值配方,并且极显著地高于其他
配方,说明配方 PH 值调节为 5.4 最有利于不定芽的增殖。
3 小结与讨论
本试验从基本培养基、激素浓度、PH 值三个方面探讨了
(下转第42页)
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前,通过沉淀池、污水处理厂、湖区湿地植被等去除水中的营
养物质;内源营养的去除与控制,以工程清淤、生态疏浚等为
主要方法的内源控制技术,清淤物的堆放应加强施工期的采样
监测和事先监测,防止污染物转移和二次污染。区别处理肥力
高又不含有毒有害物质和肥力低且含有毒物质的淤泥。
3.3 人工构筑生态系统,湖泊湿地修复
湿地是湖泊的肾、“生物超市”, 湖泊湿地修复也是一
种湖泊内源治理措施。改善湖泊水质和生态环境,实现途径主
要包括退田还湖、拆除侵占湖泊岸线的人工构筑物等湿地水文
条件的恢复。除此之外,水生植物的恢复与重建是湿地修复的
关键,应将培植挺水植物、沉水植物、浮叶植物立体组合用于
水生植物的恢复与重建。恢复水文条件、重建水生植被,湖泊
的水质、基质条件等才会逐步得到改善,提高生物多样性,进
而恢复湿地生态系统的生产力和自我维持能力,恢复水体健康。
同时,引江济湖也能缓解湖泊富营养化趋势。充分利用丰富的
过境水资源,通过涵闸、泵站和沟渠等水利工程的合理调度将
长江水引入策湖,使原有的水体由静水变动水,加快水体的置
换周期,使水体自净能力变强。实践表明,在补给水源能够得
到充分保证的情况下,引江水补给湖水对改善湖泊水质工程投
入少、收效快。
4 项目管理与建设资金的筹集
加快推进策湖通江工程的项目策划和可行性研究报告的评
估,并呈省发改委。这项工程是内容庞杂的系统工程,除了争
取国家和省发改委的支持。策湖通江工程必须举黄冈、浠水之
力,加强与相关部门的联系,争取策湖通江工程被列入长江流
域水污染防治规划以及其它相关专项规划,争取国家水利部,
环境保护部等多部委对策湖通江工程的资金、技术支持。
4.1 组建策湖流域滚动开发机制
把整个策湖通江工程涉及到的湿地修复与湿地公园景观建
设、长江流域内散花段内灭螺、水污染控制等综合考虑投入与
产出关系得出策湖通江工程经济效益,综合效益大,以此项目
带动涉及水利、环保、规划、水产、园林等职能部门,独立组
建策湖流域开发公司,强化组织领导,把一个或若干项目捆在
一起,考虑策湖通江工程具有公益型不可盈利的一部分的同时
还有可盈利部分(如航运、交通、旅游、林业、水产养殖等),
这些足以实现水利工程的自我滚动发展,只需投入一定量的启
动资金后,就可以不断开发其他水利项目和产业。
4.2 努力拓宽筹资渠道
2011 年中央一号文件中明确提出“加大公共财政对水利
的投入,从土地出让收益中提取 10% 用于农田水利建设”,
表明了中央治水态度十分给力,水利与农业发展单靠国家财政
和省级地方配套拨付完全不能满足自身巨额建设资金缺口,因
此浠水县应培育发展资本市场、多渠道、多途径筹集建设资金。
在争取各级政府支持、增加财政投入的基础上,不断拓宽筹融
资渠道,加大筹融资力度。把策湖流域水网构建与生态水环境
治理、策湖湿地公园、休闲旅游进行一站式开发。通过浠水策
湖通江工程的建设提升策湖洲周边地产的增值和浠水县人文价
值进一步爬升,使浠水县县域经济得到长足发展提供物质基础
和生态环境保障。从土地升值中获取建设资金,还要综合运用
财政和货币政策,引导金融机构增加水利信贷资金,广泛吸引
社会资金投资水利。
参考文献
[1] 汪恕诚 .水环境承载能力分析与调控 [J].全国水资源工作资料汇编
(一 )[C].北京 :水利部水资源司,2001:158-175.
[2] 俞建军 .引水对西湖水质改善的回顾 [J].水资源保护,1998(3).
[3] 黄宣伟 .太湖调水工程对水环境改善的战略意义 [J].水资源保护,
2002(3).
[4] 强继红 .滇池水环境污染的工程治理综述 [J].云南地理环境研究,
2002(1).
[5] 全国血吸虫病综合治理水利专项规划 (2004~ 2008).
[6] 王平连 ,刘俊权,等 .湖区垸内钉螺分布与渠道类型及环境关系研
究 [J].湖北预防医学杂志 , 2003, 14(6).
[7] 水利灭螺技术导则 (SL/ Z318.2004).
[8] 吴迪 .上海大莲湖湖滨带湿地修复效果评价及关键因子分析 [D].上
海:华东师范大学,2011.
[9] 戴小琳 ,傅铁 .湖泊湿地修复工程应注意的问题及对策措施 [J].人民
长江,2011(15):73-76.
[10] 张家荣 ,刘建林 .渭河治理项目建设资金筹措渠道探讨 [J].中国高
新技术企业,2009(17):119-120.
[11] 刘永明,周先荣 .构建生态水网与促进人水和谐 [J].政策,2008
(11).
[12] 季昌化 .美国水利工程的多种经营方式 [J].人民长江,1988(05).
[13] 王广深 .美国水利融资制度及其启示 [J].管理百科,2012(01).
[14] 王广深 .日本水利投融资制度及其启示 [J].发展研究,2012(05).
作者简介:董改平,高级工程师,主要从事农田水利设计与水工
结构设计研究;夏志慧,工程师,主要从事水利项目规划研究。
对欧李组培苗增殖扩繁的影响,结果表明,选择 B5 作为基本
培养基最适合,从添加 TDZ 激素的浓度来看,以 0.4mg/L 最为
适宜,PH 调节到 5.4,所增殖的不定芽无论从鲜物重、干物重
还是芽数均达到最大。因此本次试验得出最佳的欧李组培苗增
殖扩繁培养基为添加 0.4 mg/LTDZ 的 B5 培养基,其中加入糖
30g/L,琼脂 6g/L,培养基 PH 值调节到 5.4。由于试验进行的
过程中采用的是单因素试验,另外在激素浓度、PH的选择方面,
不同配比的数据间差略大,有一定的跳跃性,有待于进一步的
研究进行精确。
参考文献
[1] 奥小平.欧李的生态特性与栽培技术 [J].山西林业科技,2006(1):7
- 9.
[2] Ahmed E. Long term effects o f propagation by tissue culture o r
softwood single-node cutting on growth habit, yield, and berry weight o f
“northblue”blueberry[J].HortScience, 1996, 16(4) : 705- 706.
[3] Read P E, Hartley C A, Sandahl J G, et al. Field performance o f in vitro
propagation blueberries[ J] . Proc Intl Plant Prop Soc, 1987, 22( 4) : 450-
452.
[4] 周金梅 .欧李芽离体诱导培养技术研究 [J].江苏农业科学,2011(6):
97-98.
[5] 孙新政,申顺先,李庆伟,等. 钙果 4号欧李组织培养技术研究
[J].果树学报,2007,24(1):80- 83.
作者简介:孙铭(1977-),女,吉林省农安市人,硕士,讲师,
从事园林植物教学与科研工作。
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