全 文 ：药用红树植物黄槿嫩枝叶醇提物的抗炎镇痛止血作用研究
丘 芬，田 辉，张 志，原鲜玲，谈远锋，宁小清*
(广西中医药大学，南宁 530001)
摘要 目的:观察黄槿嫩枝叶醇提物(下称黄槿醇提物)的止血镇痛抗炎作用，为指导临床合理用药和开发新药
提供科学依据。方法:采用小鼠断尾法、玻片法、毛细管法研究黄槿醇提物的止血作用;醋酸扭体法、小鼠热板法研究
黄槿醇提物的镇痛作用;二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠毛细血管通透性模型研究黄槿醇提物的抗炎作用。结果:
黄槿醇提物各剂量均可显著缩短小鼠出血、凝血时间，减少醋酸所致的小鼠扭体次数，对热板所致小鼠疼痛，对二甲苯致
小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠毛细血管通透性增高均有显著的抑制作用。结论:黄槿醇提物具有显著的抗炎止血镇痛作用。
关键词:黄槿;止血;镇痛;抗炎
中图分类号:Ｒ285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)10-1648-04
Pharmacological Study on Hemostasis，Analgesic and Anti Inflammation Effects
of the Alcohol Extract of Hibiscus tiliaceus
QIU Fen，TIAN Hui，ZHANG Zhi，YUAN Xian-ling，TAN Yuan-feng，NING Xiao-qing
(Guangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanning 530001，China)
Abstract Objective:To study the effects of hemostasis，analgesic and anti inflammation of the alcohol extract of Hibiscus tiliaceus
and offer pharmacological and experimental basis for its safe and effective use in clinic. Methods:The effects of hemostasist were ob-
served with tail breaking method，capillary tube method and slide method;Hot board and body distortion induced by acetic acid methods
were applied in mice analgesia experiment，the mice model of acute auricle swelling induced by dmi ethylbenzene and capillary permea-
bility induced by acetic acid were applied to observe the anti inflammatory effects. Ｒesults:The alcohol extract of Hibiscus tiliaceus
could significantly reduce the bleeding time and the clotting time，delay the plant reaction time and reduce the writhing times of the
mice，and it also had effect on inhibiting swelling of mice ear and the permeability of the capillary. Conclusion:These results suggest
