全 文 ：　［收稿日期］　２０１３－０１－０１；２０１３－０３－２６修回
　［基金项目］　贵州省科学技术厅“贵州省中药、民族药炮制技术研究平台建设”［黔科合社字（２００９）５００１］
　［作者简介］　郭建民（１９５４－），男，副教授，从事中药炮制研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｑｊｍ８８０６３＠１６３．ｃｏｍ
　＊通讯作者：王建科（１９６６－），男，高级实验师，项目主持人，从事中药炮制研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｊｋ－６６＠１６３．ｃｏｍ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１３）０５－０２６８－００６１－０３
不同产地余甘子中没食子酸与槲皮素含量的测定
郭建民，王建科＊，李 玮，田源红，张 英，周林欢
（贵阳中医学院，贵州 贵阳５５０００２）
　　［摘　要］为了更好地控制余甘子药材的质量，建立高效液相色谱法同时测定余甘子中没食子酸和槲皮
素含量的方法，对不同产地余甘子中没食子酸、槲皮素的含量进行测定。结果表明：余甘子中没食子酸和槲
皮素含量分别在１．３２～２３．１μｇ、０．０５～１．００μｇ呈良好的线性关系（ｒ＝０．９９９　７，ｒ＝０．９９９　７）。没食子酸平
均加样回收率为１０１．９６％，ＲＳＤ为１．９９％；槲皮素平均加样回收率为９９．５１％，ＲＳＤ为２．０７％。该方法简
便、准确、重现性好。不同产地余甘子中没食子酸、槲皮素的含量有一定的差异。
［关键词］余甘子；没食子酸；槲皮素；高效液相色谱
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ
Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｇａｌｉｃ　Ａｃｉｄ　ａｎｄ　Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｉｎ
Ｐｈｙｌａｎｔｈｕｓ　ｅｍｂｌｉｃａ　ｏｆ　Ｄｉｆｅｒｅｎｔ　Ａｒｅａｓ
ＧＵＯ　Ｊｉａｎｍｉｎ，ＷＡＮＧ　Ｊｉａｎｋｅ＊，ＬＩ　Ｗｅｉ，ＴＩＡＮ　Ｙｕａｎｈｏｎｇ，ＺＨＡＮＧ　Ｙｉｎｇ，ＺＨＯＵ　Ｌｉｎｈｕａｎ
（Ｇｕｉｙａｎｇ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕｉｙａｎｇ，Ｇｕｉｚｈｏｕ５５０００２，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｂｅｔｔｅｒ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｐ．ｅｍｂｌｉｃａ，ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ
ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｕｓｉｎｇ　ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｉｎ　Ｐ．ｅｍｂｌｉｃａｂｙ　ＨＰＬＣ，
ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｉｎ　Ｐ．ｅｍｂｌｉｃａ　ｆｏｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ａｒｅａｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗ
ｔｈａｔ：ＨＰＬＣ，ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　ｓｈｏｗｅｄ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ（ｒ＝０．９９９　３，ｒ＝
０．９９９　７）ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　１．３２～２３．１μｇ、０．０５～１．００μｇ，ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　１０１．９６％，ＲＳＤ＝
１．９９％，ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９９．５１％，ＲＳＤ＝２．０７％．Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｅｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ　ａｎｄ　ｇｏｏｄ
