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Research to the intervention effect of Smilax china in C-IBS rats
Zhang Ning，Ma Tengfei，Wang Yeqiu，Liu Ying，Li Tienan
(Heilongjiang University of Chinese Medicine，Harbin 150040)
Purpose:To study on the intervention and mechanism of Smilax china L． for rat suffered from the constipation-predominant irritable
bowel syndrome． Method:Replicating the model of rats suffered from constipation-predominant irritable bowel syndrome with the method of
intragastric administration by ice water and deviding the rats that were made model successfully into the group of model and the extract of Smi-
lax China L． into the dose group of high，middle，and low(Concentration were 8g /ml、4g /ml、2g /ml，Calculated by the amount of crude drug
) ，as well as active control group and blank control group． To determine the chang of content of NO of rat serum with the method of Nitrate
reductase and to determine the chang of content CGRP of rat plasma with the method of enzyme immunoassay as well as to observe the influ-
ence of immunohistochemical staining for VIP，iNOS of rat colon after three weeks by gavage and drug administration． Results:The low dose
group of extract of Smilax China L(Concentration were 2g /ml，Calculated by the amount of crude drug)． obviously reduced，compared with
model group，the content of GCRP of model rat plasma and of NO of model rat serum(P ＜ 0． 05) ，and obviously increased the value of average
gray of immunohistochemical staining for VIP of model rat colon(P ＜ 0． 05) ，as well as extremely remarkably raised the value of average gray
of immunohistochemical staining for iNOS of model rat colon (P ＜ 0． 01)． Conclusion:Smilax China L． had evident intervention for model rat
