全 文 ：基金项目:国家自然科学基金项目(No． 81360652)
作者介绍:陈雪梅，女，研究方向:中药学，E － mail:568457652@ qq． com
通信作者:范源，男，博士研究生，副教授，硕士生导师，研究方向:天然活性产物治疗糖尿病研究，Tel:13708874680，E － mail:1647909799@
qq． com
5 ℃储藏条件下余甘子中没食子酸、单宁酸、β － PGG
含量的变化及分析
陈雪梅，陈平，王娟，张鑫，范源
(云南中医学院，云南 昆明 650500)
摘要:目的 新采摘余甘子在低温储藏条件下其没食子酸、单宁酸、五没食子酰基葡萄糖(β － PGG)的含量变
化。方法 新采摘余甘子置于 5 ℃恒温的棕色密封广口瓶中，每 3 天用反相高效液相色谱法(ＲP － HPLC)测定没
食子酸、单宁酸、五没食子酰基葡萄糖含量的变化。结果 5 ℃恒温条件下余甘子中没食子酸、单宁酸、五没食子酰
基葡萄糖含量 1 ～ 4 d均下降，之后单宁酸、五没食子酰基葡萄糖呈缓慢波动上升趋势，而没食子酸在 16 d 时开始
急剧上升。结论 比较 5 ℃恒温条件下余甘子褐变过程中没食子酸、单宁酸、五没食子酰基葡萄糖含量的变化，没
食子酸在余甘子褐变过程中变化更为敏感。5 ℃恒温条件下储藏余甘子果有利于预防褐变，可为余甘子中药养护
及褐变控制提供一定的参考。
关键词:余甘子;没食子酸;单宁酸;五没食子酰基葡萄糖;高效液相色谱;储藏
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:A 文章编号:2095 －5375(2016)02 －0070 －004
doi:10． 13506 / j． cnki． jpr． 2016． 02． 003
Determination of gallic acid，tannic acid and β －PGG in Phyllanthus emblica L．
in 5 ℃ storage condition
CHEN Xuemei，CHEN Ping，WANG Juan，ZHANG Xin，FAN Yuan
(Yunnan University of Traditional Chinese Medicine，Kunming 650500，China)
Abstract:Objective To determine gallic acid，tannic acid and β － PGG content in fresh Phyllanthus emblica L． in 5
℃ storage condition． Methods Fresh Phyllanthus emblica L． fruit was kept in 5 ℃ temperature which was placed in
brown wide － mouth bottle． ＲP － HPLC method for the determination of gallic acid，tannic acid and β － PGG content in
Phyllanthus emblica L． every three day． Ｒesults Determination of gallic acid，tannic acid，β － PGG was decreased in 5 ℃
when it was at 1 ～ 4 days． Then tannic acid，β － PGG was slow fluctuation of upward trend and gallic acid began rising
sharply in 16 days． Conclusion Compared of gallic acid，tannic acid and β － PGG content in Phyllanthus emblica L． in 5
℃ storage condition，changes in Phyllanthus emblica browning of gallic acid was more sensitive． 5 ℃ storage condition was
good for fresh Phyllanthus emblica L． and prevention of browning． It can provide some references for Chinese medicine con-
servation and browning control．
