免费文献传递   相关文献

大叶碎米荠水提取液的镇痛抗炎作用研究



全 文 :·论 著· 2011 年 9月第 8卷第 27期
中国医药导报 CHINA MEDICAL HERALD
大叶碎米荠(Cardamine macrophylla Willd.)属于十字花
科碎米荠属植物,多年生草本 ,是一种重要的野生食用蔬
菜和药用资源。在全国各地均有分布,生长于海拔 1 600~
4 200 m 的地区,在湖南省隆回、洞口等县区亦可大量采集。
据文献报道[1-3]:大叶碎米荠含有丰富的蛋白质、膳食纤维、氨
基酸、矿物质和多种维生素,是一种正在开发的绿色野生植
物资源;同时具有独特的药用功效。 据《中华本草》、《全国中
草药汇编》所载,大叶碎米荠以全草入药,可煎汤或炖肉服,
主要功效为健脾、利水、消肿,凉血止血,主治虚劳内伤头晕,
体倦乏力,脾虚、水肿、小便不利、白带崩漏、尿血等。 相关研
究表明其挥发油成分具有抑菌和抗氧化作用。 全草药用,利
小便、止痛及治败血病[4]。据调查考证民间用大叶碎米荠治疗
腰痛有显著疗效,我校退休老中医应用大叶碎米荠治疗腰肌
劳损、腰痛 100 多例,取得了较好的疗效,有效率达 90%以
上,特别是用药后镇痛效果显著。为此,特对大叶碎米荠的镇
痛抗炎作用做初步研究。
1 材料与方法
1.1 动物
昆明种小鼠,体重 18~22 g,雌雄兼用;Wistar 大鼠,体重
160~190 g,雌雄兼用。 均由邵阳医专实验动物中心提供。
1.2 药品
100%大叶碎米荠水提取液,每毫升相当于原生药 1 g,用
时以蒸馏水稀释到所需浓度,由本研究组制备。哌替啶注射液
(青海制药厂有限公司,批号:20100602);地塞米松注射液(天
津药业集团有限公司,批号:20100502);二甲苯(广东光华化学
厂有限公司,批号:20090903),伊文氏蓝,冰醋酸均为分析纯。
1.3 仪器
日本岛津紫外可见分光光度计 UV-2450(日本产);GJ-
8402 型热板测痛仪(浙江宁海白石电子医药仪器厂)。
1.4 实验方法[5-6]
1.4.1 镇痛作用
1.4.1.1 热板法 选用体质量 18~22 g 的昆明种雌鼠, 热板测
痛仪调节温度为(55.0±0.5)℃,每次放 1 只动物在热板上,小
鼠舔后足为疼痛指标,小鼠自放至热板上到出现舔后足所需
时间小于 5 s或大于 30 s或跳跃者弃之不用。 给药前隔 5 min
测定痛阈 2次,取均值。 选择痛阈合格的 40只小鼠随机分成
4组, 每组分别腹腔注射生理盐水 (生理盐水组),50%、20%
的大叶碎米荠水提取液(高、低剂量组),0.2%盐酸哌替啶注
大叶碎米荠水提取液的镇痛抗炎作用研究
刘江舟,向一恒,黄 芬,刘凤林,周效思
邵阳医学高等专科学校,湖南邵阳 422000
[摘要] 目的:观察植物大叶碎米荠水提取液的镇痛抗炎作用。方法:以大叶碎米荠为研究对象,采用小鼠热板法、小鼠
扭体法观察镇痛作用,采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、鸡蛋清所致的大鼠足跖肿及毛细血管通透性实验模型观察抗
炎作用。结果:大叶碎米荠水提取液能明显延长热板所致的小鼠舔后肢的时间;减少醋酸致小鼠扭体反应的次数;对
小鼠耳肿胀及大鼠足肿胀均有显著的抑制作用;降低毛细血管的通透性;显著抑制醋酸所致的小鼠腹腔炎症渗出。
结论:大叶碎米荠具有镇痛抗炎作用。
[关键词] 大叶碎米荠水提取液;镇痛作用;抗炎作用
[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2011)09(c)-012-03
Study on analgesic and antiinflammatory effects of extract fluid of Cardamine
macrophylla Willd.
LIU Jiangzhou, XIANG Yiheng, HUANG Fen, LIU Fenglin, ZHOU Xiaosi
Shaoyang Medical College, Shaoyang 422000, China
[Abstract] Objective: To evaluate the analgesic and anti-inflammatory effects of extract fluid of Cardamine macrophylla
Willd.. Methods: The analgesic and anti-inflammatory effects of extract fluid of Cardamine macrophylla Willd. were ob-
served by the hot-plate procedure, mice wringing test, auricula swelling caused by xylene, foot-plate swelling caused by
egg white and the experimental model of capillaries permeability of abdominal capillaries in mice induced by acetic acid.