ｉｎ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｉｎ　Ｐ．ｅｍｂｌｉｃａ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ａｒｅａｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｈｙｌｌａｎｔｈｕｓ　ｅｍｂｌｉｃａ；ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ；ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ；ＨＰＬＣ
　　余甘子为大戟科植物余甘子（Ｐｈｙｌｌａｎｔｈｕｓ
ｅｍｂｌｉｃａ　Ｌ．）的干燥成熟果实，具有清热凉血，消食
健胃，生津止咳的功效，用于血热血瘀，消化不良，腹
胀，咳嗽，喉痛，口干等症［１］。余甘子既是中药，也是
民族药，是苗族药物中具有特色的药物之一［２］，应用
广泛。现代研究表明，余甘子中含有没食子酸、鞣花
酸、槲皮素等主要成分［３］，其中，槲皮素具有止咳、平
喘、抗肿瘤、抗炎、抗病毒等多种药理作用［４］，是发挥
余甘子临床疗效的主要成分之一。虽然余甘子中没
食子酸的含量测定方法已收载于２０１０年版《中国药
典》其项下，但中药的成分复杂，往往是一药多效。
多指标、多成分控制中药的质量已是一种发展趋势。
沙磊等采用ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定余甘子中诃黎勒酸、
没食子酸、粘酸－２－Ｏ－没食子酸酯的含量［５］。但未见
有采用 ＨＰＬＣ法同时测定没食子酸及槲皮素含量
的报道。因此，笔者在《中国药典》的基础上，研究高
效液相色谱法同时测定没食子酸及槲皮素的含量，
可用于余甘子的质量控制，为以后的研究提供理论
依据。
１ 材料与方法
１．１ 材料
１．１．１ 药材 大戟科植物余甘子Ｐｈｙｌａｎｔｈｕｓ　ｅｍ－
ｂｌｉｃａ　Ｌ．的干燥成熟果实，购自贵州省兴义、镇宁、安
龙、贞丰，广东惠州、汕头，福建漳州。
１．１．２ 仪器 高效液相色谱仪（ＬＣ－２０ＡＴ，检测器
ＳＰＤ－２０Ａ），ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８ 色 谱 柱 （４．６ ｍｍ ×
２５０ｍｍ，５μｍ），全自动电子天平（ＡＵＷ２２０Ｄ、万分
之一），超声波清洗器（ＨＳ１０２６０Ｄ），远红外干燥箱
（ＹＨＷ－１０２）。
１．１．３ 试 剂 没 食 子 酸 对 照 品 （批 号：
０７３－２０１１１０，用于含量测定，中国药品生物制品检定
所），槲皮素对照品（批号：１０００８１－２００９０７，用于含量
测定，中国药品生物制品检定所）。甲醇、乙醇、磷
酸、盐酸均为分析纯，甲醇为色谱纯，水为纯净水。
１．２ 方法
１．２．１ 检测波长的选择 将余甘子进行全波长扫
描，选择具有最大吸收峰的波长为测定波长。
　贵州农业科学　２０１３，４１（５）：６１～６３
　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
１．２．２ 色谱条件 在选定的检测波长条件下，以
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇（Ａ）０．１％
磷酸水（Ｂ）溶液为流动相进行洗脱（０～１０ｍｉｎ，
１２％Ａ～１２％Ａ；１０～３０ｍｉｎ，６０％Ａ～６０％Ａ）；柱
温：３０℃；流速：１ｍＬ／ｍｉｎ。
１．２．３ 对照品溶液的制备 分别精密称取干燥至
恒重的没食子酸、槲皮素对照品适量，加甲醇溶解，
制成含１．３２ｍｇ／ｍＬ的没食子酸对照品溶液和含
０．１０ｍｇ／ｍＬ的槲皮素对照品溶液。
１．２．４ 供试品溶液的制备 取样品粉末１ｇ，精密
称定，置平底烧瓶中，精密加入４０ｍＬ　１０％盐酸－甲
醇（４∶１）溶液，回流提取３次，每次０．５ｈ，过滤，合
并滤液，用０．４５μｍ微孔滤膜过滤，即得。
１．３ 方法学考察
１．３．１ 线性关系考察 精密吸取没食子酸、槲皮
素对照品溶液０．５μＬ、１．０μＬ、２．５μＬ、５．０μＬ、
７．５μＬ、１０．０μＬ、１２．５μＬ、１５．０μＬ、１７．５μＬ，按
“１．２．２”项下色谱条件进行测定。
１．３．２ 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液，
按“１．２．２”项下色谱条件连续进样６次。
１．３．３ 重复性试验 精密称取同一批次余甘子药
材粉末６份，每份约１ｇ，按“１．２．３”项下供试品溶液
制备方法制备，按“１．２．２”项下色谱条件进行测定。
１．３．４ 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，
按“１．２．２”项下色谱条件分别在０ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、
