全 文 ：第 39卷第 10期
2010年 10月
应　用　化　工
AppliedChemicalIndustry
Vol.39 No.10
Oct.2010
收稿日期:2010-07-07　　修改稿日期:2010-07-29
作者简介:夏虹(1969-),女 ,湖北武汉人 , 农业部食品质量监督检验测试中心副研究员 , 多年从事高效液相色谱领域内
的应用和研究。电话:13554231682, E-mail:xdsh996@126.com
葛根超微粉 、葛粉中葛根素 、大豆甙和大豆甙元
的分析研究
夏虹 ,彭茂民 ,周有祥
(农业部食品质量监督检验测试中心 ,湖北 武汉　430064)
摘　要:采用高效液相色谱法测定功能食品葛根超微粉 、葛粉中的葛根素 、大豆甙和大豆甙元 , 为葛根保健品的质
量控制提供方法保证。试验利用 70%乙醇溶液超声提取样品 , 流动相为甲醇与水二元体系。结果显示 ,葛根超微
粉中葛根素 、大豆甙和大豆甙元的含量远远高于葛粉。加标回收率为 90.1% ～ 100.5%, 该方法操作简便 , 准确可
靠。
关键词:葛根超微粉;葛粉;葛根素;大豆甙;大豆甙元
中图分类号:O657.7　　　文献标识码:A　　　文章编号:1671-3206(2010)10-1601-03
Studyonpuerarin, daidzinanddaidzeinin
radixpuerariaandpuerariapowder
XIAHong, PENGMao-min, ZHOUYou-xiang
(FoodQualityInspectionandTestingCenterofAgriculturalMinistryofChina, Wuhan430064, China)
Abstract:Thecontentofpuerarin, daidzinanddaidzeininfunctionfoodsradixpuerariaandpuerariapow-
derwasdeterminedbyHPLC.Itcouldprovideamethodofqualitycontrolforpuerariahealthproducts.
Thesamplewasextractedbyultrasoundwith70% ethanolfor30 min.Themobilephaseconsistedof
methanolandwater.Thecontentsofpuerarin, daidzinanddaidzeinintheradixpuerariaarefarhigher
thanthoseinthepuerariapowder.Theresultsshowedthattherecoverieswereintherangeof90.1% ～
100.5%.Themethodissimpleandaccurate.
Keywords:radixpueraria;puerariapowder;puerarin;daidzin;daidzein
　　葛根是豆科葛属植物野葛和粉葛的肥大块根 。
葛根中除含有 19% ～ 20%的葛根淀粉外 ,还含有丰
富的异黄酮类化合物[ 1] 。其主要含有葛根素 、大豆
甙 、大豆甙元等 ,其性味甘 、辛 、凉 ,归脾 、胃经。具有
解肌退热 、生津止渴 、升阳止泻之功效 [ 2] ,对心脑血
管疾病具有较好的治疗和预防作用。葛粉是一种营
养独特的绿色保健食品 ,人经常食用能强筋壮骨 ,延
年益寿 。
　　葛根素:R1 =葡萄糖 , R2 =R3 =H
大豆甙:R1 =R3 =H, R2 =葡萄糖
大豆甙元:R1 =R2 =R3 =H
目前 ,对葛根和葛根制品的测定方法主要有高
效薄层双波长扫描法 [ 3] ,毛细管电泳电化学法 [ 4]和
高效液相色谱法[ 5-6] 。本实验采用高效液相色谱法 ,
应用简单的甲醇-水二元体系 ,重点对葛根超微粉 、
葛粉中的葛根素 、大豆甙 、大豆甙元进行了定量测定
和含量差异的探究 ,该方法简单 、快速 ,可用于葛根
超微粉和葛粉产品中有效成分的质量检测。
1　实验部分
1.1　试剂与仪器
　　葛根素 、大豆甙和大豆甙元对照品均购自中国
药品生物制品检定所。
Aliance2695, 2998二极管阵列检测器 , Empow-
er2色谱工作站(均为美国 Waters公司)。
1.2　色谱条件
　　色谱柱为 Diamonsil-C18(250 mm×4.6 mm
i.d., 5 μm);流动相为甲醇 ∶水 =35∶65(检测葛根
应用化工 第 39卷
素 ,大豆甙);甲醇 ∶水 =60∶40(检测大豆甙元);流
速 1.0 mL/min,柱温 30 ℃,检测波长 249 nm,进样
量 20 μL。
1.3　样品处理及测定
　　葛根超微粉试样是神农架野生葛根经切片 、烘
干 、超微粉碎得到的 300目粉末。葛粉试样是葛根
超微粉经过传统水洗工艺处理而得到的速食葛粉。
称取约 0.5 g(准确至 0.1 mg)试样 ,置于锥形
瓶中 ,加 70%乙醇 50 mL,超声提取 30 min,过滤于
100mL容量瓶中 ,用适量 70%乙醇洗涤滤渣 ,定容
至 100mL,摇匀 。经 0.45 μm滤膜过滤 ,取 20 μL
进样。采用标准曲线法定量 ,样品图见图 1、图 2。
图 1　葛根素 、大豆甙样品图
Fig.1　Chromatogramofpuerarin, daidzinintheradixpueraria
图 2　大豆甙元样品图
