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铁包金按摩膏中铁包金超微粉与饮片质量对比研究



全 文 :世界中 医药 20 1 5 年 1 1 月 第 10 卷第 丨 1 期 . 1 77 1 .
中 药 研 堯
铁包金按摩膏 中铁包金超微粉与饮片质量对 比研究
蔡 萍 ' . 2 李跃辉 U 2 肖 娟 1 ’ 2 万 丹 1戎 宽 1 匡建军 3
( 1 湖南省中 医药研究院中药研究所 , 长沙 ,4 1 00 1 3 ;2 杨 永华全 国名老中医药专家传承工作室 ,
长沙 ,4 1 00 1 3 ; 3 湖南省中 医药研究院附属医院 , 长沙 , 4 1 0006 )
摘要 目 的 : 采用 HPLC 建立铁 包金按摩膏 中铁 包金中 大黄素 、 大黄酚和 大黄 素甲 醚的含量测定方 法 ,比 较铁 包金超微粉
与 饮片 中上述 3 种成分的 含量 。 方法 : Hyp e rs i l0 1 8柱 ( 25 0mmx 4 .6mm , 5 (xm ) ; 流动相 : 甲醇 - 0 .2% 甲酸水溶液 , 梯度洗


流速 : 1 . 〇mL/m in ; 检测 波 长 : 2 90nm ; 柱 温 : 2 5T : 。 结 果 : 大黄素 、 大黄 酚和 大 黄素 甲醚 的 线性 范 围 分 别 为 1 . 1 3 ? 5 丨

jig/mU r2= 0 . 9999 ) 、 1 . 27 ̄ 5 7pg/mL ( r2= 0 . 9 995 ) 和2 . 22? 40f ju g/ mU r2= 0. 9 998 ) , 加样 回 收 率分 另 i j为9 9 . 58% 、
99. 47% 和 99 .27% , 值分 别 为 1 . 丨 8% 、 1 . 49% 和 1 . 52% 。 结论 : 该方法灵敏度 高 ,精 密度好 , 对比超微粉末与 饮 片 中 3
种成 分含量发现 ,在相 同提取方法 中 ,超微粉 中 3 种成 分含量明 显 高 于饮 片 ,超微粉技术可提高铁 包金中 3 种化 学成分的
提取率 。
关键词 铁包金 ;超微粉 ; HPLC 法 ; 大黄素 ; 大黄酚 ;大黄素 甲醚
Qual ityCompa ri sonbetw ee nSubm ic ro nPowde ra ndSl ices in Ber chem iaL i nea taMa ssag eC ream
Ca iP i ng

