全 文 ：第 22 卷 第 1 期
2012年2月 总 105期
中 国 药 物 化 学 杂 志
Chinese Journal of Medicinal Chemistry
Vol. 22 No. 1 p． 38
Feb. 2012 Sum 105
收稿日期:2011 － 07 － 14
基金项目:国家自然科学基金项目(20602041，30900002，U0932601，81072553)
作者简介:霍培元(1983 －) ，女(汉族) ，河北衡水人，硕士;* 通讯作者:韩力(1978 －) ，女(满族) ，辽宁凤城人，副
教授，博士，主要从事天然药物化学研究，Tel:(024)23256666 － 5250，E-mail:lihan@ mail. cmu. edu. cn。
文章编号:1005 － 0108(2012)01 － 0038 － 06
傣药黑面神内生菌 Bacillus pumilus化学成分研究
霍培元1，陈华红2，姜 怡3，韩 力1* ，徐丽华3，黄学石1
(1. 中国医科大学 代谢病分子机制与药物研究所，辽宁 沈阳 110001;2. 楚雄师范学院 化学与生命科学系，
云南 楚雄 675000;3. 云南大学 云南省微生物研究所，微生物药物国家工程研究中心，云南 昆明 650091)
摘 要:目的 研究一株从傣药黑面神(Breynia fruticosa)中分离得到的内生菌 Bacillus pumilus的化学成分。方
法 采用正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱等方法进行分离，利用理化性质及波谱数据并结合文
献对照确定化合物的结构。结果 从 Bacillus pumilus发酵液中分离得到 23 个已知化合物，分别鉴定为 12-羟基
茉莉酮酸(1)、环-(色氨酸-缬氨酸)-二肽(2)、环-(色氨酸-异亮氨酸)-二肽(3)、环-(亮氨酸-异亮氨酸)-二肽
(4)、环-(亮氨酸-亮氨酸)-二肽(5)、环-(亮氨酸-缬氨酸)-二肽(6)、吲哚-3-甲酸(7)、吲哚-3-甲醛(8)、黄豆醇
B(9)、4，7-二羟基异黄酮(10)、4，7-二羟基-6-甲氧基异黄酮(11)、4，5，7-三羟基异黄酮(12)、对羟基苯乙酸
(13)、N-(4-戊氧基)乙酰胺(14)、3-甲硫基-丙烯酸(15)、10-甲基-十一烷酸(16)、十三烷酸(17)、12-甲基-十
四烷酸(18)、十五烷酸(19)、十六烷酸(20)、(Z)-9-十六烯酸(21)、10-甲基-11-羟基-正十二烷酸(22)、9，10-
亚甲基十八烷酸(23)。结论 化合物 1 ～ 8、13 ～ 23 为首次从黑面神内生菌 Bacillus pumilus 代谢产物中分离得
到。
关键词:Bacillus pumilus;黑面神;化学成分;内生菌
中图分类号:R284 文献标志码:A
植物内生菌是指其生活史的一定阶段生活在
活体植物组织内、又不引起植物明显病害的微生
物。由于植物内生菌与宿主植物存在一定的生物
信息联系，从植物内生菌中寻找和发现新的活性
化合物已经成为植物内生菌研究的一个热点［1］。
黑面神(Breynia fruticosa)是大戟科黑面神属灌
木，为傣药帕弯藤的原植物［2］。本文作者对采自
云南西双版纳的黑面神中分离到的一株内生菌
Bacillus pumilus 的化学成分进行研究，得到了 23
个已知化合物，通过 ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、
GC-MS 等波谱数据分析及与文献数据对照确定它
们的结构为 12-羟基茉莉酮酸(1)、环-(色氨酸-缬
氨酸)-二肽(2)、环-(色氨酸-异亮氨酸)-二肽(3)、
环-(亮氨酸-异亮氨酸)-二肽(4)、环-(亮氨酸-亮氨
酸)-二肽(5)、环-(亮氨酸-缬氨酸)-二肽(6)、吲
哚-3-甲酸(7)、吲哚-3-甲醛(8)、黄豆醇 B(9)、4，
7-二羟基异黄酮(10)、4，7-二羟基-6-甲氧基异黄
酮(11)、4，5，7-三羟基异黄酮(12)、对羟基苯乙
酸(13)、N-(4-戊氧基)乙酰胺(14)、3-甲硫基-丙
烯酸(15)、10-甲基-十一烷酸(16)、十三烷酸
(17)、12-甲基-十四烷酸(18)、十五烷酸(19)、十
六烷酸(20)、(Z)-9-十六烯酸(21)、10-甲基-11-
羟基-正十二烷酸(22)、9，10-亚甲基十八烷酸
(23)。化合物 1 ～ 8、13 ～ 23 为首次从黑面神内
生菌代谢产物中分离得到。化合物 9 ～ 12 与空白
培养基(YIM 61)共薄层，证明这 4 个化合物均来
自于培养基中的黄豆粉，并非微生物的代谢产物。