suffered from constipation-dominant irrtable bowel syndrome，which implemented its mechanism by adjusting the NO of model rat serum，the
CGRP of model rat plasma ，theVIP，iNOS of model rat colon and something like that．
Key words Smilax china(菝葜) ;constipation-predominant irritable bowel syndrome;nitric oxide;iducible NOS;calcitonin gene related
peptide;vasoactine intrestinal peptide
白蔹对大、小鼠烫伤模型的影响*
苗晋鑫，白 明，郭晓芳，苗明三
(河南中医学院，郑州 450008)
摘 要 目的:探讨白蔹外用对小鼠、大鼠烫伤模型的影响。方法:采用 90℃恒温水浴造大、小鼠烫伤模型，观察大、中、小剂
量白蔹水煎液和大、小剂量白蔹油糊对小鼠、大鼠烫伤模型烫伤面积及局部组织形态的影响。结果:大、中、小剂量( 0． 75g /cm2、0． 5
g /cm2、0． 25 g /cm2 ) 白蔹水煎液组，大、小剂量( 0． 24 g /cm2、0． 12 g /cm2 ) 油糊组均显著减小小鼠烫伤面积、显著增加烫伤皮肤面积纸
重差值、显著改善烫伤的症状及病理变化。结论:白蔹外用对小鼠、大鼠烫伤模型均有治疗作用。
关键词 白蔹;外用;烫伤模型
56中药药理与临床 2012;28(4)
* 基金项目: 国家十一五支撑计划( 2008BAI53B09) ;郑州市科技攻关( 10PTGS485 － 21)
白蔹首载于《神农本草经》，归为下品［1］。主要用于痈疽发
背，疔疮，瘰疬，烧烫伤。药典外用适量，煎汤洗或研成极细粉敷
患处，现代临床单味外用治疗烧伤等病症疗效较好。现代研究
表明，白蔹主要含多酚、蒽醌类等化学成分;白蔹主要活性为抗
菌，并有抑制黑色素形成等作用［2］;本文报道白蔹外用对大鼠
和小鼠烫伤模型的治疗作用，位白蔹临床外用提供依据。
1 材料和方法
1． 1 试验药物 白蔹，购自安徽省亳州市药材交易公司，经鉴
定为葡萄科植物白蔹 Ampelopsis japonica (Thunb．)Makino。白
蔹饮片 600g加入 10 倍量的蒸馏水浸泡 30min 后煎煮，沸后改
文火煎煮 60min，滤出煎液，再加入 8 倍量蒸馏水同法煎煮，合
并两次滤液，70℃水浴浓缩至 1． 5g 生药 /ml 、1g 生药 /ml 、0． 5g
生药 /ml，作为大、中、小剂量白蔹水煎液组;白蔹糊剂制备方法:
白蔹药材打粉，过 100 目筛，麻油调糊，分别配成 0． 20g /ml、0．
10g /ml，作为大、小剂量白蔹糊组;麻油淀粉调糊，含淀粉量为
0． 20g /ml;京万红烫伤膏，天津达仁堂京万红药业有限公司生
产，批号 211646;呋喃西林，苏州第五制药厂有限公司生产，批
号 20090406。
1． 2 动物 SPF级昆明种小鼠，体重 20 ～ 22g，雌雄各半，河南
省实验动物中心提供，动物质量合格证号:0003676;SPF 级
Wistar大鼠，体重 180 ～ 200g，雌雄各半，河南省实验动物中心提
供，动物质量合格证编号:0003677。
1． 3 试剂 水合氯醛(天津市科密欧化学试剂开发中心，批号
20071018) ;一滴香(郑州市春芝调味品有限公司，批号
20090426A) ;甲醛(烟台市双双化工有限公司，批号 20090326)。
1． 4 方法
1． 4． 1 小鼠烫伤试验 取小鼠 100 只，雌雄各半，随机取 10
只作为空白组(雌雄各半)。于实验前 1 天背部脱毛 2cm ×
2cm［3］，次日取 90 只小鼠腹腔注射 10%水合氯醛 0． 03ml /10g
麻醉，将去毛的背部皮肤浸入 90℃恒温水浴中持续 6s，使之造
成烫伤(浅Ⅱ°烫伤) ，烫伤面积为直径 18mm［4］。以 1 /5000 呋
喃西林清洁伤口，随后 ip灭菌生理盐水 1． 5ml /只。造模后可见
皮肤发红、水肿，将造模小鼠随机均分为 8 组(雌雄各半) ，分别
