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余甘子的抗衰老作用研究



全 文 :时珍国医国药 2 0 7年第 81 卷第 9期 U S HZI H EN M ED IC IN E AN D MA T ER』A M ED I CA R E S EAR CH Z (X 7y V O L. 18 N 0 . 9
余甘子的抗衰老作用研究
崔炳权 , 林元藻 `
(广东药学院 ,广东 广州 51 《XX拓
摘要 : 目的 研究余甘子的抗衰老作用及机制 。 方法 用不 同浓度的余甘子提取物灌可和用余甘子含全不 同的词料喂养
D 一 半乳枪所致衰老小鼠 , 用试别盒分别浏定小或血清、 心肌和肝中 so D , G SH 一 xP 活性以及其中的 M D A 和 LP F 含童 。
结果 余甘子能显著提高血清和组织中的超氧化物歧化酶 ( so )D 、 谷耽甘肤过氧化物醉 ( G S H 一 p 、 )活性 ,显著降低丙二
醛 ( M A)D 和脂质素 (廿 )F 含 1 。 结论 余甘子具有显著的杭衰老作用 。 这为余甘子食用和药用价值的开发提供 了实脸
依据 。
关键词 : 余甘子 ; 超氧化物歧化醉 ; 谷脱甘肤过氧化物畴 ; 脂质过氧化物 ; 抗衰老
中图分类号 : 2R 85 . 5 文献标识码 : A 文章编号 : 10 8习 8 0 5 ( 2X() 7 ) 09 一 10 刃2
S tU d y o n ht e A n it a ig n g E n触c t of 月妙枷n ht u s em b价 a L .
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G S H 一 P x , an d er d u e e d th e e o n t e n st of M D A
,
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余甘子 外对勿心 h su e州必icl a L . 又名 山油柑 、油甘子 、 余甘果
等 ,为大戟科叶下珠属植物余甘子的成熟果实 , 广泛分布在广东 、
福建 、 台湾 、贵州 、湖南 、 广西 、 四川 、 浙江和云南等省区 。 余甘子
性味甘 、酸 、涩 、 凉 , 归肺 、 胃经 。 其功能与主治为清热凉血 , 消
食健胃 , 生津止咳 ;用于血热血淤 、消化不良 、腹胀 、咳嗽 、喉痛及
口干川 。 明《本草纲目》曾记载 : “ 余甘子果 , 主补益气 , 久服轻
身 ,延年益寿 ” 。 余甘子营养价值高 ,具有一定的抗癌防衰老功
能 ,卫生部将余甘子列人首批 “ 既是食品又是药品 ” 的材料名单。
本文报道了余甘子对 D 一半乳糖所致衰老小鼠的抗衰老作用 , 旨
在为余甘子的食用和药用价值的开发提供实验依据 。
1 材料与方法
1
.
1 材料
1
.
1
.
1 药材 余甘子 ,采自广东普宁市和潮阳市 ,将余甘子凉干 ,
取适量余甘子 ,粉碎后蒸煮 , 回流 Z h , 过滤 , 定容 ,得余甘子提取
液 , 配成两种浓度 : 以生药记分别为 O, 6 岁mI 和 1 . 2 岁耐 ;将余甘
子粉碎后 , 过 12 0 目筛 ,拌于饲料中 ,配制成 25 m g余甘子粉g/ 饲
料和 50 m g 余甘子粉 / g 饲料 。
1
.
1
.
2 动物 昆明种 S P F 级小鼠 60 只 , 雌雄各半 ,体重为 ( 20 土
2 ) g
, 由广州市白云区穗北实验动物养殖场提供 。
1
.
1
.
3 试剂 超氧化物歧化酶 ( SO D ) ,脂质过氧化物 ( LP O ) 、脂
质素 (廿 )F 、谷胧甘肚过氧化物酶 ( G S H 一 p x )用南京建成生物工
程公司的试剂盒测定 ,其它试剂均为分析纯。
l
,
2 方法
1
.
2
.