Results: It was found that extract fluid of Cardamine macrophylla Willd. markedly increased the pain threshold in mice in-
duced by hot plate, significantly reduced twisting times of mice induced by acetic acid, evidently suppressed mice auricula
swelling induced by dimethylbenzene. It markedly inhibited rats foot-plate swelling inducing by egg white albumen. It re -
duced permeability of abdominal capillaries and inflammatory peritoneal exudation induced by acetic acid in mice. Con-
clusion: Cardamine macrophylla Willd. plays a significant role in anti-inflammation and analgesia.
[Key words] Extract fluid of Cardamine macrophylla Willd.; Analgesia; Anti-inflammation
[基金项目] 2010 年度湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划资助
项目(No.528)。
[作者简介] 刘江舟(1991-),男, 湖南湘潭人,邵阳医专 2009 级药学 1 班
在校学生,在药学专业学习。
[指导教师] 周效思(1952-),男,湖南邵阳人,现任邵阳医专教授,主要从
事临床药理学教学及研究工作。
12
2011 年 9月第 8卷第 27期 ·论 著·
CHINA MEDICAL HERALD 中国医药导报
生理盐水组
高剂量组
低剂量组
地塞米松组
组别
剂量
(g/kg)
-
5.00
2.00
0.02
动物数
10.0
10.0
10.0
10.0
左右耳片重量之差
(mg)
1.03±0.17
0.82±0.14*﹟﹟△△
0.95±0.16**﹟
0.72±0.14*
表 3 大叶碎米荠对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(x±s)
注:与生理盐水组比较,*P<0.05,**P>0.05;与地塞米松组比较,﹟P<
0.05,##P>0.05;与低剂量组比较,△△P>0.05
生理盐水组
高剂量组
低剂量组
盐酸哌替啶组
组别
剂量
(g/kg)
-
5.00
2.00
0.02
动物数
10
10
10
10
扭体反应次数
(次)
36.7±10.4
14.1±14.0*﹟﹟△△
15.0±9.6*﹟﹟
10.7±13.2*
扭体反应
发生率(%)
100.0
70.0
90.0
60.0
表 2 大叶碎米荠对醋酸所致小鼠扭体反应的效果(x±s)
注:与生理盐水组比较,*P<0.05;与盐酸哌替啶组比较,##P>0.05;与
低剂量组比较,△△P>0.05
射液(盐酸哌替啶组)各 0.1 ml/10 g。给药后 30、45、60 min 分
别测定各组的痛阈,同样隔 5 min测 2 次,取均值。
1.4.1.2 小鼠扭体法 取昆明种小鼠 40 只,随机分成 4 组,每
组分别腹腔注射生理盐水 (生理盐水组),50%、20% 的大叶
碎米荠水提取液(高、低剂量组),0.2%盐酸哌替啶注射液(盐
酸哌替啶组)各 0.1 ml/10 g,半小时后每只小鼠腹腔注射新
配制的 0.6%醋酸溶液 0.2 ml, 计算 15 min 内小鼠扭体反应
(腹部凹陷、伸展后肢、臀部抬高)次数。
1.4.2 抗炎作用
1.4.2.1 小鼠耳肿胀法 取昆明种小鼠 40 只,雌雄兼用,随机
分成 4 组,每组分别腹腔注射生理盐水(生理盐水组),50%、
20%的大叶碎米荠水提取液(高、低剂量组),0.2%地塞米松
注射液(地塞米松组)各 0.1 ml/10 g,每天给药一次,共 3 d。
于末次给药后半小时,给小鼠右耳内外侧涂二甲苯 0.05 ml/耳,
左耳不涂作对照。 30 min 后颈椎脱臼处死动物,沿耳廓基线
剪下小鼠左右耳,用 8 mm 直径打孔器在同一部位取下圆耳
片,立即在分析天平上称重(mg),每耳的右耳片减去左耳片
的重量差作为肿胀度进行比较。
1.4.2.2 蛋清致大鼠足跖肿胀的实验 取 Wistar 大鼠 40只,随