1 仪器与材料
核磁共振仪为 Bruker － AV － 600 MHz 和
Varian Mercury － VX 300 MHz 型;质谱仪为
Finnigan LCQ(Thermo)型;气相色谱-质谱联用仪
为 HP 6890 － HP 5973 型。薄层色谱用硅胶
GF254、硅胶 H、柱色谱用硅胶(71 ～ 90 μm，50 ～
71 μm)均为青岛海洋化工厂生产;Sephadex
LH-20 为 Pharmacia 公司产品;反相柱色谱硅胶
为 YMC * GEL ODS-A (50 μm，12 nm;YMC
Co. ，Ltd. ，日本)。其他试剂均为国药集团化学
试剂有限公司的分析纯试剂。
实验菌株从 2005 年 11 月采自西双版纳的植
物黑面神(Breynia fruticosa)中分离得到，由云南
大学、云南省微生物研究所姜怡博士鉴定为 Ba-
cillus pumilus;微生物样品保存于云南大学、云南
省微生物研究所，菌株号为 YIM 56368。
2 提取与分离
菌株分离纯化后，用 YIM 61 培养基(黄豆粉
10 g、蛋白胨 2 g、葡萄糖 20 g、可溶性淀粉 5 g、酵
母膏 2 g、NaCl 4 g、K2HPO4 0. 5 g、MgSO4·7H2O
0. 5 g、CaCO3 2 g、H2O 1 L，pH = 7. 8)发酵培养
80 L，滤出菌丝体，发酵液浓缩至约 10 L，用等量
乙酸乙酯萃取 4 次，得乙酸乙酯提取物 32 g。粗
提物经硅胶柱色谱分离，二氯甲烷-甲醇系统梯度
洗脱，得 到 9 个 流 分 (Fr. 1 ～ Fr. 9)。 Fr. 3
(700 mg)经 Sephadex LH-20 柱色谱分离，得 15
(10 mg)和另外 5 部分 Fr. 3-1 ～ Fr. 3-5。Fr. 3-3
(325 mg)经 ODS 柱色谱(6. 0 cm × 50 cm)分离
(100%乙腈洗脱) ，得化合物 16(25 mg)、17
(20 mg)、18 和 19 的混合物(47 mg)、20 和 21 的
混合物(10 mg)、23(6 mg)。Fr. 4(3. 48 g)经
Sephadex LH-20 柱色谱分离，硅胶柱色谱纯化，
得化合物 8(2 mg)和 9(10 mg)。Fr. 5(940 mg)
经 Sephadex LH-20 柱色谱分离，硅胶柱色谱纯
化，得化合物 12(13 mg)和 22(18 mg)。Fr. 6
(2. 40 g)先后经 Sephadex LH-20 柱色谱、硅胶柱
色谱、ODS 柱色谱分离得化合物 4(8 mg)、5
(8 mg)、6(9 mg)、7(7 mg)、11(35 mg)、14
(10 mg)。Fr. 7(1. 03 g)经 Sephadex LH-20 柱色
谱、硅胶柱色谱、ODS 柱色谱分离得化合物 1
(9 mg)、2(5 mg)、3(5 mg)、13(60 mg)。Fr. 8
用甲醇溶解出现白色不溶物，抽滤得化合物 10
(23 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1:无色油状物，ESI-MS 谱给出准分
子离子峰 m/z:244［M + NH4］
+、249［M + Na］+、
475［2M + Na］+、225［M － H］－、261［M + Cl］－、
451［2M － H］－，确定化合物 1 的分子质量为
226，结合 1H-NMR、13C-NMR谱数据确定分子式
为 C12H18O4，不饱和度为 4。
1H-NMR(600 MHz，
CD3OD)谱给出 2 个顺式取代烯双键上的质子信
号 δ 5. 48(1H，dt，J = 10. 8，7. 2 Hz)、δ 5. 42(1H，
dt，J = 10. 8，7. 2 Hz) ;1 个与氧相连的亚甲基信号
δ 3. 54(2H，t，J = 6. 6 Hz) ;2 个次甲基信号和 5 组
亚甲基信号。13C-NMR(150 MHz，CD3OD)谱中
给出 12 个碳信号，除了与氢谱相对应的碳信号
外，还有 1 个酮羰基信号 δ 221. 9 和 1 个羰基信号
δ 177. 0。1H-NMR(600 MHz，CD3OD)δ:5. 48
(1H，dt，J = 10. 8，7. 2 Hz，H-10) ，5. 42(1H，dt，
J = 10. 8，7. 2 Hz，H-9) ，3. 54(2H，t，J = 6. 6 Hz，
H-12) ，2. 68(1H，dd，J = 18. 6，7. 8 Hz，H-2) ，2. 39
(2H，t，J = 6. 6 Hz，H-8) ，2. 32(1H，dd，J = 18. 6，
