全 文 ：收稿日期:2010-12-22; 修订日期:2011-06-28
基金项目:湖北省教育厅中青年科研项目(No． Q20091601)
作者简介:曹 艳(1975-) ，女(汉族) ，湖北房县人，现任湖北中医药大学
讲师，博士学位，主要从事中药新制剂、新技术研究工作．
* 通讯作者简介:余尚工(1950-) ，女(汉族) ，湖北武汉人，现任湖北中医
药大学教授，学士学位，主要从事药理学研究工作．
甘遂及醋炙甘遂提取物对小鼠的
肾脏毒性及利尿作用的研究
曹 艳1，2，苏汉文3，周志文1，成忠皇1，方念伯1，余尚工1*
(1．湖北中医药大学中药资源与中药复方省部共建重点实验室，湖北 武汉 430065;
2．湖北中医药大学药学院，湖北 武汉 430065; 3．武汉大学人民医院，湖北 武汉 430060．)
摘要:目的 比较甘遂及醋炙甘遂提取物对小鼠的肾脏毒性及利尿作用，探讨醋炙对甘遂毒性及利尿作用的影响。方法
用改良蔻氏法测定甘遂及醋炙甘遂对小鼠的半数致死量，以半数致死量为依据设计不同给药剂量。给药 1 周后，处死小
鼠，取血并制备肾脏组织切片。检测小鼠血肌酐(Scr)和血清总蛋白含量(TP)的值，并观察小鼠肾脏的组织切片及利尿
作用。结果 醋炙甘遂提取物对小鼠的肾脏毒性小，且表现出较明显的利尿作用。结论 醋炙处理可显著降低甘遂毒性且
具有良好的利尿作用，研究为甘遂醋炙工艺制订及临床安全用药提供理论依据。
关键词:醋炙甘遂; 小鼠; 肾脏毒性; 利尿作用; 炮制工艺
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 11． 062
中图分类号:R285． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2011)11-2711-02
甘遂 Euphorbia kansui T． N． liou ex T． P． wang 为大戟科多年
生草本植物甘遂的干燥块根，作为中药，具有泻水逐饮，消肿散结
的功效，临床用于治疗肝腹水、镇痛、抗病毒、抗生育和抗肿瘤
等［1］。含甘遂的中药方剂可治疗胰腺 、卵巢、肝脏及胃肠道恶性
肿瘤［2］。因其毒性及刺激性，须醋炙后方可入药［3］。聂淑琴
等［4］研究了炮制对甘遂特殊毒性及药效的影响。刁义平［5］对生
甘遂和醋甘遂提取物进行了急性毒性和刺激性实验研究。而对
其肾脏毒性及其利尿作用的研究较少。该试验分别制备甘遂及
醋炙甘遂的醇提取物，观察两种提取物对小鼠的肾脏毒性和外周
血液生化指标血肌酐(Scr)、血清总蛋白含量(TP)的影响及利尿
作用。
1 材料与仪器
1． 1 材料、仪器及试剂 甘遂，购于武汉市银杏饮片厂，经湖北中
医药大学生药教研室陈科力教授鉴定为甘遂 Euphorbia kansui T．
N． liou exT． P． wang的干燥块根。
温控式炒药机(上海德华国药制品有限公司) ，全自动生化
分析仪(OLYPUS AU2700) ;低速离心机，代谢笼，手术剪、小鼠灌
胃针、纱布等。血清总蛋白测定试剂盒、血肌酐试剂盒均为南京
建成生物工程研究所生产。10%甲醛溶液(上海振兴化工厂，分
析纯)。
1． 2 供试品的制备 醋炙甘遂:按照《中国药典》2005 版Ⅰ部附
录Ⅱ中药炮制通则，取净药材，大小分档，加醋拌匀，闷透，置锅
内，武火(约 280℃)10 min炒干［6］。
分别称取生甘遂及醋炙甘遂药材适量，粉碎成粗粉，依次用
85%、50%、100%甲醇浸泡 24 h，滤取浸泡液并合并，用旋转蒸发
仪真空除去甲醇，浓缩至小体积，冷冻干燥，得到甘遂及醋炙甘遂
醇提物。将各样品置于干燥器中保存。临用时按所需剂量分别
用适宜溶剂配制成一定浓度，供实验用。
1． 3 动物 SPF级小鼠，雌雄各半，体质量(20 ± 2)g，武汉生物制