, '
,L iYaoh u i

, '
 ,X iaoJuan 1 -2 ,WanDa n 1 ' 2 ,RongKuang 1 ,Kuan gJ i anju n3
( 1In sti tu teofCh ines eMa teriaMedia ,Hu nanAcademyofTradit ionalChinese Medic ine(TCM ) ,HunanChangsha4 1 00 1 3 ,
China ;2 Inh eritanceSt udioofYangYong-kua ,HunanChangsh a ,4 \ 00 1 3 ,Chi na ; 3The Affil iat edHospi tal
of Huna nAcademy ofChinese Medic in e ,Changs ha4 1 00 06 ,Ch ina )
Abs trac tObject i ve : U s ingHPLC tod e term i net hecon tent sofemod in ,c h rys oph anol ,an d phy sc i oninB erc hem iaL ineata ,wh ich
w asus ed toproduceb erch emial inea tama ss agecream ,an dtoc omparet hehe ex t rac t ionrate sof thesethre ecom ponen tsi nthe
be rchemia l i neat as ubmi c ronpo wdera ndsl ices .Methods :U s ingC 1 8 co lum n( 250 mm x 4 . 6mm ,5 (jim ),revers eHPLC ,mob i l e
phase :wat erwit h0 . 2 %formicac id ,ethan ol .Gradi ente lu ti onsys tem weremadei n thi smethond .F lowve loc i t y : 1 . 0mL/m in .
C ol umn tempe ra ture :25
°C .De t e rm inew ave length :290nm .Resu l ts :Th e l i nearrangeofEmod i n ,ch rys ophano l ,an dphysc io n
i nberchemialineataare1 . 1 3? 5 1(xg/ml ( r
2= 0 . 999 9 ) , 1 . 27 ̄5 7|xg/ml ( r
2= 0 ?9995 )and2 . 22? 40 j jug/m l( r
2= 0 ? 999
8 )resp ective l y .The stand ard recoveryofem od in , chrysop han ol ,andphysci ona re 1 00 . 6 7%wit h/?SZ) 1 . 59% , 99 .72%w i th
RSD1 . 20%and 1 00 . 29%w i t hRSD1 . 09% res pec t i v ely .Conc l us ion :Thisme thod hash ighaccuracyandsens i t i vi ty .A l so ,un ?
d ert he sameext rac t ionm et hod ,th eco n ten tsoft hreecompon ents in su bmic ronpowde rareobvi ousl yhi gher th ant hose in the
sl ices
,m ea n ing tha tult ra st ru c t u re -powde rt echn iq uec ould i mprovet heex trac ti oneffic i enc y o f t hese threecomp onents .
KeyW ord sBerchem iaLin eata ;Subm i c ronpowde r ;HPLC ;Emodi n ;Chrys ophan o l ;Ph ys c ion
中图 分类号 : R2 84 . 2文献标识码 : Adoi  : 1 0 . 396 9/ j .  iss n. 1 67 3- 72 02 . 20 1 5 . 1 1 . 036
超微粉 U _3 ]是指平均粒径在 1 ̄ 75pm 之间的颗黄 、生川乌 、 生草乌 、木瓜 、 白芷 、木鳖子 、三棱 、莪术
粒 ,它兴起于 80 年代 ,是一 门跨学科 、跨行业的高新等 2 3 味中药精制而成 。 具有活血化瘀 、 通络止痛的
技术 。 该技术被引入 中草药加工领域 , 使药材细胞功效 ,铁包金 [ 8 ] 作 为君药主要含有黄酮类W 、苯 酚
破壁率达 90% 以上 , 形成微米 、 纳米级 中草药 。 由类 [ 1 ° ] 、蒽醌类 [ " ] 、萜类 [ 12 ] 、木脂素类等成分 。 其 中
于粒径的 比表面积增加 , 能 大大提高 中草药 中有效蒽醌类成分主要 包含大黄素 、 大黄酚 和大黄 素 甲
成分的溶 出率 [ 4乂提高 中草药利用率 , 减少 中草药醚 [? ,徐煜纯W等首次采用 HPLC 测定了壮药铁包
资源的浪 费 [ W ] 。 铁包金按摩膏 主要 由铁包金 、 大金 中大黄酚和大黄素质量分数 , 发现细叶勾儿茶根 、
基金项 目
: 湖南省中药管理局项 目 ( 编号 = 20 1 3 1 33 )
作 者简介 : 蔡萍 ( 1 975 . 7— ) , 女 ,硕士研究生 , 副研究员 , 研究方向 : 中药制剂及质量标准研究 , E -ma i l : 3 3 034 3348@q q. com
通 信作者 : 匡建 军 ( 1的3 . 4— ) , 男 , 博士研究 生 , 研究员 , 副院长 , 研究方 向 : 中 西结合对 脊柱骨关节病 的防治与研究 , E - ma i 丨 : 973 54 丨4 1 1 @
qq . com
?1 772 ?WORLDCHINESEMED IC INENovember. 20 15 , Vol . 10 , No .1 1
茎 中蒽醌类成分的质量分数差异具有统计学意义40min , 85% ̄ 100%A ) ;流速为 1 . 0miymin ; 柱温

