全 文 ：2006年 第1期
CHINAPLANTPROTECTION2006.Vol.26.No.1
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园林
病虫
方法防治。
1)清洁田园。发现病株,应及时将病株连同周
围5～10m的植株拔除。拔除时,位于下水头植株
应当多拔一些。拔下的病株、采收后的根茬以及败
叶不可乱扔,要集中深埋或用其他有效的方法销
毁。
2)轮作倒茬。与非十字花科蔬菜实行3年以上
的轮作。
3)种子处理。在疫区种植十字花科蔬菜,播前
应进行种子处理。处理用种子重量03%的50%多菌
灵WP拌种。
4)栽培抗病或耐病品种。目前我国育出的甘蓝
品种大多不抗枯萎病。特别是一些早熟品种中的甘
系列、8132、北农早生等更为敏感。由日本引进的珍
奇、百惠抗病或耐病。
5)药剂防治。在苗期或定植时使用多菌灵、恶
霉灵(绿亨1号)等化学农药处理土壤或蘸根。
以上防治方法,所能取得的效果并不理想。例
如,采用化学农药防治,菜农认为有一些效果,但是
成本较高,将来是否能推得开还不一定。轮作倒茬,
因其寄主范围较广,也存在一定的难度。尤其是清洁
田园,在农村贯彻起来难度更大。由于农忙,来不及
整理收后的田地到处都是根茬、败叶。众所周知,采
用嫁接的方法是防治各种根病的有效方法。但是十
字花科蔬菜在形成产量时往往仅有短缩茎,不便采
用嫁接方法。这为防治带来了很大难处。因此,对疫
区来说加速培育推广抗病品种,是当务之急。但这类
品种的育成尚需时日。
4 警惕病害在全国蔓延
鉴于防治十字花科枯萎病难度很大,应当受到
我国植病工作者的严重关切。笔者最为担心的是这
一病害大面积传播的危险性。笔者到过位于十字花
科蔬菜枯萎病疫区的 1个批发市场,每年的夏、秋
季将疫区的甘蓝源源不断地运往外地。这些甘蓝有
不少维管束是褐色的,携带着枯萎病菌。任其传播
出去,其后果将不堪设想。因此,笔者认为,有关职
能部门有必要严格检疫制度,杜绝该病随产品、种
子的传播。同时,要提醒育种部门不要在有十字花
科蔬菜枯萎病的地区制种、采种。菜农不要使用在
疫区培育的带土十字花科蔬菜种苗,也要尽量避免
进入病田去观摩,减少病原的传播,警惕病害在我
国蔓延。
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杜英(ElaeocarpusdecipiensHems),属杜英科,
杜英属。原产印度、中国和日本。我国浙江、江西、福
建、台湾、湖南、广东、广西及贵州南部均有分布。杜
英是亚热带树种,常绿速生阔叶乔木,喜温暖、湿润
的气候和酸性土壤环境,是南方黄壤、红壤和红黄壤
山地绿化的理想树种。杜英树干挺拔,树冠优美,枝
叶繁茂,红叶点缀鲜艳夺目,且具抗有害气体之功
能,因此,又是优良的园林绿化树种[1]。野生杜英很
杜英叶枯病病原菌鉴定及抑菌药剂筛选初报
郭立中,邓先琼
(湖南环境生物职业技术学院,湖南 衡阳 421005)
摘要:杜英叶枯病主要为害叶片,引起叶斑和叶枯。经鉴定,杜英叶枯病病原菌有性态为球座菌(Guignardiasp),无性
态为叶点霉(Phylostictasp)。室内抑菌药剂试验结果表明,抑制该菌菌丝生长和分生孢子萌发效果较好的杀菌剂是
50%福·甲硫 WP(扑菌特)、70%甲基硫菌灵 WP、50%多菌灵 WP、50%福·福甲胂·福锌 WP(退菌特)、60%福·福锌
WP(炭必灵)、50%多福·硫WP(施菌克)、25%咪鲜胺锰盐WP和1∶1∶100波尔多液;25%多·锰锌 WP(病克净)抑菌丝
