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蒙椴树叶中黄酮类成分的提取与分离



全 文 :2003年 7月 内蒙古大学学报 (自然科学版 ) Jul. 2003第 34卷第 4期 Acta Scientiarum Naturalium Univ ersi tati s NeiM ongol Vol. 34 No. 4
  文章编号: 1000- 1638( 2003) 04-0478-02
蒙椴树叶中黄酮类成分的提取与分离①
王静媛 ,田福利
(内蒙古大学化学化工学院 ,呼和浩特 010021)
摘要:新鲜蒙椴树叶 ,用 95%乙醇浸泡提取 ,提取液浓缩后用石油醚萃取 .经 TLC,硅胶柱层
析及紫外光谱检测 ,证明蒙椴树叶中至少含有四种黄酮类化合物 .
关键词: 椴树 ;黄酮类成分 ;提取 ;分离
中图分类号: O656. 22  文献标识码: A
  椴树 ( Ti lia )俗称菩提树 ,生长于北半球温带地区 ,约有 50多种不同种类 .在古代 ,民间就把椴树
的花、皮、根作为药用 .它具有去风湿 ,解痉挛的效果 .在用于缓解焦虑的苯并二氮 药物中 ,椴树中的
一些成分可作该药的配体 ,这在不同的药典中都有报道〔 1〕 .同时 ,椴树还对光肩星天牛有抑制性作用 .
黄酮类化合物是由黄酮体中 C3部分与 C6部分形成六元氧杂环再经氧化而形成 ,如图:
根据 C3部分的成环、氧化和取代方式的差异 ,黄酮体 ( flavonoids)除可形成黄酮类 ( f lav ones)外 ,还可
形成黄酮醇类 ( flavono ls) ,异黄酮类 ( iso flavonoes) ,查尔酮类 (chalcones) ,花青素类 ( anthocyanins)
等 ,以及上述各类的二氢衍生物 .黄酮类化合物具有多种生理功能和较大的药用价值 .近些年来 ,对黄
酮类化合物的生理活性和药物用途正受到广泛的重视 .
1 实验部分
1. 1 仪器和试剂
层析柱 ( 100 cm× 5 cm) ,硅胶 ( 160~ 200目 ) , T LC板 (青岛海洋化工厂生产 ) , UV- 160紫外-
可见分光光度计 ,真空旋转蒸发仪 ,紫光灯 ,玻璃层析缸 ,分液漏斗 ,乙醇 ,石油醚 ,乙酸乙酯 (均为分
析纯 )
1. 2 实验方法
1. 2. 1 黄酮类成分的提取 新鲜的蒙椴树叶 350 g浸泡于 3000 m l 95%乙醇中 ,每次 7 d,共提取三
次 .将提取液蒸干 ,浓缩得浸膏 ,将浸膏用 70%乙醇重新溶解 ,再用石油醚进行萃取 .将石油醚萃取部
分蒸干 ,得石油醚萃取浸膏 .
1. 2. 2 柱层析分离 以 160~ 200目的硅胶进行湿法装柱 ,固定相高度为 80 cm.将石油醚浸膏装于
柱填料上端 ,样品高度为 2 cm.上面再覆盖以 2 cm的硅胶 ,柱上端用滴液漏斗滴入洗脱液 .
1. 2. 3 薄层层析 将柱层析中的各部分洗脱液进行薄层层析检测 .用毛细管点样于硅胶板上 ,在层
① 收稿日期: 2003-01-17基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (批准号: 20162003)作者简介: 王静媛 ( 1979~ ) ,女 ,内蒙古乌兰浩特市人 ,内蒙古大学化学系 2001级硕士研究生 .
析缸中选择不同的溶剂进行展开 ,待溶剂前沿接近薄板上边缘时 ,取出薄板 ,晾干 ,在紫光灯下观察各
类斑点 .
2 结果与讨论
2. 1 提取剂的选择
用 95%乙醇可提取黄酮甙元和黄酮甙 ,得到浸膏后用 70%乙醇再次溶解 ,叶绿素可沉淀出去 ,再
用石油醚提取得到其中的黄酮甙元 .
2. 2 柱层析分离结果
以不同比例的石油醚 ,乙酸乙酯进行梯
度洗脱 ,再经 TLC和紫外光谱进行检查 .结
果柱层析洗脱剂在石油醚 -乙酸乙酯分别为
3∶ 1, 5∶ 1时得到的两组洗脱剂中 ,经 T LC
和紫外光谱检测 ,分别含有两种黄酮类化合
物 .紫外光谱见表 1.
表 1 洗脱液的紫外吸收光谱
Table 1  The absorption peak in ul tra violet spectrum for eluant
洗脱剂
(石油醚 -乙酸乙酯 )
洗脱液
颜色
紫外吸收峰
A环吸收峰 B环吸收峰
3∶ 1 橙黄 260  285 320  348
5∶ 1 浅黄 265  277 314  355
2. 3 薄层层析结果
在薄层层析的展开剂选择为石油醚-乙酸乙酯 -乙醇 ( 30∶ 10∶ 5)时 ,两部分洗脱液在 TLC板上
展开后 ,均呈现两个斑点 ,且 Rf 值各不相同 .说明石油醚 -乙酸乙酯 ( 3∶ 1, 5∶ 1)的两种洗脱液中 ,各
含有两种不同的成分 .再将以上两部分洗脱液经紫外吸收光谱判断 ,结果与 T LC检测相符 .
黄酮类化合物的紫外吸收光谱有两个带组成 . A环部分可看作苯甲酰的衍生物 , B环部分可看作
肉桂酰的衍生物 .黄酮体的紫外光谱也可解析为与上述苯甲酰和肉桂酰相当的两个部分 .产生自肉桂
酰部分的吸收峰称为带Ⅰ 在长波区 ( 300~ 400 nm ) ,而产生自本甲酰部分的吸收峰为带Ⅱ ,在较短波
区 ( 240~ 280 nm ) .在柱层析洗脱液中含有两个 A环吸收和两个 B环吸收 ,说明在该洗脱液中含有两
种黄酮类化合物 ,有待进行进一步的分离 .
参考文献:
[ 1]  Piet ta P G, Mauri P L , Bruno A, et al. Identifica tion o f flav onoids from Ginkgo biloba L. , Anthemis nobilis L.
and Equisetum a rvense L. by high-perfo rmance liquid chr oma to g raphy w ith diode-ar ray UV detection [ J].
Chromatogr. , 1991, 533: 233.
[ 2 ]   Pie rgio Pietta , Pierluigi Mauri. High-perfo rmance liquid chr omato g raph y and micellar elect rokine tic
chr omato g raphy o f flav ono l g ly co sides f rom T ilia [ J].Chromatogr. , 1993, 638: 357.
[ 3] 徐任生 .天然产物化学 [ M ].北京:科学出版社 , 1993. 591.
(责任编委 边占喜 )
Ex tracting and Separating of Flav onoids Cons tituents
in T. M ongolia Leaves
WANG Jing-yuan, T IAN Fu-li
(Department of Chemistry , NeiMongol Univ ersity , Hohhot 010021, PRC )
   Abatract: The f resh leaves of T. Mongo lia w ere soaked in 95% EtOH. The solution w ere
concentra ted first , dissolv ed in 70% EtOH and then ex t racted in pet roleum ether. The ex t racts w as
analysed by column chroma tog raphy and T LC. The resul ts indicated that the leaves of T. M ongolia
contain at least four kinds o f flav onoids consti tuents.
Key words: T. Mongolia; f lav onoids consti tuents; ex t racting; separating
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