全 文 ：·54· Chinese Journal of Information on TCM Apr.2005 Vol.12 No.4
正交试验法优选地锦草的提取工艺
李肖玲,崔 岚,祝德秋
(上海第二医科大学附属仁济医院临床药学实验室,上海 200001)
摘要：目的 研究地锦草中没食子酸的最佳提取条件。方法 采用正交试验法,以加水量(A)、提取时间(B)
和提取次数(C)为研究因素,每个因素选取 3 个水平进行实验。结果 因素 B 和 C 对没食子酸含量有显著影响；因
素 A 则无显著性差异。结论 最佳工艺为 30 倍量的水煎煮 3 次,每次 2 h。
关键词：正交试验法；地锦草；没食子酸；提取工艺
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2005)04-0054-02
Orthogonal Test for Optimization of Extracting Procedure to Gallic Acid from Dijincao LI Xiao-ling,
CUI Lan, ZHU De-qiu (Dept. of Clinical Pharmacy, Renji Hospital of SSMU, Shanghai 200001,China)
Abstract：Objective To select the optimal extracting procedure for gallic acid from Dijincao. Methods A
orthogonal test method was used, the aquavolume, extraction times and extraction time were the three
factors in the experiment. Each of them was tested at three levels. Results B and C were the significant
factor, while A is the inefficient factor to the extracting procedure. Conclusion The optimal extracting
procedure was extracting third times by using thirty times of aqua, two hours once.
Key words：orthogonal test；Dijincao；gallic acid；extracting procedure
地锦草又名血见愁,系大戟科双子叶 1 年生草本植物。全
草入药,具有清热解毒、凉血止血等功效。地锦草主要含有黄
酮类、没食子酸、鞣质等化学成分,其鲜汁、水煎剂、醇提液
均有抗菌作用[1-2]。已有大量的研究表明,没食子酸具有抗肿
瘤、抗炎、抗病毒等生物学活性。为研究地锦草中没食子酸
提取的最适宜条件,我们以没食子酸为考察指标,采用正交试
验法,在实验设计范围内筛选出了最佳工艺。
1 仪器和试药
仪器：高效液相色谱仪(美国 Waters Breeze 系列,2487
双波长紫外检测器,1525 型高压双泵)；AE240 型电子天平(瑞
士 METTLER)。
试药：地锦草药材、没食子酸对照品均购自中国药品生
物制品检定所。乙腈为色谱纯；水为重蒸水；其它试剂均为
分析纯。
2 方法与结果
2.1 正交试验设计
根据没食子酸的理化性质,确定加水量(A)、提取时间
(B)、提取次数(C)为考察因素,每个因素设立 3 个水平(见表
1)。采用 L9(34)正交设计表,以没食子酸含量为指标进行试验
(n =3),测定结果取其平均值供统计分析用。
表 1 正交试验因素水平表
因 素 水平
A(倍) B(h) C(次数)
1 10 0.5 1
2 20 1 2
3 30 2 3
2.2 试验方法
2.2.1 色谱条件 色谱柱：Hypersil BDS C18(5 μm,4.6 mm
×150 mm)；流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液(5∶95,v/v)；流
速：1.0 mL/min；柱温：40 ℃；检测波长：272 nm；进样
20 μL；灵敏度 0.02 AUFS。
2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对照品 14.4
mg,置100 mL量瓶中,加水使之溶解并稀释至刻度,摇匀,作为
储备液。
2.2.3 标准曲线的绘制 精密吸取上述储备液 0.5、1、2、
3、4 mL,用水定容至 10 mL,制成浓度分别为 7.2、14.4、28.8、
43.2、57.6 μg/mL 的对照品溶液。精密吸取各对照品溶液
20 μL,分别进样测定 2 次,记录色谱图。以平均峰面积对浓
度进行回归,得一直线方程：Y =68400X -39700,r =0.99994；
即没食子酸浓度在 7.2～57.6 μg/mL 范围内,与峰面积呈良
好的线性关系。
2.2.4 样品溶液的制备与测定 取地锦草药材粗粉过 60 目
筛,精密称取 9 份,每份 10 g,按 L9(34)组合试验条件进行提
取,合并滤液,用 0.45 μm 微孔滤膜过滤,取滤液进行测定。
2.3 结果
将正交设计试验结果进行方差分析,结果表明：因素 B
和 C 有显著性差异；而因素 A 则无显著性差异,程度依次为
B>C>A。表明各因素的最佳水平为 A3B3C3,即加 30 倍量的水,
煎煮 3 次,每次 2 h(见表 2)。
表 2 方差分析表
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F P
A 0.0054 2 0.002708 1.29 >0.05
B 0.5277 2 0.263869 125.73 <0.05
C 0.0863 2 0.043166 20.57 <0.05
误差(D) 0.0042 2 0.002099
3 讨论