生长效果好,抑制孢子萌发的效果差;45%石硫合剂结晶、70%丙森锌 WP(安泰生)、70%代森锰锌 WP抑制孢子萌发
的效果好,而抑菌丝生长效果较差。
关键词:杜英;叶枯病;球座菌;叶点霉;杀菌剂筛选
中图分类号:S763.15 文献标识码:A 文章编号:1672-6820(2006)01-0022-04
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少发生病害。但随着杜英人工栽培面积的扩大,近年
来,在杜英幼苗和幼树上发生了严重的叶枯病。该病
主要为害新梢嫩叶,形成叶枯和叶斑,严重影响杜英
的生长。杜英病害迄今尚无人研究,为查明病原和为
该病的防治提供理论依据,对该病的病原菌进行了
鉴定,并对病害的化学防治进行了药剂筛选。结果报
告如下。
1材料与方法
141 病原菌分离 从湖南环境生物职业技术学院
校内山坡和绿地栽种的5年生杜英病株上采集病叶
作为分离材料。从杜英病叶上取病健交界组织约
0!5cm2小块,经表面常规消毒后,置杜英叶煮出液+
1‰酵母+1!5%蔗糖琼脂培养基上,26℃培养,长出
菌丝后,取菌落边缘菌丝体移植到以上培养基上再
次培养,观察培养性状,产生子实体后在显微镜下观
察子实体形态,并测其大小。
142 致病性测定 将杜英叶煮出液用 HCL调到
pH3,然后将杜英叶枯病菌分生孢子用杜英叶煮出
液配成在低倍镜(10×10)下每视野 80～100个孢子
的悬浮液,作为接种体。用喷雾法接种杜英的新叶,
接种后用塑料薄膜袋将叶子包裹,保湿 48h。共接
种10株,用无菌水作对照,定期记载发病情况和症
状特点。产生子实体后,从病斑上取子实体镜检,并
取病组织再分离,观察描述病菌形态特征,测其大
小。根据以上结果确定致病菌。
143 病原菌鉴定 采集长有子实体的病叶,在显微
镜下观察,并描述其分生孢子器、产孢细胞和分生孢
子的形态特征,并与分离菌相比较,作为鉴定菌种的
依据。
14 药剂筛选
14 41 供试药剂。70%甲基硫菌灵WP(湖南浏阳东
永农药厂)、50%多菌灵WP(江苏江阴农药厂)、70%
代森锰锌 WP(西安丰田生物工程有限公司)、50%
福·甲硫WP(扑菌特,下称,广东惠阳中迅化工有限
公司)、50%福·福甲胂·福锌WP(退菌特,下称,河北
冀丰农药化工有限责任公司)、50%多·福·硫WP(施
菌克,下称,广东惠阳中迅化工有限公司)、70%丙森
锌WP(安泰生,下称,拜耳作物科学公司)、25%多·
锰锌 WP(病克净,下称,四川国光农化有限公司)、
50%咪鲜胺WP(施保功,下称,拜耳作物科学公司)、
25%咪鲜胺锰盐WP(珠海焦点科技有限公司)、35%
柴油·毒EC(果菜康,下称,北京中农大生物技术股
份有限公司)、60%福·福锌 WP(炭必灵,下称,河北
冀丰农药化工有限责任公司)、80%代森锰锌WP(新
万生,下称,美国固信公司)、45%石硫合剂结晶(湖
南邵阳农业技术雪峰服务中心)。
14 42 不同药剂对菌丝生长的影响。将上述药剂用
杜英叶煮出液配制成10000μg/ml的药液和1∶1∶10
的波尔多液,分别取以上药液20、10、6!67和5ml,
加入 80、90、93!33和 95ml的杜英叶煮出液+1‰酵
母+15‰蔗糖琼脂培养基中,配成2000、1000、667、
500μg/ml的培养基药液,取波尔多液 5ml混入 45
ml上述培养基中,然后倒平板,将直径6mm的菌丝
块移到平板上,置28℃恒温培养,设3个重复,以无
