全 文 ：药学实践杂志 年 月 日第 卷第 期
， ，
阔叶五层龙根提取物对 糖苷酶抑制活性的研究
原 源 ‘ ， 黄光辉 ’ ， 李 霞、 王 燕 、 孙连 娜 丨 解 放 军 第 医 院 ， 上海 第 二 军 医大学药学 院 ， 上海
福建卫生职业技术学院药学系 ， 福建 福州 】 ； 福建 中医药大学药学院 福建 福州
摘要 目的 研究 阔叶五层龙 根各提取物体 外 糖 苷酶抑 制活性 。 方法 将 阔 叶 五层龙 根 乙醇提取物 依次
用石油醚 、 乙 酸 乙酯 、 正丁醇萃取 ，得 到 个不 同极性 部位 ，并 对 乙醇 总提取物与 个不 同极性部位进 行 葡 萄糖苷酶
和 淀 粉酶体外 抑制活性筛选 。 结果 阔 叶五层 龙根各提取物均具有一定 的 葡 萄糖 苷酶 和 淀粉 酶体外 抑制 活性 ，其
中对 葡萄糖苷酶 的 抑制 活性 大小 ： 正丁醇部位 石 油 醚部 位 乙酸 乙 酯 总提取物 ； 对 淀粉酶 的抑制 活 性大小 ： 石油
醚部位 正丁醇部位 总提取物 乙 酸乙 酯部位 。 结 论 阔 叶五层龙根各 提取物均具有较好 的 糖苷酶 抑制 活性 和很好
的 开发价值 。
关键词 阔叶五层龙 糖苷酶 ； 抑制活性
中 图分类号 文献标志码 文章编号 丨
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；
餐后 高 血糖 症是 型糖 尿病 患者 的 重要 症
状 〃 对 《 糖苷酶的抑制可 以有效缓解 型 糖尿
病病人餐后的高血糖症状 。 阿卡波糖 （ 拜
唐平 ） 、伏格列波糖 （倍欣 ） 等控制 和 调节 糖苷酶
活性的药物已在临 床得到广泛应用 。 但 目前临床应
用的 糖苷酶抑制剂 品种太少 ， 没有更多的选择余
地 ，且阿卡波糖会引起某些不良反应 ， 如 胃肠道不适
气胀 、腹痛 、腹泻 ） 等 。 因此 从 中药或天然产物 中
寻找高效低毒 的 糖苷酶抑 制剂 已 成 为近年国 际
基金项 目 上海市科委资助课题 上海市卫生局局
级科研项 目 （ 年度第 项 ）
作者简 介 原 源 （ ， 女 ， 博士 丨 ， ：
通讯作者 孙 连 娜 ：
研究热点 。
阔 叶五层龙 （
为翅子藤科 （ 五层龙属 （ 植
物 ， 又名海南桫拉木 ， 为攀缘灌木 ， 主要分布于海南
各地 为海南特 有植物 ⑷ 。 阔叶五层龙在 民 间用
其根人药 ，具有通经活 络 、祛风除湿的作用 ， 用于风
湿性关节痛 、腰肌劳损 、 体虚无力 的治疗 。 目前国内
外对该植物的 降血糖作用 已 有少量报道 」 ° ，但 是
主要集中在体 内 的研究 ， 为此 ， 笔者通 过两种 糖
苷酶体外抑制模型 ， 对阔 叶五层龙根不 同极性提取
物进行系统的降糖活性筛选 为进 一步研究与开发
阔叶 五层龙提供依据 。
仪器与材料
仪 器 与 试 药 酶 标 仪 （
1 8 6

药学实践杂志 年 月 日 第 卷第 期
， ， ，
低速离心机 （ 恒温水浴锅 （ 上
海精宏实验 设备 有限公 司 ） ； 硝基 苯 吡喃 葡
萄糖苷 （ 葡 萄糖检测试剂 盒 （ 上海
荣盛生 物技 术有 限公 司 ） ； 阿 卡波糖 （
； 淀 粉酶 （
， ， ；其他试剂均 为分 析
。
实验动 物 雄性 大 鼠 ， 第
二军医大学 实验 动物 中 心 ， 许 可证 号 ： 沪 ）
■
， 等级 清洁级 ） 。
药材 阔 叶五层龙药材采 自 海南省兴隆县 ， 经
第二军医大学生药教研室张汉明教授鉴定为翅子藤
科五层 龙 属 植 物 阔 叶 五 层 龙 （
的 干燥根 ， 标本存放 于第二军 医大学