1 实脸方法 〔卜 刁] 将小鼠以标准饲料喂养 5d 后随机分为 6
组 ,每组 or 只 ,分别是对照组 ;D 一 半乳糖衰老模型组 ;低浓度余
甘子提取物灌胃组 ;高浓度余甘子提取物灌胃组 ;小剂量余甘子
饲料组 ;大剂量余甘子饲料组 。 对照组 :颈背部皮下注射生理盐
水 0 . 2 耐 ,同时灌服生理盐水 0 . 2 耐 , 1 次 / d 。
D 一 半乳糖衰老模型组 :每 日颈背部皮下注射 l % D 一 半乳
糖 0 . 2 耐 ,同时灌服生理盐水 0 . 2 耐 。
低浓度 、高浓度余甘子提取物灌胃组每 日颈背部皮下注射
1% D 一半乳糖 0 . 2 耐 ,同时分别灌胃余甘子提取物 ( 浓度为 0 . 6
岁耐 和 1 . 2 岁耐 )各 o . Z inl 。
小 、大剂量余甘子饲料组 :每 日颈背部皮下注射 1% D 一 半
乳糖 0 . 2 耐 ,同时分别给予 25 gm 余甘子粉 / g 饲料和 50 m g余甘
子粉 / g 饲料的饲料 6 90
实验期间小鼠自由取食和饮水 ,第 30 天 , 眼眶取血 ,分离血
清 ,断椎处死 ,取心 、 肝用生理盐水洗净 ,称重 , 用生理盐水制成匀
浆 ,离心取上清液备用 。
1
.
2
.
2 测定方法 依照试剂盒说明书方法测定。
so D 测定用黄嗓吟法 1z[ : 规定血清中 s 0 D 活力以每毫升反
应液中 SO D 抑制率达到 50 % 时所对应的 SO D 量为一个活力单
位 ( U ) , 即 U/ mI ,组织中 SO D 活力以每毫克组织蛋白在 l 耐 反
应液中 SO D 抑制率达到 os % 时所对应的 SO D 量为一个活力单
位( U ) , 即 U/ m即 or t o
LoP 的测定用丙二醛 ( MD A )法 a[J : Lp o 降解产物中的 MD A
可与硫代巴比妥酸 ( hit ba it iur c ac id , T BA ) 反应生成红色产物在
52 3 n m 处有最大吸收峰 。 单位 : 血清 为 n mo F ml , 组织为 n m o F
收稿日期 : 2X() 7孤仍 ; 修订日期 : 2X() 7仍 一 1
荟金项目: 2仪巧 年度广东药学院断药研发墓金资助项 目 ( N o . x尹巧 一 01 )
作者简介 :崔炳权 ( 19 6 一 ) , 男 (汉族 ) , 陕西风翔人 , 现任广东药学院讲 师 ,
硕士学位 ,主要从字生物活性物质性质和作用机制 的研究工作 .
. 通讯作者简介 :林元藻 ( 19 46 一 ) , 男 ( 汉族 ) , 江西南康人 , 现任广 东药学
院教授 , 学士学位 , 主要从事天然活性物质生理功能及应用研究工作 .
mgP rD

G S H 一 xP 测定用二硫对硝基苯甲酸法 a1[ 。 血清中 sG H 一 xP
活力为 0 . 1 闹 血清在 37 ℃反应 5 m in ,扣除非酶反应 ,使体系中
Gs H 浓度降低 l 卜m o F L 为一个活力单位 ( U ) ;组织中 Gs H 一 p x
活力以每毫克蛋白 ,每分钟扣除非酶反应 ,使体系中 G S H 一 xP 浓
度降低 1 卜m心 L 为一个活力单位 ( u ) 。
LP F 测定用荧光比色法闭 , 单位 :血清为 u / ml , 组织为 u / g
2 10 0
U SH IZ H EN M E D IC I N E A ND MA T E IR A M E D IC A R ES EA R C H Z峨洲)7 V O L . 18 N0 . 9 时珍国医国药 20 7 年第 81 卷第 9 期
1
.
2
.
3 数据处理 实验结果以 元土 , 表示 ,用 SPS S l l . O 软件进行
统计分析比较 ,采用单因素方差分析检验其显著性。
2 结果
2
.