菌水做对照。对照菌落长满平皿时,测量菌落半径,
计算抑菌率。
14 43 不同药剂对分生孢子萌发的影响。用杜英叶
煮出液将上述药剂分别配成 4000、2000、1333、
1000μg/ml的药液和1∶1∶50的波尔多液,再用杜英
叶煮出液配成在低倍镜(10×15)下每视野 160～200
个孢子的悬浮液,取等量的药液与孢子液充分混合,
配成 2000、1000、667、500μg/ml的孢子药液和等
量式波尔多液,将这些孢子药液滴到PSA+1‰酵母
平板上,12h后检查孢子萌发情况,计算孢子萌发
率和抑制率。设3次重复,无菌水做对照。
2 结果与分析
241 杜英叶枯病症状 该病菌主要为害叶片。病害
大多从叶缘或叶尖开始发生,逐渐向叶片内侧或叶
柄方向发展,最后形成叶枯。病斑初期为深褐色小
点,后发展为红褐色圆形、半圆形或不规则形小斑。
病斑不断扩大,向内和向上下延伸或多个病斑愈合
形成叶尖或叶缘枯死。病斑边缘红褐色,中间棕褐色
或灰褐色。湿度大时,嫩叶上病斑扩展快,迅速形成
叶片半截枯死或叶缘枯死。病、健交界明显,病斑上
散生黑色的颗粒状物(分生孢子器)。病斑在叶片中
部发生时,开始为深褐色小点,后发展为边缘红褐
色、中间棕褐色或淡褐色的近圆形或不规则形病斑。
病斑中央散生黑色的颗粒状物。
242 病原菌形态特征、培养性状及致病性 分生孢
子器散生,初埋生后突破寄主表皮,近球形或扁球
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形,直径80～150μm。分生孢子梗无色,不分枝,大小
为75～10μm×25～3μm;产孢细胞瓶梗状。分生孢
子单胞,无色,卵形、椭圆形或近球形,多数为卵形,
顶端钝圆,基部稍尖,大小为75～15μm×5～625μm
,多数为10～125μm×5～625μm。自然发病的病叶
上未发现有性世代,但在杜英叶煮出液+1‰酵母+
15%蔗糖琼脂培养基上,培养15d后开始产生子囊
座。子囊座球形,黑色,直径为150～300μm。子囊束
生,双层壁,顶端两壁之间距离2～3μm。子囊圆筒形
或棍棒形,大小为 35～80μm×75～10μm,子囊内有
8个子囊孢子。子囊孢子纺锤形,微弯,无色,初为单
细胞,成熟后为大小不等的双细胞,大小为10～15
μm×5μm。
在杜英叶煮出液+1‰酵母+15%蔗糖琼脂中性
培养基上,培养10d菌落可长满直径9cm的培养
皿。菌落开始为白色,后变淡黄色。菌落紧密,紧贴平
板。子实体容易产生。培养3d后开始产生子实体,
培养7d后子实体大量成熟。子实体初为白色绒毛
状小球,继续培养成红褐色,最后变为黑色小颗粒。
培养15d后开始产生子囊座。子囊座初为白色绒毛
状小球,后变为黄褐色、深褐色,最后变为黑色。
用分生孢子悬浮液接种杜英嫩叶全部发病。回
接发病的症状特点和病原菌形态特征与自然发病株
相同。取病、健交界处组织再分离,其培养性状和形
态特征与第1次分离结果一致。证实接种菌即为杜
英叶枯病的致病菌。
根据病原菌的形态特征,培养特性和致病性测
定结果,参考陆家云等人的记载,杜英叶枯病菌无性
态初步鉴定为叶点霉(Phylostictasp),有性态为球
座菌(Guignardiasp)[2]。
243 不同药剂对菌丝生长及孢子萌发的影响 抑
制菌丝生长试验结果表明,抑制菌丝生长效果较好
的药剂有扑菌特、70%甲基硫菌灵 WP、50%多菌灵
WP、退菌特、炭必灵、施菌克、病克净、25%咪鲜胺锰
盐WP和1∶1∶100波尔多液。在最低浓度500μg/ml