生药教研室 。
实验方法
阔 叶 五层龙根各提取物 的 制 备 阔 叶五层龙
根粉碎后取 用 倍量 乙醇 回 流提取
次 ， 提取液减压浓缩后 ，取 浓缩至干 ， 即得阔 叶
五层龙根总提取物 。 另 加适量水混悬后 ， 依次
用石油醚 、 乙 酸 乙酯和正丁醇萃取 ， 得到石 油 醚部
位 、 乙酸乙酯萃取部位 、 正丁醇部位 和剩下 的水 部
位 。 取上述得到 的阔 叶五层龙根 种提取物用少量
二 甲亚砜溶解 （ 溶解 ， 用磷酸缓 冲液 （
配成 的供试溶液 ，置 冰箱备用 。
葡 萄 糖 苷酶 活性 测 试 将 大 鼠 禁食
后 ， 断头处死 ， 立即 取 出 上端小 肠 ， 用 预
冷 的生理盐水冲 洗 次 ， 翻转小肠后再 漂洗 ， 将洗
净 的小肠置于冰台 上 ， 用滤纸掖 干小肠上 的 黏液 ，
用载玻 片轻 刮下 小肠黏膜 。 将刮 取物按约 ：
加入 在冰浴上匀浆 ， 离
心 （ 取上清液 （ 即酶液 ） 分装
于 保存备用 。 以 为底物 ， 用 孔细
胞培养板 ， 设 个组 ，分 别为酶 活性对 照组 （ 缓 冲
液 底物 酶液 ） 、 空 白 对照组 （ 缓 冲 液 底物 ） 、
阳性对照组 （ 阿卡波糖 缓冲 液 底物 酶液 ） 、
个样品测定组 （ 样 品 缓 冲液 底 物 酶 液 ） ， 每
组 个复孔 。 操 作方法为 ： 预先往 板孔里加人
… 样品溶液 （ 用 磷酸缓冲液
稀释 ） ， 然后加入 ！ 的 蔗糖溶液
温孵 加入酶提取液 ，样品 的终浓度
为 温孵 加入
终 止 酶 反 应 。 采 用 葡 萄 糖 氧化 酶
法 ， 在 波长下测定 吸光度 （ 样 品对酶活
性 的抑制率 （ ％ 按下式计算 ：
抑制率 （ ％ 活性对照 空 白对照 ）
淀粉酶活性测 试 用 ％ 孔细胞培养板 设
个组 分别 为空 白 对照组 （ 蒸馏 水 ） 、 阳性对照组
阿卡波糖 ） 、 个样品测定组 ， 每组 个复孔 。 操作
方法为 ： 预先往板孔里加人 样品溶液 ， 空 白 对
照组加等量蒸馏水 分别于其 中三个孔加入
淀粉酶溶液 另 三个孔加 蒸馏水 ， 温
孵 然后于每个孔加入 淀粉溶液 ，
温孵 分别于各孔加人 显色试剂终
止反应 ，在 波长下测 定吸光度 （ 吸光度
所反映的是被酶水解 的淀粉的量 ， 直接反映淀粉酶
的活性 。 抑制率 （ ％ 计算公式如下 ：
抑制率 （ ％ 样品不 — 样品加補 ） 乂空 白对照不加
空 白 对照加
结果
阔 叶 五层龙根提取 物 葡 萄 糖苷酶抑制 活
性 在 同一质量浓度 （ 下 ， 将 阳性对 照
药阿卡波糖的抑制率记 为 ， 阔 叶五层龙根不
同 提取物的 正丁醇萃取 物对 葡萄糖苷酶 的抑制
作用最强 ， 抑制率达 到 ； 其次 ， 石 油醚萃
取 物 也 表 现 出 较 强 的 抑 制 作 用 ， 抑 制 率 为
这两 种提 取物 的抑 制活性都 高 于 阳性
对照阿卡波 糖 （ 组 。 阔叶 五层 龙根 个
不同提 取物 葡萄 糖苷 酶 的抑 制 活性 大 小依 次
为 ： 正丁醇 部位 石油 醚部位 乙 酸 乙 酯 总提
取物 ， 结果见表 。
表 阔叶五层龙根不 同提取物对 葡萄糖
苷酶的抑制活性
名称 浓度 （ 抑制率 （ ％
总提取物
石油醚部位
乙 酸乙酯部位
正丁醇部位
水部位
阿卡波糖
阔 叶 五层龙根提取物 淀粉酶抑制 活性 在
同一质量浓度 （ 下 ， 将 阳性对 照药 阿卡
波糖的抑制率记 为 阔叶五层龙根不 同提取
物对 淀粉酶具有一定的 的抑制活性 ， 各溶剂提取
物对 淀粉酶抑 制 活性大小依 次为 ： 石油 醚部位