Fig.2　Chromatogramofdaidzeinintheradixpueraria
2　结果与讨论
2.1　样品提取条件的选择
　　本实验对提取方法:水浴回流 1 h, 常温浸泡
24 h,超声提取 30 min进行研究 ,结果表明 ,超声提
取效果最好 ,且时间最短。在此基础上 ,又对提取溶
剂水 、30%乙醇 、50%乙醇 、70%乙醇进行了摸索 ,结
果发现 ,采用 70%乙醇 ,超声提取 30min效果最佳 。
2.2　色谱条件的选择
　　用二极管阵列检测器采集 200 ～ 400 nm的色谱
图 ,发现葛根素 、大豆甙 、大豆甙元的最大吸收波长
分别为 248.4, 247.2, 246.0 nm, 本实验最终确定
249 nm作为检测波长。
　　采用甲醇 -水为流动相 , 考察了甲醇的比例
30% ～ 70%范围内保留时间的变化 , 结果表明 ,
甲醇 ∶水 =35∶65测定葛根素 、大豆甙;甲醇 ∶水 =
60∶40测定大豆甙元分离效果良好 ,保留时间合适。
2.3　标准曲线
　　准确称取葛根素 2.36 mg,大豆甙 3.70 mg,大
豆甙元 3.28 mg,分别用 70%乙醇定容至 50 mL。
标准溶液浓度分别为 47.2, 74.0, 65.6 μg/mL。精
确吸取葛根素标准溶液 5, 10, 15, 20μL进样;精确
吸取大豆甙标准溶液 2, 4, 6, 8 μL进样;精确吸取大
豆甙元 1, 2, 4, 8 μL进样。以进样量 X(μg)为横坐
标 ,峰面积 Y为纵坐标 ,进行线性回归 , 得回归方
程:
葛根素:y=4.51×106x-2.40×104
　　　　　 r=0.999 7
大豆甙:y=3.71×106x+2.40×104
　　　　　 r=0.999 6
大豆甙元:y=6.11×106x-3.02×103
　　　　　 r=0.999 9
标样图分别见图 3 ～图 5。
图 3　葛根素标样图
Fig.3　Chromatogramofthestandardsolutionofpuerarin
图 4　大豆甙标样图
Fig.4　Chromatogramofthestandardsolutionofdaidzin
1602
第 10期 夏虹等:葛根超微粉 、葛粉中葛根素 、大豆甙和大豆甙元的分析研究
图 5　大豆甙元标样图
Fig.5　Chromatogramofthestandardsolutionofdaidzein
2.4　葛根超微粉 、葛粉中葛根素 、大豆甙 、大豆甙元
　　 含量的测定
　　在上述样品处理及仪器条件下测定 ,结果见
表 1。
　　由表 1可知 ,由于生产工艺的原因 ,在水洗工艺
中造成了大量葛根素 、大豆甙 、大豆甙元的损失 ,葛
粉中有效成分完全流失。葛粉在世界上被誉为 “长
寿粉 ”,国内外市场需求量很旺 ,而我国葛根资源丰
富 ,开发葛粉保健食品潜力大 ,但是我们传统的生产
工艺需要创新 、需要改造 ,使葛粉中生理活性成分得
到保留 ,生产出富含活性物质的营养保健葛粉食品。
表 1　测定结果
Table1　Thedeterminationresultsofdifferentsamples
样品 葛根素/(mg· g-1)
大豆甙
/(mg· g-1)
大豆甙元
/(mg· g-1)
葛根超微粉 2.66 0.65 0.35
葛粉 未检出 未检出 未检出
2.5　回收实验
　　准确称取已知含量的样品约 0.3 g,共 5份 ,分
别加入 2个含量的葛根素 、大豆甙 、大豆甙元标准
品 ,在上述色谱条件下进行测定 ,结果见表 2。
表 2　回收率实验结果
Table2　Resultsofrecoverytest
成分 样品含量 /mg 加入量 /mg 测得量 /mg 回收率 /% 平均值 /% RSD/%
葛根素 0.800 7 0.630 0 1.366 3 95.5 97.3 2.26
0.830 4 0.630 0 1.425 4 97.6
0.812 8 1.260 0 2.074 9 100.1
0.805 7 1.260 0 1.956 2 94.7
0.806 0 1.260 0 2.035 0 98.5
大豆甙 0.195 6 0.080 0 0.277 0 100.5 96.5 2.82
0.202 9 0.080 0 0.273 3 96.6
0.198 6 0.160 0 0.347 8 97.0
0.196 9 0.160 0 0.339 8 95.2
0.197 0 0.160 0 0.332 4 93.1
大豆甙元 0.105 4 0.170 0 0.257 8 93.6 92.1 2.26
0.109 2 0.170 0 0.253 2 90.7
0.106 9 0.340 0 0.408 0 91.3
0.106 0 0.340 0 0.401 8 90.1
0.106 0 0.340 0 0.423 7 95.0
3　结论
　　本实验采用 70%乙醇超声提取葛根超微粉 、葛
粉 , HPLC法测定葛根素 、大豆甙 、大豆甙元 ,操作简
便 ,准确可靠 ,回收率在 90.1% ～ 100.5%,并且可
适用于其它葛根制品的质量控制。葛根是一种尚未
完全开发利用的天然野生植物资源 ,随着对葛根的
研究不断深入 ,其药理功能 、保健作用和应用价值将
会日益引起人们的重视 ,不断改进生产工艺 ,继续开
发葛根系列制品 ,必将具有重要的社会意义和经济
价值。
参考文献:
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