全 文 ：飞扬草化学成分研究
王 壹，蒋金和，陈业高，赵 勇* (云南师范大学化学化工学院，云南昆明 650500)
摘要 ［目的］对飞扬草地上部分进行化学成分研究。［方法］利用正反相硅胶和 Sephadex LH － 20 对飞扬草的化学成分进行分离、纯
化，并利用 MS，NMR等光谱技术鉴定化合物结构，采用流式细胞术对化合物 1，4，5，6进行了小鼠脾细胞免疫刺激活性测试。［结果］从
飞扬草地上部分分离得到 6个化合物，经鉴定分别为邻苯二甲酸二异丁基酯(化合物 1)、邻苯二甲酸二乙基己基酯(化合物 2)、高车前
素(化合物 3)、过氧化乙酰(化合物 4)、槲皮素(化合物 5)和没食子酸(化合物 6)，所有测试化合物均未发现有明显的免疫刺激活性。
［结论］成分 1 ～3为首次从飞扬草中分离得到，4为首次从天然产物中得到。该研究为从飞扬草中寻找生物活性物质提供了参考依据。
关键词 大戟科;飞扬草;化学成分;免疫活性
中图分类号 S567;R284． 1 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2012)07 －04060 －03
Studies on the Chemical Constituents of Euphorbia hirta
WANG Yi et al (College of Chemistry and Chemical Engineering，Yunnan Normal University，Kunming，Yunnan 650500)
Abstract ［Objective］The aim was to study the chemical constituents in Euphorbia hirta．［Method］The constituents were isolated and puri-
fied by various chromatography methods including normal phase and reverse phase silica gel as well as Sephadex LH-20 gel column，and then
elucidated by spectroscopic analysis such as MS and NMR etc． Compounds 1，4，5 and 6 were evaluated for their immunostimulatory activity a-
gainst splenic cell of mouse by FCM．［Result］ Six compounds were isolated from Euphorbia hirta，and identified as diisobutyl-O-phthalate
(compond 1)，diethylhexyl phthalate (compond 2)，hispidulin (compond 3)，acetyl peroxide (compond 4)，quercetein (compond 5)and gal-
lic acid (compond 6)． All compounds were inactive against splenic cell of mouse．［Conclusion］Compounds 1，2 and 3 were isolated from this
plant for the first time，and compound 4 was the first naturally occurring compound． This study provided reference for isolating bioactive sub-
stances from Euphorbia hirta．
Key words Euphorbiaceae;Euphorbia hirta;Constituents;Immunological activities
基金项目 国家自然科学基金(21162044) ;云南省自然科学基金
(2009CD051) ;云南省中青年学术后备人才项目(2010-
CI040)。
作者简介 王壹(1986 － ) ，男，辽宁朝阳人，硕士研究生，从事药用植物
化学的研究，E-mail:wyioioioioio@ 163． com。* 通讯作者，教
授，硕士生导师，从事药用植物化学的研究，E-mail:zhaooy@
