全 文 ：基金项目：新疆维吾尔自治区专利实施计划项目（２０１２ＳＳ１０２１）
作者简介：王小新（１９７０－），女，本科，主管药剂师，研究方向：中药学基础研究。
通信作者：周晓英，女，硕士，教授，硕士生导师，研究方向：天然药物的质量控制与活性的筛选研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｏｕｘｉａｏｙｉｎｇ４＠１６３．ｃｏｍ。
对叶大戟总多酚超声提取工艺的研究
王小新１，刘 冲２，赵 璐３，周晓英３
（１新疆乌鲁木齐市中医医院南门二部药剂科，乌鲁木齐 ８３０００１；２新疆师范大学化学化工学院，乌鲁木齐 ８３００５４；
３新疆医科大学药学院，乌鲁木齐 ８３００１１）
摘要：目的 研究优选对叶大戟总多酚乙醇超声提取的工艺。方法 采用单因素考察及正交试验设计，以
没食子酸的含量为考察指标优选对叶大戟总多酚提取工艺。结果 对叶大戟总多酚超声提取工艺选择为７０％的
乙醇，药液比１∶４０，超声时间３０ｍｉｎ，超声温度４０℃。结论 此方法提取对叶大戟中总多酚效率高、结果稳定。
关键词：超声提取；对叶大戟；总多酚；正交试验
中图分类号：Ｒ９４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００９－５５５１（２０１６）０３－０３２４－０３
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－５５５１．２０１６．０３．０１５
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｉｎ Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｓｏｒｏｒｉａ Ａ．
ＷＡＮＧ Ｘｉａｏｘｉｎ１，ＬＩＵ Ｃｈｏｎｇ２，ＺＨＡＯ Ｌｕ３，ＺＨＯＵ Ｘｉａｏｙｉｎｇ３
（１ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｂｒａｎｃｈ ｏｆ Ｎａｎｍｅｎ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ ＴＣＭ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｕｒｕｍｑｉ，
Ｕｒｕｍｑｉ ８３０００１，Ｃｈｉｎａ；２ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
Ｕｒｕｍｑｉ ８３００５４，Ｃｈｉｎａ；３ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ ８３００１１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｅｔｈａｎｏｌ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｏｒ ｔｏｔａｌ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ Ｅｕ－
ｐｈｏｒｂｉａ ｓｏｒｏｒｉａ Ａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｓｉｎｇｌｅ－ｆａｃｔｏｒ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ ｄｅｓｉｇｎ，ｐｕｔ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ
ｇａｌｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｉｎｄｅｘ ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｏｒ ｔｏｔａｌ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ
ｓｏｒｏｒｉａ Ａ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ Ｅｕ－
ｐｈｏｒｂｉａ ｓｏｒｏｒｉａ Ａ ｗａｓ ３０ｍｉｎ ａｔ ４０℃ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ７０％ｅｔｈａｎｏｌ，ａｎｄ １：４０ｏｆ ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ．
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ａｎｄ ｓｔａｂｌｅ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｓｏｒｏｒｉａ Ａ．；ｔｏｔａｌ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ
维药对叶大戟 （Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｓｏｒｏｒｉａ Ａ．）为大戟
