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地锦草抗氧化作用及对肾缺血再灌注损伤保护作用的实验研究



全 文 :中国中医药科技 1熨刃 年第 6卷 1期
地饰草杭氧亿作 用及对肾缺血再灌注
损仿保 护作 用 的实脸研 究
张振涛 吴仁奇 张 威 ` 张 娟 2
(内蒙古 医学院 ·呼和浩特 1 0X ) (59 1保定第一中医院 ·保定 7 01口汉 ) 2解放军 5 2 2医院 ·保定 7 01 1) 0
地锦草为常用中药材 ,也是一种蒙药材川 (蒙文名
为马拉根一扎拉一乌布斯 ) 。 它是大戟科植物地锦
( E叩 ha hit an ll叨西坦 a l以记 )的干燥全草 , 具有清热解毒 、
活血 、 止血 、 利湿通乳等功效川 。 本文以小鼠肝组织匀
浆为实验对象 ,观察 了地锦草抗氧自由基的作用 。 同
时建立了大鼠肾缺血再灌注损伤模型 ,观察了地锦草
对肾缺血再灌注后血中 MD A 、 SOD 以及肾组积中 aN + ,
K
十 一 A飞P 醉和 aCz 十 一 ATp 活性的影响 ,研究了其对肾
缺血再灌注损伤的保护作用 。
i 实脸材料
1
.
1 动物 W询段 大鼠 ,体重 乃。 土 50 9 . 昆明种小 鼠 ,
体重 25 土 59 ,内蒙古大学实验动物中心提供 。
1
.
2 试荆 地锦草注射液 ( .0 5岁L 自制 ) , MD A 、 , 〕D及
人T P酶试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品 。
1
.
3 仪器 岛津琳 一 540 荧光分光光度计 , 岛津 VU -
120
一 工分光光度计
2 方法与结果
2
.
1 地佛草对丙二醛 ( MD A )的抑制率 小 鼠断头处
死 ,立即取肝脏 ,用 4℃生理盐水静脉灌注至黄褐色 , 同
磷酸缓冲液 ( PH 二 7 . 21 )配成 20岁 L 肝匀浆 , 取肝匀浆
0
.
1而分别加人地锦草溶液 0 . 1、 0 . 2 、 0 . 5 、 1 . O lnI 中 ,用生
理盐水稀释至 10 n d , 37 ℃恒温水浴振荡 hl ,用荧光光度
计测定荧光强度31[ 。 结果见表 1。
表 1 地锦草对 MDA 的抑制率
浓度 (尸L
0
0
.加 5
0
.
0 10
0
.工 5
0
. 饭巧心
荧光强度 ( F ) 抑制率 ( %
89
.
4 土 6 . 5
5 8
.
5 士 7 . 1 34
.
6
月6 . 2 士 4 . 5 48 . 3
28
.
3 土 6 . 6 68
.
4
10
.
1 士 2 . 4 8
.
7
.2 2 地饰草对份 的影响 25 ℃取地锦草 .0 5 d , 加人
磷酸缓冲液 s d (PH 二 8 . 30 )及 50矛止邻苯三酚 ( 5伽址加F
功 。 迅速摇匀 , 以生理盐水为对照组 , 每隔 30 5 测定
325 nx 的吸收值闭 。 结果见表 2o
表 2 地锦草对份 ·的抑制作用
组别 不同时间的吸收值
对照组
药物组
0
.
6 1 1 土 0 0 15
0
.
1仍 土 0 . 0 1 1“
0
.
8肠 士 0 .工1
0
.
27 4 士 0 .旧3 .
12叱
1
.
173 土 .0
O
`
O月石士 0
仍 5
03 1
2 4( 万
1
.
46 1
土 0 .
0
.
57 2 土 0 .
0 14
0 3 2
3以】S
1 7 89 土 0
.
0
.印 4 士 0 .
0 2 5
O邓
0
, .且,占J立.1
与对照组 比较 , P < 0 .仍 , “ P < 0 . 01
2
.