1 余甘子对血清中 S OD , ` S H 一体 , M D A 和 1尸 F 的影响 结果
见表 l 。 从表 1可以看出 ,与衰老模型组比较 ,余甘子能显著提
高血清中 SO D 活性 ,但高浓度提取物灌胃组与低浓度提取物灌
胃组以及大剂量余甘子饲料组和小剂量余甘子饲料组之间有显
著差异 ; 同样余甘子也显著提高了血清中 G s H 一 p x 的活性 ,但大
剂量余甘子饲料组与其它组之间差异显著 ;余甘子极显著降低了
血清中 M D A 的含量 ,但低浓度提取物灌胃组与其它给药组比较
降辐较小 ;余甘子显著降低了血清中 LP F 的含量 ,余甘子饲料组
与灌胃组之间无显著差异 。 与衰老模型组比较 ,小剂量余甘子饲
料组中血清 SO D , GS H 一 xP 活性提高不明显 ,但 M A D 和 LP F 却
显著下降。 大剂量余甘子饲料组中 , 血清 So D , G S H 一 xP 活性显
著提高 , MD A 和 LP F 极显著下降。
2
.
2 余甘子对心肌中 so D不S H 一 xP , MDA 和 LP F 的影响 结果
见表 2 。 表 2 表明 : 与衰老模型组相比 ,余甘子能显著提高心肌
中 S OD , G S H 一 p x 活性 ,显著降低心肌中 MD A 和 Lp F 的含量 。
大剂量余甘子饲料组能极显著提高 So D , G S H 一 xP 活性 ,极显著
降低 M A D , LP F 含量 。
表 l 余甘子对血清中 S O D , G S H 一 px , M D A 和 LP F的影响 (无土 : )
S O D / u
· 司 一 , P灯 M D A / n m o l · m l
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D 一半乳糖衰老模型
低浓度提取物灌胃
高浓度提取物灌胃
小剂量余甘子饲料
大剂量余甘子饲料
24 3
.
07 士 2 5
.
2 7
.
2 3 1
.
8 5 士 13 . 3 5
24 3
.
2 6 士 18
.
5 3
.
25 9
.
2 1 士 2 2
.
(为二
2 46
.
39
士 1 6 . 6 3 .
2 6 3
.
4 2 士 19 . 10 章 `
二卫
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.
5 1 士 0 . 4 2 ’
2
.
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2
.
4 8 土 0 . 8 1 .
2
.
38 士 0 . 5 8二
2
.
39 土 0
.
19 二
2
.
27 士 0
.
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1 1
.
5 3 士 1
.
77
.
12
.
8 1 士 1 . 49
1 1
.
2 6 士 1 . 62
.
10
.
9 8 士 1 . 3 3 .
10
.
5 2 士 2
.
5 6二
10
.
2 6 土 1 . 7 5 ’ .
别一照组一对
与 D 一 半乳搪衰老模型组比较 , ’ 尸 < 0 . 05 , ’ . P < 0 . 01
衰 2 余甘子对心肌中 S O D . G S H 一 p x , MD A 和 LP F 的影晌 ( 云士 , )
红0849nSO D/ u · m gP m t G S H 一 u . m gP m t M D A/ n m o l · m gP or t L P F/ u ·
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别一照组一对
D 一 半乳搪衰老模型
低浓度提取物灌胃
高浓度提取物灌胃
小剂量余甘子饲料
大剂量余甘子饲料
19 8
.
57 土 8 . 2 1 .
17 2
.
4 3 士 6
.
4 5
18 3
.
49 土 9 . 0 3 .
2 0 3
.
72 士 5 . 4 2 .
2 1 1
.
8 3 土 10
.
07
.
2 3 3
.
26 士 2 7
.
18
’ .
20
.
2 6 上 2
23
.
12 土 3 .
19
.
8 9 士 3 .
.
7 3 上 4 .
11 1
.
2 6 土 3 .
18
.
7 4 土 2 . 16 .
18
.
8 1 士 3 . 1 3 .
16
.
2 6 土 1 . 8 8 , .
与 D 一 半乳搪衰老模型组比较 , ’ 尸 < 0 . 05 , 二 尸 < 0 . 01
2
.