Key words:Phyllanthus emblica L．;Gallic acid;Tannic acid;β － PGG;HPLC;Storage
余甘子(Phyllanthus emblica L． 或 amla)是大戟
科(Euphorbiaceae)叶下珠属(Phyllanthus)落叶乔木
或灌木资源植物，1990 年被收载于《中国药典》。余
甘子又称油甘子、滇橄榄、橄榄子、庵摩勒，其果实生
食酸甜酥脆，初食时酸涩味重，食后余味甘甜，故名
余甘子。余甘子在我国主要分布于福建、广东、云
南、贵州、四川、海南等省，近年被大量栽培，资源丰
富［1］。余甘子具有清热凉血，健胃消食，生津止渴
等作用［2］，且其果实中含有丰富的维生素 C、维生素
B1、维生素 B2、维生素 A 和维生素 P、单宁、超氧化
·07· 药学研究·Journal of Pharmaceutical Ｒesearch 2016 Vol． 35，No． 2
物歧化酶(SOD)等，具有较强的抗氧化作用。
余甘子果肉中涩味的主要来源是果肉中富含的
鞣质及有关多元酚类化合物，含量约为 11. 4%［3］。
酚类化合物主要有诃尼酸(chebulinic acid)、鞣花酸
(ellagic acid)、3 －乙基没食子酸(3 － ethoxy － gallic
acid)、诃子酸(chebulagic acid)、没食子酸(gallic
acid)等。挥发油类物质主要有 β － 波旁烯(β －
bourbonene)、二十四醇(tetracosanol)、二十四烷(tet-
racosane)、丁香油酚(eugenol)、β － 丁香烯(β －
Caryophyllene)［4］。
余甘子果采摘后易发生褐变，褐变率高，果面皱
缩，贮藏时间短，影响产品质量，制约供应和商品化
生产，对余甘子鲜果品质造成影响［5］。张福平等［6］
将余甘子果分别置于 5、10、15 ℃及室温条件下贮
藏，测定其失重率、好果率及可溶性固形物、维生素
C等含量，对比后认为 5 ℃是延长储藏期的最佳温
度。鲜切中药从采摘开始，就存在一个自身的动态
变化过程，即自身代谢过程。关于余甘子果褐变机
制、储藏养护方面的研究较少，本文测定 5 ℃恒温条
件下余甘子褐变过程中没食子酸、单宁酸、五没食子
酰基葡萄糖(β － PGG)含量的变化，并分析其变化
的可能机制。
1 材料与方法
1． 1 材料 云南楚雄采摘的新鲜余甘子果实;乙腈
(色谱纯)、甲醇(色谱纯)、丙酮(分析纯)、正己烷(分
析纯)、磷酸(分析纯)均购自云南丹赤贸易有限公
司;纯净水;没食子酸(中国食品药品检定研究院，批
号:110831 －201204);单宁酸标准品(成都迈斯克医
药科技有限公司，批号:130721);β － PGG标准品(成
都普瑞法科技开发有限公司，批号:14021908)。
1． 2 仪器 D2KW － D 电热恒温水浴锅;Agilent
1200 型高效液相色谱仪(VWD 紫外检测器);万分
之一分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。
1． 3 方法
1． 3． 1 没食子酸、单宁酸、β － PGG 对照品溶液的
制备 精密称定没食子酸对照品 0． 40 mg，于 10 mL
容量瓶中用 50%甲醇，制成 40 μg·mL －1的溶液，备
用。精密称取 0． 60 mg 单宁酸对照品，于 10 mL 容
量瓶中用乙醇、水、丙酮(70 ∶ 29 ∶ 1)溶液溶解并定
容，制备成浓度为 60 μg·mL －1的单宁酸标准溶液，
备用。精密称定 β － PGG对照品 1． 00 mg，于 10 mL
容量瓶中，用甲醇制成 100 μg·mL －1的溶液，备用。
1． 3． 2 没食子酸、单宁酸、β － PGG 供试品溶液的
制备 取适量去核余甘子果肉，精密称定，加入适量
石英砂研磨，尽量捣碎，称取 25 g 置具塞锥形瓶中，
精密加入 50%甲醇 25 mL，称定重量，加热回流 1． 5
h，70 ℃。放冷，再称定重量，用 50%甲醇补足减失
的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用 0． 45 μm 滤膜过
滤，即得。
1． 3． 3 没食子酸含量测定方法
1． 3． 3． 1 色谱条件 色谱柱为 Agilent Zorbax SB －
C18柱(4． 6 mm × 250 mm，5 μm)，以甲醇 － 0． 2%磷
酸溶液(5∶95)为流动相，检测波长为 273 nm［7］，柱