126． com。
收稿日期 2011-11-22
大戟属(Euphorbia)植物具有抗过敏、抗氧化、抗增殖、抗
炎、抗菌以及细胞毒活性［1 －5］，该属植物飞杨草(Euphorbia
hirta Linn)为传统中药，主要分布于我国南部和西南地区［6］，
用于治疗胃肠道病(如腹泻、痢疾和肠道寄生虫病等)、支气
管炎、结膜炎和呼吸系统疾病 (如哮喘、花粉症等)［7 －8］。已
有研究表明该植物含有烃类、二萜、三萜、植物甾醇、鞣质、多
酚和黄酮类化合物［9 －12］。
为了从飞扬草中寻找生物活性物质，笔者对其进行了化
学成分研究，分析探讨了它们的提取分离过程、结构鉴定和
部分化合物的免疫活性。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 植物材料。植物原料于 2009年 9月采自云南省西双
版纳，经云南中医学院杨耀文教授鉴定为飞扬草(Euphorbia
hirta) ，标本(YTCM 20090909)保存于云南中医学院。
1． 1． 2 仪器和试剂。WZZ －2B型旋光测定仪，Bio － RadFTS
－135红外光谱仪，Bruker DRX － 500 超导核磁共振仪，VG
Auto Spec －3000 质谱仪，柱层析硅胶(100 ～ 200 目和 200 ～
300目)为青岛海洋化工厂生产，反向硅胶 RP － 18(40 ～ 63
μm)为德国 Merck 公司生产，MCI 凝胶 CHP 20P (75 ～ 150
μm)为日本三菱化学公司生产，Sephadex LH － 20 为瑞典
Amersham生物科技公司生产，薄层层析材料———GF254硅胶
板为青岛海洋化工厂生产。
1． 2 方法
1． 2． 1 提取分离。将 4． 0 kg 干燥的飞扬草地上部分粉碎
后，用 95%乙醇室温提取 3次，每次 30 L，过滤，减压浓缩，将
粗提物分散于水中，用乙酸乙酯萃取，得浸膏 280 g。浸膏用
MCI 凝胶(90% CH3OH—H2O)脱色后得 173 g 浓缩物，用
200 ～300目硅胶上柱，氯仿—丙酮梯度(1∶0 ～ 0∶1)洗脱，得
到 6个组分 A ～ F。
组分 A (6 g)上硅胶柱，石油醚—丙酮梯度(99∶1 ～2∶1)
洗脱，得到 4 个分组分 A1 ～ A4。组分 A2 经反复硅胶柱层
析，石油醚—丙酮 (49∶1)洗脱，得到化合物 1 (3 mg)和 2 (2
mg) ;组分 A3 经硅胶柱层析，石油醚—丙酮 (20∶1)洗脱，得
到化合物 4 (5 mg)。
组分 C (5 g)上硅胶柱，石油醚—丙酮梯度(9∶1 ～ 1∶1)
洗脱，得到5个组分 C1 ～ C5。组分 C3通过反向硅胶 RP －18
柱层析，45%甲醇—水洗脱，再经 Sephadex LH －20凝胶柱层
析，100%甲醇洗脱得到化合物 3(2 mg)。化合物 5 (20 mg)
由组分 C4经反向硅胶 RP － 18 柱层析，30%甲醇—水洗脱，
再经 Sephadex LH － 20 凝胶柱层析，100% 甲醇洗脱得到。
组分 D(11 g)上硅胶柱，石油醚—丙酮梯度(4∶1 ～ 0∶1)洗脱，
得到 4个组分 D1 ～ D4。组分 D1进行反向硅胶 RP －18柱层
析，37%甲醇—水洗脱，得到化合物 6(3 mg)。
1． 2． 2 活性检测。采用流式细胞术(FCM)对化合物 1，4，5，
6进行了小鼠脾细胞免疫刺激活性测试［13］，用雷帕霉素(Ra-
pa)作阳性对照。
2 结果与分析
2． 1 结构鉴定
2． 1． 1 化合物 1。无色油状物(乙酸乙酯) ，TLC 检测遇硫
责任编辑 王春艳 责任校对 况玲玲安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2012，40(7):4060 － 4062
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.07.193
酸—乙醇溶液显猩红色，IR(KBr)νmax(cm
－1)2 963，2 876，
1 730，1 581，1 470，1 377，1 287，1 123，1 073，981，745;1H －
NMR(300 MHz，CDCl3)δ (ppm ) :7． 70(dd，J = 8． 2，3． 1 Hz，
2H，H －2，5) ，7． 50(m，2H，H －3，4) ，4． 06(d，J = 6． 7 Hz，4H，