８ｈ、１０ｈ、１２ｈ、１４ｈ进样测定。
１．３．５ 加样回收率试验 精密称取同一批余甘子
样品粉末６份，每份约０．５ｇ，加入没食子酸、槲皮素
对照品适量，按“１．２．３”项下供试品溶液制备方法制
备，按“１．２．２”项下色谱条件进行测定。
１．３．６ 样品测定 精密称取各样品粉末约１ｇ，按
“１．２．３”项下方法制备供试品溶液，按“１．２．２”项下
色谱条件进行测定。
２ 结果与分析
２．１ 测定方法的波长选择
通过对余甘子进行全波长扫描结果显示，在
２７３ｎｍ及２１６ｎｍ处有最大吸收，后经高效液相色谱仪
对两个波长进行考察，最终供试品在波长为２７３ｎｍ处
没食子酸和槲皮素均得到较好分离（图示）。
２．２ 方法学考察
以峰面积值为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标
准曲线，得回归方程为：ｙ＝３×１０６　ｘ－５２０　００４，ｒ＝
０．９９９　７，没食子酸在１．３２～２３．１μｇ呈良好线性关
没食子酸
槲皮素
没食子酸
槲皮素
0.0
0.1
0.4
0.5
0.6
0.6
0.9
0.3
0.7
0.2
1.3
1.2
1.1
1.0
1.5
1.6
1.4
1.7
0%%%%2.5%%%%5%%%%7.5%%10%%%12.5%%%15%17.5%%20%%22.5%%25%%%27.5 0%%%%2.5%%%%5%%%%%%7.5%%%%10%%12.5%%15%%%17.5%%20%%%%22.5%%25%%%27.5
时间 /min
Time
时间 /min
Time
0.0
0.1
0.4
0.5
0.6
0.6
0.9
0.3
0.7
0.2
1.3
1.2
1.1
1.0
1.5
1.6
1.4
1.7
1.8
电
量
/m
AU
El
ec
tri
c%
qu
an
tit
y
电
量
/m
AU
El
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tri
c%
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y
图示 余甘子测定样品在检测波长下的分离效果
Ｆｉｇ．　Ｇｒａｐｈｉｃａｌ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ　Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｂｙ　ｓａｍｐｌｅ
表１ 余甘子中没食子酸、槲皮素加样回收率实验测定结果
Ｔａｂｌｅ　１　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｔｅｓｔ　ｏｆ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ（ｎ＝６）
编号
Ｎｏ
样品含量／ｍｇ
Ｓａｍｐｌｅ
加入量／ｍｇ
Ａｄｄｉｎｇ　ａｍｏｕｎｔ
实测量／ｍｇ
Ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｖａｌｕｅ
回收率／％
Ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ
平均回收率％
Ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ
ＲＳＤ／％
没食子酸
１　 ３４．０１８　 ３３．４６５　 ６８．０７７　 １０１．７８　 １０１．９６　 １．９９
２　 ３４．０８６　 ３３．４６５　 ６８．７０４　 １０３．４５
３　 ３４．０８６　 ３３．４６５　 ６８．５７６　 １０３．０６
４　 ３４．１５４　 ３３．４６５　 ６８．７７４　 １０３．４５
５　 ３３．９５０　 ３３．４６５　 ６６．７７５　 ９８．０９
６　 ３３．８７１　 ３３．４６５　 ６７．９８６　 １０１．９４
槲皮素
１　 ０．６４１　 ０．６５７　 １．２９９　 １００．１２　 ９９．５１　 ２．０７
２　 ０．６４８　 ０．６５７　 １．３２５　 １０３．１２
３　 ０．６４４　 ０．６５７　 １．２８２　 ９７．１５
４　 ０．６０４　 ０．６５７　 １．２５５　 ９９．０６
５　 ０．６２８　 ０．６５７　 １．２７２　 ９８．０７
６　 ０．６４１　 ０．６５７　 １．２９５　 ９９．５３
·２６·
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　贵 州 农 业 科 学
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
系。以峰面积值为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标
准曲线，得回归方程为：ｙ＝３×１０６　ｘ－２１８６　４，