3 地娜草对大鼠肾缺血再灌注血中加姚及别l ) 的影响
大鼠随机分为 4 组 , 手术对照组 、 肾缺血组 :乌拉坦
( 1岁掩)腹腔注射 ,麻碎后 ,腹部切开 ,切除右侧肾脏 , 以
无损伤血管夹钳闭左肾 以玩五n 。 肾缺血再灌注组 :钳闭
印而 n 后 ,恢复肾血循环 30m in 。 药物组 :术前 30 n血 腹
腔注射地锦草 (0 . 5岁吨) 。 上述 4 组在手术结束后 ,分别
下腔静脉取血 ,测定 MDA含量及 吸兀)活性 。 结果见表 3o
表 3 对大鼠肾缺血再描注血中砚从含量及 S O D活性的影响
组 别 n MDA 白川宙L ) SO D ( NU/ 而 )
正常对照组 10 4 . 5 土 1 . 1 1 19 土 15
缺血组 10 4 . 8 士 0 . 8 1 10 士 19
缺血再灌注组 10 11 . 6 土 2 . 5 . 92 士 16 份
药物组 10 5 . 7 土 1 . 6 0 1 12 土 2 1△
, 与正常对照相比较 P < 0 . 01 △与再灌注组 比较 P < 0 . 01
2
,
4 地锦草对大鼠肾组织中 aN 十 , k 十 一 幻 r 酶和 aCz `
一 尤 IP 酶活性的影响 按 2 . 3 实验方法 , 手术后切除大
鼠左肾 , 4℃生量盐水冲净 ,拭干 。 称取 。 . 59 制成 2% 的
组织匀浆 ,测定 aN + 、 +k 一 A TP 酶和 C扩` 一 A IP 酶活
性 。 结果见表 4 。
表 4 对大鼠肾组织中 aN 十 、 k 十 - 人TP酶活性
及 C a Z 十 一 A T P酶活性的影响
组别
正常对照组
缺血组
再灌注组
药物组
Na
+ 、
k
+
一 人〕P 酶
C a平干 一 AI P 酶
(扭 l d p议昭 . rP . h)
4
.
6 士 1 . 1
4
.
0 士 1 . 3
2
.
3 土 0 . 7 .
3
.
8 土 1 . 3△
5
.
7 土 1 . 6
5二 1 士 1 . 9
3
.
0 士 0 . 9 .
4
.
9 上 1 . 1。
与正常对照组 , p < 。 . 01 , 与缺血再灌注组△ p < 。 . 01
3 讨论 根据 自由基生物医学理论 ,缺血再灌注与氧
1熨尧 )年第 6卷 1期 中国中医药科技
. 净
自由基关系密切 [5, 6〕。 为防止或减轻氧自由基的损伤 ,
需要合适的抗氧化剂 。 由于化学合成制品大多有毒副
作用 ,因此从天然植物 中寻找低毒或无毒的抗氧化有
效成分 ,其意义重大 。 本文通过对地锦草抗氧化作用
的实验发现 ,其对小鼠肝匀浆 MD A 的抑制作用明显 ( p
< 。 . 01 ) ,当浓度为 0 . 05 扩L 时 ,抑制率 8 . 7% 。 对邻苯
三酚产生的街 有明显的清除 、 抑制作用 。 由此提示 :
地锦草是一种较强的抗氧化植物 。
肾急性缺血性损伤在临床上较为常见 , 目前也是
巫待解决的问题。 一些研究者提出通过使用一些抗氧
化剂 ,加以解决图 。 本文通过建立大鼠肾缺血再灌注
模型 ,观察了地锦草对肾缺血再灌注后 M D A 及 SOD 的
活性变化的影响 。 结果表明 ,使用地锦草后 , 与单纯肾
缺血再灌注组比较 , MD A 含量明显下降 , S OD 活性显著
增强 。 由此可以说明 ,地锦草可抑制体内脂质过氧化 ,
减轻肾功能损伤 。 肾小管基膜内侧膜内有 N+a , +k -
左作酶 ,其主要作用是将细胞内 Na + 泵出 ,及细胞外 K 十
泵人 ,维持机体内环境的稳定 。 口 + 一 Al r 酶的作用亦