that the alcohol extract of Hibiscus tiliaceus has the effects of hemostasis，analgesic and anti inflammation.
Key words Hibiscus tiliaceus L.;Hemostasis;Analgesic;Anti inflammation
收稿日期:2013-03-05
基金项目:广西自然基金课题(2010GXNFA013197)
作者简介:丘芬(1981-)，女，硕士，实验师，主要从事中药药理研究工作;Tel:13471065704，E-mail:kadylv@ 163. com。
* 通讯作者:宁小清，Tel:0771-3933481，E-mail:lb30654@ qq. com。
黄槿(Hibiscus tiliaceus L. )始载于《新华本草纲
要》，为锦葵科木槿属半红树植物，常绿灌木或小乔
木，异名有海麻桐、黄木槿、公背树等，分布于台湾、
广西、广东等地，生海边堤岸〔1〕。黄槿具有清热解
毒、散瘀消肿等功效，主治木薯中毒，外用治疮疖肿
毒等症〔2〕。但相关的现代药理研究较少。近年来，
随着对海洋药用红树植物的研究不断深入，应用不
断扩大，其研究发展前景越来越受到人们的关注。
本课题对黄槿进行药理作用的初步研究，观察了不
同浓度的黄槿嫩枝叶醇提物的止血、镇痛和抗炎作
用，为黄槿在创伤感染的临床应用提供药理学实验
依据，以进一步开拓黄槿的临床应用。
1 材料与仪器
1. 1 实验动物 SPF 级昆明小鼠，体质量 18 ～
22 g，由广西医科大学实验动物中心提供，生产许可
证号:SCXK(桂)2009-0002。实验室温度为 20 ～
24 ℃，湿度为 60% ～70%。
1. 2 药物与试剂 黄槿嫩枝叶采自广西合浦县山
口红树林自然保护区，经广西中医药大学刘寿养副
教授鉴定为锦葵科植物黄槿 Hibiscus tiliaceus L. 的
嫩枝叶。取黄槿嫩枝叶粗粉经醇提浓缩成浸膏(下
称黄槿醇提物)，试验前配制成混悬液，供试验用;
醋酸甲萘氢醌片(VK4)(浙江瑞新药业股份有限公
司生产，批号 20100123);罗通定片(四川康福来药
业集团有限公司，批号:100302);醋酸地塞米松片
(浙江仙琚制药股份有限公司生产，批号 101280);
95%乙醇(国药集团化学试剂有限公司，分析纯，批
号:20100511);冰乙酸(天津市广成化学试剂有限公
司，批号:20100615);二甲苯(广州新港化工厂生产)。
1. 3 主要仪器 YLS-6A 智能热感仪(山东省医学
科学院设备站)。
2 方法
2. 1 动物分组造模及给药 设溶媒对照组(生理
盐水)、黄槿醇提物 3 个不同剂量组(生药 54. 5、
·8461· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 10 期 2013 年 10 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2013.10.033
27. 3、13. 6 g /kg)、阳性对照组(止血作用研究用醋
酸甲萘氢醌，2. 6 mg /kg;镇痛作用研究用罗通定，40
mg /kg;抗炎作用研究用醋酸地塞米松，4. 0 mg /
kg)，每组 10 只昆明小鼠，给药前禁食不禁水 12 h，
按 20 mL /kg(灌胃给药)1 次 /d。
2. 2 止血作用研究
2. 2. 1 黄槿醇提物对小鼠断尾出血时间的影响:
50 只昆明小鼠随机分为 5 组，连续给药 3 d，于末次
给药后 30 min，用水合氯醛将小鼠麻醉，以利剪将小
鼠尾尖 0. 5 cm 处横断，待血液自然流出后计时，每
隔 30 s 用滤纸吸去血滴 1 次，直至血液自然停止
(滤纸吸时无血斑)，秒表记录并计算出血时间。
2. 2. 2 玻片法检测黄槿醇提物对小鼠血液凝血时
间的影响:50 只昆明小鼠随机均分为 5 组，连续给
药 4 d，于末次给药后 1 h，用眼科弯镊迅速摘去一侧
眼球，即有血液流出。于载玻片两端各滴一滴血
(血滴直径约 5 mm)，立即用秒表计时，每隔 30 s 用