ｒ＝０．９９９　７，槲皮素在０．０５～１．０μｇ范围内呈良好
线性关系。没食子酸和槲皮素的精密度试验峰面积
ＲＳＤ分别为１．９７％和１．８７％，表明仪器精密度良
好。没食子酸和槲皮素重复性试验的平均含量
ＲＳＤ分别为１．９３％和２．３１％，表明该方法重复性
良好。没食子酸和槲皮素稳定性试验的峰面积
ＲＳＤ分别为２．２３％和２．３４％，表明供试品溶液在
１４ｈ内稳定。由表１可知，加样回收率试验的平均
回收率分别为１０１．９６％、９９．５１％，ＲＳＤ 分别为
１．９９％、２．０７％。表明，建立的对余甘子中没食子酸
和槲皮素分析方法准确、可靠。
２．３ 不同产地余甘子中没食子酸和槲皮素的含量
对产自贵州６个不同产地余甘子进行含量测定
结果（表２）可知，６个不同产地的余甘子中没食子酸
的平均含量为 ６．７３％，槲皮素的平均含量为
０．１６％，其中，贵州贞丰产的没食子酸含量最高，达
８．７４％；福建漳州产的 没食子酸含量最低，为
２．５８％；贵州兴义产的槲皮素含量最高，为０．２４％；
福建漳州及广东惠州产的槲皮素含量较低，分别为
０．０３％、０．０５％。表明，不同产地的余甘子两种成分
含量存在一定的差异性。
表２ 样品余甘子成分的测定结果
Ｔａｂｌｅ　２　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ（ｎ＝３）
序号
Ｎｏ．
产地
Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ａｒｅａ
没食子酸Ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ
平均含量／％ ＲＳＤ／％
槲皮素Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ
平均含量／％ ＲＳＤ／％
１ 贵州兴义（巴结） ８．６９　 ２．５６　 ０．２４　 ０．７５
２ 贵州镇宁（黄果树） ７．５２　 １．２４　 ０．１８　 １．７０
３ 贵州安龙 ６．３７　 ０．５１　 ０．１８　 ０．０７
４ 贵州镇宁（六马） ８．１８　 １．１９　 ０．１６　 １．２６
５ 贵州镇宁（板阳） ７．５４　 １．５３　 ０．１５　 １．１８
６ 贵州贞丰 ８．７４　 １．０７　 ０．１５　 ０．９９
７ 云南思茅 ７．１２　 １．３９　 ０．２１　 ０．４４
８ 广东惠州 ３．２０　 ２．１６　 ０．０５　 ２．６３
９ 广东汕头 ７．３９　 ０．０９　 ０．２０　 １．３２
１０ 福建漳州 ２．５８　 ０．５０　 ０．０３　 ２．６２
３ 结论与讨论
１）中药的成分复杂往往是一药多效，因此，多
指标、多成分控制中药、民族药的质量已是一种发展
趋势。在２０１０版《中国药典》的余甘子项下收载了
没食子酸的含量测定方法。试验研究了高效液相色
谱法同时测定没食子酸、槲皮素含量的方法，为制定
余甘子的质量标准多一份考察指标，该方法操作简
便，快捷，结果准确可靠，可用于余甘子药材的质量
控制。
２）贵州产余甘子均系野生品种，不同产地的余
甘子果实中没食子酸的平均含量为６．７３％，槲皮素
平均含量为０．１６％。不同产地的余甘子含量存在
一定差异性，这是否与当地的自然条件、土壤、人工
种植、采摘时间等因素有关，有待进一步研究。
［参 考 文 献］
［１］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典［Ｓ］．一部．北
京：中国医药科技出版社，２０１０：３４６．
［２］ 邱德文，杜 江，郑亚玉，等．《贵州十大苗药研究》
［Ｍ］．北京：中医古籍出版社，２００８：１２１．
［３］ 邓才彬，谢庆娟，曲中堂，等．余甘子化学成分研究
［Ｊ］．中国药房，２００９，２０（２７）：２１２０－２１２１．
［４］ 王艳芳，王新华，朱宇同．槲皮素药理作用研究进展
［Ｊ］．天然产物研究与开发，２００３，１５（２）：１７１－１７３．
［５］ 沙 磊，张兰珍，张兰珍．，等．ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定余甘
子中诃黎勒酸、没食子酸、粘酸－２－Ｏ－没食子酸酯的含
量［Ｊ］．药物分析杂志，２０１１，３１（２）：２９３－２９５
（责任编辑：孙小岚）
·３６·
　郭建民 等　不同产地余甘子中没食子酸与槲皮素的含量测定
　ＧＵＯ　Ｊｉａｎｍｉｎ　ｅｔ　ａｌ　Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｇａｌｉｃ　Ａｃｉｄ　ａｎｄ　Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｉｎ　Ｐｈｙｌａｎｔｈｕｓ　ｅｍｂｌｉｃａ　ｏｆ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　Ａｒｅａｓ　ｂｙ　ＨＰＬＣ