没食子酸是地锦草的有效成分之一,以其含量为指标可
确定提取工艺的优劣。采用正交设计对其提取工艺筛选了最
2005 年 4 月第 12 卷第 4 期 中国中医药信息杂志 ·55·
萸黄连不同炮制方法对其小檗碱含量的影响
徐运安 1,徐爱良 2,蒋孟良 2,陈卫红 3,谢 玲 2
(1.湘潭市第二人民医院,湖南 湘潭 411100；2.湖南中医学院,湖南 长沙 410007；
3.湖南中医学院第二附属医院,湖南 长沙 410005)
摘要：目的 探讨不同炮制方法对萸黄连中小檗碱含量的影响。方法 采用薄层扫描法测定 4 种炮制品中小
檗碱的含量,以小檗碱的含量高低来评价炮制方法的优劣。结果 以微波法炮制出的萸黄连中小檗碱含量最高。结
论 用微波法炮制萸黄连最好。
关键词：萸黄连；中药炮制；小檗碱；含量测定
中图分类号：R283.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2005)04-0055-02
The Effects of Preparing Procedure for Crude Herbs on the Berberine Content in Yuhuanglian XU
Yun-an1, XU Ai-liang2, JIANG Meng-liang2, et al (1.The Second Peoples Hospital of Xiangtan, Xiangtan 411100, China；
2.Hunan College of TCM, Changsha 410007, China)
Abstract：Objective To investigate the effects of preparing procedure for the crude herbs on the
berberine content of Yuhuanglian. Methods TLC was taken to determine the content of berberine in
4 kinds of Yuhuanglian sample prepared with different procedures. The content of berberine was
taken as the standard for the evaluation on the superiority of preparing procedures. Results The
berberine content was the highest in the Yuhuanglian sample prepared by the procedure with
microwaves. Conclusion The preparing procedure with microwaves is the best way to prepare the
crude Yuhuanglian.
Key words：Yuhuanglian；preparing procedure；berberine；content determination
黄连始载于《神农本草经》,列为上品；具有清热燥湿、
泻火解毒之功效[1]。黄连的炮制方法很多,常见的有酒炙、姜
汁炙、吴茱萸汁炙；用吴茱萸汁炮制黄连的方法又有加吴茱
萸汁拌炒、加吴茱萸汁拌烘、加吴茱萸汁煮。随着新设备的
出现及新技术的应用,又出现了微波法。笔者以小檗碱含量为
指标,比较了灸法、煮法、烘法、微波法 4 种不同炮制方法的
优劣。现报道如下。
1 实验材料
1.1 仪器
双波长薄层扫描分析仪：CS-930 型(日本 Shimadzu)；电
子分析天平：AR1140 型(奥豪撕国际贸易上海有限公司)；电
热恒温水浴锅：DK-S22 型(上海精宏实验设备有限公司)；电
热鼓风干燥箱：CS101-2AB 型(重庆试验设备厂)；微量进样
器：10 μL(上海注射器三厂)。
1.2 药品与试剂
黄连购于湖南中医学院第二附属医院,经蒋孟良教授鉴
定为毛茛科植物黄连 Coptis chinensis Franch 的干燥根茎；
吴茱萸购于湖南中医学院杏林药店,经鉴定为芸香科植物吴
茱萸 Evodia rutaecarpa (Juss.) Benth.的干燥近成熟果实。
盐酸小檗碱购于中国药品生物制品检定所。其它化学试剂均
为分析纯。
2 方法与结果
2.1 吴茱萸汁的制备
称取吴茱萸 20 g,加 160 mL 水浸泡 1 h,煮沸 40 min,滤
过,药渣再加 140 mL 水煮沸 30 min,滤过。合并滤液,水浴上
浓缩至 100 mL,备用。1 mL 吴茱萸汁相当于 0.2 g 吴茱萸。
2.2 4 种炮制品的炮制
2.2.1 炙法 称取黄连饮片 20 g,加 10 mL 吴茱萸汁,拌匀,
润透,置锅内,文火炒干[2](用迅达牌燃气灶,2 圈火苗,火苗长
度 5～10 mm,时间 3 min)。
2.2.2 煮法 称取黄连饮片 20 g,加未浓缩的吴茱萸汁 16
mL(相当 2 g 吴茱萸)、水 10 mL,拌匀,置锅内,用文火煮干[3]。
2.2.3 烘法 称取黄连饮片 20 g,加 10 mL 吴茱萸汁,拌匀,
润透,置电热鼓风干燥箱中(75～80 ℃)烘干[4]。
2.2.4 微波法 称取黄连饮片 20 g,加 10 mL 吴茱萸汁,拌
匀,润透,置格兰氏微波炉中(80%的微波)加热 3 min。
以上吴茱萸的用量均为黄连重量的 10%。
2.3 供试品溶液的制备
2.3.1 标准品溶液的制备 精密称取盐酸小檗碱 5.12 mg,
置 5 mL 容量瓶中,加甲醇溶解至刻度,摇匀备用(浓度为

佳条件,即样品药材中加入 30 倍量的水,煎煮 3 次,每次 2 h,
测得没食子酸含量可达 0.138%。
参考文献：
[1] 黄泰康.常用中药成分与药理手册[M].北京：中国医药科技出版社,
1994.803－805.
[2] 李荣芷,何云庆,刘 虎,等.地锦草化学成分的研究.北京医学院学报,
1983,15(增刊)：72－74.
(收稿日期：2004-06-29)