8. 4 Hz，H-5) ，2. 31(1H，m，H-2) ，2. 31(2H，q，
J = 7. 2 Hz，H-11) ，2. 29(1H，m，H-3) ，2. 24(1H，
m，H-4) ，2. 09(1H，ddd，J = 18. 6，11. 4，9. 0 Hz，
H-5) ，1. 99(1H，m，H-7) ，1. 54(1H，m，H-4)。
13C-NMR(150 MHz，CD3OD) δ:177. 0(C-1) ，
93第 1 期 霍培元等:傣药黑面神内生菌 Bacillus pumilus 化学成分研究
40. 0(C-2) ，39. 2(C-3) ，28. 2(C-4) ，38. 6(C-5) ，
221. 9(C-6) ，55. 1(C-7) ，26. 4(C-8) ，129. 0(C-
9) ，129. 0(C-10) ，31. 8(C-11) ，62. 6(C-12)。化
合物 1 的理化性质、波谱数据与文献［3］对照一
致，故鉴定化合物 1 为 12-羟基茉莉酮酸。
化合物 2:淡黄色固体，ESI-MS 谱给出准分
子离子峰 m/z:308［M + Na］+、284［M － H］－，确
定 2 的分子质量为 285。结合1H-和13C-NMR 谱
数据确定其分子式为 C16H19N3O2，不饱和度为 9。
1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)谱中给出 5 个芳
香质子信号 δ:7. 58(1H，d，J = 7. 8 Hz) ，7. 27
(1H，d，J = 7. 8 Hz) ，7. 05(1H，d，J = 1. 8 Hz) ，
7. 00(1H，t，J = 7. 8 Hz) ，6. 92 (1H，t，J =
7. 8 Hz) ;2 个与杂原子相连的次甲基信号 δ 4. 13
(1H，m) ，δ 3. 47(1H，m) ;1 个亚甲基信号 δ 3. 19
(1H，dd，J = 16. 2，5. 4 Hz)、δ 3. 05(1H，dd，J =
16. 2，4. 2 Hz) ;2 个甲基信号 δ 0. 43(3H，t，J =
7. 2 Hz) ，δ 0. 47(3H，d，J = 7. 2 Hz) ;此外，还有 3
个活泼质子信号 δ:10. 85(1H，br s)、7. 99(1H，
br s)、7. 87(1H，br s) ;13C-NMR(150 MHz，DM-
SO-d6)谱中给出 16 个碳原子信号，除了与氢谱
相对应的碳信号，另外，还有 2 个羰基碳信号
δ 166. 3、δ 167. 3。 1H-NMR(600 MHz，DMSO-
d6)δ:10. 85(1H，br s，H-1) ，7. 99(1H，br s，H-
1) ，7. 87(1H，br s，H-4) ，7. 58(1H，d，J = 7. 8 Hz，
H-5) ，7. 27(1H，d，J = 7. 8 Hz，H-8) ，7. 05(1H，
d，J = 1. 8 Hz，H-2) ，7. 00(1H，t，J = 7. 8 Hz，H-
7) ，6. 92(1H，t，J = 7. 8 Hz，H-6) ，4. 13(1H，m，
H-3) ，3. 47(1H，m，H-6) ，3. 19(1H，dd，J = 16. 2，
5. 4 Hz，H-10) ，3. 05(1H，dd，J = 16. 2，4. 2 Hz，
H-10) ，1. 62 (1H，m，H-1″) ，0. 58 (3H，d，J =
7. 2 Hz，H-3″) ，0. 14(3H，d，J = 6. 6 Hz，H-2″)。
13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ:166. 3(C-2) ，
55. 3(C-3) ，167. 3(C-5) ，59. 1(C-6) ，124. 7(C-
2) ，108. 9(C-3) ，128. 1(C-4) ，119. 1(C-5) ，
118. 3(C-6) ，120. 7(C-7) ，111. 1(C-8) ，136. 1
(C-9) ，28. 9(C-10) ，31. 2(C-1″) ，16. 2(C-2″) ，
18. 4(C-3″)。化合物 2 的波谱数据与文献［4］对
照一致，故鉴定化合物 2 为环-(色氨酸-缬氨酸)-
二肽。
化合物 3:淡黄色固体，ESI-MS 谱给出准分
子离子峰 m/z:322［M + Na］+、298［M － H］－，确
定 3 的分子质量为 299。结合1H-和13C-NMR 谱
数据确定分子式为 C17 H21 N3O2，不饱和度为 9。
化合物 3 的 1H-NMR、13C-NMR谱数据与 2 很相