涂敷大、中、小剂量白蔹水煎液(用 0． 5g 消毒药棉吸附 0． 5ml /
cm2 相应药液，1． 5g 生药 /ml、1 g 生药 /ml、0． 5g 生药 /ml) ，大、
小剂量白蔹油糊(0． 2g /ml、0． 1g /ml，厚度 2mm，相当于 0． 24g /
cm2、0． 12g /cm2) ，油糊(0． 2g /ml，厚度 2mm，相当于 0． 24g /
cm2) ，京万红烫伤药膏(厚度 2mm，相当于 0． 25g /cm2) ，模型组
和空白组敷生理盐水(0． 5g 消毒药棉吸附 0． 5ml /cm2 生理盐
水) ;各组敷药后均以纱布、保鲜膜覆盖，胶布固定，每天保持烫
伤部位与药物接触 6h。6h 后以生理盐水洗净药物，连续用药
12 天。于烫伤第 1 天、第 4 天及第 8 天以硫酸纸覆盖烫伤溃疡
面沿创缘描记，剪下描绘的图形，再将图形描至小方格纸，测定
小方格的格数表示烫伤创面面积［5］。末次用药后次日，小鼠处
死，剪取烫伤部位皮肤，固定于 10%甲醛溶液中，石蜡包埋切
片，HE染色，显微镜下观察比较各组小鼠烫伤皮肤的愈合程
度: - 皮肤角质层、鳞状上皮层、皮下组织的毛囊、毛囊腺均
正常; + 皮肤角质层、鳞状上皮层、皮下组织的大量炎细胞侵
润; + + 皮肤角质层、鳞状上皮层坏死，皮下组织的大量炎细
胞侵润; + + + 皮肤角质层、鳞状上皮层、皮下组织的毛囊、
毛囊腺均坏死。
1． 4． 2 大鼠烫伤试验 取大鼠 100 只，雌雄各半，随机取 10
只作为空白组(雌雄各半)。于实验前 1 天背部脱毛，次日取 90
只大鼠腹腔注射 10%水合氯醛 0． 3ml /100g麻醉，将去毛的背部
皮肤浸入 80℃恒温水浴中持续 10s，使之造成烫伤，烫伤面积为
5cm × 8cm，约是体表面积的 10%(轻度烫伤) ;以 1 /5000 呋喃西
林清洁伤口，无菌纱布擦干，随后立即 ip 灭菌生理盐水 5ml /
只［5］，造模后可见局部皮肤发红、水肿;将造模大鼠随机均分为
8 组(雌雄各半) ，分别涂敷大、中、小剂量白蔹水煎液(用 0． 5g
消毒药棉吸附 0． 5ml /cm2 相应药液，1． 5g 生药 /ml、1 g 生药 /
ml、0． 5g生药 /ml，各给药组给药量为 0． 5ml /cm2) ;大、小剂量
白蔹油糊(0． 2g /ml、0． 1g /ml，厚度 2mm，0． 24g /cm2、0． 12g /
cm2) ;油糊(淀粉调) (0． 2g /ml，厚度 2mm，相当于 0． 24g /cm2) ;
京万红烫伤药膏(厚度为 2mm，相当于 0． 25g /cm2) ;模型组和空
白组涂抹生理盐水(0． 5g 消毒药棉吸附 0． 5ml /cm2) ;各组敷药
后均以纱布、保鲜膜覆盖，胶布固定，每天保持烫伤部位与药物
接触 6h，给药期间防止药物干燥，定时定量补加药物，每 2h 按
给药量补药 1 次。6h后以生理盐水洗净药物，连续用药 12 天。
每 4 天用透明硫酸纸描绘皮肤烫伤面积的图形一次，称量烫伤
皮肤面积图纸的重量，以该重量变化表示皮肤烫伤面积的变化，
并将用药前的图纸重量减去用药后的图纸重量以此评价受试
药物的作用［6］。末次用药后次日，大鼠处死，剪取烫伤部位皮
肤，固定于 10%甲醛溶液中，石蜡包埋切片，HE染色，显微镜下
观察比较各组大鼠烫伤皮肤的愈合程度: － 实验动物皮肤上
皮细胞、皮下组织及附属腺体均正常; + 实验动物皮肤上皮
细胞和皮下组织出现被新生的肉芽组织所代替; + + 实验动
物皮肤上皮细胞和皮下组织及附属腺体被肉芽组织及瘢痕组
织所代替; + + + 皮肤上皮细胞和皮下组织及附属腺体完全
被大面积坏死组织所代替。
2 结果
2． 1 对小鼠烫伤模型的影响 给药第 1 天，与空白组比，造模
各组出现明显烫伤，说明造烫伤模型成功，各组小鼠烫伤面积无
明显差异，说明分组均匀。与模型组比，给药第 4 天和第 8 天，
大、中、小剂量白蔹水煎液，大、小剂量白蔹油糊组和京万红组均
可显著减小小鼠烫伤面积;油糊组烫伤面积虽有减少，但无明显
差异，说明白蔹水煎液与糊剂均可促进小鼠烫伤面积愈合，因赋
形剂香油组与模型组基本一致，提示白蔹外用有很好的敛疮生
肌作用，结果见表 1。
