全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2010 年
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分子、细胞甚至器官损伤，导致病变［4］。结果表明，灵
芝多糖具有直接清除羟基自由基和超氧阴离子的
能力，且清除能力与多糖的浓度呈正相关，随多糖
浓度的提高清除率可达到 70％以上。 不同体积分数
乙醇沉淀得到的灵芝多糖清除羟基自由基的能力
不同，以 GL3 清除率最高，具体原因需要进一步研
究。 另一方面，GL3 在总的灵芝多糖中的含量较低
（GL1∶GL2∶GL3＝0．41∶0．42∶0．17），因此总体来看灵芝中
可能还是 GL1 和 GL2 在灵芝抗氧化中发挥主要作
用。 另一方面，本试验只是在化学体系中测得，因为
生物体的复杂性，灵芝多糖对生物体的作用机理还
需要进一步研究。
参考文献：
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出版社，1999．
收稿日期：2010－07－26
基金项目：国家自然科学基金重点项目（NO90411020）；中央高校基本科研业务费专项资金 （CHD2009JC144）
作者简介：贾 夏（1975－），女，陕西府谷人，副教授，博士，主要从事植物化学和土壤微生物分子生物学研究，（电话）13772132927
（电子信箱）jiaxianavy＠163．com。
第 49卷第 11 期
2010年 11 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 49 No.11
Nov．，2010
D－101大孔树脂对大叶冬青叶总黄酮的
静态吸附性能研究
贾 夏，杨长军
（长安大学环境科学与工程学院化工系，西安 710054）
摘要：对 D－101 大孔树脂对冬青叶黄酮类化合物的静态吸附能力及吸附的化合物种类进行了研究。 结
果表明，提取液总黄酮含量影响 D－101 树脂吸附量的大小，主要表现为提取液总黄酮含量越高，D－101
大孔树脂对其吸附量越大，对 20 g，40 g 和 60 g 3 种不同质量的冬青叶总黄酮的吸附量间存在极显著的
差异；D－101 大孔树脂对不同质量冬青叶黄酮类化合物的吸附种类相似； 且 D－101 大孔树脂可能吸附
极性较大的黄酮苷类物质，即对这些物质有富集作用。
关键词：大叶冬青；D－101 大孔树脂；总黄酮；吸附特性
中图分类号：R284．2 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2010）11－2886-03
Study on Performance of Adsorption of the Macroreticular Resin for Ilex Latifolia
Thunb Flavones
JIA Xia，YANG Chang－jun
（Environmental Science and Engineering College，Chang’an University，Xi’an 710054，China）
Abstract：The adsorption property of macroreticular resin for holly leaf flavones and the type of flavones were determined．
The results indicated that the higher the content of flavonids， the higher the D－101 macroporous resin adsorption capacity．
The difference of the adsorption capacity for flavonids was significant （P＜0．01） between pairwise comparison of 20 g，40 g and
60 g． The flavonids types were similar between different quantities of holly leaves through D－101 macroporous resin adsorp-
tion． And mainly the C－glycosylflavones were adsorbed by D－101 macroporous resin．