机分为 4组:高剂量组(腹腔注射 50%大叶碎米荠液 1ml/100 g);
低剂量组(腹腔注射 20%大叶碎米荠液 1 ml/100 g);生理盐
水组(腹腔注射注射生理盐水 1 ml/100 g),地塞米松组(腹腔
注射 0.2%地塞米松注射液 1 ml/100 g)。 各组每天给药一次,
共 3 d, 最后一次给药后分别将大鼠左后爪踝关节上端腿毛
下周围处以记号笔作一清晰标记,然后用毛细管放大法 [5],测
定大鼠足体积,半小时后给各组大鼠后足皮下注射 10%新鲜
蛋清 0.1 ml 致炎, 致炎后 30、60、90 min 各测左足肿胀容积
一次,各组肿胀容积与盐水对照组进行比较。
1.4.2.3 对小鼠毛细血管通透性增高的影响 小白鼠 40 只,
分为高剂量组(腹腔注射 50%大叶碎米荠液 0.1 ml/10 g);低
剂量组 (腹腔注射 20%大叶碎米荠液 0.1 ml/10 g); 对照组
(腹腔注射生理盐水 0.1 ml/10 g); 地塞米松组 (腹腔注射
0.2%地塞米松注射液 0.1 ml/10 g)。每天给药 2 次,共 3 d。最
末一次给药半小时后,静脉注射 0.5%的伊文氏蓝 0.1 ml/10 g,
继而腹腔注射 0.6%醋酸溶液 0.1 ml/10 g,20 min 后脱臼处
死动物,迅速剪开腹腔,用生理盐水 5 ml 冲洗腹腔,吸取腹
腔液,离心 5 min(1 000 r/min),取上清液用紫外可见分光光
度计,在 590 nm 波长下测定吸收光度值(A)。
1.5 统计学方法
应用 SPSS 13.0 软件进行统计分析, 各组数据均采用均
数±标准差(x±s)表示,多组资料的比较采用完全随机设计的
单因素方差分析方法, 多组间两两比较采用 LSD-t 检验,以
P<0.05 为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 大叶碎米荠对小鼠痛阈的影响
5.0、2.0 μg/kg 剂量的大叶碎米荠均能显著提高小鼠对
热反应的痛阈值,与生理盐水组比较差异有统计学意义 (P<
0.05)。 5.0 g/kg 剂量组作用强度与 2.0 μg/kg 剂量组给药后
45、60 min 无显著性差异(P>0.05)。 生理盐水组小鼠的痛阈
值前后无显著性差异(P>0.05)。 实验结果提示,大叶碎米荠
水提取液能提高小鼠对热刺激的痛阈值,见表 1。
2.2 大叶碎米荠对醋酸所致小鼠扭体反应的影响
与生理盐水组比较,5.0、2.0 μg/kg 剂量大叶碎米荠提取
液能显著抑制醋酸所致小鼠扭体反应次数(P<0.05),高、低
浓度组与与盐酸哌替啶组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
结果见表 2。
2.3 大叶碎米荠对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
生理盐水组小鼠右耳接触二甲苯后肿胀明显, 而高、低
剂量组及地塞米松组则肿胀较轻。肿胀度高剂量组与生理盐
水组比较有显著性差异(P<0.05);低剂量组与生理盐水组比
较无显著性差异(P>0.05)。 结果见表 3。
2.4 大叶碎米荠对鸡蛋清致大鼠足跖肿胀的影响
大叶碎米荠水提取液高、低剂量组均能减轻大鼠足肿胀
程度, 30、60、90 min 足肿胀度与生理盐水组比较有显著性
生理盐水组
高剂量组
低剂量组
盐酸哌替啶组
组别
剂量
(g/kg)
动物数
-
5.00
2.00
0.02
10
10
10
10
24.3±3.4
26.0±1.9
26.3±2.6
24.8±3.5
24.1±3.2
41.8±11.7*﹟﹟△
34.4±9.1*﹟
48.1±11.6*
28.0±13.6
40.0±6.1*﹟△△
41.0±10.3*﹟
51.7±10.3*
26.2±2.7
38.6±12.2*﹟﹟△△
32.9±7.2*﹟
46.8±9.6*
痛阈值(s)
给药前
给药后
30 min 45 min 60 min
表 1 大叶碎米荠对小鼠痛阈的影响(x±s)
注:与生理盐水组比较,*P<0.05;与盐酸哌替啶组比较,﹟P<0.05,##P>0.05;与低剂量组比较,△P<0.05,△△P>0.05
13
·论 著· 2011 年 9月第 8卷第 27期
中国医药导报 CHINA MEDICAL HERALD
《中国现代医生》杂志征订启事
《中国现代医生》杂志是卫生部主管、中国医学科学院主办的国家级医疗卫生期刊,中国核心期刊(遴选)数据库、
中国期刊全文数据库、 中文科技期刊数据库全文收录期刊, 解放军医学图书馆 CMCC/CMCI, 国内统一刊号:CN11-
5603/R,国际刊号:ISSN1673-9701,邮发代号:80-611,全国各地邮局均可订阅,脱订者可直接通过发行部订阅。 每月出