表 1 白蔹水煎液、油糊对小鼠烫伤模型的影响(珋x ± s)
组别
剂量
(g /cm2)
鼠数
(只)
给药不同时间烫伤面积(mm2)
第 1天 第 4天 第 8天
空白对照 10 0． 0 ± 0． 0＊＊ 0． 0 ± 0． 0＊＊ 0． 0 ± 0． 0＊＊
模型对照 10 254． 2 ± 7． 2 245． 1 ± 7． 7 234． 2 ± 6． 3
油糊 0． 24 10 255． 3 ± 7． 9 243． 5 ± 7． 3 221． 8 ± 3． 6
京万红 0． 25 10 253． 0 ± 8． 0 193． 9 ± 17． 2＊＊ 185． 5 ± 16． 4＊＊
白蔹水煎液 0． 75 10 250． 0 ± 2． 6 220． 2 ± 13． 5＊＊ 207． 4 ± 11． 3＊＊
白蔹水煎液 0． 50 10 249． 8 ± 2． 7 211． 5 ± 10． 9＊＊ 196． 8 ± 11． 1＊＊
白蔹水煎液 0． 25 10 250． 2 ± 2． 4 228． 9 ± 10． 9＊＊ 212． 8 ± 10． 3＊＊
白蔹油糊 0． 24 10 249． 8 ± 2． 1 206． 7 ± 10． 3＊＊ 191． 5 ± 11． 5＊＊
白蔹油糊 0． 12 10 254． 2 ± 7． 2 213． 0 ± 11． 4＊＊ 198． 2 ± 11． 8＊＊
与模型组比较 * P ＜ 0． 05，＊＊ P ＜ 0． 01(下同)
2． 2 对小鼠烫伤模型病理组织变化的影响 经 Ridit检验，与
66 中药药理与临床 2012;28(4)
空白组比，模型组出现显著的烫伤病理损伤;与模型组比较，油
糊组对烫伤的病理变化改善不明显;京万红组大、中剂量白蔹
水煎液组、大、小剂量白蔹油糊组组可显著改善烫伤的病理变
化;小剂量白蔹水煎液组可明显改善烫伤的病理变化。说明白
蔹水煎液与油糊可使小鼠烫伤病变显著改善，油糊组病理变化
与模型组基本一致，结果见表 2。
表 2 白蔹水煎液、油糊对小鼠烫伤模型病理组织变化的影响
组别
剂量
(g /cm2)
鼠数
(只)
－ + + + + + +
空白对照 10 10 0 0 0
模型对照 10 0 0 1 9
油糊 0． 24 10 0 0 6 4
京万红 0． 25 10 8 2 0 0
白蔹水煎液 0． 75 10 3 3 4 0
白蔹水煎液 0． 50 10 4 5 1 0
白蔹水煎液 0． 25 10 1 3 2 4
白蔹油糊 0． 24 10 6 3 1 0
白蔹油糊 0． 12 10 4 4 2 0
2． 3 对大鼠烫伤模型的影响 与模型组比较，在用药第 4 天
后，大、中、小剂量白蔹水煎液组，大、小剂量白蔹糊剂组，京万红
组大鼠烫伤烫伤皮肤面积纸重差值明显增加，油糊组大鼠烫伤
皮肤面积纸重差值无明显增加;在用药第 8 天，大、中、小剂量白
蔹水煎液组，大、小剂量白蔹糊剂组，京万红组大鼠烫伤皮肤面
积纸重差值明显增加，油糊组大鼠烫伤皮肤面积纸重差值无明
显增加;在用药第 12 天，白蔹水煎液大、中、小剂量组，白蔹油糊
大、小剂量组，京万红组大鼠烫伤皮肤面积纸重差值明显增加，
油糊组大鼠烫伤皮肤面积纸重差值稍有增加，结果见表 3。
表 3 白蔹水煎液、油糊对大鼠烫伤模型的影响(珋x ± s)
组别
剂量
(g /cm2)
鼠数
(只)
用药后不同时间烫伤面积与用药前纸重差(mg)
第 4天 第 8天 第 12天
空白对照 10 0． 0 ± 0． 0＊＊ 0． 0 ± 0． 0＊＊ 0． 0 ± 0． 0＊＊
模型对照 10 10． 3 ± 2． 7 36． 3 ± 3． 9 97． 2 ± 5． 7
油糊 0． 24 10 12． 3 ± 2． 2 41． 1 ± 4． 7 104． 7 ± 8． 2*
京万红 0． 25 10 32． 6 ± 2． 7＊＊ 83． 8 ± 4． 1＊＊ 146． 6 ± 6． 3＊＊
白蔹水煎液 0． 75 10 22． 5 ± 1． 3＊＊ 77． 4 ± 4． 4＊＊ 130． 3 ± 3． 9＊＊
白蔹水煎液 0． 5 10 29． 2 ± 2． 3＊＊ 81． 4 ± 3． 8＊＊ 145． 6 ± 4． 0＊＊