似，推测 3 同样为环二肽类化合物。 1H-NMR
(600 MHz，DMSO-d6)δ:10. 85(1H，br s，H-1) ，
8. 02(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-4) ，7. 83(1H，br s，H-
1) ，7. 58(1H，d，J = 7. 8 Hz，H-5) ，7. 27(1H，d，
J = 7. 8 Hz，H-8) ，7. 04(1H，d，J = 1. 8 Hz，H-
2) ，7. 00(1H，t，J = 7. 8 Hz，H-7) ，6. 91(1H，t，
J = 7. 8 Hz，H-6) ，4. 13(1H，m，H-3) ，3. 50(1H，
m，H-6) ，3. 23(1H，dd，J = 14. 4，4. 2 Hz，H-10) ，
3. 02(1H，dd，J = 14. 4，4. 2 Hz，H-10) ，1. 28(1H，
m，H-1″) ，0. 47(3H，d，J = 7. 2 Hz，H-4″) ，0. 47
(1H，m，H-2″) ，0. 43(3H，t，J = 7. 2 Hz，H-3″) ，
0. 36(1H，m，H-2″)。13C-NMR(150 MHz，DMSO-
d6)δ:166. 3(C-2) ，55. 3(C-3) ，167. 3(C-5) ，
58. 9(C-6) ，124. 7(C-2) ，108. 9(C-3) ，128. 1
(C-4) ，119. 1(C-5) ，118. 3(C-6) ，120. 7(C-
7) ，111. 1(C-8) ，136. 8(C-9) ，28. 6(C-10) ，
37. 9(C-1″) ，23. 0(C-2″) ，11. 7(C-3″) ，14. 5(C-
4″)。化合物 3 的波谱数据与文献［5］对照一致，
故鉴定化合物 3 为环-(色氨酸-异亮氨酸)-二肽。
化合物 4:白色粉末，ESI-MS 谱给出准分子离
子峰 m/z:225［M － H］－，确定 4 的分子质量为
226。结合1H-和13C-NMR 谱数据确定分子式为
C12H12N2O2。化合物 4 的
1H-NMR、13C-NMR数据
特点表明为环二肽类化合物。1H-NMR(300 MHz，
DMSO-d6)谱中给出 2 个活泼质子信号 δ:8. 19
(1H，br s) ，8. 06(1H，br s) ;2 个与杂原子相连的
次甲基信号 δ:3. 76(1H，m) ，3. 72(1H，m) ;4 个
甲基信号 δ:0. 94(3H，d，J = 7. 0 Hz) ，0. 90(3H，
d，J = 6. 6 Hz) ，0. 88(3H，d，J = 6. 6 Hz) ，0. 87
(3H，t，J = 7. 2 Hz)。13C-NMR(75 MHz，DMSO-
d6)谱中给出亮氨酸和异亮氨酸的特征信号
δ:168. 6，52. 4，43. 8，23. 7，23. 2，21. 9 和 δ:
166. 9，58. 9，38. 4，24. 4，15. 3，11. 9。化合物 4 的
波谱数据与文献［6］对照一致，故鉴定化合物 4
为环-(亮氨酸-异亮氨酸)-二肽。
化合物 5:白色粉末，由 1H-NMR和 13C-NMR
波谱特征确定 5 为环二肽类化合物。1H-NMR
(300 MHz，DMSO-d6)谱中给出 1 个活泼质子信
号 δ 8. 23(1H，br s) ;1 个与杂原子相连的次甲基
信号 δ 3. 72(1H，m) ;2 个甲基信号 δ 0. 88(3H，
d，J = 7. 2 Hz) ，δ 0. 86 (3H，d，J = 7. 2 Hz)。
13C-NMR(75 MHz，DMSO-d6)谱中给出亮氨酸的
特征信号 δ:168. 6，52. 8，43. 7，23. 7，23. 2，21. 8。
04 中 国 药 物 化 学 杂 志 第 22 卷
化合物 5 的波谱数据与文献［6］对照一致，故鉴
定化合物 5 为环-(亮氨酸-亮氨酸)-二肽。
化合物 6:白色粉末，由 1H-NMR和 13C-NMR
波谱特征确定 6 为环二肽类化合物。ESI-MS 谱
给出准分子离子峰 m/z:235［M + Na］+。
1H-NMR(300 MHz，C5D5N)谱中给出 2 个活泼质
子信号 δ 9. 23(1H，br s) ，δ 9. 12(1H，br s) ;2 个
与杂原子相连的次甲基信号 δ 4. 27(1H，m) ，
δ 4. 12(1H，m) ;4 个甲基信号 δ:1. 17(3H，d，J =
7. 5 Hz) ，1. 10(3H，d，J = 6. 6 Hz) ，0. 95(3H，d，