清洁大头针自血滴边缘向里轻轻挑动 1 次，从血液
流出开始至挑起血丝止，所用时间为凝血时间。
2. 2. 3 毛细血管法检测黄槿醇提物对小鼠血液凝
血时间的影响:50 只昆明小鼠随机均分为 5 组，连
续给药 4 d，于末次给药后 1 h，用长 10 cm 内径 1
mm 的毛细玻璃管由小鼠眼睑插入眦球后静脉丛，
深约 4 ～ 5 mm采血，血液注满后取出毛细管平放于
桌上，立即用秒表计时，每隔 30 s 折断两端毛细玻
璃管约 1. 5 cm，并缓慢向左右拉开，直至血凝丝出
现为止，所用时间即为凝血时间。
2. 3 镇痛作用研究
2. 3. 1 黄槿醇提物对醋酸致小鼠扭体次数的影
响:50 只昆明小鼠随机均分为 5 组，连续给药 7 d，
于末次给药 1 h 后，每只小鼠腹腔注射 0. 6%醋酸
10 mL /kg，记录注射 0. 6%醋酸后 20 min 内各鼠出
现扭体的潜伏时间和扭体次数。
扭体抑制率(%)=(溶媒对照组平均扭体次数 －给药
组平均扭体次数)/溶媒对照组平均扭体次数 × 100%
2. 3. 2 热板法检测黄槿醇提物对小鼠痛阈值的影
响:初筛出合格的昆明小鼠 50 只，置于(55 ±
0. 5)℃热板上，重复测定 2 次正常痛阈值，正常痛阈
值均为 5 ～ 30 s 的小鼠为合格小鼠，取 2 次正常痛
阈平均值，作为该鼠给药前痛阈值，随机均分为 5
组，连续给药 7 d，于末次给药 45 min 后，将小鼠放
到(55 ±0. 5)℃热板上，用秒表记录小鼠自投入热板
至出现舔后足的时间，作为该鼠的痛阈值，如 60 s仍
无反应将小鼠取出以免烫伤，其痛阈值以 60秒计算。
2. 4 抗炎作用研究
2. 4. 1 二甲苯致小鼠耳肿胀法:50 只昆明小鼠随
机均分为 5 组，连续 7 d，于末次给药后 1 h 后于各
小鼠右侧耳廓正反面均匀涂抹二甲苯 40 μL(室温
25 ℃)，左耳涂抹等量生理盐水为对照，涂抹二甲苯
20 min 后断颈处死小鼠，沿耳廓对称剪下小鼠两
耳，用直径 8 mm 的小鼠耳廓打孔器在左右耳同一
部位冲下耳片，用精密分析天平称量质量，以左右耳
片质量(mg)差值表示炎性肿胀程度，计算肿胀度及
肿胀抑制率(%)。
肿胀度 =右耳片质量(mg)－左耳片质量(mg)
肿胀抑制率(%)=(生理盐水组平均肿胀度 －给药组
平均肿胀度)/生理盐水组平均肿胀度 × 100%
2. 4. 2 腹腔染料渗出法:50 只昆明小鼠随机均分
为 5 组，连续 7 d，于末次给药 1 h 后各鼠均尾静脉
注射 0. 25%伊文思蓝生理盐水溶液 10 mL /kg，随即
腹腔注射 0. 6% HAc 生理盐水 0. 20 mL /只，20 min
后脱颈椎处死，剪开腹部皮肤肌肉，用 6 mL 生理盐
水分数次洗涤腹腔，吸管吸出洗涤液，3 000 r /min
离心 15 min;取上清液于 590 nm比色皿测定其光密
度 D(λ)值，以腹腔洗出液中染料水平的高低反映
醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性炎症的变化。
2. 5 统计学处理 采用 SPSS 17. 0 统计学软件对
实验数据进行单因素方差分析，数据用 珋x ± s 表示，
以 P ＜ 0. 05 为差异显著。
3 结果
3. 1 黄槿醇提物对小鼠断尾出血时间的影响 结
果如表 1 所示，与溶媒对照组比较，黄槿醇提物各剂
量均可显著缩短小鼠断尾出血时间(P ＜ 0. 05)。
表 1 黄槿醇提物对小鼠断尾出血
时间的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 出血时间 /min
溶媒对照组 － 7. 00 ± 3. 64
黄槿醇提物组 54. 5 2. 60 ± 0. 61*
27. 3 2. 45 ± 2. 18*
13. 6 3. 40 ± 0. 52*
醋酸甲萘氢醌组 0. 0026 2. 11 ± 1. 17*
注:与溶媒对照组比较，* P ＜ 0. 05
3. 2 玻片法检测黄槿醇提物对小鼠血液凝血时间的
