全 文 ：史丛 药 学 于,J 2 0 0 3 年 5 月第 2 1 卷第 5 期
文章编号 : 10 0 9 一 5 2 7 6 (2 00 3 )05 一 0 6 7 1 一 02 中图分类号 : R 5 7 4 文献标识码 : A 收稿 日期 : 2 002 一 09 一 21
一叶较碱对延髓迷走复合体神经元
电活动及十二指肠运动的影响
韩 伟 1 周利玲 l 尹 立 ‘ 唐朝克2 高治平 2
(1
. 湖南省怀化医学高等专科学校 , 41 80 0 , 湖南怀化 ; 2 . 南华大学基础医学院生理学教研室 ,
4 2 10 0 1
, 湖南衡阳刀第一作者男 , 19 6 年生 , 实验师 )
摘 要 : 目的 : 初步探讨左旋一 叶获碱是 否对延髓迷走复合休神经元具有 兴奋作用 , 以 及对十 二指肠运动 是
否有促进作 用。 方法 : 以 SI ) 大 鼠为实验对象 , 采用下 丘脑腹 内侧 区微 量注射 、微 电极神经元放 电记录及十 二 指
肠运动记 录等方法 , 观寨下 丘脑腹 内侧 区微量注入 不 同荆蚤的一叶 获城 对延髓迷走复合体神 经元电活动 与十二
指肠运动的影响 。 实验 中 V M H 微量注射 L 一 Se 。解除 了 G A B A 能 紧张性抑制而 引起 MF R 增加和十二指肠收缩
幅度与频率均增强 。 随 着剂量 的加 大 , M R F 增加 值亦逐 渐加 大 。 呈剂 童 一 效 应 正相 关 关 系 , 相 关 系数 下二 0 .
99 7 5( 尸 < 0 . 00 1 )。 结果 : 一叶获 城对延髓迷走复合体神经 元具有兴奋效应 , 并能促进 十二指肠运动 。 当注射 荆
圣从 4 尸g 逐渐加大至 5 4拌g 时 , 平均放电率的增加值从 (0 . 6 1 士 0 . 3 8 )脉冲/ S 增大到 (1 2 . 2 4 士 一 6 2 )脉冲/ 5 . 呈现 荆
t 一 效应正相关关系 。 结论 : 一叶获 碱通过解除 下一 氛基丁酸能紧张性抑制机 制而 引起 延髓迷走 复合体神经 元
的平均放 电率增加 , 并使十二指肠收缩 幅度与频率均增大 。
关 键 词 :一叶获 碱 ; 下 丘脑腹 内侧 区微贡注射 ; 延髓迷走复合休神经元放 电 ; 十二指肠运动
左旋一叶袂碱 (L 一 sec u ri ni ne , L 一 sec )是一种新型 y 一
氨基丁酸(G A B八)受体拮抗剂 , 具有 中枢兴奋作用 , 大剂量
可引起惊厥 。川下 丘脑背内侧核(D MH )微量注 射 GAB A 受
体拮抗剂 , 导致类似急性应激反应时呼 吸 、循环 、行为的改
变t2. 3) , 该部位微量注射 GAB A 受体拮抗剂 , 亦引起小肠 、结
肠动力显著增高闭 , 但有关下 丘脑腹内侧区 (ve nt ra l m ed ial
hyP ot hal m us
,
vMH) 微量注射 L 一 s ec 对胃肠功能作用的研
究未见报道 。 本项实验研究是通过在大鼠 V M H 微量 注 射
t 一 se e , 观察延髓迷走复合体(d o rs a x v a g a l c o m ple x , D V C )神
经元电活动变化及十二指肠运动变化。 初步探讨其作用 机
制。
1 材料与方法
实验动物准备 实验用 20 9 一25 鲍 的 SD 大鼠 , 雌雄不
限 。 禁食 12 一 巧 小时 , 自由饮水 。 用 8 % 水合氯醛麻醉
(4 0o m g / k g
, 腹腔注射)。
延髓速走 复合体神经元 电活动的记 录及放 电信 号处理
参照文献〔5 一 , 〕进行 , 现简述如下 。 将大鼠的头固定在脑立