白蔹水煎液 0． 25 10 20． 8 ± 1． 9＊＊ 73． 8 ± 5． 6＊＊ 129． 5 ± 2． 5＊＊
白蔹油糊 0． 24 10 30． 5 ± 2． 8＊＊ 80． 6 ± 4． 8＊＊ 146． 3 ± 4． 0＊＊
白蔹油糊 0． 12 10 22． 7 ± 1． 4＊＊ 78． 7 ± 1． 6＊＊ 131． 3 ± 1． 8＊＊
2． 4 对大鼠烧烫伤模型病理组织变化的影响 经 Ridit 检验，
与空白组比较，模型组出现显著的烫伤病理损伤，说明造模成
功;与模型组比较，油糊组对烫伤的病理变化改善不明显;大、中
剂量白蔹水煎液组，大、小剂量白蔹油糊组及京万红组均可显
著改善烧烫伤的病理变化。说明白蔹水煎液与油糊可使大鼠
烫伤病变显著改善，油糊组病理变化与模型组基本一致，结果
见表 4。
表 4 白蔹水煎液、油糊对大鼠烧烫伤模型病理组织变化的影响
组别
剂量
(g /cm2)
鼠数
(只)
－ + + + + + +
空白对照 10 10 0 0 0
模型对照 10 0 0 1 9
油糊 0． 24 10 0 0 5 5
京万红 0． 25 10 8 2 0 0
白蔹水煎液 0． 75 10 3 3 4 0
白蔹水煎液 0． 50 10 5 4 1 0
白蔹水煎液 0． 25 10 1 3 2 4
白蔹油糊 0． 24 10 7 3 0 0
白蔹油糊 0． 12 10 5 3 2 0
3 讨论
烫伤损伤在体表，反应在全身，烫伤愈重，反应愈烈，成为危
害人类健康的重要伤病之一［7］。烫伤破坏皮肤天然屏障，血液
循环障碍或丧失血液灌注，局部营养缺乏，全身免疫力下降，为
细菌入侵创造良好的条件。目前有关烫伤模型的复制方法有多
种，如采用激光、恒温恒压电烫仪、手提压力蒸汽消毒器等方
法［8］。大多数方法由于操作困难或者难以掌握最适的温度、时
间与压力等因素，造成动物皮肤烧伤程度达不到临床研究的要
求［9］。鉴于此，我们参考苗氏［10］等动物模型建立方法，用 90℃
恒温水浴中持续 6s复制小鼠烫伤模型(浅Ⅱ°烫伤) ;80℃恒温
水浴中持续 10s复制大鼠烫伤模型(轻度烫伤)。此法操作简
便，所需器具少，成功率较高及符合临床病症。为较好判断白蔹
外用对烫伤的疗效，本实验对烫伤面积、烫伤部位皮肤组织病理
变化进行评价。烫伤面积测定能直观反映白蔹对烫伤的治疗情
况。织病理学变化可以反映受损组织各层皮肤的炎细胞浸润程
度和愈合情况，能直接反映药物的疗效。
实验结果显示大、中、小剂量白蔹水煎液组和大、小剂量白
蔹油糊组均可显著增加烫伤面积与用药前纸重差值和显著改
善烫伤的病理变化。在对小鼠和大鼠烫伤模型烫伤面积与用药
前纸重差值方面，京万红组，中剂量白蔹水煎液组和大剂量白蔹
油糊组均略优于大、小剂量白蔹水煎液组和小剂量白蔹油糊组。
在对小鼠和大鼠烫伤模型组织病理学的影响方面，京万红组和
大剂量白蔹油糊组相差不大，均略优于各给药组;中剂量白蔹水
煎液组和小剂量白蔹油糊组相差不大，均略优于大、小剂量白蔹
水煎液组。油糊组各项指标与模型组相差不大，对烫伤的改善
显然不是香油本身的作用，提示白蔹外用有很好的敛疮生肌作
用。
现代研究认为，机体组织烫伤后造成皮肤局部组织功能破
坏，血管通透性增强，各种炎性介质大量释放而产生严重的炎症
反应，造成组织细胞水肿、变形、坏死，炎性细胞浸润，毛细血管
层破坏也导致营养物质供应障碍，皮肤生长愈合缓慢，皮肤屏障
功能破坏，各种炎性渗出液增多，容易引起细菌感染。白蔹含黏
质和淀粉，其药理作用对同心性毛癣菌、奥杜盎小芽胞癣菌、腹
股沟表皮癣菌和红色表皮癣菌等皮肤真菌均有不同程度的抑
制作用。
根据药理实验数据和结果，探讨中药治疗相应疾病的特点
和规律，为白蔹外用敛疮生肌的功能提供了实验支撑，给临床应
用以补充［11 ～ 12］。有文献报道临床用白蔹和麻油调糊治疗烧伤
创面［13］，该临床疗效与白蔹敛疮生肌外用功能一致;药典记载
白蔹外用适量，煎汤洗或研成极细粉敷患处，故本实验采用白蔹
水煎液和油糊治疗烫伤，为临床外用烫伤提供了一种简易有效