影响 结果如表 2所示，与溶媒对照组比较，黄槿醇提
物各剂量均可显著缩短小鼠凝血时间(P ＜0. 05)。
3. 3 毛细血管法检测黄槿醇提物对小鼠血液凝血
时间的影响 结果如表 3 所示，与溶媒对照组比较
均，黄槿醇提物各剂量均可显著缩短小鼠凝血时间
(P ＜ 0. 05)。
·9461·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 10 期 2013 年 10 月
表 2 玻片法检测黄槿醇提物对小鼠血液
凝血时间的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 凝血时间 /min
溶媒对照组 － 3. 70 ± 0. 98
黄槿醇提物组 54. 5 2. 20 ± 1. 14*
27. 3 2. 65 ± 0. 94*
13. 6 2. 15 ± 1. 20*
醋酸甲萘氢醌组 0. 0026 1. 70 ± 1. 21*
注:与溶媒对照组比较，* P ＜ 0. 05
表 3 毛细血管法检测黄槿醇提物对小鼠
血液凝血时间的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 凝血时间 /min
溶媒对照组 － 3. 40 ± 0. 61
黄槿醇提物组 54. 5 2. 30 ± 0. 89*
27. 3 2. 50 ± 0. 85*
13. 6 1. 95 ± 0. 96*
醋酸甲萘氢醌组 0. 0026 1. 45 ± 1. 09*
注:与溶媒对照组比较，* P ＜ 0. 05
3. 4 黄槿醇提物对醋酸致小鼠扭体次数的影响
结果如表 4 所示，与溶媒对照组比较，黄槿醇提取物
各剂量组的小鼠扭体次数均显著减少(P ＜ 0. 05)，
抑制率最高达 67. 59%。
表 4 黄槿醇提物对醋酸致小鼠扭体次数
的影响(珔x ± s，n =10)
组别
剂量 /
(g /kg)
潜伏时间 /
min
扭体次数 /
次
抑制率 /
%
溶媒对照组 － 3. 31 ± 0. 61 84 ± 28. 88 －
黄槿醇提物组 54. 5 7. 97 ± 3. 23* 27 ± 15. 04* 67. 59
27. 3 7. 35 ± 2. 81* 29 ± 9. 40* 65. 01
13. 6 5. 13 ± 1. 92 29 ± 11. 93* 65. 41
罗通定组 0. 04 5. 51 ± 2. 07* 25 ± 13. 34* 69. 78
注:与溶媒对照组比较，* P ＜ 0. 05
3. 5 热板法检测黄槿醇提物对小鼠痛阈值的影响
结果如表 5 所示，与溶媒对照组比较黄槿醇提取
物各剂量均能显著提高小鼠痛阈值(P ＜ 0. 05)。
表 5 热板法检测黄槿醇提物对小鼠痛阈值
的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 给药前痛阈 / s 给药后痛阈 / s
溶媒对照组 － 16. 21 ± 4. 37 16. 46 ± 1. 67
黄槿醇提取物组 54. 5 17. 19 ± 5. 05 21. 67 ± 6. 34* #
27. 3 17. 21 ± 5. 18 26. 39 ± 5. 93* #
13. 6 17. 19 ± 4. 71 28. 76 ± 17. 09* #
罗通定组 0. 04 16. 46 ± 5. 62 44. 14 ± 14. 43* #
注:与溶媒对照组比较，* P ＜ 0. 05;与给药前痛阈比较，# P ＜
0. 05
3. 6 黄槿醇提物对二甲苯致小鼠耳肿胀的炎症的
影响 结果如表 6 所示，黄槿醇提取物各剂量组耳
廓肿胀度与溶媒对照组比较均可显著降低(P ＜
0. 05)，抑制率最高达 67. 07%。
表 6 黄槿醇提取物对二甲苯致小鼠耳
肿胀的炎症的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 肿胀度 /mg 抑制率 /%
溶媒对照组 － 6. 59 ± 1. 19 －
黄槿醇提取物组 54. 5 5. 23 ± 1. 59* 20. 64