3 余甘子对肝中 so D 声S H 一 xP , M D A 和 LP F 的影响 结果见
表 3 。 与衰老模型组相比 ,余甘子能显著提高肝中 S O D , G SH 一 xP
的活性 ,能显著降低肝中 M DA 和 L P F 的含量 。 大剂量余甘子饲
料组中 , SO D , G S H 一 xP 活性提高显著 , M D A , 廿F 显著降低 。 灌
胃组和小剂量余甘子饲料组之间在提高 SO D , G SI 卜 xP 活性方面
无显著差异 ,但肝中 M DA , L P F 含量却极显著降低 。
表 3 余甘子对肝中 S O D , sG H 一 xP . M D A 和 廿F的影响 (无 士 , )
组别 S OD/ u · m即 , * 一 ` G S H 一 p灯 u · m即。 t 一 ’ M D A / n m o l · m即 or t 一 ’ 廿称 u · g 一 ’
对照 2 12 . 4 3 土 10 . 2 1 . 13 7 . 5 4 士 6 . 8 6 . 3 . 7 6 士 0 . 5 3 ’ 2 6 . 8 3 士 3 . 2 7 .
D 一半乳搪衰老模型 18 3 . 5 9 土 8 . 3 8 1 1 1 . 6 3 士 8 . 7 2 3 . 8 9 士 0 . 3 1 2 9 . 5 8士 2 . 15
低浓度提取物灌胃 20 1 . 2 3 士 6 . 23 . 14 1 . 5 2 士 13 . 1 1 ’ 3 . 6 2 士 0 . 4 8 . ’ 2 7 . 26 土 4 . 16 `
高浓度提取物灌胃 2 14 . 5 6 士 9 . 32 ` 15 6 . 5 8 土 8 . 3 2 ’ 3 . 5 8 土 0 . 8 7 二 2 4 . 4 3 士 3 .科 二
小剂量余甘子饲料 2 26 . 8 3 * 1 1 . 4 3 . 15 8 . 6 土 4 . 7 5 . 3 . 5 5 士 06 1二 2 4 . 24 士 4 . 06 . *
大剂量余甘子饲料 _ _ _ 梦 7
.
6
士 8 . 75 ” _ _ _ 168 卫卫生 5 19 ’ . 3通 9* 0 .犯 . ’ 23 . 97 士 2 . 1 1“
与 D 一 半乳搪衰老模型组比较 , ’ 尸 < 0 . 05 , 二 尸 < 0 . 01
3 讨论 L P F 的含量 , 这可能是余甘子提取物在提取过程中活性物质被破
解释机体衰老发生的学说多种多样 ,但自由基学说 ( fer e ar d一 坏或损失所致 。
ic al ht eo yr )是被普遍接受的衰老学说之一 。 自由基学说认为 : 衰 有研究表明 ,抗氧化剂一般是通过两条途径实现抗氧化 , 一
老过程源于代谢产生的 自由基和脂质过氧化物 ( LP O )会破坏生 是直接清除过量的自由基 , 二是通过增强体内抗氧化系统 , 抑制
命大分子物质 (核酸 、 蛋 白质 、 糖类 、 脂类等 ) 及细胞膜的结构从 自由基的产生 6[] 。 余甘子的抗氧化抗衰老也是通过以上两种途
而导致衰老 。 即 :随着年龄增长 ,体内自由基与脂质过氧化物含 径实现的 ,在血清和肝中 S O D 和 G S H 一 xP 活性提高不显著的条
量增高 ,而超氧化物歧化酶活性降低 , 机体对自由基损害的防御 件下 ,其中的 M D A 和 廿 F 却极显著降低 ,说明此时余甘子是通
能力逐渐下降 , 加速了机体的衰老进程 s1[ 。 过其中所含的活性物质 (如维生素 c ,维生素 E , 多酚 , s 0 D 等 )在
S o D
,
G SH 一 xP 是机体抗氧化系统中重要的酶类 。 能对机体 体内可以通过起氢供体的作用而阻断和终止自由基连锁反应链 ,
代谢中产生的超氧离子进行歧化反应 ,减轻或消除自由基对机体 阻止和抑制氧自由基反应和脂质过氧化反应的病理性加剧 , 抑制
的损害而抗衰老 。 M D A 和 L P F作为 LP O 的代表产物 ,是衡量机 LP O 及其代谢产物 M DA 等毒性物质的生成 ,从而发挥抗氧化作
体自由基代谢的敏感指标 ,其含量能客观地反映机体产生 自由基 用 。 而高浓度提取物灌 胃组 和大剂量余甘子饲料组 中 , so D ,
的水平 。 因此 , 用机体 SO D , G SH 一 xP 活力上升和 M D A , L p F 含 GS H 一 xP 活性提高显著 , M DA 和 L PF 均极显著降低 ,说明余甘子