品研究所实验动物中心提供。动物合格证号:SCXK(鄂)－ 2008
－ 0003。常规喂养 3 d后体征正常者供实验用。
2 方法
取健康小鼠 70 只，随机分成 7 组，每组 10 只，分别为空白对
照组(正常组)、甘遂(高、中、低剂量)组、醋炙甘遂(高、中、低剂
量)组。本实验开展之前，采用改良蔻氏法［7］测定了甘遂及醋炙
甘遂对小鼠的半数致死量 LD50，分别为(20 ± 6) ，(101 ± 11)mg /
g。给药剂量按照 LD50极大值的 1 /10、1 /30、1 /50 分别设计高、
中、低剂量组。其中给药组以 0． 4 ml /10 g 药液灌胃，1 次 /d;空
白对照组以 0． 4 ml /10 g双蒸水灌胃。连续给药 7 d，正常饮食饮
水。在喂养期间第 2，4，6 天，将小鼠转移至代谢笼，于 21:00 ～
09:00 时间段收集各组小鼠尿液，记录尿量。在第 7 天给药 3 h
后，称重，摘眼球取血，离心取血清用于检测血肌酐 Scr和总蛋白
TP的含量，并摘取肾脏称重，计算肾脏指数(肾质量 mg /体质量
g)。取肾脏，福尔马林固定，HE染色，200 ×显微镜下观察组织病
理变化。统计学方法计量数据采用 珋x ± s，组间比较进行 t 检验，
并采用 Microsoft Excel统计软件进行分析处理。
3 结果
3． 1 对体质量、肝肾指数的影响 结果见表 1。与空白对照组相
比，甘遂高中低剂量组对小鼠正常的体质量增长有明显抑制作
用，抑制程度高达 30%。其他组均对小鼠正常的体质量增长未
见显著影响。甘遂高中剂量组及醋炙甘遂高剂量组肾脏指数显
著增加，而其它组肾脏指数与空白组比较其差异无统计学意义。
表 1 各组小鼠体质量及肾脏指数的影响(珋x ± s)
组别 小鼠体质量 m / g 肾脏指数 C /mg·g － 1
空白对照 26． 2 ± 0． 2 34． 3 ± 0． 4
甘遂高剂量 18． 3 ± 0． 3* 41． 2 ± 0． 4*
甘遂中剂量 19． 2 ± 0． 2* 40． 7 ± 0． 3*
甘遂低剂量 21． 3 ± 0． 3* 35． 4 ± 0． 4
醋炙甘遂高剂量 26． 6 ± 0． 3 37． 9 ± 0． 4*
醋炙甘遂中剂量 25． 5 ± 0． 3 33． 9 ± 0． 3
醋炙甘遂低剂量 25． 9 ± 0． 2 32． 3 ± 0． 2
与空白组比较，* P﹤ 0． 05;n = 10
3． 2 对血清生化指标 Cr 及 TP 的影响 结果见表 2。甘遂高中
剂量组使 Scr 显著增加;醋炙甘遂高剂量组使 Scr 值显著升高。
其他各组引起的生化指标的差异与对照组比较无统计学意义。
各组 TP值与空白组比较无统计学差异。从以上结果可看出，甘
遂经醋炙后对各生化指标的影响较甘遂生品要小，显然醋炙可显
著降低甘遂的毒性。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 11 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 11 期
表 2 对各组小鼠生化指标的影响(珋x ± s)
组别 SCr /μmol·L －1 TP /g·L －1
空白对照 56． 6 ± 11． 4 61． 3 ± 14． 3
甘遂高剂量 94． 3 ± 20． 6* 63． 7 ± 12． 1
甘遂中剂量 78． 9 ± 25． 4* 60． 6 ± 12． 3
甘遂低剂量 53． 2 ± 18． 3 59． 8 ± 13． 4
醋炙甘遂高剂量 64． 3 ± 15． 4* 62． 5 ± 13． 2
醋炙甘遂中剂量 56． 2 ± 14． 7 60． 8 ± 12． 6
醋炙甘遂低剂量 55． 6 ± 13． 2 60． 7 ± 12． 1
