全 文 ：HPLC法测定海南核果木枝叶中DEHP含量
刘平怀， 陈德力， 郭黄英， 孙玉婉
（海南大学热带作物种质资源保护与开发利用教育部重点实验室，海南 海口 570228）
摘 要：建立了一种正相高效液相色谱测定海南核果木枝叶中 DEHP 含量的方法。通过改变样品的前处理方法及检测的色谱
条件，以保留时间定性和外标法定量，对试验结果进行优化。 结果表明：以 YMC-Sil 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，进样量
10 μL，以二氯甲烷为流动相，流速 1.0 mL/min，检测波长为 275 nm 时，能获得较好的分离效果；其 DEHP 进样量线性范围为 0.05～
0.80 μg（r=0.9973）；平均回收率为 99.23%，RSD=1.22%；海南核果木枝叶中 DEHP 的含量为 10.93（±0.21）μg/g。
关键词：海南核果木； 邻苯二甲酸二（2-乙基已基）酯； 高效液相色谱法
中图分类号：O656.9 文献标识码：A 文章编号：1004-874X（2012）22-0117-02
Determination of the content of DEHP in leaves and
stems of Drypetes hainanensis by HPLC
LIU Ping-huai， CHEN De-li， GUO Huang-ying， SUN Yu-wan
（Ministry of Education Key Laboratory of Protection，Development and Utilization of Tropical
Crop Germplasm Resources，Hainan University，Haikou 570228，China）
Abstract： A method of diethylhexyl phthalate quantitative analysis in leaves and stems of Drypetes hainanensis by high performance
liquid chromatography (HPLC) was established. The results were optimized by sample pre-treatment and the variation of chromatographic
detection conditions. The retention time of peak was qualitatively employed to evaluate the results, and the ex-situ measurement was used
to analyze quantitatively. YMC-Sil column (250 mm×4.6 mm, 5 μm) was used. The inject volume was 10 μL. The mobil phase was
CH2Cl2. The flow rate was 1.0 mL/min. The detection wavelength was 275 nm. When the content of DEHP was between 0.05～0.80 μg (r=
0.9973), there a good linear relationship and the accuracy and precision were good. The average recovery of DEHP was 99.23% with RSD
of 1.22%. The content of DEHP in leaves and stems of Drypetes Hainanensis was 10.93（±0.21）μg/g.
Key words: Drypetes hainanensis； DEHP； HPLC
邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）是塑料中用
量最多最广泛的一种增塑剂，在塑料中含量可达 60%[1-2]。
但是，DEHP 与塑料中的其他成分不存在键合关系， 致使
其极易转移至外部环境中，对大气、水源以及土壤造成了
严重的污染 [3-6]。 同时，研究表明，大剂量的 DEHP 对人体
生育能力具有较强的损害， 并有可能导致胎儿畸形病变
甚至死亡等；此外，DEHP 也会造成肝功能损伤，严重者可
诱发肝细胞癌变等[7-10]。 研究 DEHP 如何降解或修复是当
今环境保护领域的一个重要课题。
已有研究表明，有些植物可从空气及土壤中吸收或吸附
DEHP及其类似衍生物，并累积于植物的叶、茎、根或花果之
中[11-12]。 因此采用植物对 DEHP进行富集或降解，是一种重
要的手段方式，其投入低、治理效果明显、不易产生副作用、
可恢复和建设生态环境，具有广阔的研究及运用前景[12]。
海南核果木 （Drypetes hainanensis Merr.）为大戟科
（Euphorbiaceae）核果木属（Drypetes）植物，是海南岛特有的
物种，广泛分布于海南各地，也是海南主要的经济树木[13-14]。 我们
在分离海南核果木枝叶的化学成分过程中，发现其枝叶的脂
溶性成分中含有大量的 DEHP。 因此， 海南核果木可能对
DEHP等类似化合物具有富集降解等功能，在保护环境等方
面具有重要的研究价值。本研究建立了一种高效液相色谱法
检测海南核果木枝叶中 DEHP含量的方法，并以之测定海南
核果木枝叶中 DEHP的含量， 为后续研究工作提供理论基
础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试材为海南核果木，于 2010 年 10 月采自海南省霸王
岭国家级自然保护区，经中国医学科学院药用植物研究所
海南分所冯锦东研究员鉴定为 Drypetes hainanensis Merr.