版 3期,每期定价 15 元,全年 540 元。 国内外公开发行,主要登载国内外医疗、教学、科研和管理工作者在医药科研领
域中所取得的新理论、新成果、新经验、新技术、新方法。 主要栏目设有:专家述评、论著、综述、基础医学、药物研究、临
床研究、药物与临床、中医中药、临床护理、医院管理、误诊误治、个案报道、预防医学、健康研究、医学教育、检验与临
床、临床麻醉、病理研究、临床探讨、技术与方法、法医论坛等。凭订阅单复印件投稿,同等条件优先录用。欢迎各医药单
位、院校、厂家刊登产品和广告。
地 址:北京市朝阳区百子湾西里 402 号楼 403 室 《中国现代医生》杂志社发行部
邮 编:100124
电 话:010-59693870-8017
传 真:010-59693848
联系信箱:1979248054@qq.com 网址:www.zgxdys.com
联 系 人:缐红宇
生理盐水组
高剂量组
低剂量组
地塞米松组
组别
剂量
(g/kg)
-
5.00
2.00
0.02
动物数
10
10
10
10
A 值
1.29±0.42
0.70±0.34*﹟△
1.17±0.52**﹟﹟
0.74±0.59*
表 5 大叶碎米荠对醋酸所致小鼠毛细血管通透性的影响(x±s)
注:与对照组比较,*P<0.05,**P>0.05;与地塞米松组比较,﹟P<0.05,##P>
0.05;与低剂量组比较,△P<0.05
差异 (P<0.05), 其抗肿胀强度与地塞米松组作用相当 (P>
0.05),结果见表 4。
2.5 对小鼠毛细血管通透性增高的影响
高剂量组大叶碎米荠液水提取液能降低小鼠腹腔毛细
血管的通透性(P<0.05),减少小鼠腹腔伊文氏蓝渗出量,但
低剂量组大叶碎米荠水提取液腹腔伊文氏蓝渗出量与生理
盐水组无明显差异(P>0.05)。 结果见表 5。
3 讨论
本文采用了热板法和小鼠扭体实验来评估大叶碎米荠
水提取液的镇痛作用。 5.0、2.0 g/kg(相当于原药材)剂量大叶
生理盐水组
高剂量组
低剂量组
地塞米松组
组别
剂量
(g/kg)
动物数
-
5.00
2.00
0.02
10
10
10
10
左后足正常容积(ml)
0.37±0.05
0.38±0.03
0.36±0.03
0.38±0.04
0.50±0.05
0.42±0.04*﹟﹟△△
0.42±0.05*﹟﹟
0.41±0.04*
0.50±0.06
0.41±0.03*﹟﹟△△
0.43±0.09*﹟﹟
0.40±0.03*
0.46±0.06
0.38±0.03*﹟﹟△△
0.40±0.04*﹟﹟
0.41±0.03*
给药后不同时间的足跖肿胀度(ml)
30 min 60 min 90 min
表 4 大叶碎米荠对大鼠蛋清致足肿胀度的影响(x±s)
注:与生理盐水组比较,*P<0.05;与地塞米松组比较,##P>0.05;与低剂量组比较,△△P>0.05
碎米荠水提取液均能显著提高小鼠对热反应的痛阈值,且给
药 60 min 作用仍很明显, 说明大叶碎米荠水提取液具有较
好的镇痛作用。 采用 “小鼠耳廓肿胀法”、 “大鼠蛋清致炎
法”、“醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加法”, 评估大
叶碎米荠水提取液的抗炎作用,结果显示大叶碎米荠水提取
液高浓度具有明显抗炎作用(P<0.05)。 但低浓度大叶碎米荠
水提取液对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀症模型和醋酸所致小
鼠腹腔毛细血管通透性增加炎症渗出模型,与生理盐水组比
较无明显差异(P>0.05),实验揭示大叶碎米荠水提取液具有
较好的抗炎作用。
综上所述, 大叶碎米荠水提取液具有镇痛抗炎作用,本
研究为大叶碎米荠民间治疗腰肌劳损的开发利用提供了一
定的实验依据。
[参考文献]
[1] 董玮玮 ,鲁智丛,曲一,等.大叶碎米荠营养成分的研究 [J].天然产物研
究与开发,2007,19(B11):442-444.
[2] 李世丽 ,余道平,李策宏,等 .大叶碎米荠的开发与利用 [J].资源开发与
市场,2010,26(2):139-140.
[3] 郜瑞.大叶碎米荠和百里香的化学成分及活性研究[D].西安:陕西师范
大学,2009:168.
[4] 张宇,文涛,梁莉,等 .大叶碎米荠的组织培养和快速繁殖[J].植物生理
学通讯,2006,42(2):256.
[5] 徐叔云.药理实验方法学[M].2 版.北京:人民卫生出版社,2002:716.
[6] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2006:356.
(收稿日期:2011-07-01)
14