体定位仪 (PFS 一 4 8 )上 , 按 Pa x in os 和 w a tso n 的 (大鼠脑立
体定位图谱》定位延髓迷走复合体 (do rsal 一 va ga l co m plex ,
D v C)
, 坐标为 : 前自后 1 3m m , 旁开 lm m , 颅骨表面下 sm m
进行玻璃微电极细咆外电活动记录 。 用 PFS 一 48 型微电极
操纵器 (日本光电公司 )控制擂入深度 。 记录到的放电信号
经 MEz 一 82 01 型微电极放大器放大后送入 V 一 21 2 型记忆
示波器 (日本 N IT A CH ID E N SH I, L T D )上线观察 , 并输入到
窗口鉴别器 , 鉴别结果在下线显示 。 把窗口鉴别器窗内输出
的放电信号与刺激器发生的时间信号并行送入柳p le n 型微
电脑作初步处理后存盘。 按放电陈列图分别取注射前和注
射后的放电信号作平均放电率(m e a n firin g : a te , MFR )分析 ,
分段计算出 MFR 后 , 再按公式计算处理因家引起的 MFR
的改变值 , MFR 改变值 二 (注射后 MFR 一 注射前 MFR) , 并
对 M FR 作 t 检验 , 尸 < 0 . 05 为显著性差异界限 。
十 二指肠运 动的记录 [8j 麻醉后的大鼠 , 作剑突下皮肤
切 口 , 打开腹腔 , 把应力传感器缝置在十二指肠定点部位(距
幽门 1 . s cm )的浆膜表面 , 并将导线由皮下至后颈部引出。
记录前 , 大鼠禁食 12 一 巧 h , 自由饮水 。 首先记录 30 分钟十
二指肠运动 , 稳定后各组分别给予 vM H 微量注射生理盐水
或药物 。
结果以 又士 S 表示 , 用方差分析进行统汁处理 。 十二指
肠收缩幅度和频率变化率参照文献 t83 进行计算 , 幅度或频率
= 【(给药后幅度或频率 一 给药前幅度或频率 )/ 给药前幅度
或频率] x 20 0 % 。
v MH 微量注射 L 一 se C 参照 Pax inos 一 w at so n 图谱将
微量注射用套管植入下丘脑腹内侧区 (v MH ) , 坐标 : 前自后
2
.
s m m
, 旁开 0 . 4 m m , 颅骨表面向下 9 . sm m 。 以 5 02 胶固 定
外套管 。 注射微量药液时 , 每次注射容量为 5拌Lo
实验分组 D V C 神经元放电的记录 : 大 鼠 50 只 , 按性
别 、体重比例相近随机分为 5 组 , 每组 10 只 。
十二指肠运动实验分组情况 : 将大鼠 2 4 只 , 按性别 、体
重比例相近随机分为 4 组 : ¹ 对照组 (A 组 , 6 只 ) : v MH 微
量注射生理盐水( N s ) 5拜L :À L 一 Se e 12 . 5拜g ( 5拜L )组 ( B 组 , 6
只 ) : v MH 微量注射 L 一 段 C lz . 5群g ( 5拜L ) ; » L 一 反c 25拌g
( 5林L )组 ( c 组 , 6 只 ) : vM H 微量注射 L 一 Se c2 5拼g ( 5拌L ) ; ¼
L 一 Se cs即g ( 5拌L) 组 ( D 组 , 6 只 ) : v MH 微世 注射 L -
Se c5 0四 (5户L ) 。
药 品 左旋硝酸一叶簌碱 ( C1 3H1 5烧N , 分子足 217)
由江苏鹏鹤药业有限公司提供。
2 结 果
经组织学鉴别 , 给药部位正确后方取实验数据。
徽童注封不 同荆全的 L 一 Se C 对延髓迷走复合体神经元
电活动 的影响 实验结果表明 vMH 微量注射 L 一 跳c 对大
, ‘71 .
