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地锦草水提液对糖尿病小鼠的降血糖作用



全 文 :收稿日期:2014-04-10
基金项目:江西省卫生厅中医药科研基金课题(2013A089);江西中医学院2012年度重点学科教师培养计划资助项目科研课
题(2012jzzdxk015)
作者简介:周志愉(1979—),男,硕士,讲师,主要从事中医药与内分泌研究。
通信作者:王晓敏,副教授,E-mail:wangxm2001@163.com。
地锦草水提液对糖尿病小鼠的降血糖作用
周志愉,谢 斌,王晓敏
(江西中医药大学病理学教研室,南昌330004)
摘要:目的 观察地锦草水提液对糖尿病小鼠的降血糖作用,并探究其作用机制。方法 对60只小鼠进行尾静
脉注射0.25%四氧嘧啶溶液80mg·kg-1,注射后2h给予50%葡萄糖溶液0.2mL·10g-1灌胃造模,3d后眼眶
采血测血糖,血糖值>11.1mmol·L-1为糖尿病小鼠。将50只造模成功的小鼠按随机数字表法分为5组:NS组
(阴性对照组),地锦草低(59mg·kg-1·d-1)、中(118mg·kg-1·d-1)、高(236mg·kg-1·d-1)剂量组,二甲双
胍组(阳性对照组),每组10只。连续给药14d后,观察地锦草水提液对糖尿病小鼠血糖、血清胰岛素、胰岛病理形
态变化的影响。结果 1)备糖:地锦草高剂量组和二甲双胍组给药后的血糖明显低于给药前及 NS组,地锦草低、
中剂量组(均P<0.05),NS组、地锦草中、低剂量组血糖也略下降,但差异均无统计学意义(均P>0.05)。2)血清
胰岛素:地锦草高剂量组、二甲双胍组血清胰岛素水平均显著高于NS组及地锦草低、中剂量组(均P<0.05),地锦
草低、中剂量组及NS组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。3)胰腺的病理形态:NS组胰岛数量明显减少,结
构破坏,边界模糊不清,胰岛β细胞排列紊乱,部分细胞出现变性或坏死;地锦草各剂量组胰岛数量较多,胰岛结构
较完整,境界较清晰,胰岛β细胞排列较整齐,细胞形态较好,胞浆丰富,胞核多数清楚,仅可见少数细胞变性或坏
死;二甲双胍组胰岛形态有一定的恢复。结论 地锦草水提液对糖尿病小鼠的降血糖作用可能是通过保护胰岛β
细胞、减轻其损伤及增加胰岛素分泌来实现。
关键词:地锦草;糖尿病;血糖;胰岛β细胞;动物,实验;小鼠
中图分类号:R587.1;R-332   文献标志码:A   文章编号:2095-4727(2014)06-0005-03
Hypoglycemic Effect of Humifuse Euphorbia
Herb Extract in Diabetic Mice
ZHOU Zhi-yu,XIE Bing,WANG Xiao-min
(Department of Pathology,Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine,
Nanchang330004,China)
ABSTRACT:Objective To explore the hypoglycemic effect of humifuse euphorbia herb extract in
diabetic mice and its mechanism of action.Methods Sixty mice were given intravenous injection
of 0.25%aloxan solution(80mg·kg-1)though tail vein,and then were intragastricly adminis-
trated 50%glucose solution(0.2mL·10g-1)2hours after intravenous injection.After 3days,
orbital blood was taken to detect the levels of blood glucose.Mice with blood glucose levels above
11.1mmol·L-1 were regarded as the diabetic mice.Fifty diabetic mice were randomly divided in-
to 5groups:normal saline group(negative control group),low-dose humifuse euphorbia herb
group(59mg·kg-1·d-1),medium-dose humifuse euphorbia herb group(118mg·kg-1·d-1),
high-dose humifuse euphorbia herb group(236mg·kg-1·d-1)and metformin group(positive
control group),with 10mice in each group.After successive administration for 14days,levels of
blood glucose and serum insulin were measured and pathological changes in pancreatic islet were
5南昌大学学报(医学版)2014年第54卷第6期 Journal of Nanchang University(Medical Sciences)2014,Vol.54No.6
DOI:10.13764/j.cnki.ncdm.2014.06.002
observed.Results 1)Blood glucose:Compared with both negative control group and low,medi-
un-dose humifuse euphorbia herb group and before medication,blood glucose levels significantly
decreased in both high-dose humifuse euphorbia herb group and metformin group(P<0.05).