J = 6. 0 Hz) ，0. 93(3H，d，J = 6. 0 Hz)。13C-NMR
(75 MHz，C5D5N)谱中给出亮氨酸和缬氨酸的特
征信号 δ:168. 4，52. 7，44. 2，23. 5，22. 3，20. 5 和
δ:166. 8，59. 9，31. 5，18. 3，16. 5。化合物 6 的波
谱数据与文献［6］对照一致，故鉴定化合物 6 为
环-(亮氨酸-缬氨酸)-二肽。
化合物 7:淡黄色粉末，ESI-MS 谱给出准分
子离子峰 m/z:160［M － H］－、196［M + Cl］－，确
定分子质量为 161，结合1H-和13C-NMR 谱数据
确定 分 子 式 为 C9H7NO2，不 饱 和 度 为 7。
1H-NMR(300 MHz，DMSO-d6)谱中共给出 6 个
质子信号，包括 1 个活泼质子信号 δ:11. 81(1H，
br s) ;5 个芳香质子信号 δ:7. 99(1H，d，J =
8. 4 Hz) ，7. 45(1H，d，J = 8. 4 Hz) ，7. 15(2H，m) ，
7. 98(1H，s)。13C-NMR(75 MHz，DMSO-d6)δ:
132. 4(C-2) ，107. 5(C-3) ，126. 1(C-4) ，120. 6(C-
5) ，122. 3(C-6) ，121. 1(C-7) ，112. 3(C-8) ，136. 5
(C-9) ，166. 1(C-10)。化合物 7 的波谱数据与文
献［7］报道的吲哚-3-甲酸对照一致，故鉴定化合
物 7 为吲哚-3-甲酸。
化合物 8:淡棕色固体，根据 EI-MS m/z:145
［M］+及碎片峰 m/z:144、116、89，确定其分子质
量为 145。1H-NMR(300 MHz，DMSO-d6)谱中给
出 2 个活泼氢信号 δ:11. 89(1H，br s) ，9. 73(1H，
s) ;5 个芳香质子信号 δ:8. 13(1H，s) ，8. 00(1H，
br t，J = 7. 2 Hz) ，7. 46(1H，br d，J = 7. 2 Hz) ，
7. 20(2H，m)。化合物 8 的氢谱数据与文献［8］
报道的吲哚-3-甲醛对照一致，故鉴定化合物 8 为
吲哚-3-甲醛。
化合物 9、10、11、12 的理化性质、波谱数据与
文献［9 － 10］对照一致，确定它们的结构分别为
黄豆醇 B(9)、4，7-二羟基异黄酮(10)、4，7-二
羟基-6-甲氧基异黄酮(11)、4，5，7-三羟基异黄酮
(12)。本文作者的前期工作［9 － 10］曾对一株链霉
菌新种 Streptomyces pleomorphus sp. nov. (培养
基为 YIM 302:黄豆粉 20 g，甘露醇 20 g，pH =
7. 0 ～ 7. 5)的化学成分进行了研究，也同样分离
得到这 4 个化合物。因此，将这 4 个化合物与两
种空白培养基(YIM 302，YIM 61)共薄层，证明
这 4 个化合物均来自于培养基中的黄豆粉，并非
微生物的代谢产物。
化合物 13:白色针状晶体(甲醇)，ESI-MS 谱给
出准分子离子峰m/z:151［M －H］－、187［M +Cl］－，
确定其分子质量为 152。 1H-NMR(600 MHz，
MeOH-d4)谱给出 1 组呈 AABB偶合的芳香质
子信号 δ:7. 08(2H，d，J = 8. 4 Hz) ，6. 71(2H，d，
J = 8. 4 Hz) ;1 个亚甲基信号 δ 3. 47(2H，br s)。
13C-NMR(150 MHz，MeOH-d4)谱中给出 8 个碳
信号 δ:176. 8，157. 3，131. 3(2 × C) ，127. 2，116. 2
(2 × C) ，41. 7。根据 13 的物理性质和1H-NMR、
13C-NMR 谱数据鉴定化合物 13 为对羟基苯
乙酸。
化合物 14:黄色针状结晶(甲醇) ，ESI-MS 谱
给出准分子离子峰 m/z:144［M + H］+、166［M +
Na］+、142［M － H］－、178［M + Cl］－，确定其分
子质量为 143，结合1H-和13C-NMR 谱数据确定
其分子式为 C7H13 NO2，不饱和度为 2。
1H-NMR
(300 MHz，CDCl3)谱中共给出 13 个氢信号，包
括 1 个活泼质子信号 δ 6. 39(1H，br s) ;3 个亚甲
基信号 δ:3. 15(2H，q，J = 6. 6 Hz) ，2. 45(2H，t，
J = 7. 0 Hz) ，1. 70(2H，m) ;2 个甲基信号 δ:2. 08
(3H，s) ，1. 89 (3H，s)。 13C-NMR (75 MHz，
CDCl3)谱中给出 7 个碳原子信号 δ:208. 7，