DOI：10.13193/j.archtcm.2003.05.33.hanw.017
二刃叶燕壑严照些主垦宜终神经元曳i坦卫上进鱼塑竺塑上
鼠有中枢兴奋作用 . 使 MFR 增加 。 并随剂量的加大, MFR
增加值亦逐渐加大 。 呈剂量 一 效应正相关关系(表 1 ) , 相关
系数 y = O . 99 75( 尸 < 0 . 00 1 ); 若以 L 一 Se c 的剂量为自变量
(X )
,
M FR 的增加值为因变量 (Y )进行相关分析 , 得到的相
关方程为 Y = 0 . 2 4 llX 一 0 . 55 84 。
表 1 V M H 注射 L 一 Sec 对 O V C 神经元放电活动的兴
奋效应《又士 S , 脉冲 /s )
注射剂 M FR
量(产g ) “ 注射卜 se。 前 注射卜 s e c 后 增加值
4 9 1 3 0 土 0 . 5 5 1 . 9 1 土0 . 9 0 1) 0 . 6 1 士0 . 3 8
9 9 1
,
4 5 土 0 . 3 5 2 . 7 7 土 0 . 56 2 ) 1 . 32 上 0 . 2 2
19 9 1 4 7 士 0 . 57 5 . 2 9 士 0 . 9 5 2 1 3 . 8 1 士0 . 7 4
34 1 0 1 4 2 上 0 . 6 1 9 . 5 8 土 1 . 14 2 ) 8 . 16 士 1 . 3 6
54 1 0 1 5 1 士 0 . 5 9 13 . 7 5 土 1 2 2 2 ) 1 2 . 24 上 1 . 6 2
注 : l) 与注射 L 一 sec 前相 比较 p < 0 . 0 0 2 ;2) 与注射 L 一 sec 前
相比较 尸 < 0 . 0 01
微 量注射不 同剂量的 L 一 se c 对十二指肠运动的影响
B 组 5 分钟时与 10 分钟时十二指肠收缩幅度变化率与 A 组
比较 , 均有显著差异 (尸 < 0 . 0 5) ; C 组与 A 组比较 (P < 0 .
0 5) ;D 组与 A 组 比较 (尸 < 0 . 05 ) ; C 组 5 分钟时与 B 组比
较有显著差异 ( P < 0 . 05) ; D 组与 C 组比较有显著差异 , 5
分钟时( P ( 0 05 ) : 1 0 分钟时(P < 0 . 0 5 ) ; 一5 分钟时 , 各实
验组的十二指肠收缩幅度变化率与对 照组 比较无统计学意
义 。 见表 2 。
表 2 V MH 注射 L 一 Sec 对大鼠十二指肠收缩幅度变化
的影响《% , 又土 s)
组别 n s 分钟 10 分钟 巧 分钟
A 组 6 一 12 . 7 0 土 12 . 4 1 一 14 . 58 士 14 . 3 0 一 2 . 7 6 土 2 0 , 20
B 组 6 又 . 龙5士乃 .以。 多 . 10 士业 .27 ) 16
.
67 士25
.
07
C组 6 118 为土汤 .留)7 钓 .乃士汤 引) 汤 一 91 土龙 76
D 组 6 哪 . 肠士57 .梦帅0) 1 7 .反 土31 .好岑)J1) 刀 . 男士义 . 巧
注 : B 组与 A 组 比较 , sm in 时 F = 4 5 . 9 , q , ) 二 5 . 0 7 , 尸 < 0 . 0 5 ;
lo m in 时 F = 4 2 . 24 . q 2 ) = 4 . 5 2 , 尸 < 0 . 0 5 ; e 组与 A 组比较 , sm in 时
F = 4 5
.
9
,
q 3 , = 9
.
5 4
, 尸 < 0 . 0 5 ; l o m in 时 F = 4 2 . 2 4 , 矿’= 6 . 4一 P <
0
.
0 5 ; D 组与 A 组 比较 , sm in 时 F = 4 5 . 9 . q 5 ) = 15 . 5 8 . 尸 < o , 0 5 ;
lo m sn 时 F 二 4 2 . 2 4 . q 6 ) = 2 5 . 52 . 尸 < o , 0 5 :e 组与 B 组 比较 , sm in 时
F = 4 5 9
.
q Z , = 4
.
7 7
, 尸 < 0 0 5 ; D 组与 B 组 比较 , 5而n 时 F = 4 5 . 9 .
矿, = 10 . 5 2 , 尸 < 0 . 0 5 ; lo m i。 时 F = 42 . 2 4 , 矿, = 10 9 6 , 尸 < 0 . 0 5 ; D
组与 B 组 比较 , sm in 时 F = 4 5 . 9 , 矿, = 10 . 8 1 . 尸 < o , 0 5 ; lom in 时 F
= 4 2
.
2 4
, q , ) = 10 9 6
, 尸 < 0 . 0 5 ;D 组与 e 组比较 , sm in 时 F = 4 5 . 9 ,
q 10 ) 二 6
.