科大戟属一年生草本植物，以全草入药，主要分布于
我国新疆和田和中亚地区，在维吾尔医中是一味常
用药材，具有利水消肿、降压清脑、泻下杂虫的功效，
多用于大便秘结、尿频、高血压头痛、肝硬化、水肿以
及疥疮肿痛等病症［１］。对叶大戟中主要含有多酚、
黄酮类化合物，以山柰酚３－Ｏ－吡喃葡萄糖苷、莨菪
亭、β－谷甾醇为代表的多酚类成分是对叶大戟抗菌、
降血脂、抗衰老和抗病毒的主要有效成分［２－３］。为
了充分提取对叶大戟中的有效成分，采用单因素考
察及正交试验设计［４－７］，本研究对对叶大戟中的总
多酚提取工艺进行了研究，确定了适合对叶大戟中
总多酚提取的工艺，报道如下。
１仪器与材料
１．１ 实验仪器 Ｕ－３３１０型紫外可见分光光度仪
（日本株式会社日立高新技术那珂事业所）；
ＫＱ２２００ＤＥ型数控超声仪（昆山市超声仪器有限公
司）；Ａｎｋｅ ＴＤＬ－４０Ｂ离心机（上海安亭科学仪器
厂）；ＤＧ１６０Ｃ型中药粉碎机（浙江省瑞安市春海药
材器械厂）；ＦＡ１００４Ｎ电子天平（上海菁海仪器有限
公司）。
１．２ 实验材料 没食子酸标准品（成都市科龙化工
试剂厂，批号：２０１３０４１５）；对叶大戟药材（新疆奇康
第３９卷 第３期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Ｖｏｌ．３９ Ｎｏ．３
２０１６年３月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｍａｒ．２０１６
哈博维药有限公司，批号：１３０８１６），Ｆｏｌｉｎ－Ｃｉｏｅａｌｔｅｕ
试剂（磷钼钨酸试液自制），无水乙醇、碳酸钠均为分
析纯，水为去离子水。
２ 方法与结果
２．１ 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸标准
品１０ｍｇ于１００ｍＬ棕黄色容量瓶中，蒸馏水溶解
定容至刻度，浓度为０．１ｍｇ／ｍＬ，备用。
２．２ 供试品溶液的制备 精密称取干燥的对叶大
戟药材粉末１ｇ，置于１００ｍＬ锥形瓶中，加入６０％
的乙醇溶液３０ｍＬ，温度３０℃，时间３０ｍｉｎ，功率
１００Ｗ，频率４０ＫＨｚ，过滤，将滤液转移至１００ｍＬ
容量瓶中，去离子水定容至刻度，备用。
２．３ 最大吸收波长的测定 取对照品溶液和供试
品溶液各１ｍＬ于２５ｍＬ比色管中，加入Ｆ－Ｃ试剂
１ｍＬ，再加入质量分数为２０％的碳酸钠溶液２．０
ｍＬ，用去离子水定容至刻度线，摇匀，放置在５０℃
恒温水浴锅中，水浴４０ｍｉｎ，在紫外波长５００～８００
ｎｍ范围扫描，确定最大吸收波长为７５８ｎｍ。
２．４ 标准曲线的配制与线性关系 精密吸取没食
子酸对照品溶液０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６ｍＬ置
于１０ｍＬ棕色容量瓶中，按照“２．３”项下方法测定。
以吸光度 Ａ为纵坐标，标品浓度Ｃ作为横坐标作
图，并制作回归曲线，得到回归方程Ａ＝１７３．７Ｃ－
０．００４ ３，ｒ＝０．９９９ １。按 Ｍ（ｍｇ）＝Ｃ×２５ｍＬ×４
式进行含量计算，在０．００１～０．００６ｍｇ／ｍＬ浓度范
围内与没食子酸测定的吸光度Ａ的线性回归良好。
２．５ 回收率试验 取已知含量的样品６份，每份精
密称取１ｇ，精密加入一定量没食子酸对照品溶液，
按照“２．２”项下的方法制备供试品溶液，按照“２．３”
项下方法测定，结果没食子酸平均回收率为９７．
４８％，ＲＳＤ为２．１０％。
２．６ 单因素试验
２．６．１ 乙醇浓度对提取率的影响 精密称取１ｇ
药材５份，乙醇浓度分别为５０％、６０％、７０％、８０％、
９０％，药液比１：３０，超声４０ｍｉｎ，超声温度５０℃，超
声提取２次，计算提取率。结果乙醇浓度为７０％
时，总多酚提取率最高，见图１。
图１ 乙醇浓度对对叶大戟总多酚提取率的影响
２．６．２ 超声温度对提取率的影响 精密称取１ｇ
药材５份，乙醇浓度为７０％，药液比为１：３０，超声
４０ｍｉｎ，超声温度分别２０℃、３０℃、４０℃、５０℃、６０℃
进行超声提取，提取２次，计算提取率。结果超声温
度为４０℃时，总多酚提取率最高，见图２。
图２ 超声温度对对叶大戟总多酚提取率的影响
２．６．３ 药液比对提取率的影响 精密称取１ｇ药
材５份，乙醇浓度７０％，以药液比分别为：１：１０、１：
２０、１：３０、１：４０、１：５０，超声３０ｍｉｎ，超声温度４０℃，
提取２次，计算提取率。结果药液比１：４０时，总多
酚提取率最高，见图３。
图３ 药液比对对叶大戟总多酚提取率的影响
２．６．４ 超声时间对提取率的影响 精密称取１ｇ
药材５份，乙醇浓度７０％，药液比１∶４０，超声温度
４０℃，分别超声２０、３０、４０、５０、６０ｍｉｎ，提取２次，计
算提取率。结果提取时间为４０ｍｉｎ时，总多酚提取
率最高，见图４。
图４ 时间对对叶大戟总多酚提取率的影响
２．６．５ 正交试验优化选择对叶大戟总多酚提取条
件 以乙醇浓度、药液比、超声温度和超声时间设计
为正交试验，由此建立正交试验表（表１）。各因素
对对叶大戟总多酚提取的影响主次顺序为Ｃ＞Ｄ＞
５２３ 第３期 刘 冲，等：对叶大戟总多酚超声提取工艺的研究