温:25 ℃，进样量:10 μL。
1． 3． 3． 2 没食子酸线性关系考察 精密称取对照
品 0． 50 mg，用 50%的甲醇溶解并定容至 10 mL 容
量瓶中，摇匀作为储备液。按上述没食子酸色谱条
件分别取 2、4、8、10、12 μL不同体积进样，以没食子
酸的峰面积(Y)对标准品的进样量(X)进行线性回
归，得方程 Y = 1 605． 7X － 3． 908 0，r = 0． 999 9。结
果表明，没食子酸峰面积值与进样量有良好的线性
关系，线性范围为 0． 20 ～ 0． 60 μg。
1． 3． 4 单宁酸含量测定方法
1． 3． 4． 1 色谱条件 色谱柱为 Agilent Zorbax SB －
C18柱(4． 6 mm ×250 mm，5 μm)，以甲醇 －水(80∶ 20)
为流动相，检测波长为 275 nm，柱温:25 ℃，进样量:
2． 0 μL。
1． 3． 4． 2 单宁酸线性关系考察 精密称取对照品
0． 80 mg，用乙醇、水、丙酮(70 ∶29 ∶1)溶液溶解并定
容至 10 mL容量瓶中，摇匀作为储备液。按上述单
宁酸色谱条件分别取 2、4、6、8、10 μL 不同体积进
样，以单宁酸的峰面积(Y)对标准品的进样量(X)
进行线性回归，得方程 Y = 7 314． 8X － 226． 91，r =
0． 999 3。结果表明，单宁酸峰面积值与进样量有良
好的线性关系，线性范围为 0． 16 ～ 0． 80 μg。
1． 3． 5 β － PGG 含量测定方法
1． 3． 5． 1 色谱条件 色谱柱为 Agilent Zorbax SB －
C18柱(4． 6 mm × 250 mm，5 μm)，流动相:0 min 时
乙腈 － 0． 1%磷酸(10∶90)，15 min时乙腈 － 0． 1%磷
酸(25∶75)，15． 1 min 时乙腈 － 0． 1%磷酸(25∶75)，
20 min 时乙腈 － 0． 1%磷酸(25 ∶ 75)，检测波长为
281 nm，柱温:25 ℃，进样量:20 μL。
1． 3． 5． 2 β － PGG 线性关系考察 精密称取对照
品 1． 0 mg，用 50 %的甲醇溶解并定容至 10 mL 容
量瓶中，摇匀作为储备液。按上述没食子酸色谱条
件分别取 11、13、15、17、19 μL 不同体积进样，以 β
－ PGG的峰面积(Y)对标准品的进样量(X)进行线
性回归，得方程 Y = 2 193． 8X － 44． 233，r = 1． 0。结
·17·药学研究·Journal of Pharmaceutical Ｒesearch 2016 Vol． 35，No． 2
果表明，β － PGG 峰面积值与进样量有良好的线性
关系，线性范围为 1． 1 ～ 1． 9 μg。
2 试验结果与分析
2． 1 试验数据 结果见表 1。
表 1 5 ℃储藏条件下没食子酸、单宁酸、β － PGG含量
测定时间(d)
测定数据(μg·g － 1) 平均值(μg·g － 1) ＲSD(%)
没食子酸 单宁酸 β － PGG 没食子酸 单宁酸 β － PGG 没食子酸 单宁酸 β － PGG
1
152． 844 0 5 568． 690 2 70． 071 9
151． 497 4 5 561． 143 8 67． 959 3
141． 807 7 5 566． 865 1 66． 975 3
148． 716 4 5 565． 566 4 68． 335 5 4． 05 0． 07 2． 32
4
47． 529 9 597． 635 0 15． 351 4
53． 540 5 695． 091 9 14． 748 9
51． 291 9 1 100． 914 8 15． 586 0
0． 787 4 797． 880 6 15． 228 8 5． 98 33． 45 2． 84
7
45． 727 1 1 361． 316 1 33． 018 8
42． 247 5 1 350． 700 6 33． 242 6
39． 376 6 1 252． 131 2 48． 911 9
42． 450 4 1 321． 382 7 38． 391 1 7． 49 4． 56 23． 73
10
60． 801 9 2 537． 506 8 26． 977 1
54． 893 8 2 538． 689 4 26． 781 8
49． 467 2 2 537． 137 7 26． 771 8
55． 054 3 2 537． 778 0 26． 843 6 10． 30 0． 03 0． 43