量下降可以作为抗氧化 、抗衰老的指标 。 除通过其中所含活性物质抗氧化外 , 还通过提高体内抗氧化系
实验结果显示 ,余甘子能显著提高血清和组织中的 S O D , 统 ,特别是 S O D , G S H 一 xP 活性来抑制或清除自由基的产生而抗
GS H
一 xP 活性 , 能显著降低 M DA 和 廿 F 含量 , 具有明显的抗氧 氧化抗衰老的 。
化抗衰老的生理作用 。 从各指标的变化幅度来看 ,余甘子饲料比 另外 ,余甘子中所含有的微量元素如 nz , cu , eS 在抗氧化中
提取物更能明显提高 SO D 和 GS H 一 xP 活性 , 显著降低 M D A 和 也有重要作用 , cu 是 SOD 的活性 中心组分 ; nz 能稳定 SO D 结
2 10 1
时珍国医国药 2X() 7 年第 18 卷第 9 期 U S H IZ H EN M E DI C IN E A N D M A I , ER I A ME D I CA R E S EA RC H Z仪y7 V O L . 18 N 0 . 9
ó .JóJ es一lù, .J工,`飞ù4气ù ùO月矛rllJùseLr月ó,LlesF.L户构 ; eS 是一种强抗氧化剂 ,这些元素可消除或拮抗自由基 ,保护
组织细胞免受自由基氧化攻击 v[J 。
人类疾病多与自由基的过盛有关 ,超氧离子是所有其他活性
氧自由基产生的源泉 ,所以消除超氧离子至关重要 。 通过增强或
提高体内 so D , Gs H 一 xP 活性或补充活性稳定的外源 So D , 以及
抗氧化的活性物质 ,消除超氧离子 ,是抗衰老的主要方法 ,而余甘
子正是具备这些特征的优质天然药用生物资源 。 因此 ,余甘子的
药理和保健功能的研究与开发对防病抗衰老具有重大的意义 。
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维药芹菜籽总黄酮含量测定及提取工艺研究
乌莉娅 · 沙衣提 , , 耿 萍2 , 虞慧云 ,
( 1
. 新疆医科大学中医学院 ,新疆 乌鲁木齐 83 X() 54 ; 2 . 新疆医科大学研究生院 ,新疆 乌鲁木齐 83 X() 54 )
摘要 : 目的 检测 维药芹莱籽中总黄酮的含量 ,并优选其提取工艺 。 方法 分别采用超声提取法和索氏提取法 , 用 比色法
比较维药芹菜籽中总黄酮 的含量 。 结果 以芦丁为对照品 时 , 超声提取法刻得芹菜籽中总黄酮的含童为 19 . 61 % ; 索氏
提取法测得芹菜籽中总黄酮的含童为 1 6 . 32 % 。 结论 超声提取法更为简便 、德定 、 可行 、 重现性好 。
关键词 : 芹莱籽 ; 总黄酮 ; 提取
中图分类号 : 2R 84 . ;2 2R 91 . 5 文献标识码 : A 文章编号 : 10 8习 8 0 5 ( 20 7) 0 一 102 刃2
S加d y o n ht e C o n t e n t L随t e n nr lna it o n o f T o at l R a v o n io ds an d E x t r a c it n g P r OC es i n yU gn r
M e d iic n e C e le叮 S e d s
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( 1
. 矛吸 J it 沁an l hC iesn o eM d ic al cS ic cen lsn 公“ et of XI I公i a gn eM d ic a l nU ~ itr
, 价“ m uq i 83 0 54 , hC ian ;
2
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n a v o n o id s in C e le叮 s e e d s w as e o m户灯 e d by e o l硒 m e t刁 . R es ul st W卜e n ur [ in w as u s e d as s ant dadl m aet ir al , t h e a v e仆 gI e e o n et n t of
ot t a l fl va
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id s i n C e le斗 s e de s e x I’a e t w as 1 9 . 6 1% 场 ul tr a s o n ie ex actr t io n , hw ile 16