27. 3 2. 17 ± 1. 75＊＊ 67. 07
13. 6 3. 64 ± 2. 16＊＊ 44. 76
醋酸地塞米松组 0. 004 3. 67 ± 1. 75＊＊ 44. 36
注:与溶媒对照组比较，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01
3. 7 黄槿醇提物对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透
性增高的影响 结果如表 7 所示，黄槿醇提取物各
剂量均能显著抑制染料渗入小鼠腹腔(P ＜ 0. 01)。
表 7 黄槿醇提物对醋酸致小鼠腹腔毛细血管
通透性增高的影响(珔x ± s，n =10)
组别 剂量 /(g /kg) 腹腔内渗入染料的 D(λ)值
溶媒对照组 － 0. 63 ± 0. 12
黄槿醇提取物组 54. 5 0. 27 ± 0. 12＊＊
27. 3 0. 19 ± 0. 12＊＊
13. 6 0. 33 ± 0. 21＊＊
醋酸地塞米松组 0. 004 0. 47 ± 0. 17*
注:与溶媒对照组比较，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01
4 讨论
目前国内外对半红树植物黄槿的研究不多见，
对其化学成分研究有报道，但药效作用的研究鲜有
报道。王忠昭等〔3〕从黄槿中分离得到 10 个化合物，
分别为木栓酮、粉蕊黄杨二醇、β-粘霉烯醇、羽扇豆
醇、日耳曼醇、豆甾-4-烯-3-酮、豆甾-4，22-烯-3-酮、
麦角衡-4，6，8(14)，22-四烯-3-酮、β-谷甾醇、豆甾
醇。冯超等〔4〕利用正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色
谱、PTLC 及重结晶等分离手段，首次从黄槿中分离
得 coniferaldehyde、3，4-二羟基苯甲酸甲酯、松脂醇、
丁香脂素、格榄酮、黄芪苷、植醇、胆甾-5-烯-3β，7a-
二醇、胆甾-5-烯-3β，7β-二醇、胆甾醇和 β-胡萝卜苷
等 11 个化合物。Subramanian等〔5〕从黄槿中分离得
槲皮(黄)素和山奈酚。Ｒenato 等〔6〕研究了黄槿花
甲醇取物的化学成分及其在活体内的抗氧化性质、
诱变抗诱变效应。
黄槿的止血作用在传统的民间药用及现代药理
研究中均未见记载。本研究采用经典的药理学实验
方法，小鼠断尾出血时间法和毛细管法、玻片法凝血
时间实验方法直观、简便易行，广泛应用于止血、促
凝血药的初步活性筛选。结果表明，黄槿醇提取物
·0561· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 10 期 2013 年 10 月
各剂量均能明显缩短小鼠出、凝血时间(P ＜ 0. 05)，
表明黄槿醇提物具有一定的止血作用。通过采用醋
酸致小鼠扭体法与热板法 2 个经典疼痛模型，黄槿
醇提取物各剂量均能显著延长醋酸致小鼠疼痛的潜
伏期、减少醋酸致小鼠扭体次数;在热板法试验中，
黄槿醇提取物各剂量给药后痛阈值均较给药前痛阈
值显著提高(P ＜ 0. 05)，表明黄槿醇提物具有一定
的镇痛作用。黄槿醇提物还能明显抑制二甲苯致小
鼠耳肿胀和抑制小鼠腹腔渗入的染料量，与溶煤比
较有显著性差异(P ＜ 0. 05)，表明黄槿醇提取物具
有一定的抗炎作用。
本研究观察了不同浓度的黄槿醇提物的止血和
镇痛作用及抗炎作用，表明黄槿醇提物具有一定的
抗炎止血镇痛作用，这可能为黄槿在临床创伤治疗
中提供理论依据。但黄槿醇提物抗炎止血镇痛的作
用机制尚不明确，发挥药效学作用的有效成分还不
清楚，有待于进一步的研究。
参 考 文 献
［1］张伟伟，刘楠，王俊，等 . 半红树植物黄槿的生态生物学
特征研究［J］. 广西植物，2012，32(2):198-202.
［2］邵长伦，傅秀梅，王长云，等 . 中国红树林资源状况及其
药用调查Ⅲ民间药用与药物研究状况［J］. 中国海洋大
学学报，2009，39(4):712-718.