However,no obvious decrease in blood glucose levels were found after treatment in negative con-
trol group,low-dose humifuse euphorbia herb group and medium-dose humifuse euphorbia herb
group(al P>0.05).2)insulin:Compared with negative control group,low-dose humifuse eu-
phorbia herb group or medium-dose humifuse euphorbia herb group,serum insulin levels marked-
ly increased in both high-dose humifuse euphorbia herb group and metformin group(al P<
0.05).No significant differences in serum insulin levels were found among negative control
group,low-dose humifuse euphorbia herb group and medium-dose humifuse euphorbia herb group
(al P>0.05).3)Pathological change of the pancreas:Pathological analysis showed obvious de-
crease in the number the pancreatic islets with damaged structures,blurred boundaries,disordered
βcel arrangement and partial degeneration or necrosis in negative control group,but significant
increase in the number the pancreatic islets with complete structures,clear boundaries,orderlyβ
cel arrangement,normal cel morphology,abundant cytoplasm,clear nucleus and mild degenera-
tion or necrosis in humifuse euphorbia herb groups.In addition,metformin treatment improved
the morphology of pancreatic islets compared with negative control group.Conclusion Humifuse
euphorbia herb extract exerts has hypoglycemic effect in diabetic mice through protecting pancre-
atic isletβcels,reducing damage and promoting insulin secretion.
KEY WORDS:humifuse euphorbia herb;diabetes;blood glucose;pancreatic isletβcel;
animals,laboratory;mice
  地锦草是中医常用药材,为大戟科植物地锦或
斑地锦的干燥全草,一年生草本,夏、秋二季采收,全
草洗净晒干作药用,具有清热解毒、凉血止血等功
效,临床上多用于治疗皮肤病、糖尿病、细菌性痢疾、
肠炎、病毒性肝炎等疾病[1-3],但地锦草治疗糖尿病
的作用机制目前尚不清楚。本实验通过研究地锦草
水提液对糖尿病小鼠的血糖、血清胰岛素、胰岛病理
形态的影响,探讨其对糖尿病小鼠的降血糖作用及
其机制。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物
清洁级昆明种雄性小鼠60只,体质量18~22g,
由江西中医药大学动物实验中心提供(许可证号:
SCXK(赣)2011-0001)。自然光照,自由进水进食。
1.1.2 药物
地锦草(南昌益丰大药房,批号:111023)。将地
锦草加10倍量水浸泡30min后,加热至沸腾,并保
持沸腾20min后过滤,地锦草药渣再加8倍量水加
热至沸腾,并保持沸腾20min后过滤,合并2次滤
液,低温浓缩成生药含量为0.2g·mL-1的水提液,
置于4℃ 冰箱内保存备用。
1.1.3 试剂与仪器
四氧嘧啶(美国sigma公司);葡萄糖试剂盒(中
生北控生物科技股份有限公司);胰岛素放射免疫分
析药盒(北京科美东雅生物公司);苏木精、伊红 Y
等(上化试剂公司);UV-2102C型紫外可见分光光
度计(上海尤尼柯仪器有限公司);光学显微镜及摄
像系统(BX-41型,日本 OLYMPUS);全套生物组
织自动脱水机、石蜡包埋机、摊烤片机(湖北孝感亚
光医用电子技术有限公司);切片机(RM2235型,德
国Leica公司)。
1.2 实验方法
1.2.1 动物模型建立及分组
实验动物禁食不禁水12h后,进行尾静脉注射
0.25%四氧嘧啶溶液(80mg·kg-1),注射后2h给
予50%葡萄糖溶液(0.2mL·10g-1)灌胃。自然