170. 3，40. 7，38. 8，29. 8，23. 2，22. 9。化合物 14
的物理性质、波谱数据与文献［11］报道的 N-(4-
戊氧基)乙酰胺对照一致，故鉴定化合物 14 为 N-
(4-戊氧基)乙酰胺。
化合物 15:白色针晶(氯仿) ，根据 ESI-MS
m/z:117［M － H］－ 确定其分子质量为 118。
1H-NMR(300 MHz，CDCl3)谱给出 1 个活泼氢信
号 δ 10. 80(1H，br s) ;1 组呈反式偶合的烯键上
的质子信号 δ:7. 82(1H，d，J = 14. 8 Hz)、5. 58
(1H，d，J = 14. 8 Hz) ;1 个甲基信号 δ 2. 29(3H，
s)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)谱给出 4 个碳信
号 δ:170. 6，150. 3，112. 2，14. 4。以上数据与文
献［9］对照一致，故鉴定化合物 15 为(E)-3-甲硫
基-丙烯酸。
化合物 16、17、22、23，以及 18 和 19 的混合
14第 1 期 霍培元等:傣药黑面神内生菌 Bacillus pumilus 化学成分研究
物、20 和 21 的混合物根据相应的 1H-NMR 谱数
据特点确定均为脂肪酸类化合物。将它们分别通
过气相色谱-质谱联用仪分析，其质谱特征峰与标
准图谱对照，相似度均大于 93%，确定它们的结
构分别为 10-甲基十一烷酸(16)、十三烷酸(17)、
12-甲基-十四烷酸(18)、十五烷酸(19)、十六烷酸
(20)、(Z)-9-十六烯酸(21)、10-甲基-11-羟基-正
十二烷酸(22)、9，10-亚甲基十八烷酸(23)。
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Chemical constituents from the endophyte Bacillus pumilus
derived from Breynia fruticosa
HUO Pei-yuan1，CHEN Hua-hong2，JIANG Yi3，
HAN Li1* ，XU Li-hua3，HUANG Xue-shi1
(1． Laboratory of Metabolic Disease Research and Drug Development，China Medical University，
Shenyang 110001，China;2． Department of Chemistry ＆ Life Science，Chuxiong Normal University，
Chuxiong 675000，China;3． Yunnan Institute of Microbiology，The National Engineering Center
for Research of Microbial Pharmaceuticals，Yunnan University，Kunming 650091，China)
Abstract:In this work，chemical constituents of an endophyte Bacillus pumilus isolated from Breynia frutico-
sa，which is a Dai nationality medicinal plant，was studied． The EtOAc extracts of the fermentation broth of
Bacillus pumilus were isolated by various chromatographic techniques，such as silica gel column chromatog-
raphy，ODS column chromatography，Sephadex LH-20 column chromatography and so on． The structures
were elucidated on the basis of spectral analysis． Twenty-three compounds were obtained，and their structures
were identified as 12-hydroxyjasmonic acid(1) ，cyclo-(Trp-Val)-dipeptide(2) ，cyclo-(Trp-Ile)-dipeptide