时,抑制菌丝生长率可达100%。因此,这些药剂可
作为防治杜英叶枯病的首选药剂。其次是施保功,其
他药剂抑菌效果较差(表1)。
抑制孢子萌发试验结果显示,扑菌特、70%甲基
硫菌灵 WP、50%多菌灵 WP、45%石硫合剂晶体、退
菌特、炭必灵、安泰生、70%代森锰锌 WP、施菌克和
5%咪鲜胺锰盐WP,最低浓度在500μg/ml以上时,
各处理的孢子萌发率为0,抑制孢子萌发的效果达
100%;1∶1∶100波尔多液处理,孢子萌发率为0,抑制
率达100%。说明这些药剂对杜英叶枯病病菌孢子
具有很强的毒杀作用,对防止初侵染和再侵染都是
很好的保护剂。其次是新万生和病克净浓度在500
μg/ml时,孢子萌发率分别为 89%和 10%,抑制孢
杀菌剂名称
菌落半径(mm) 抑菌率(%)
2000!g/ml1000!g/ml667!g/ml500!g/ml2000!g/ml1000!g/ml667!g/ml500!g/ml
50%福·甲硫WP(扑菌特) 0 0 0 0 100 100 100 100
70%甲基硫菌灵WP 0 0 0 0 100 100 100 100
50%多菌灵WP 0 0 0 0 100 100 100 100
50%多·福·硫WP(施菌克) 0 0 0 0 100 100 100 100
25%多·锰锌WP(病克净) 0 0 0 0 100 100 100 100
50%福·福甲胂·福锌WP(退菌特) 0 0 0 0 100 100 100 100
60%福·福锌WP(炭必灵) 0 0 0 0 100 100 100 100
5%咪鲜胺锰盐WP 0 0 0 0 100 100 100 100
50%咪鲜胺WP(施保功) 0 0 6.00 9.00 100 100 85.00 77.50
70%代森锰锌WP 0 0 6.66 10.00 100 100 85.35 75.00
70%丙森锌WP(安泰生) 0 0 8.00 13.40 100 100 80.00 66.50
80%代森锰锌WP(新万生) 0 0 12.00 15.00 100 100 70.00 62.50
45%石硫合剂晶体 21.50 24.50 25.60 29.20 46.25 38.75 36.00 27.00
35%柴油·毒WP(果菜康) 20.00 25.00 29.00 40.00 50.00 37.50 27.50 0
表1 不同杀菌剂对杜英叶枯病菌菌丝生长的影响
注:1∶1∶100波尔多液处理,菌落半径为0,抑制率100%;对照菌落半径为40mm,抑制率0。
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子萌发的效果达90%以上。其他药剂抑制孢子萌发
的效果较差(表2)。
3 结论与讨论
杜英叶枯病主要为害叶片,引起叶枯和叶斑。根
据病原菌的形态特征,培养特性和致病性测定结果,
杜英叶枯病菌无性态初步鉴定为叶点霉菌(Phyl-
lostictasp!),有性态为球座菌(Guignardiasp!)。据文
献记载[2,3],球座菌腐生干枯死茎干、落叶或僵果组织
内或寄生茎、叶及果实。国内报道了葡萄球座菌[G
bidweli(El)VialaetRavaz]引起黑腐病,浆果球
座菌[Gbaccae(Cav!)Jacz]引起葡萄房枯病,山茶
球座菌[Gcameliae(Cooke)Butl.]引起山茶叶枯
病,其无性态大多为茎点霉(Phomasp!);叶点霉已
描述2000多种,国内报道引起的农林植物病害近