状态饲养3d后,禁食不禁水12h,眼眶采血测血
糖,血糖值>11.1mmol·L-1为糖尿病小鼠,即造
模成功(50只)。将造模成功的50只糖尿病小鼠按
随机数字表法分为5组:NS组(阴性对照组),地锦
草低、中、高剂量组及二甲双胍组(阳性对照组),每
组10只。
1.2.2 给药方法
NS组给予生理盐水0.4mL·d-1·只-1灌胃,
6 南昌大学学报(医学版)2014年6月,第54卷第6期
地锦草低、中、高剂量组分别按59mg·kg-1·d-1、
118mg·kg-1·d-1和236mg·kg-1·d-1的剂量
给予地锦草水提液灌胃,二甲双胍组给予盐酸二甲
双胍混悬液(25mg·kg-1·d-1)灌胃。连续给药
14d后禁食12h,眼球取血,不抗凝取血清,低温保
存,待测;切取胰腺组织待检。
1.3 检测指标
血糖采用葡萄糖氧化酶法进行检测,血清胰岛
素采用放射免疫分析法进行检测。胰腺组织用
10%甲醛固定,常规石蜡包埋切片,HE染色,观察
胰岛细胞形态变化。
1.4 统计学方法
应用SPSS16.0统计软件进行数据处理,计量
资料用表示,组间比较采用单因素方差分析,以P<
0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 地锦草水提液对糖尿病小鼠血糖及血清胰岛
素的影响
地锦草高剂量组和二甲双胍组给药后的血糖明
显低于给药前及NS组,地锦草低、中剂量组(均P<
0.05),NS组、地锦草中、低剂量组血糖也略下降,
但比较差异无统计学意义(均P>0.05)。地锦草高
剂量组、二甲双胍组血清胰岛素水平均显著高于
NS组及地锦草低、中剂量组(均P<0.05),地锦草
低、中剂量组及 NS组之间比较差异均无统计学意
义(均P>0.05)。见表1。
表1 地锦草水提液对各组糖尿病小鼠血糖及血清胰岛素的影响 x±s
组别 n
血糖c/mmol·L-1
给药前 给药后
血清胰岛素/
(mU·L-1)
NS组 10  16.79±1.85  15.56±3.18  10.45±1.98
二甲双胍组 10  17.01±3.15  9.69±1.81* 13.64±3.34#
地锦草低剂量组 10  16.49±2.58  14.39±2.38  11.62±2.62
地锦草中剂量组 10  17.57±4.14  15.49±3.06  10.78±2.44
地锦草高剂量组 10  16.79±3.27  10.02±2.29* 14.31±3.21#
  *P<0.05与给药前及NS组,地锦草低、中剂量组比较;#P<0.05与NS组及地锦草低、中剂量组比较。
2.2 胰腺的病理形态变化
NS组胰岛数量明显减少,结构破坏,边界模糊
不清,胰岛β细胞排列紊乱,部分细胞出现变性或坏
死(图1A);地锦草低、中、高剂量组胰岛数量较多,
胰岛结构较完整,境界较清晰,胰岛β细胞排列较整
齐,细胞形态较好,胞浆丰富,胞核多数清楚,仅可见
少数细胞变性或坏死(图1B—D);二甲双胍组胰岛
形态有一定的恢复(图1E)。
DCBA E
A.NS组;B.地锦草低剂量组;C.地锦草中剂量组;D.地锦草高剂量组;E.二甲双胍组。
图1 糖尿病小鼠胰腺组织 HE染色结果
3 讨论
  糖尿病是由于人体内胰岛素缺乏或相对缺乏所
导致的一种慢性内分泌代谢性疾病,高血糖是主要
特征,具有发病率高、并发症多及高致残率等特点。
目前,糖尿病已成为许多国家的常见病和多发病,其
病死率已居肿瘤、心血管之后的第3位[4]。
糖尿病属于中医学“消渴病”范畴,中医[5]认为:
糖尿病是体质因素加后天饮食、劳倦、情志、药石及
外感所伤导致“热伤气阴”而成,病由热生,热极成
毒。热毒是影响糖尿病病情进展的重要因素。因
此,清热解毒治疗法在糖尿病的预防和治疗中有重
要的作用。唐代孙思邈《备急千金要方》引巴郡太守
三黄丸,药用苦寒清热之黄连、黄芩和清热泄下之大
黄,乃为消渴病清热解毒治法之代表方。有研究[6-8]
表明,清热解毒中药对糖尿病及其并发症控制、胰岛
功能的保护均具有一定作用。
糖尿病的发生及发展与胰岛β细胞的损伤和功
能异常密切相关[9],胰岛素合成量的减少是由胰岛
β细胞的数量和(或)β细胞功能障碍导致的。因此,
(下转第11页)
7周志愉等:地锦草水提液对糖尿病小鼠的降血糖作用
管扩张,明显改善心、脑血流量;其可有效降低交感
神经的兴奋性,使副交感神经处于相对兴奋状态,可
有效增强机体的抗病能力及中枢抗炎作用;SGB还
可通过下丘脑垂体轴机制调节机体全身自主神经系
统、心血管系统、内分泌系统及免疫系统,使全身自
主神经系统趋于稳定化,有助于维持机体内环境稳
态;此外,SGB还可明显扩张颅内血管,降低颅内血
管阻力,增加脑血流量,有效改善大脑的血液循环状
态和中枢神经系统氧供平衡状态。
综上所述,星状神经节阻滞预处理可减轻急性
缺氧诱发的大鼠脑损伤,其机制可能与其抑制海马
神经元凋亡有关。
参考文献:
[1] 余倩,贺纯静,楚兰.星状神经节阻滞对急性脑梗塞患者血浆相
关血管舒缩因子和氧自由基的影响[J].贵州医药,2011,35
(6):491-494.
[2] Honkamiemi J,Massa S M,Breckinridge M,et al.Global ische-
mia induces apoptosis-associated genes in hippocampus[J].Mol
Brain Res,1996,42(1):79-88.
[3] 陈勇,孙静,杜晓红,等.星状神经节阻滞对老龄大鼠术后认知
功能的影响[J].中华麻醉学杂志,2013,23(1):37-39.