(3) ，cyclo-(Leu-Ile)-dipeptide(4) ，cyclo-(Leu-Leu)-dipeptide(5) ，cyclo-(Leu-Val)-dipeptide(6) ，in-
dole-3-carboxylic acid(7) ，indole-3-carbaldehyde(8) ，soyasapogenol B (9) ，4，7-dihydroxyisoflavone
(10) ，4，7-dihydroxy-6-methoxyisoflavone(11) ，4，5，7-trihydroxyisoflavone(12) ，2-(4-hydroxyphenyl)
24 中 国 药 物 化 学 杂 志 第 22 卷
acetic acid(13) ，N-(4-oxopentyl)acetamide(14) ，(E)-3-(methylthio)acrylic acid(15) ，10-methylunde-
canoic acid(16) ，tridecanoic acid(17) ，12-methyl-tetradecanoic acid(18) ，pentadecanoic acid(19) ，hexade-
canoic acid(20) ，(Z)-9-hexadecanoic acid(21) ，11-hydroxy-10-methyldodecanoic acid(22) ，9 10-methyle-
neoctadecanotic acid(23)． Compounds 1 － 8，13 － 23 were isolated from the metabolites of Bacillus pumilus
derived from Breynia fruticosa for the first time．
Key words:Bacillus pumilus;Breynia fruticosa;chemical constituent;
櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅
endophyte
(上接第 37 页)
Improved synthesis of miriplatin，an antitumor drug
WANG Qing-kun，PU Shao-ping* ，ZHU Ze-bing，LI Xue-jie，
WEN Zhi-shou，MIAO Xiang-hong
(Kunming Gui Yan Pharmaceutical Co．，Ltd．，Yunnan Engineering and Technology Center of
Platinum-based Anti-tumor Drug，Kunming 650106，China)
Abstract:Miriplatin(1) ，a novel lipophilic platinum complex，had been developed to treat hepatocellular car-
cinoma． An improved synthetic route was designed and used to prepare the target compound． The intermediate
Pt(C6H14N2) (H2O)2(NO3)2 solution was synthesized from Pt(C6H14 N2) (I)2 and AgNO3，and it was
treated with the anion exchange resin to give the key intermediate Pt(C6H14N2) (OH)2(2)． The key inter-
mediate 2 was subsequently reacted with CH3(CH2)12COOH in n-butanol to give target compound with sat-
isfied yield 75%(based on Pt(C6H14N2)I2)． The structure of the target compound was identified by elemen-
tal analysis，ESI-MS，FT-IR，1H-NMR，thermal analysis and specific rotatory power，and the structure was
consistent with the target compound．
Key words:chemical synthesis;antitumor drug;miriplatin
34第 1 期 霍培元等:傣药黑面神内生菌 Bacillus pumilus 化学成分研究