Key words：Ilex latifolia Thunb； D－101 macroporous resin； flavonids； adsorption
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2010.11.086
第 11 期
大叶冬青（Ilex latifolia Thunb）系冬青科冬青
属常绿乔木， 自然分布于我国长江流域以南地区。
因其适应性强、较耐寒、耐阴湿、病虫害少、萌蘖性
强等特点，使其成为我国城市生态园林绿化的优良
观赏树种 ［1，2］。 大叶冬青叶内除含有多种游离氨基
酸、 维生素 C 和微量咖啡碱外， 还含有黄酮类、芦
丁、槲皮素等对人体有益的保健活性物质，是制作
苦丁保健茶的重要原料［1，3，4］。现代医学证明，大叶冬
青苦丁茶具有清热解毒、消炎杀菌、止咳化痰、健胃
消积、降血压血脂、抗衰老等保健功能［3，4］；对治疗高
血压、口腔炎、咽喉炎、急性肠胃炎等疗效显著 ［4，5］。
对鼻咽癌、食道癌、肺癌等也有抑制作用，用老叶煮
洗还能医治多种皮肤病及烫伤等 ［2－4］，因此，大叶冬
青又是优良的药用保健树种。 黄酮类化合物是冬青
中具有医疗保健作用的主要成分，因此对冬青叶中
黄酮类化合物的研究具有很高的价值。 本文通过对
D－101 大孔树脂对冬青叶总黄酮类化合物进行静
态吸附率及吸附黄酮类化合物种类的研究，以为冬
青叶黄酮类化合物的分离纯化提供一定的参考依
据。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 大叶冬青叶 大叶冬青（Ilex latifolia Thunb）
叶于 4 月下旬采集于长安大学雁塔校区校园内，采
摘后经过分选，剔除树枝、土石块等，晾干，放入电
热鼓风干燥箱 90℃杀青后自然干，干燥后粉碎机粉
碎，然后密封保存备用。
1．1．2 试剂与仪器 芦丁、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧
化钠、无水乙醇、三氯化铝等，试验所用试剂均为分
析纯，D－101 大孔树脂为西安电力树脂厂生产；主
要仪器有 752 型紫外－可见分光光度计 （上海光谱
仪器有限公司）和 365 nm 紫外分析仪（上海科艺仪
器厂）。
1．2 方法
1．2．1 冬青叶黄酮类化合物的提取 分别准确称
取 20、40、60 g 经粉碎的冬青叶于 250 mL 圆底烧瓶
中，加入 70％的乙醇按 1∶5（W ／ V，g∶mL）的物料比回
流提取， 利用 KDM 型连续可调电子控温电热套加
热，电压调为 75V，回流提取 1 h 后抽滤，采用旋转
蒸发器浓缩滤液，最后 70％的酒精定容到 50.0 mL。
取 0．5 mL用于黄酮类物质含量的测定，剩余的用于
吸附试验。
1．2．2 冬青叶黄酮类化合物含量的测定［4］ 准确称
取芦丁 20 mg（120℃烘 2 h 至恒重），置 100 mL 容量
瓶中，以 70％乙醇溶解定容，取 25.0 mL 用蒸馏水稀
释至 50.0 mL（即芦丁浓度为 0．1 mg ／ mL）。准确吸取
1．0、2．0、3．0、4．0、5．0、6．0 mL 0．1 mg ／ mL 芦丁溶液分
别置 20 mL具塞刻度试管中，先加 5％亚硝酸钠（m ／
m）溶液 0．3 mL，摇匀，放置 6 min，再加 10％硝酸铝
（m ／m）溶液 0．3 mL，摇匀，再放置 6 min。 加 1 mol ／ L
氢氧化钠溶液 4.0 mL。 用 70％乙醇稀释至刻度，放
置 15 min， 于 752型紫外－可见分光光度计在 400～
520 nm 间经扫描，确定 510 nm 处为最大吸收波长，
于波长 510 nm 处测定吸光度， 以 70％乙醇作空白
对照。 以测定结果得芦丁浓度（C）与吸光值（A）的标
准曲线为：C＝0．084 4 A＋0．000 6 （r＝0．999 4）。 取 0．5
mL 冬青叶提取样液及吸附后的残液等按照标准曲
线的制作方法进行测定。
1．2．3 D－101 大孔树脂预处理 将 D－101 大孔吸
附树脂浸泡于 95％乙醇活化 2 d，以乙醇湿法装于 3
个吸附柱，先用无水乙醇清洗至流出液加水（1.0 mL
流出的酒精加 5.0 mL 水）不混浊为止，再用纯化水
洗至流出液澄清无醇味，备用。 用乙醇溶液浸泡树
脂 2～3 d， 将树脂装入柱中先用乙醇洗至流出液加
适量去离子水（1.0 mL 流出的酒精加 5.0 mL 去离子