的枝叶。 采后自然阴干粉碎，放置暗处贮存备用。
主要试剂和仪器:二氯甲烷、甲醇（色谱纯，国药集团
化学试剂有限公司），DEHP（色谱纯，sigma 公司）；索氏提
取仪（北京欣维尔玻璃仪器有限公司）；大连依利特高效液
相色谱仪 （UV-230 紫外检测器，P230 恒流泵和 EC-2000
色谱工作站）；IKA RV-10 型旋转蒸发仪 （德国 IKA 公
司）；BT224S 电子天平（德国 Sartorious公司）。
1.2 试验方法
1.2.1 色谱条件 色谱柱：YMC–Sil柱（250 mm×4.6 mm，5
μm）；进样量：10 μL；流动相：二氯甲烷；流速：1 mL /min；检
测波长：275 nm；在上述色谱条件下，供试品中 DEHP 色谱
峰与其他成分的色谱峰能达到较好的基线分离（图 1）。
1.2.2 标准系列溶液的配制 将 100 μg/mL 的 DEHP 甲
醇溶液标准品， 分别稀释得到浓度为 80、60、40、20、10、5
μg/mL的 DEHP标准溶液，4℃贮存备用。
1.2.3 供试品溶液的制备 分别称取植物样品 10 g，用滤
纸包好，放入索氏抽提管内，然后加入 90 mL 二氯甲烷，
收稿日期：2012-10-18
基金项目：海南大学植物学国家级重点学科项目（071001）；海
南省自然科学基金（309001）
作者简介：刘平怀（1967-），男，硕士，教授，E-mail：twlph@163.
com
广东农业科学 2012 年第 22 期 117
DOI:10.16768/j.issn.1004-874x.2012.22.006
电
压
（ m
V
）
电
压
（ m
V
）
4.5
1.5
6.6
1.0
3 6 9
3 6 9
A
B
保留时间（min）
A：供试品（海南核果木枝叶）；B：标准品；1：DEHP
图 1 DEHP 的 HPLC 色谱图
1
1
88℃抽提 20 h。 将回收的溶剂在旋转蒸发仪上，50℃下浓
缩至约为 5 mL[12]。
1.2.4 净化分离 将 10 mm×300 mm的玻璃柱下端用脱脂
棉堵住， 依次加入 100～120 mm 长的活性氧化铝、30～40
mm长的硅胶和 30～40 mm 长的无水硫酸钠。 先用二氯甲
烷充分湿润柱子，然后将样品转移到柱子，再用 5～6 mL二
氯甲烷冲洗装样品的平底烧瓶， 将样品全部转移到柱子，
重复 5～6次，洗脱液收集于锥形瓶[15]。将上述收集液浓缩至
干，再用色谱纯甲醇定容到 10 mL容量瓶中，过滤备用。
2 结果与分析
2.1 线性关系考察
取 100 μg/mL的 DEHP甲醇溶液标准品，分别稀释得
到浓度为 80、60、40、20、10、5 μg/mL 的 DEHP 标准溶液，
按照上述色谱条件，分别进样 10 μL，以 DEHP 的进样量
（μg） 为横坐标， 峰面积为纵坐标， 计算回归方程：Y=
225.48X+16.903，r=0.9973， 结果表明，DEHP 在 0.05～0.80
μg 范围内线性关系良好。
2.2 精密度试验
取对照品溶液 10 μL， 连续进样 5 次， 计算精密度，
DEHP峰面积平均值为 193.676，RSD=0.09%。
2.3 重复性试验
取同一批海南核果木枝叶样品， 按供试品溶液制备
方法平行制备 3份供试品溶液，按上述色谱条件测定海南
核果木枝叶中 DEHP 的含量，计算重复性，发现平均含量
为 10.68 μg/g，RSD=0.25%，表明此方法重复性良好。
2.4 稳定性试验
精密量取同一供试品溶液，分别于 0、1、2、4、12、24 h
测定 DEHP 峰面积，平均值为 41.57，RSD=2.02%，表明其
在 24 h内稳定性良好。
2.5 加样回收率试验
精密称取已知含量的样品 6 份， 分别加入 0.05、0.2、
0.4、0.5、0.6、0.7 μg 的 DEHP 标准品， 按供试品溶液的制
备方法，依照上述色谱条件测定，计算回收率，平均回收率
为 99.23%，RSD=1.22%。
2.6 供试样品中 DEHP含量测定
精密称取海南核果木枝叶样品 10 g，按供试品溶液的
制备方法平行制备 3份供试样品溶液，按照上述色谱条件
测定海南核果木枝叶中 DEHP 的含量， 结果为 10.93（±
0.21）μg/g。
3 结语
建立了一种海南核果木枝叶中 DEHP 正相高效液相
色谱检测方法。 该检测方法简便、准确率高，适合作为海
南核果木中 DEHP 含量的测定方法。 该方法进样量的线
性范围为 0.05～0.8 μg，r＝0.9973， 加标回收率为 99.23%，
RSD=1.22%，可用于植物样品中 DEHP 含量的分析，从而
为植物样品中痕量邻苯二甲酸酯的含量检测提供了重要
技术手段。
通过正相高效液相色谱法测定海南核果木枝叶中
DEHP 的含量， 海南核果木枝叶中 DEHP 的含量达 10.93
（±0.21）μg/g，含量丰富。
海南核果木枝叶中含有丰富的 DEHP，其可能具有植
物修复的功能，可累积降解环境中的污染物 DEHP，具有
推广种植的可能，有待进一步研究。
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