P < 0 . 05 ) 。 研究表 明 [ 1 | ] 大黄素和大黄酚对 D2 半为 25 丈 ;检测波长 290rnn ;进样量 : 1 0 斗 ;分析时间
乳糖胺诱导 的 WB—F344 大鼠肝表皮细胞毒性有一 为 40m in 。 色谱图见图 1 。
定保护作用 ,且二者具有清除氧 自 由基的作用 ,是铁2. 2 对照品制备及标准曲 线绘制 精密称取大黄
包金能够起到抗肿瘤 、 肺结核咯血和黄疸型肝炎等素 、大黄酚和大黄素 甲醚适量 ,置于容量瓶中 , 加 甲
治疗作用的有效成分之一。 大黄素 甲醚具有很强的醇溶解并稀释到刻度 ,摇匀 。 大黄素 、大黄酚和大黄
抗炎作用 。 Lee [ 15 ] 等研究发现大黄素 甲 醚能够抑制素甲醚浓度分别为 1〇2pg/mU l W fjug/mL 、 40pg/
核因子激活内毒素细胞和促分裂原激活蛋白激酶 , mL 。 标准曲线的制备及线性关系考察 :精密吸取上
从而发挥其抗炎的作用 。述 3 种对照品溶液适量 ,配置成混合对照品溶液 , 过
本文采用高效液相色谱法测定铁包金按摩膏中〇 . 45(xm 微孔 滤膜 。 注入高效液相色谱仪 , 按上述
铁包金药材中大黄素 、大黄酚和大黄素 甲醚的含量 , 色谱条件测定 , 以峰面积为纵坐标 ,浓度为横坐标 ,
对比铁包金超微粉与饮片中 上述 3 种成分的提取 绘制标准 曲线 。 结果见表 1 。
率 ,探索提高其有效成分的入药比率 , 为更好地开发表 13 种对照品线性方程及相关系数
铁包金按摩膏的药用价值提供参考 。对照品 雖范 围Ug/mL ) 线性方程 相关系数 ( r 2 )
1 材料与方法大黄素1 . 1 4 - 5 1y = 30 . 65 1 * - 1 8 .825 ̄0 . 9999
1 . 1仪器Agi lent1200高效液相色谱仪 (美国Ag-大黄酚1 27  ̄ 57y =43 . 368x - 43 . 710. 9995
i lent公司 ) ; AL-204电子分析天平 ( Me ttlerTo ledo ) ; 大黄素 甲酸2 ."__y = 23 . 2 14, - 29 . 5 1 5 , .0 . 9999
KQ5200DE 型超声波清洗器 ( 昆山 市超声仪器有 限2 . 3 样品 的制备
公司 ) 。 2 . 3 .1 超微粉体的制备 铁包金药材经粉碎成粗
1 . 2 材料 大黄酌 (批号 : 1 10796 -20 1 1 1 8 ) 、大黄素 粉 ,在 60 丈干燥至水分约为 6% ,振幅为 100HZ ,振
( 批 号 : 1 1075 8-200 1 1 0) 大 黄 素 甲 醚 ( 1 10758 - 动粉碎时间为 10m in , 粉碎温度为 0 ̄1 0T , 经测
20 1 0 13 )对照 品均购 自 中 国食品药品检定研究院 。 定 :粒度 < 75 |xm 的 占 96 .59% 。
HPLC 级 甲醇 、超纯水 ;其余试剂均为分析纯 。 铁包 2 . 3 . 2 供试品溶液的制备 精密称取铁包金超微
金药材由 湖南省中医药研究院中药研究所鉴定为多 粉末与饮片各约 4g ,置锥形瓶中 ,加入 甲醇 25mL ,
花勾儿茶莲。称重 ,置水浴 中加热回流 1h ,取出 ,放冷 , 再称重 。

I* 用 甲醇补足减失量 , 摇匀 、过滤置于具塞锥形瓶中 ,
:j水浴蒸干至少量 ,精密加人 8%(体积分数 , 下 同 )
: IAHC1 溶液 25mL , 超声 5min , 再加人二氯 甲 焼 25

1-,1W 1A, . .—dmL ,置水浴中加热 回流 30min ,取出 ,冷却 。 置于分
M 液漏斗中 ,用少量二氯 甲烷洗涤锥形瓶 ,洗液合并 。

1 : 取二氯甲烷层 ,蒸干 , 残渣加 甲醇溶解 。 移至 5mL
: 1
j容量瓶中 ,加甲醇定容 ,摇匀即得 。 铁包金超微粉及
:W- ̄I ' ^ ^ j饮片样品图见图 1 。

I〇 , 2 . 4 精密度试验 分别精密吸取大黄素 102pg/
: 1 mL 、大黄酸 1 1 4pg/mL和大黄素甲醚 40pg/m 对照
: I : ,品溶液 2 . 5mL 、 2. 5mL 和 5mL 至 20 mL 容量瓶中 ,