Ａ＞Ｂ，即超声温度＞提取时间＞乙醇浓度＞药液
比。超声温度和提取时间为主要影响因素，乙醇浓
度和药液比次之，最佳提取工艺为 Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ１，即体
积分数７０％的乙醇，药液比为１：４０，超声温度
４０℃，超声时间为３０ｍｉｎ，见表２、３。
表１ 正交设计因素水平表
水平 Ａ：乙醇浓度／％ Ｂ：药液比 Ｃ：超声温度／℃ Ｄ：超声时间／ｍｉｎ
１ ６０％ １：３０ ３０ ３０
２ ７０％ １：４０ ３５ ４０
３ ８０％ １：５０ ４０ ５０
表２ 正交试验设计表及结果
试验序号
因素
Ａ Ｂ Ｃ Ｄ
多酚含量ｍｇ／ｇ
重复１ 重复２ 重复３ 平均含量
１ １ １ １ １ ５．６３７ ５．６４２ ５．６５３ ５．６４４
２ １ ２ ２ ２ ５．５０２ ５．４９９ ５．４９９ ５．５００
３ １ ３ ３ ３ ８．２８６ ８．２９４ ８．２９３ ８．２９１
４ ２ １ ２ ３ ５．４７６ ５．４６８ ５．４６９ ５．４７１
５ ２ ２ ３ １ １０．９８５ １１．１０２ １１．０６９ １１．０５２
６ ２ ３ １ ２ ７．７０４ ７．７１８ ７．７２３ ７．７１５
７ ３ １ ３ ２ １０．２１２ １０．２２０ １０．２２２ １０．２１８
８ ３ ２ １ ３ ４．６０２ ４．６１１ ４．６１１ ４．６０８
９ ３ ３ ２ １ ６．７８８ ６．７９２ ６．８０５ ６．７９５
Ｋ１ ６．４７８ ７．１１１ ５．９８９ ７．８３０
Ｋ２ ８．０７９ ７．０５３ ５．９２２ ７．８１１
Ｋ３ ７．２０７ ７．６００ ９．８５４ ６．１２３
Ｒ １．６０１ ０．５４７ ３．９３２ １．７０７
表３ 方差分析
方差来源 偏差平方和 自由度 Ｆ值 Ｆ临界值
Ａ ３．８５５ ２ ０．３８０ ４．４６０
Ｂ ０．５４２ ２ ０．０５３ ４．４６０
Ｃ ３０．３９８ ２ ２．９９８ ４．４６０
Ｄ ４０．５６０ ２ ０．５６８ ４．４６０
误差 ５．７６２ ８
２．６．６ 总多酚最佳工艺提取验证试验 为考察上
述工艺的稳定性，精密称取１ｇ药材，按照该工艺条件
Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ１ 进 行 重 复 性 试 验 ３ 次，平 均 含 量 为
１１．１６３ｍｇ／ｇ，ＲＳＤ为０．０４９％，说明该提取工艺稳定。
３ 结论
本研究以乙醇浓度、药液比、提取温度和提取时
间为影响因素，并采用正交试验优化工艺。筛选出
对叶大戟中总多酚最佳提取工艺为 Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ１，即
体积分数７０％的乙醇，药液比为１：４０，超声温度
４５℃，超声时间为３０ｍｉｎ。对最佳提取工艺进行验
证试验，提取的对叶大戟中总多酚含量可达１１．１６３
ｍｇ／ｇ，ＲＳＤ为０．０４９％，实验结果表明Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ１ 提
取工艺简单、稳定性好，可为对叶大戟总多酚提取研
究提供理论依据。
参考文献：
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［收稿日期：２０１５－９－１０］
（本文编辑 施洋
）
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ａｂｌｅｓ ｏｆ ｚａｎａｍｉｖｉｒ－ｌｏａｄｅｄ ｓｏｌｉｄ ｌｉｐｉｄ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ
ｐｒｅｄｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅｉｒ ｃｅｌｕｌａｒ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ ｉｎ Ｃａｃｏ－２ｃｅｌ ｍｏｄｅｌ
［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２０１４，４７８：６０－６９．
［１６］ Ｓｉｎｇｈ ＲＳ，Ｍｉｃｈｅｌ Ｄ，Ｄａｓ Ｕ，ｅｔ ａｌ．Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ １，５－ｄｉａｒｙｌ－３－
ｏｘｏ－１，５－ｐｅｎｔａｄｉｅｎｅｓ：ａｎ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｍｅｍ－
ｂｒａｎｅ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ｕｓｉｎｇ Ｃａｃｏ－２ａｎｄ ＭＤＣＫ ｍｏｎｏｌａｙｅｒｓ［Ｊ］．
Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ．２０１４，２４：１９９－２０２．
［收稿日期：２０１５－１１－６］
（本文编辑 施洋）
６２３ 新 疆 医 科 大 学 学 报 第３９卷