0 4
, 尸 < o , 0 5 ; 一o m in 时 F 二 4 2 . 2 4 , q , ’) = 9 . 0 7 , 尸 < 0 0 5
表 3 V O MH 注射 L 一 Sec 对大鼠十二指肠收缩频率变
化的影响 (% , 又士 s)
组别 n s分钟 10 分钟 巧 分钟
A 组 6 一 1 1 . 15 士 1 7 . 10 一 10 . 0 2 士 2 6 . 1 5 一 2 . 4 2 士 17 . 2 8
B 组 6 54 . 9 6 土 2 2 . 8 1 , ) 4 2 . 2 5 土3 4 . 3 1 2〕 18 . 6 1 土2 3 . 0 0
C 组 6 110. 31 土37 .旁功 肠.书 士男 .时黝 多 . 肠土弘所
一卫鳖一 . 互 坦 .暇兄歼理川 .少 :色牛奉时洲 刀那士琴。 .
注 : B 组与 A 组比较 、srm n 时 F = 32 . 6 1 , q ‘) = 5 . 0 5 , 尸 < 0 . 0 5 ;
l o m in 时 F = 16 . 5 6 , q Z ) = 3 . 92 , 尸 < 0 . 0 5 ; e 组与 A 组 比较 . sm in 时
F = 3 2
.
6 1
, q3 ’= 9 . 3 4 , 尸 < 0 . 0 5 ; lom in 时 F = 26 . 5 6 , q4 ) = 7 . 2 3 , 尸
< 0
.
0 5 ; o 组与 A 组比较 , sm in 时 F = 32 . 6 2 , q s) 二 23 . 3 2 , 尸 < 0 . 0 5 ;
lo m in 时 F = 1 6 . 5 6 , 护) = 9 礴一, P < 0 . 0 5 ; e 组与 B 组比较 , smln 时
F = 3 2 6 1
, 矿, = 4 . 2 6 . P < 0 . 0 5 ; l o m in 时 F = 26 . 8 6 , 矿, = 3 . 3 2 , 尸
< 0
.
0 5 ; D 组与 B 组比较 , sm in 时 F = 32 . 6 1 , 矿, 二 5 . 2 2 、 尸 < 0 . 0 5 ;
l om in 时 F 二 一6 . 8 6 , q , 0 ) = 5 . 5 0 , P < 0 . 0 5 ; o 组与 e 组 比较 . sm in 时
F = 3 2
.
6 2
, q l l) = 3
.
9 6
,
p < 0
.
0 5
对 十二指肠收缩频率的影响 B 组 5 分钟时与 10 分钟
时十二指肠收缩频率变化率与 A 组比较 , 均有显著差异 (P
( 0
.
05 ) : C组与 A 组比较( P ( 0 . 05 ) ; D 组与 A 组 比较 ( P
( 0
.
05 ): C组与 B 组比较 (P ( 0 . 05 ) ; D 组与 B 组 比较 (P
< 0
.
05 ) ; D 组与 C 组 比较 5 分钟时有显著差异 ( 尸 < 0 .
0 5 ); 15 分钟时 , 各实验组的十二指肠收缩频率变化率与对
照组 比较无统计学意义 。 见表 3 。
3 讨 论
下丘脑是调节胃肠运动 、控制摄食的皮质下中枢 , 接受
来 自端脑(大脑皮层 、杏仁 、海马 )的传入纤维 , 与脑干内脏感
觉运动核(迷走复合体 D vC) 有直接双向投射联系 。 [1 ‘〕本研
究采用下丘脑腹内侧区 (v en tral m e di日 h叩o th alam u s , V M H )
微量注射法 , 发现新型 G A 13A 受体拮抗剂 L 一 、e 。对延髓迷
走复合体神经元是兴奋效应 , 能加强这些神经元的电活动。
并具有促进十二指肠运动的作用 。
下丘脑位于第 m 脑室周围 , 含有大量 G A B A 及其合成
酶 , 正常静息状态 下内源性 G AB A 具有紧张性抑制作用 。
根据 Beu tle : 等阅 的研究 , L 一 se c 是 G AB A 识别位点的竞争
性拮抗型 。 本实验中 v MH 微量注射 L 一 Se C 解除了 G A BA
能紧张性抑制而引起 M FR 增加和十二指肠收缩幅度与频
率均增强 。 随着剂量的加大 , MFR 增加值亦逐渐加大 。 呈
剂量 一 效应正相关关系 , 相关系数 下二 0 . 997 5( 尸 < 0 . 0 01 ) 。
这就是本工作的重要意义所在 。
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13 5
6 7 2