:P ^ ̄: — j加 甲醇定容 , 配置制 成混合对照 品 溶液 ( 大黄素
图 1 1 . 大黄素 :2 . 大黄酣 : 3 . 大黄素 甲醚12 .75 网/mL 、大黄酣 1 4 . :25pg/mL 和大黄素 甲 醚
注 : 对照 品溶液 ( A ) 、铁包金饮片供试品 ( B )和铁包金超微粉供1〇 |xg/mL ) ,按上述色谱条件连续进样 6 次 , 大黄
试品 ( C ) M HPLC 色谱图 素 、大 黄酚 和 大黄 素 甲 醚 峰 面积 分 别 为
2 方法 3 .73% 、 3 .64% 和 3 . 43%( n= 6 ) , 结果表明仪器精
2. 1 色谱条件 色谱柱 : Hyp ersi l(: 1 8柱 ( 250mm x密度 良好 。
4 . 6 mm , 5pm ) ;流动相 : A 为甲醇 , B 为 0. 2% 甲 酸2 . 5稳定 性试验 取 1 号铁 包金超微 粉 , 按
水溶液 ,梯度洗脱 ( 〇 ̄ 30min , 65% ̄ 85%A ; 32 ̄“ 2 .4.2 ”项下方法制备得到供试品 溶液 , 分别在 0 、
世界中医药 20 1 5 年 1 1 月 第 10 卷第 1 1 期 . 1 773 .
2 、4 、6 、 8 、 1 2 、24 、48h 进样 。 计算大黄素 、大黄酚和合物的峰性 。 同时采用梯度洗脱 , 3 种化合物得到
大黄 素 甲 醚 的 含量 , 其 值分 别 为 0 .83% 、快速分离 。 本文测定 了湖南产地 3 批次铁包金超微
0 . 8 1% 和 1 . 1 1 % , 表 明在 48h 内 供试液稳定性 良粉与饮片中 大黄素 、大黄酚和大黄素甲 醚的含量 ,从
好 。实验结果来看 ,超微粉中 3 种成分的含量均高于同
2 . 6 加样 回收率试验 称取 2 号铁包金超微粉末批次饮片 。 在同一提取方法下超微粉体技术很好地
样品 4 .5 206g ,按照 2 .4 .2 供试品处理方法对样 品提高铁包金药材中这 3 种成分的提取率 ,增加入药
进行处理。 从供试液 中吸取供试品 600 jjlL ,依次加比率 ,采用超微粉碎技术可节省中药材资源 ,促进中
人大黄素对照品 1〇〇|xL (102fjug/mL ) 、大黄酚对照药产业长足发展 。
品 100 |xL(1 14(xg/mL ) 和大黄素甲醚对照 品 200jjiL参考文献
( 40 jjug/mL )混勻 ,微孔滤膜滤过 ,得加样回 收液 ,重[ 1 ]李雅 , 杨永华 ,蔡光先 ? 超微粉碎技术对黄苗药材主要化学成分提
复做 6 份 ,进样 10 卟 ,测定峰面积 。 大黄素 、大黄酚 4^H ’ 2008 ’ 3 (K 2 h229_23 1 _jr [ 2 ]蔡光先 ,杨永华 , 张水寒 ? 微粉化对人参类药材有效成分的影 响及大 黄素 甲 醚 的 平均 回 收率分 别 为 9 9 .58% 、[ _n . 中华中医药杂志 , 200 1 , 1 6 (6 ) :26-28 .
99 . 47% 和 99. Z7% , 其 RSD 值 分 别 为 1 .1 8% 、[ 3 ]马伟 , 白 天松 , 白长林 ,等. 冬虫夏草超微粉的物性及溶出特性研
1 . 49%和1 . 52% , 究 [ J ] . 食品科技 , 20 15 ,40 ( 4 ) : 丨 27- 1 3 1 .
2 . 7 样品测定 本实验测定了湖南产地 3 个批次⑷雑 Hi ,轉胃溧鱗 ,筝 S靴 卿刀,謹好1 2
的样品 。 样品处理方法见“ 2 .4 .2 ”供试品溶液 的制mm i +l^t' ’ 2( ) l l ’ 36U4h 3444 _
4^ ,4^. [ 5 ]唐哲 ,刘莉 , 谢伟沃 . 肉桂超微粉体外溶出度及主要药效学量效关备 ,