H － 1’，1”) ，2． 02(m，2H，H － 2’，2”) ，0． 96(d，J = 6． 7 Hz，
12H，H － 3’，3”，4’，4”) ;13 C － NMR(75 MHz，CDCl3)δ
(ppm) :167． 62(C － 7，8) ，132． 38(C － 1，6) ，130． 88(C － 2，
5) ，128． 81(C －3，4) ，71． 74(C －1’，1”) ，27． 70(C － 2’，2”) ，
19． 13(C －3’，3”，4’，4”) ;ESI － MS m/z(rel． int) :579［2M +
Na］+(10) ，301［M + Na］+(100) ，279［M + H］+(8)。以上
数据与已有报道一致［14］，化合物 1 鉴定为邻苯二甲酸二异
丁酯 (Diisobutyl －O － phthalate) (图 1)。
2． 1． 2 化合物 2。无色油状物(乙酸乙酯) ，TLC 检测遇硫酸
－乙醇溶液显猩红色，［α］22． 0D － 7． 97(c 0． 15，MeOH) ;IR
(KBr)νmax(cm
－1)2 960，2 929，2 859，1 730，1 464，1 381，
1 287，1 275，1 124，1 073，743;1H － NMR (300 MHz，CDCl3)δ
(ppm) :7． 70(dd，J =8． 1，3． 0 Hz，2H，H － 2，5) ，7． 53(m，2H，
H －3，4) ，4． 22 (m，4H，H － 1’，1”) ，1． 68(m，2H，H － 2’，
2”) ，0． 92(overlap，6H，H －6’，6”) ，0． 89(overlap，6H，H －8’，
8”) ;13C － NMR (75 MHz，CDCl3)δ(ppm) :168． 51(C － 7) ，
167． 74(C －8) ，132． 39(C － 1，6) ，130． 85(C － 2，5) ，128． 76
(C －3，4) ，68． 12(C － 1’，1”) ，38． 68(C － 2’，2”) ，30． 31(C
－3’，3”) ，28． 88(C －4’，4”) ，23． 69(C －7’，7”) ，22． 95(C －
5’，5”) ，14． 02(C －6’，6”) ，10． 92(C －8’，8”) ;ESI － MS m/z
(rel． int) :803［2M + Na］+(100) ，413［M + Na］+(5) ，391［M
+H］+(4)。以上数据与文献报道一致［15］，化合物 2 鉴定为
邻苯二甲酸二乙基己酯(Diethylhexyl phthalate) (图 1)。
图 1 化合物 1 ～ 6的化学结构
2． 1． 3 化合物 3。黄色针状结晶(甲醇) ，熔点为 284 ～ 286
℃，盐酸—镁粉反应显红色，IR (KBr)νmax(cm
－1)3 408，
1 652，1 610，1 493，1 369，1 295，1 251，1 178，1 095，829;1H －
NMR (400 MHz，CD3OD)δ (ppm) :7． 83(d，J =8． 8 Hz，2H，H
－2’，6’) ，6． 91(d，J = 8． 8 Hz，2H，H － 3’，5’) ，6． 58(br s，
1H，H －8) ，6． 56(br s，1H，H － 3) ，3． 87(s，3H，OCH3) ;
13 C －
NMR (100 MHz，CD3OD)δ (ppm ) :184． 26(C － 4，C) ，
166． 38(C －2，C) ，162． 76(C － 4’，C) ，158． 88 (C － 7，C ) ，
154． 67(C － 5，C) ，153． 79(C － 9，C) ，132． 70(C － 6，C) ，
129． 44(C －2’，6’，CH) ，123． 25(C － 1’，C) ，117． 00(C － 3’，
5’，CH) ，105． 32(C － 10，C) ，103． 37(C － 3，CH) ，95． 32(C －
8，CH) ，60． 92(OCH3)。以上数据与文献报道一致
［16］，化合
物 3 鉴定为高车前素(Hispidulin) (图 1)。
2． 1． 4 化合物 4。无色片状结晶(甲醇) ，熔点为 30 ～32 ℃，
TLC 检测遇硫酸—乙醇溶液不显色，IR (KBr)νmax(cm
－1)
1 696，1 416，1 309，1 201，921，803，638;1H-NMR(400 MHz，