为保持细胞内 C a异+ 的适当浓度 。 当肾缺血再灌注损伤
时 , 由于 Na + , +k 一 Al r 酶及 C矛干 一 AT P 醉的活性降
低 , 导致 Na ` 、 aCz ` 浓度的升高 , k ` 的减少 ,从而引起蛋
白 、 磷脂水解 ,游离脂肪酸释放 , 由此引起细胞膜破坏 ,
造成肾组织的损伤 sj[ 。 本文通过使用地锦草后发现 ,
aN
十 , k + 一 AT P酶及 aCz + 一 A TP酶的活性较单纯缺血再
灌注组酶的活性均有显著提高 ,说明地锦草能抑制肾
缺血再灌注时引起的肾功能损伤 。
目前在研究肾缺血再灌注损伤保护时 , 多使用一
些西药 ,由于其毒副作用 ,往往难以付诸实际应用 。 地
锦草为中医常用药物 ,毒副作用很小 ,因此地锦草对肾
缺血再灌注的保护作用有望在临床上推广使用 。
参考文献
l 内蒙古自治区卫生厅 . 内蒙古药材标准 . 赤峰 : 内蒙古科
学技术出版社 , 19 87月月)2
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197 9 鑫8 27
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S G先即 J . et d . 苟山班 y ntI l卯3 ; 43 : 1 印
( 1卯8年 6 月 7 日收稿 )
灯盆花注 射液治 疗心截痛 4 5 例 疗致魂秦
邹烈环 陈 惠 ,
(乌手木齐市中医 院 ·乌香木齐 83[ 口刃 I新接 自治 区三建医院 ·乌香木齐 8 3X() X() )

1 一般资料 按 1叨 9年 W HO 颁布的冠心病诊断标准 , 选择
冠心病心绞痛患者 45 例 ,其中劳力性心纹痛 30 例 , 自发性心绞
痛 10 例 , 混合型 5例 , 男性 25 例 , 女性 20 例 ;最小年龄 4 岁 ,
最大年龄 76 岁 。
2 治疗方法 予血常规 、血脂 、 血流变检查后 , 停用硝酸甘油
等扩血管药物 ,停用 p受体阻滞剂 、钙拮抗剂 、血管转换酶抑制
剂 、调脂及抗凝药物 ,仅予灯盏花注射液 20 d 加人 5% 葡萄糖
注射液 玺刃 d 中 ,静脉点滴每 dl 次 , 个别疗效不明显者可予每
d2 次 , 15 d为 1疗程 , 2 个疗程后予以各项指标复查 。
3 治疗结果
3
.
1 疗效标准 显效 : 经治疗后 心绞痛完全解除 ;或程度明显
减轻 , 发作次数减少 85 % 以上 , 运动实验为阴性 , 12 导联静息
心电图缺血型 卿段压低消失 , 或压低值的和减少 85 % 以上 。
有效 :治疗后心绞痛程度有所减轻 , 发作次数减少 50 % 以上 , 运
动实验虽仍为阳性 ,但心电 图中 ,心肌缺血程度减轻 , 12 导联静
息心电图 盯段压低值的和减少 父% 以上 。 无效 :治疗后心绞
痛无明显改善 , 运动实验仍为阳性 , 心电图无改善 。
3
.
2 治疗效果 显效者 25 例 , 占 56 % , 有效者 18 例 , 占 40 % ,
无效者 2 例 , 占 4% , 总有效率达肠% ; 复查各项化验指标 : 血
常规无明显变化 , 血脂粘度均有不同程度降低 。
4 体会 灯盏花注射液是从云南产中草药灯盏花中提炼加工
制成的 , 主要起活血通络作用 ,同时亦可轻微扩张血 管 , 而心绞
痛患者多为冠状动脉粥样硬化所致冠脉狭窄 , 血流不畅 , 以致
心肌缺血 , 缺氧导致 。 灯盏花活血通络及扩张血管的作用 , 可
改善局部循环 ,解除心 肌缺血缺氧状况 , 达到治疗心绞痛的 目
的 。
( 19更) 年 3 月 16 日收稿 )