与空白组比较，* P﹤ 0． 05;n = 10
3． 3 肾脏组织形态观察 见图 1。由小鼠肾脏病理切片结果可
见，空白组肾组织结构完整，肾小球、肾小管未见异常，间质小管
可见;甘遂高剂量组、中剂量组和醋炙甘遂高剂量组肾小管间质
上皮细胞偶有脱落，绒毛可见，未见明显病变，间质血管少量充
血，未见纤维化。其它组与空白组比较无明显异常。以下各图均
为 HE染色，放大倍数均为 200 ×。
A．空白对照组 B．甘遂高剂量组 C．甘遂中剂量组 D．醋炙甘遂高剂量组
图 1 小鼠肾脏组织 HE染色切片(200 ×)
3． 4 对小鼠利尿作用的影响 在给药 1 周期间，分别于第 2、4、6
天晚上将小鼠转移至代谢笼中，在 21:00 ～ 9:00，收集各组尿液，
结果见表 3。与空白组相比，甘遂高剂量组无利尿作用且使尿量
显著减少，醋炙甘遂高剂量组对尿量无明显的影响，而其它组均
表现出明显的利尿作用，且醋炙甘遂组中、低剂量组较甘遂中、低
剂量组利尿作用更强。
表 3 甘遂及醋炙甘遂醇提物各剂量组
对小鼠尿量的影响(珋x ± s) ml
编号 组别 小鼠尿量
0 空白对照 0． 35 ± 0． 05
1 甘遂高剂量 0． 22 ± 0． 04#
2 甘遂中剂量 0． 61 ± 0． 05*
3 甘遂低剂量 0． 73 ± 0． 05*
7 醋炙甘遂 B高剂量 0． 32 ± 0． 05
8 醋炙甘遂 B中剂量 0． 99 ± 0． 06*
9 醋炙甘遂 B低剂量 0． 98 ± 0． 07*
与空白组比较，* P ﹤ 0． 05，尿量明显增加;与空白组比较，# P ﹤
0． 05，尿量明显减少;n = 10
本实验结果表明，甘遂经醋炙后对各生化指标的影响较甘遂
生品要小。与空白组相比较，甘遂生品较醋炙品对小鼠肾脏指数
的影响较大，表明甘遂对小鼠肾脏的毒性较醋炙甘遂大。生甘遂
中、低剂量组和醋炙甘遂在中、低剂量均表现出一定的利尿作用，
而醋炙甘遂的利尿作用与空白组相比，作用显著，具有统计学意
义。甘遂、醋炙甘遂高剂量组与空白组相比无利尿作用，且前者
使尿量减少。由此可见，醋炙可降低甘遂的毒性，增加用药安全
性。甘遂醋炙后入药是安全的，无明显肾脏毒性，且控制好剂量
是可以发挥利尿作用的。
4 讨论
因甲醇的溶解范围广，而甘遂及醋炙甘遂的毒性成分尚不明
确［7］，故在制备过程中依次用 85%，50%，100%甲醇作为提取溶
剂，目的是提取出尽可能多的成分，确保所得醇提物成分的全面
性。
甘遂属有毒中药，因其刺激性及毒性，极大地限制了它在临
床的使用，因此临床常须炮制方可入药。甘遂具有峻下逐水的功
效，临床用药多“中病即止”，因此该实验设计给药时间为 1 周。
醋炙甘遂在中、低剂量均表现出一定的利尿作用，与空白组
相比，作用显著，具有统计学意义。甘遂高剂量组与空白组相比
无利尿作用且使尿量减少，可能是高剂量存在肾脏毒性，破坏肾
脏正常的生理功能，因此不仅没有观察到利尿作用，相反却使小
鼠尿量减少。
有关文献［4］报道，用固定时间间隔，称质量，以小鼠体质量
的差值来作为考察利尿作用，结果醋炙后，利尿作用不明显。而
本实验结果显示，甘遂醋炙后利尿作用并没降低，与文献有较大
的出入。与该法结果有很多差异的原因可能为:文献中采用称重
法，显然没有直接收集尿液准确度高，故该法结论可信度大。醋
炙甘遂在实验设计的中、低剂量下有明显的利尿作用，但其利尿
机理尚需进一步研究。
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时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 11 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 11