［3］王忠昭，李俊，唐旭利，等 . 半红树植物黄槿中的三萜和
甾醇成分［J］. 中国天然药物，2011，9(3):191-193.
［4］冯超，李晓明，田敏卿，等 . 药用红树林植物黄槿的化学
成分研究［J］. 海洋科学，2008，32(9):57-60.
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constituents of the fruits of Hibiscus tiliaceus［J］. Current
Seienee，1973，42(21) :770-771.
［6］ Ｒenato Moreira Ｒosa，Maria Ines S，Meleeehi，et al． Antiox-
idant and Antimutagenic Properties of Hibiscus tillaceus
L. Methanolic Extract［J］. Journal of Agricultural and Food
Chemictry，2006，54(19) :7324-7330
收稿日期:2013-05-20
作者简介:黄治官(1980-)，男，博士，讲师，主要从事运动与健康促进等方面研究;E-mail:zhiguan1980 @ 163. com。
宽心解郁汤联合有氧运动抗抑郁效果的实验研究
黄治官1，亓毅飞2，李 承2
(1. 广州体育学院运动与健康系，广东 广州 510500;2. 中山大学药学院，广东 广州 510006)
摘要 目的:观察宽心解郁汤、短期有氧运动及二者联合干预的抗抑郁作用，探讨可能机制。方法:SPF级雄性
昆明小鼠，随机分成空白对照组、丙咪嗪阳性对照组、宽心解郁汤低剂量组(生药 1. 8 g /kg)、宽心解郁汤高剂量组
(生药 3. 6 g /kg)、运动组(游泳 30 min /d)、联合组(宽心解郁汤低剂量联合运动)，干预 8 d;通过强迫游泳、悬尾实
验以及高架十字迷宫实验评价抗抑郁效果;处死小鼠，ELISA 法检测脑组织单胺类神经递质含量，Western blotting
分析脑组织 BDNF表达。结果:宽心解郁汤高剂量表现出与丙咪嗪相似的抗抑郁效果，而低剂量抗抑郁效果不显
著。单独的运动有与丙咪嗪相似或更好的抗抑郁效果。联合组疗效最佳。与空白对照组比较，宽心解郁汤高剂量
组脑组织 NE、DA含量以及运动组脑组织 NE、DA及 5-HT含量显著升高，丙咪嗪组、宽心解郁汤高剂量组、运动组
及联合组脑组织 BDNF蛋白表达显著高于空白对照组，运动组、联合组脑组织 BDNF 蛋白表达高于宽心解郁汤低、
高剂量组，联合组脑组织 BDNF蛋白显著升高。联合组脑组织 NE、DA 及 5-HT 含量显著高于阳性对照组。结论:
适量宽心解郁汤、短期有氧运动以及联合干预对轻度抑郁有显著的抗抑郁疗效，其机制可能与增加脑组织 NE、5-
HT含量，引起脑组织 BDNF蛋白表达增多，进而影响神经再生及可塑性、改善认知功能有关。
关键词 宽心解郁汤;宽心解郁汤联合运动;抗抑郁;行为学测试;单胺类神经递质;BDNF
中图分类号:Ｒ285. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)10-1651-06
Study on Antidepressant Effect of Kuanxinjieyutang Combined
Aerobic Exercise
HUANG Zhi-guan1，QI Yi-fei2，LI Cheng2
(1. Department of Exercise and Health，Guangzhou Institute of Physical Education，Guangzhou 510500，China;2. School of Pharmaceu-
tical Science，Sun Yat-sen Universty，Guangzhou 510006，China)
Abstract Objective:To observe antidepressant effects of Kuanxinjieyutang(KXJYT)，short-term aerobic exercise and their joint
intervention and its possible mechanism. Methods:Ninty-six SPF male KM mice were randomly divided into control group，imipramine，
·1561·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 10 期 2013 年 10 月