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o n o id s in C e le叮 se d s ex tacr t 15 e on v e n ie n t
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芹菜助 iu 。 乎。优。 le o L . 又名香芹 、旱芹 ,是伞形科一年生或
两年生草本植物 ,喜肥沃土坡 ,全国和世界各地均有栽培川 。 维
药芹菜籽是芹菜的干燥成熟果实 。 维医临床表明 ,其性二级干
热 ,具有散气 、消肿 、止痛 、利尿 、降血压的作用 。 在维吾尔药中主
要用于治疗高血压病 、 关节炎 、类风湿关节炎 、气滞性子宫炎 、腹
水 、肾脏等疾病川 。 目前对其挥发油成分研究的比较多 ,其挥发
油主要成分为 a 一芹子烯 、柠檬烯 、 丁基苯酞等3[, 4〕 。 并且从其正
丁醇部位分离出 4 个黄酮类化合物〔’ 〕 , 分别为 : 木犀草素一 ` -
O一 D 一 葡萄糖昔 , 木犀草素一O一 D 一葡萄糖昔 ,香叶木素一 0一
D
一葡萄糖昔 ,柯伊利素。 实验表明 ,芹菜中含有丰富的黄酮类化
合物 .1[ , 具有降压安神 、 降血脂 、 保护血管和增强免疫力等功
能 [ ’ ) 。 但对其黄酮含量测定的研究还未见报道 。 本实验拟对两
种方法提取物中总黄酮含量进行分析测定 , 旨在为维医临床用药
收稿 日期 :2 0 7习卜 17 ; 修订日期 :2 0 7仍 -20
基金项目 : 新 住维 吾 尔 自治 区高校科研计 划科学研 究重 点项 目 ( No .
月E D U ZX( 抖 12 8 )
作者简介 :乌莉娅 · 沙依提 ( 195 5 一 ) , 女 ( 维吾 尔族 ) , 新脸乌香木齐人 , 现
任新桩 医科大学中医学院副教授 , 主要从事中维药资源及化学成分教学
研究工作 .
及对芹菜的综合开发利用提供科学依据。
1 仪器与材料
1
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1 仪界 Spe c tru 耐ab 54 紫外分光光度计 (上海市棱光有限公
司 ) ; K Q 一 4X(J D B 型数控超声清洗器 ( 昆山市超声仪器有限公
司 ) ; 电子天平 ( s aort ir us 德国产 ) ; D Z F 一印2 1 型真空干燥箱 (上海精密实验设备有限公司 ) ; DRT 一 xS 型恒温电热套 (郑州长城
科工贸有限公司 ) ; RE 一 52 旋转式蒸发器 (上海亚荣生化仪器
厂 ) ; S H B 一 m 循环水式多用真空泵 ( 郑州长城科工贸有限公
司 ) 。
1
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2 材料 芦丁标 准品 ( 中国药品生物制品检定所 , 0 50 -
97 05 ) ;芹菜籽 (购于新疆和阂维吾尔医院 , 由本校乌莉娅老师鉴
定 ) ;所用试剂均为分析纯 。
2 方法与结果
2
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1 样品溶液的制备
2
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1
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1 精密称取芹菜籽 2 9 , 置于干燥的索氏提取器中 ,用石
油醚回流脱脂 l h ,弃去石油醚提取液 。 再加入甲醇 20 耐 超声
提取两次 , 时间分别为 30 , 20 m in ,超声温度为 25 ℃ ,过滤并合并
滤液 。 回收甲醇 ,挥干后用甲醇溶解 ,置于 25 耐 容量瓶中加甲
醇定容 , 摇匀 。 此为样品溶液 I 。
2
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1
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2 称取芹菜籽细粉 2 9 , 于真空干燥箱中干燥 6 h ,温度为
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