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el of the mice and rats infected by 90℃ constant temperature water bath． The observation of large，medium and small － dose Ampelopsis water
decoction and large and small － dose Ampelopsis oil paste on mice and rats scald model of the scald area and the local tissue morphology． Re-
sults:Large，medium，small doses(0． 75g /cm2，0． 5 g /cm2，0． 25 g /cm2)Ampelopsis water decoction groups，large and small doses(0． 24 g /
cm2、0． 12 g /cm2)oil paste of Ampelopsis group was significantly reduce the scald area of mice，significantly increase the area scalded rats
paper weight difference before and after drug，Significantly improve the symptoms of burn and pathological changes(P ＜ 0． 01)． Conclusion:
Ampelopsis has remarkable external curative effect on mice and rats scald model．
Key words Ampelopsis;external Use;scald model
赤芝孢子粉肠溶滴丸对大鼠镇静催眠作用研究
何秀峰，余凌虹，王爱国，魏怀玲，刘 冬，刘耕陶
(中国医学科学院北京协和医学院药物研究所，北京 100050)
摘 要 目的:研究赤芝孢子粉提取物肠溶滴丸灌胃给药后对大鼠的镇静催眠作用。方法:采用阈上和阈下剂量戊巴比妥钠、
致大鼠睡眠的方法，考察不同剂量、不同给药方式下赤芝孢子粉提取物对大鼠睡眠时间及主动活动等的影响。结果:采用阈上剂量
戊巴比妥钠诱导大鼠催眠作用表明，灌胃孢子粉肠溶滴丸 1． 5 及 2． 5g /kg，可明显延长睡眠时间( p ＜ 0． 01) ;采用阈下剂量戊巴比妥
钠诱导大鼠催眠作用表明，灌胃孢子粉肠溶滴丸 1． 5 及 2． 5g /kg，可明显延长睡眠时间( p ＜ 0． 05) ，与皮下同剂量注射给药相比无显
著性差异。结论:赤芝孢子粉提取物肠溶滴丸剂对于大鼠具有镇静催眠作用。
关键词 赤芝孢子粉提取物;镇静催眠;肠溶滴丸;大鼠
灵芝为多孔菌科真菌赤芝 Ganoderma lucidum(Leyss． ex
Fr．)Karst．或紫芝 Ganoderma sinense Zhao，Xu et Zhang 的干燥
子实;性甘、味平，具有补气安神、止咳平喘的功效，具有多方面
的药理活性和临床用途［1，2］。赤芝孢子粉为赤芝子实体成长过
程中散发的种子，经研究发现赤芝孢子粉提取物也具有诸多药
理活性和临床用途［3，4］。赤芝孢子粉注射液(灵孢多糖注射液)
在临床应用已有 30 余年，对多种神经肌肉疑难疾病具有肯定的
疗效，同时还具有改善病人睡眠、提高机体免疫力以及增进食
欲等效果。魏怀玲等［5］在对赤芝孢子粉水溶性提取物对小鼠
的镇静催眠作用研究中发现，皮下注射对小鼠的镇静催眠作用
较好，而灌胃后无效，推测为胃液对赤芝孢子粉提取物中有效
成分的破坏作用导致。赤芝孢子粉提取物灌胃肠溶制剂的药理
学研究未见报道，我们参考相关文献［6］，采用肠溶滴丸对大鼠
的镇静催眠作用进行了研究，并与孢子粉提取物水溶性提取物
皮下注射给药后的药效结果进行了对比。
1 材料与方法
1． 1 试验药物 赤芝孢子粉提取物肠溶滴丸，由北京协和药
厂提供，批号:20030101。制备工艺为采用赤芝孢子粉提取物
(1g相当于 24g赤芝孢子粉)与适量聚乙二醇 8000、单硬脂酸甘
油酯等辅料经滴丸机滴制、包肠溶衣制得的肠溶滴丸;空白滴丸
86 中药药理与临床 2012;28(4)