CDCl3)δ(ppm) :2． 55(s，6H，H － 1，1’) ;
13 C － NMR(100
MHz，CDCl3)δ(ppm ) :176． 25(C － 2，2’，C) ，29． 85(C － 1，
1’，CH3) ，ESI － MS m/ z (rel． int) :141［M + Na］
+(100)。以
上数据与文献报道一致［17］，化合物 4 鉴定为过氧化乙酰(A-
cetyl peroxide) (图 1)。
2． 1． 5 化合物 5。黄色粉末(甲醇) ，盐酸—镁粉反应显红
色，IR(KBr)νmax(cm
－1)3 265，1 657，1 604，1 499，1 358，
1 271，1 200，1 069，997，964，917，822;1H － NMR(400 MHz，
CD3OD)δ(ppm) :7． 34(dd，J =8． 2，1． 9 Hz，1H，H － 6’) ，7． 30
(d，J =1． 9 Hz，1H，H －2’) ，6． 92(d，J =8． 2 Hz，1H，H －5’) ，
6． 37(d，J = 1． 8 Hz，1H，H － 6) ，6． 20(d，J = 1． 8 Hz，1H，H －
8) ，5． 36(br s，1H，H －1”) ，4． 24(d，J = 2． 4 Hz，1H，H － 2”) ，
3． 73 ～3． 80(m，2H，H － 3”，4”) ，3． 33 (m，1H，H － 5”) ，1． 14
(d，J =6． 3 Hz，3H，H － 6”) ;13 C － NMR(100 MHz，CD3OD)δ
(ppm) :179． 65(C － 4) ，165． 86(C － 7) ，163． 21(C － 5) ，
158． 52(C －9) ，149． 80(C － 4’) ，146． 41(C － 3’) ，136． 27(C
－2) ，122． 91(C － 3) ，122． 90(C － 1’) ，116． 99 (C － 6’) ，
116． 40 (C － 5’) ，105． 81(C － 10) ，103． 57(C － 2’) ，102． 03
(C －1”) ，99． 85(C －6) ，94． 76(C －8) ，73． 30(C － 4”) ，72． 05
(C －3”) ，72． 03(C － 2”) ，71． 93(C － 5”) ，17． 69(C － 6”)。
160440 卷 7 期 王 壹等 飞扬草化学成分研究
以上数据与文献报道一致［18］，化合物 5 鉴定为槲皮素(Quer-
cetein) (图 1)。
2． 1． 6 化合物 6。白色粉末(甲醇) ，熔点为 253 ～255 ℃，IR
(KBr)νmax(cm
－1)3 496，3 284，1 667，1 612，1 541，1 425，
1 386，1 320，1 267，1 221，1 028，867，735;1H － NMR(400
MHz，(CD3)2CO )δ(ppm) :7． 14(s，2H，H － 2，6) ;
13 C － NMR
(100 MHz，(CD3)2CO)δ(ppm) :167． 62(COOH) ，145． 84(C －
3，5) ，138． 43(C －4) ，121． 97(C －1) ，109． 95(C －2，6)。以上
数据与文献报道一致［19］，化合物 6 鉴定为没食子酸(Gallic
acid) (图 1)。
2． 2 生物活性 由于所得化合物量的限制，2和 3 未进行活
性测试，化合物 1，4，5，6进行了小鼠脾细胞免疫刺激活性测
试，5． 6 μmol /L 化合物 1，4，5，6 的增殖率分别为 108%、
100%、104%、100%，对照组 0． 02 μmol /L Rapa 的增殖率为
57%，所纯化的 4种化合物均未发现有明显活性。
3 结论
从飞扬草地上部分分离得到 6个组分，再经进一步纯化
得到 6种化合物，分别为邻苯二甲酸二异丁基酯(化合物
1)、邻苯二甲酸二乙基己基酯(化合物 2)、高车前素(化合物
3)、过氧化乙酰(化合物 4)、槲皮素(化合物 5)和没食子酸
(化合物6) ，其中，化合物1 ～3为首次从该植物中分离得到，
化合物 4为首次从天然产物中得到，化合物 1，4，5，6 均未发
现有明显的免疫刺激活性。
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2604 安徽农业科学 2012年