导1、试 卩 fJ ,按上述色

?曰条件 定 , 1 ?己录峰面豕、 ,按系研究 [ J ] . 时珍国医国药 , 20 1 2 , 23 ( 2 ) : 285 -287.外标法计算含量 。 含量测定结果见表 2 。[ 6 ]张琴 ,刘莉 . 川弯纖粉的粉体学性质研究 [ 】 ] . 中草药 , 20 1 0 , 4 1
表 2 铁包金超微粉与饮片 中 3 种化学成分含量测定结果( 1 1 ) : 1 797 - 17" -
——— ̄—— TTT:: 一 —「[ 7 ]邹冰姿 . 门诊中药饮 片处方 3600 张分析 [ J ] . 中 国医刊 , 201 3 , 48样品批号 大黄素 ( M<g/g ) 大黄 酚 ( l^g ) 大黄素 甲醚 ( M# g ) , 。 、 。< C 〇 ) : 〇〇 .
tt H *11 2071 207Q36
1 G

^ , 。 m ,

? [ 8 ]滕红丽 , 陈科力 , 陈士林? 壮药铁包金及其药材商品 的物种基础趙傲 11 8 . 46 1 〇 .1 U 1 3. 5 5
饮 片 21 2741 2931 365 [ J ]
? 中药材 ,20 10 , 3 3 ( 5 ) : 674名77 .
mm1 738 1 6 . 49 1 7 . 75[ 9 ]郭力城 ,滕红丽 ,梅之南 . 铁包金药材 中槲皮素 的薄层鉴别与含量
饮 片 31 3 . 421 6 . 2 11 0 . 55 测定研究 [ J ] . 时珍国医国药 , 2〇 丨 2 ,23 ( 1 2 ) :2983 -29 85 .
超微 31 6. 39 20 . 56 1 5 . 82[ 10 ] ShenYu-xia ,TengHong- li f XiongHu , et al .Anew ch romone deriva?
t ivefromB erc herai al inea ta i [J ] . Ac taPharma ceu t ieaS in ic a , 201 0 ,
3 结果 45 (9 ) :U3 9 - 1 143 .
从表中可以看出 超微粉 中大黄酿 、大黄素和大C 1 1 ]We iXinj iangJian -S huang , FengZ i-Mi ng , e tal _Amhraqui ncne-
黄素 甲酿的含量均离于饮片铁包金属于根关类药 benz i sochromanqu imme d imersfr om the roo tsofB erchemi afloribun -
da [ J ] ?C hemic al& pha rmaceuti c albulle tin , 200 8 , 56 ( 9) : 1248 -材 ,常以饮片入药 ,其有效成分很难充分溶解出来 , 1 2^铁包金超微粉 3 种成分含量高 于饮片 ,可能 由于细 [ 1 2 ]杨娟 ,段文峰 , 彭英 ,等 . 光枝勾儿茶化学成分研究⑴ [ J ] . 中草
胞破壁率提高 ,促进了 细胞 内的有效成分在短时间药 ,2006 , 36 ( 6 ) : 836?837 .
内大量溶出 ,提高 了提取效率 。[ 1 3侧顧獅 ,酿九 t繊&赖鮮财厕雜腿
4究进展 [ J ] . 中国 医药导报 ,20 1 1 , 8 ( 6 ) : 5 』 .
士 I匕士法丄古也 、油《為 、並扑咖 丨占扯々八檢戚[ ⑷徐想纯 ,谢明 容 , 刘少蜂 ,等 . HPLC 法测定壮药铁包 金中 大黄本文旨在建兄高鎌相色谱法测定铁包金按摩 帛 、大黄晒含量 [ 】 ] . 广东药学院学报 ,腿 ,30⑵ :削2 .膏中铁包金超微粉与饮片中大黄素 、大黄酌■和大黄
[ 1 5 ; | Lee (^ eh oiTW , lCim C^ etaLAm i inf lamnrn to ryaedv it ieso f
素甲醚的含量测定。 主要研究铁包金超微粉与饮片n ou tr ia ellipti c athroughsuppressio n ofmi togen- act ivat edprote i nk i -
中上述3 种成分对比研究实验 。 文章考察了流动相nase sand nuc learfact or-kappaBac t iva t io npathway [J ] . I mmuno p -
组成 甲醇和水 , 以及 甲醇和 〇 ?2% 甲 酸水 。 实验表h arm—Immu n— ira l ’2m 2 ’ 34 ( 3 )  :454464 ,
明 ,在水相 中加人 0 . 2% 的 甲 酸有利 于改善各个化 ( 20 15 - 02 - 06 ^