[4] 王华仁,李积胜,杨芳.牛磺酸和锌对急性缺氧小鼠脑组织
HIF-1αmRNA表达的影响[J].中国病理生理杂志,2007,23
(1):160-162.
[5] 侯燕芝,焦晓惠,吕国蔚,等.低氧预适应过程中小鼠脑内
CGRP和AngⅡ含量的变化[J].基础医学与临床,2001,21
(6):574-576.
[6] 张华,姚珍薇.神经元凋亡与未成熟脑组织缺血缺氧性脑损
伤[J].中华神经医学杂志,2004,3(6):470-472.
[7] Nizuma K,Yoshioka H,Chen H,et al.Mitochondrial and ap-
optotic neuronal death signaling pathways in cerebral ischem-
ia[J].Biochim Biophys Acta,2010,1802(1):92-99.
[8] 李琳,王红阳,陈宝元,等.重度间歇性低氧对大鼠认知功能及
海马超微结构的影响[J].西安交通大学学报:医学版,2011,32
(6):687-689.
[9] Eastwood S L,Weickert C S,Webster M J,et al.Webster syn-
aptophysin protein and mRNA expression in the human hipp-
ocampal formation from birth to old age[J].Hippocampus,
2006,16(8):645-654.
[10] Orike N,Middleton G,Borthwick E,et al.Role of PI-3ki-
nase,Akt and Bcl-2-related proteins in sustaining the survival
of neurotrophie factor-independent adult sympathetic neuro-
ns[J].J Cel Biol,2001,154(5):995-1005.
(责任编辑:刘大仁
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(上接第7页)
保护胰岛β细胞,减轻其损伤,改善胰岛β细胞功能
是治疗糖尿病的关键环节。
地锦草是中医常用药材,具有清热解毒之功效。
本研究结果显示,在光学显微镜下,NS组胰岛数量
明显减少,结构破坏,边界模糊不清,胰岛β细胞排
列紊乱,部分细胞出现变性或坏死。而连续给予地
锦草水提液灌胃14d后,糖尿病小鼠的胰岛数量增
多,胰岛结构较完整,境界较清晰,胰岛β细胞排列
较整齐,细胞形态较好,胞浆丰富,胞核多数清楚,仅
见少数细胞变性或坏死;二甲双胍组胰岛形态也有
一定恢复。提示地锦草水提液和二甲双胍均能够保
护胰岛β细胞,减轻四氧嘧啶对其损伤,促进胰岛β
细胞修复。本研究结果还显示,地锦草高剂量组和
二甲双胍组给药后的血糖明显低于给药前及 NS
组,地锦草低、中剂量组(均P<0.05),NS组,地锦
草中、低剂量组血糖也有所下降,但比较差异均无统
计学意义(均P>0.05)。地锦草高剂量组、二甲双
胍组胰岛素水平均显著高于 NS组及地锦草低、中
剂量组(均P<0.05),提示地锦草水提液对糖尿病
小鼠具有明显的降血糖作用,其机制可能与保护胰
岛β细胞、减轻四氧嘧啶对其损伤、促进胰岛β细胞
修复及增加胰岛素分泌有关。但其具体作用机制还
有待于进一步进行实验研究。
参考文献:
[1] 王婷婷,文今福,金松南.地锦草的化学成分及药理作用研究进
展[J].泰山医学院学报,2012,33(8):629-632.
[2] 姚松学,李春华,蔡高玉,等.地锦草的药理作用研究[J].亚太
传统医药,2010,6(9):144-145.
[3] 谢奇,李治建,斯拉甫·艾白,等.地锦草化学成分及其抗真菌
作用的研究进展[J].医药导报,2011,30(7):880-883.
[4] 贾安,杨义芳,黄涛,等.中药及天然药物中抗糖尿病活性成分
研究进展[J].中药材,2012,35(5):822-826.
[5] 庞博,赵进喜,王颖辉,等.糖尿病清热解毒治法探讨[J].中华
中医药杂志,2011,26(6):1471-1474.
[6] 李智.清热解毒治法在糖尿病中的应用[J].中国中医基础医学
杂志,2012,18(4):414.
[7] 冯建华,张萌,王殿云,等.清热解毒方对2型糖尿病患者血清
炎症因子干预的临床研究[J].中国医药科学,2013,3(8):9-
14.
[8] 冯建华,李洁,王殿云,等.清热解毒方对2型糖尿病大鼠胰岛
β细胞及骨骼肌细胞 NF-κB/IκB信号途径的调节作用[J].中
华中医药杂志,2013,28(1):93-95.
[9] 任文辉,张保丽,李中平,等.芍药苷对STZ损伤的INS-1细胞
的保护和修复作用[J].中国老年学杂志,2011,31(2):230-
232.
(责任编辑:周丽萍)
11郑文军等:星状神经节阻滞预处理对急性缺氧大鼠海马神经元凋亡的影响