13
77． 948 3 816． 397 5 61． 606 5
57． 030 6 799． 361 0 65． 016 8
97． 682 5 895． 596 7 48． 741 6
77． 553 8 837． 118 4 58． 455 0 26． 21 6． 13 14． 68
16
73． 798 2 2 363． 790 5 41． 799 2
72． 442 7 2 367． 844 0 42． 722 0
55． 562 5 2 361． 931 3 35． 365 8
67． 267 8 2 364． 521 9 39． 962 3 15． 10 0． 13 10． 03
19
134． 617 5 1 200． 072 9 37． 046 2
138． 254 7 1 582． 335 9 37． 720 2
129． 541 9 1 415． 138 5 58． 026 9
134． 138 0 1 399． 182 4 44． 264 4 3． 26 13． 70 26． 94
22
97． 337 5 2 238． 975 1 69． 667 6
95． 432 7 2 239． 720 2 69． 423 2
95． 574 5 2 134． 146 5 69． 203 2
96． 114 9 2 204． 280 6 69． 431 3 1． 10 2． 76 0． 33
5 ℃储藏条件下余甘子中没食子酸含量在 1 ～ 4
d呈下降趋势，4 ～ 16 d 基本保持平稳趋势，16 ～ 22
d出现一个峰值波动，4 ～ 22 d 总体出现了一个缓慢
上升的趋势(见图 1);5 ℃储藏条件下前 4 d余甘子
中单宁酸的含量变化相似呈下降趋势。4 ～ 22 d 期
间余甘子中单宁酸含量在 10 d和 16 d时到达峰值，
总体波动趋势逐渐趋于缓慢上升(见图 2);5 ℃储
藏条件下余甘子中 β － PGG含量从第 1 天开始呈急
剧下降趋势，之后呈缓慢波动上升的趋势，到 22 d β
－ PGG含量接近第 1 天(见图 3)。
图 1 5 ℃储藏条件下没食子酸含量
2． 2 试验分析 余甘子果实中富含的水解单宁是
一种易水解的多酚化合物，其能在酸性、碱性条件下
水解产生没食子酸、β － PGG 等中间产物，这些中间
产物之间存在相互转化的可能［8］。采摘后 1 ～ 4 d
图 2 5 ℃储藏条件下单宁酸含量
图 3 5 ℃储藏条件下 β － PGG含量
余甘子中单宁酸急剧减少，推测其可能是因单宁酶
水解作用使单宁酸转化为没食子酸和糖类。Feld-
man等［9］认为，凡含有六羟基联苯基(HHDP)及其
衍生物取代基的化合物，其取代几乎均发生在葡萄
糖的 C － 2，4 或 C － 3，6 位，即葡萄糖的构型为1C4
型，该特点与大戟科植物中鞣质类成分相似。因此，
推测余甘子中没食子酸 D －葡萄糖反应可生产 β －
·27· 药学研究·Journal of Pharmaceutical Ｒesearch 2016 Vol． 35，No． 2
PGG，β － PGG因 HHDP及没食子酰基的数目、结合
位置等不同，可组成各种结构的物质，如木麻黄
鞣亭［10］。
研究表明，没食子酸可作为褐变底物与 PPO 结
合，导致褐变［11 － 13］。所以，推测在余甘子褐变开始
一定时间内，没食子酸都处于一个低水平状态，直到
其褐变到一定程度，由于余甘子果实呼吸作用、变质
等，没食子酸和 β － PGG 开始累积。但低温储藏能
有效地控制采后果实的呼吸速率、蒸腾作用，防止病
菌引起的变质，同时相对密封的条件下能与氧气隔
绝，使部分导致变质的有氧菌在缺氧条件下死亡，调
节代谢，起到保鲜作用［14］。但余甘子中没食子酸、
单宁酸、β － PGG 在 5 ℃相对密封条件下含量在储
藏 16 d以后均出现缓慢上升趋势，表明长期低温储
藏仍然可导致褐变发生。
3 结论
本试验表明，5 ℃储藏条件下没食子酸、单宁
酸、β － PGG含量保持一个相对平稳的趋势，褐变过
程明显减缓。综上所述，本试验提示没食子酸、单宁
酸、β － PGG可作为余甘子褐变的质控指标，其中没
食子酸在褐变过程中含量变化更为敏感。在 5 ℃储
藏条件下余甘子中没食子酸、单宁酸、β － PGG 的含
量变化说明，该储藏条件可延缓余甘子褐变，使余甘
子储藏时间延长。本试验可为进一步研究余甘子褐
变机制、褐变防控提供一定的参考。
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