水）无白色浑浊现象，再用去离子水进行水洗直到
洗出液中没有乙醇味为止。
1．2．4 D－101 大孔树脂对冬青叶黄酮类化合物的
静态吸附率 准确称取经预处理的树脂各 20 g 于
50 mL 具塞磨口三角瓶中，精密加入 20、40、60 g 的
冬青叶的黄酮提取液，振荡 24 h，振荡器温度 27℃，
转速 110 r ／ min，充分吸附后，过滤，测定滤液中剩余
黄酮的浓度。
1．2．5 D－101 大孔树脂静态吸附前后冬青叶黄酮
类化合物种类 将吸附残液及吸附前样液用毛细
管点样于聚酰胺薄膜上， 以氯仿∶甲醇＝8∶2 上行展
开， 待展开完毕后喷洒 1％的三氯化铝酒精溶液显
色， 等干燥后于 365 nm 紫外分析仪下观察并定位
黄酮类化合物。
1．2．6 数据处理 采用 Excel 软件进行处理。 指标
计算公式如下。
大孔树脂吸附量 （干树脂）＝吸附的黄酮的量 ／
干树脂质量
被吸附的黄酮的质量＝（V1C1－V2C2）×103
大孔树脂吸附率＝（C1－C2） ／C1×100％
式中，V1： 加入的冬青叶黄酮提取物溶液体积
（mL）；V2： 吸附后冬青叶黄酮提取物溶液体积
（mL）；C1：加入溶液的初始浓度（mg ／ mL）；C2：吸附后
溶液的浓度（mg ／ mL）。
贾 夏等：D－101 大孔树脂对大叶冬青叶总黄酮的静态吸附性能研究 2887
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2 结果与分析
2．1 D－101 大孔树脂对冬青叶黄酮类化合物的静
态吸附率
由表 1 可知，提取液总黄酮含量影响 D－101 树
脂吸附量的大小，主要表现为提取液总黄酮含量越
高，D－101 大孔树脂对其吸附量越大， 且对 20 g 冬
青叶总黄酮的吸附量和对 40 g 以及 60g 之间存在
着极显著（P＜0．01）差异，同时对 40 g 冬青叶总黄酮
的吸附量和 60 g之间的差异亦极显著（P＜0．01）。 但
D－101 大孔吸附树脂对直接提取液的静态吸附率
波动较小， 且 3 种处理之间差异不显著， 表明 D－
101大孔树脂对冬青叶总黄酮的静态吸附率及吸附
性能比较稳定。
2．2 D－101 大孔树脂静态吸附前后冬青叶黄酮类
化合物种类
由图 1 可知，在 20、40 和 60 g 冬青叶直接提取
物的静态吸附残液中都含有 4 种相同黄酮类物质，
表明尽管 D－101 大孔树脂对不同质量冬青叶黄酮
类化合物的吸附率及吸附量不同，但吸附的黄酮类
化合物种类相似；此外由图 1c、图 1d 结果可以看出
静态吸附前冬青叶提取液中含有 7 种黄酮类化合
物， 与静态吸附后的剩余残液的层析结果相比，D－
101 树脂可能吸附的是极性比较大的黄酮苷类物
质，即对这些物质有较大富集作用。
3 结论
通过对 D－101 大孔吸附树脂对不同总黄酮含
量的冬青叶提取液静态吸附率及吸附后剩余残液
黄酮类化合物种类的研究，结果表明，提取液总黄
酮含量影响 D－101 树脂吸附量的大小，主要表现为
提取液总黄酮含量越高，D－101 大孔树脂对其吸附
量越大，且对 20 g 冬青叶总黄酮的吸附量和对 40 g
以及 60 g 之间存在极显著（P＜0．01）差异，同时对
40 g 冬青叶总黄酮的吸附量和 60 g 之间的差异亦
极显著 （P＜0．01）；D－101 大孔树脂对不同质量冬青
叶黄酮类化合物的吸附种类相似；且 D－101 大孔树
脂可能吸附极性较大的黄酮苷类物质，即对这些物
质有富集作用。
参考文献：
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表 1 D-101 大孔树脂对冬青叶黄酮类化合物的静
态吸附量和吸附率
项目
20g
40g
60g
提取液浓度
mg/mL
0.044 6±0.000 2
0.044 9±0.000 1
0.044 6±0.000 1
吸附量
mg/g
0.053 0±0.010 3**
0.059 0±0.001 6**
0.068 4±0.005 7**
吸附率
%
49.36±1.08
50.34±0.12
52.49±0.19
注：** 表示 P<0.01 水平差异极显著。
a b
a、b．静态吸附残液层析结果；c、d．吸附前层析结果
b1．20g 冬青叶；b2．40g冬青叶；b3．60g冬青叶；b4．芦丁
图 1 聚酰胺层析结果
1 2 3 4
c d
样品 芦丁
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