正 丁 醇 部 位 （ 总 提 取 物
乙酸乙酯部位 （ ， 结果见表 。
可见阔叶五层龙不 同溶媒提取物对 淀粉酶抑制
活性有一定 的差别 。 （ 下转 第 页 ）
药学实践杂志 年 月 日第 卷第 期
提 高 药 品余液 的监 管力 度 严 防 药 品使 用 漏 洞
加大麻醉药品和精神药品余液的 回收 、处置力度
建立有效监控措施 ， 防止因药品余液监管不力而导
致的药品流失隐患 。 具体的做法包括建立完善的实
验室记录 ，要求详细注 明药品的使用种类和数量 ； 规
范麻醉药品和精神药品 残余量处置记 录 并要求上
述两个记录在特殊药 品的使用种类和数量上能统一
一致 。 另外 ， 实验室 回 收和销毁麻醉药品应 由 两人
共同完成 ， 并及时在记录上双签名备案 。
采 用信息 化手段 ，提升麻醉药 品 和精神 药 品管
理效率 采用信息化方式管理药 品 已是比较成熟的
管理手段 。 目 前各级医疗机构对麻醉药品和精神药
品的管理大都采用计算 机化管理 ， 这种管理手段可
以直观地了解到特殊管理药品在本医疗机构 内 流转
的顺序 、位置等详 细信息 ， 减少人员 的工作量 ， 显著
提升管理的准确性 ， 而且采用信息化 的管理手段也
可有效杜绝麻醉药品 和精神药品 管理的 漏洞 ， 提高
管理的效率 。 实验室也可以借鉴医疗机构麻醉药品
和精神药品 的计算机管理经验和方法 ，结合实验室
药品使用的特点 和流程 ， 开发 出一套科学规范的药
品管理程序 ，并在程序运行过程中 根据实际情况不
断调整程序 ， 以建立完善的信息化管理药 品的制度 。
结语
麻醉药品管理和精神药品管理是一项长期而细
致的工作 ， 要使得实验室麻醉药 品和精神药 品 的管
理和使用 步人科 学化 、 规范化 的 道路 ， 采用专 人管
理 ， 对实验室人员定期进行安全管理的教育 ，不断加
大检查和监督力度 ， 引人信息化手段提 高管理效率
等做法尤为重要 。 可见 ， 只有通过实验室人员 在实
践中探索新方法 、新措施 才能把把麻醉药品 、第一
类精神药品的管理工作推向一个新高度 。
【 参考文献 】
吴 蓬 杨世 明 药事管理学 第 版 北京 ： 人民卫生出
版社
收稿 日 期
修回 日 期
上接第 页 ）
表 阔叶五层龙根不 同提取物对 淀粉酶 的
抑 制活性 （ 《
名称 浓度 （ 抑制率 （ ％
乙醇提取物
石 油醚萃部位
乙 酸乙酯部位
正 丁醇部位
水部位
阿卡波糖
小结
上述实验研究表明阔叶五层龙根总提取物具有
一定的 《 葡萄糖苷酶和 《 淀粉酶抑制活性 。 同时 四
个不同极性的萃取部位的酶抑制活性筛选结果显示 ，
正丁醇部位和石油醚部位对 葡萄糖苷酶和 淀粉
酶都表现 出较强的抑制作用 ， 乙 酸乙酯部位对 葡
萄糖若酶也表现出部分抑制作用 。 因此 ， 结合两种体
外 糖苦酶抑制活性研究 ， 初步 明确 阔 叶五层龙根
的活性部位是正丁醇部位 、石油醚部位及 乙酸乙酯部
位 ， 为下一步活性成分的分离提供参考 并为进一步
阐明阔叶五层龙根的药效物质基础奠定基础 。
【参考文献 】
， ：
：
，
中国科学院中 国植物志编辑委员会 中国 植物志 第
卷 ， 北京 科学出 版社 ， ：
广东省植 物研 究所 海南 植物 志 北京 ： 科学 出 版 社 ，
郭 澄 ， 张 纯 国外植物药治疗祷 尿病的研究进展 国
外医学 ： 中医 中药分册 ， ， ：
袁干军 田 育望 王志琪 阔叶五层龙根 乙醇提取物的降血糖
作用 中药新药与 临床药理 ， 〉
收稿 日 期
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