百种,主要病害症状是叶斑和叶枯。查阅文献,未见
球座菌和叶点霉为害杜英的报道。
室内药剂试验结果表明,抑制该菌菌丝生长和
分生孢子萌发效果较好的杀菌剂是扑菌特、70%甲
基硫菌灵 WP、50%多菌灵 WP、退菌特、炭必灵、施
菌克、25%咪鲜胺锰盐WP和1∶1∶100波尔多液。上
述药剂除波尔多液属触杀剂外,其余属内吸广谱性
杀菌剂。同时,具有铲除、治疗和保护作用[4],是防治
该病的首选药剂;病克净抑菌丝生长效果较好,抑制
孢子萌发的效果稍差;45%石硫合剂晶体、安泰生、
70%代森锰锌 WP,抑制孢子萌发的效果较好,而抑
菌丝生长效果较差。这些药剂可根据病害发生的不
同时期和作用机理选择使用。应注意各种杀菌剂不
能单一连续使用,最好与其他药剂轮换或混合使用,
以免产生抗药性[5]。本试验是在室内离体条件下进
行,其结果有待大田试验验证。
参考文献:
[1] 郑万钧 ! 中国树木志(第三卷)[M]! 北京:中国林业出
版社 !1997:2783～2800!
[2] 陆家云 ! 植物病原真菌学[M]! 北京:中国农业出版社,
2001!
[3] 方中达 ! 中国农业植物病害[M]! 北京:中国农业出版
社,1996!
[4] 宋晓东,刘桂荣,陈江燕,等 ! 樟子松苗木枯梢病的药剂
防治[J]! 东北林业大学学报,1999,27(6):22～25!
[5] 徐大高,潘汝谦,郑 仲,等 ! 芒果炭疽病菌对多菌灵的
抗药性监测[J]!华南农业大学学报,2004,26(2):34～36!
收稿日期:2005-08-29
作者简介:郭立中(1951- ),女,湖南桃江人,副教授,主要从
事园林植物病理学教学和研究工作。
杀菌剂名称
萌发率(%) 抑制率(%)
2000!g/ml1000!g/ml667!g/ml500!g/ml2000!g/ml1000!g/ml667!g/ml500!g/ml
70%甲基硫菌灵WP 0 0 0 0 100 100 100 100
50%福·甲硫WP(扑菌特) 0 0 0 0 100 100 100 100
50%多菌灵WP 0 0 0 0 100 100 100 100
45%石硫合剂晶体 0 0 0 0 100 100 100 100
70%丙森锌WP(安泰生) 0 0 0 0 100 100 100 100
70%代森锰锌WP 0 0 0 0 100 100 100 100
50%福·福甲胂·福锌WP(退菌特) 0 0 0 0 100 100 100 100
50%多·福·硫WP(施菌克) 0 0 0 0 100 100 100 100
60%福·福锌WP(炭必灵) 0 0 0 0 100 100 100 100
5%咪鲜胺锰盐WP 0 0 0 0 100 100 100 100
80%代森锰锌WP(新万生) 0 0 0 8.90 100 100 100 90.62
25%多·锰锌WP(病克净) 0 0 0 10.00 100 100 100 89.47
50%咪鲜胺WP(施保功) 17.10 19.20 20.60 30.80 82.00 79.79 78.32 67.58
35%柴油·毒WP(果菜康) 45.00 56.00 80.00 85.00 52.63 40.05 5.79 10.53
表2 不同杀菌剂对杜英叶枯病菌孢子萌发的影响
注:1∶1∶100波尔多液处理孢子萌发率0,抑制率100%;对照萌发率95%,抑制率0。
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