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绿玉树化学成分研究



全 文 :收稿日期:2014-05-16 接受日期:2014-07-17
基金项目:国家自然科学基金(21162044);云南省学术带头人后备人
才项目(2010CI040)
* 通讯作者 Tel:86-871-65941087;E-mail:zhaooy@ 126. com
天然产物研究与开发 Nat Prod Res Dev 2014,26:1961-1964,2065
文章编号:1001-6880(2014)12-1961-05
绿玉树化学成分研究
王 莉,肖国琼,王宇飞,臧 贞,赵 勇*
云南师范大学化学化工学院,昆明 650500
摘 要:采用正反相硅胶、Sephadex LH-20 和 HPLC等色谱手段对绿玉树 Euphorbia tirucalli化学成分进行分离纯
化,从绿玉树地上部分 70%丙酮提取物中分离得到 12 个化合物。利用 MS、1H NMR 和13 C NMR 等现代波谱技
术确定化合物结构为 4α-去氧-巴豆醇-13-乙酸酯(1)、对映-3β,13S-二羟基-16-烯-14-阿替森酮(2)、羊毛甾醇
(3)、3-表-粘霉烯醇(4)、齐墩果烷-9(11),12-二烯-3-酮(5)、β-香树烯酮(6)、齐墩果烷-18-烯-3-酮(7)、无羁萜
(8)、4-豆甾烯-3-酮(9)、β-谷甾醇(10)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(11)和东莨菪内酯(12)。其中,化合物 1、2、5
~ 7、9 和 12 为首次从该植物中分离得到。
关键词:绿玉树;二萜;三萜
中图分类号:R284. 2 文献标识码:A
Chemical Constituents from Euphorbia tirucalli
WANG Li,XIAO Guo-qiong,WANG Yu-fei,ZANG Zhen,ZHAO Yong*
College of Chemistry and Engineering,Yunnan Normal University,Kunming 650500,China
Abstract:Twelve compounds including a tigliane diterpene ester,4α-deoxy-phorbol-13-acetate(1),a atisane diterpene,
ent-(3β,13S)-dihydroxyatis-16-en-14-one(2) ,together with six triterpenoids,lanosterol(3) ,3-epi-glutinol(4) ,oleana-
9(11) ,12-dien-3-one(5) ,β-amyrenone(6) ,olean-18-en-3-one(7) ,friedelin(8) ,and four other compounds,stigmast-
4-en-3-one(9) ,β-sitosterol(10) ,kaempferol 3-O-α-L-rhamnoside(11)and scopoletin(12) ,were isolated from the 70%
acetone extract of Euphorbia tirucalli. Their structures were elucidated by spectroscopic analysis,including 1D NMR,2D
NMR and ESI-MS. Among them,compounds 1,2,5-7,9 and 12 were isolated from E. tirucalli for the first time.
Key words:Euphorbia tirucalli;diterpenoids;triterpenoids
绿玉树 Euphorbia tirucalli为大戟科 Euphorbiec-
eae 大戟属 Euphorbia 植物,原产非洲东部(安哥
拉),广泛栽培于热带和亚热带,我国南北方均有栽
培[1]。许多国家用作传统药物,在非洲和亚洲用作
催泻和治疗神经痛、风湿病、牙痛等[2]。研究表明,
绿玉树的乳汁有毒,且对皮肤和粘膜有很强的刺激
性,高度不饱和的大戟二萜醇酯为其毒性的主要成
分[3-7]。为了弄清云南产绿玉树的化学成分,发现更
多活性好的化合物,作者对采自云南西双版纳的绿
玉树地上部分进行了化学成分的研究。从其 70%
丙酮提取物中分离得到 12 个化合物,其中,化合物
1、2、5 ~ 7、9 和 12 为首次从该植物中分离得到。
1 仪器与材料
Bruker DRX-500 型超导核磁共振仪;VG Auto
spec-3000 质谱仪;色谱正相硅胶(200 ~ 300 目,青
岛海洋化工厂);高效薄层板 TLC GF254(青岛海洋
化工厂);Sephadex LH-20(瑞典 Pharmacia公司)。
植物样品于 2009 年 8 月采自云南西双版纳,由
云南中医学院杨耀文教授鉴定为绿玉树 Euphorbia
tirucalli。植物标本(标本号:YTCM 20090803)存放
于云南中医学院标本室。
2 提取与分离
干燥的绿玉树地上部分 4. 8 kg,粉碎后用 70%
丙酮室温浸提 3 次,每次 24 h,回收丙酮,依次用石
油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,回收溶剂后分别得石
油醚浸膏(120 g)、乙酸乙酯浸膏(70 g)。
石油醚萃取物用硅胶(200 ~ 300 目)柱层析分
离,以石油醚 /乙酸乙酯(1∶ 0 ~ 0∶ 1,V /V)进行梯度
洗脱,TLC对照合并相似流分得组分 A ~ E。B 组分
(13. 5 g)用硅胶(200 ~ 300 目)上柱,以石油醚 /乙
酸乙酯(99∶ 1 ~ 10∶ 1)梯度洗脱,经 TLC 检测后合并
相似流分后得 4 个组分 B1 ~ B4,组分 B1 有晶体析
出,经重结晶后得到化合物 3(182 mg)。组分 B3 经
石油醚 /乙酸乙酯(40 ∶ 1)洗脱,得到化合物 4 (200
mg)。C组分(8. 3 g)用硅胶(200 ~ 300 目)柱层析,
以石油醚 /乙酸乙酯(50 ∶ 1)梯度洗脱,经 TLC 检测
后合并相似流分得组分 C1 ~ C3,C1 再经石油醚 /乙
酸乙酯(50∶ 1)洗脱,得到化合物 5(25 mg)。C2 经
Sephadex LH-20 (甲醇 /氯仿 1∶ 1)分离后,再经硅胶
(200 ~ 300 目)柱层析以石油醚 /乙酸乙酯(30 ∶ 1)
洗脱,得到化合物 7(40 mg)。组分 C3 经 Sephadex
LH-20(甲醇 /氯仿 1∶ 1)分离后,再经 PTLC(石油醚 /
乙酸乙酯 10∶ 1)纯化得到化合物 6 (15 mg)和化合
物 8(10 mg)。D 组分(4. 1g)上硅胶(200 ~ 300
目)柱,石油醚 /乙酸乙酯(20 ∶ 1)梯度洗脱部分经
Sephadex LH-20(甲醇 /氯仿 1∶ 1)分离后,再经 PTLC
(石油醚 /丙酮 3∶ 1)得到化合物 9(15 mg)和化合物
10(10 mg)。
乙酸乙酯萃取物(70 g)利用硅胶(200(300
目)柱层析,以氯仿 /丙酮(1∶ 0 ~ 0∶ 1)梯度洗脱,TLC
检测合并相似流分,得到 6 个组分 F ~ K。G 组分
(3. 6 g)经硅胶(200 ~ 300 目)柱层析,以石油醚 /丙
酮梯度(1∶ 0 ~ 0∶ 1)洗脱,石油醚 /丙酮(10∶ 1)洗脱
部分,再经 Sephadex LH-20(氯仿 /甲醇 1 ∶ 1)分离,
再经硅胶(300 ~ 400 目)柱层析,以石油醚 /丙酮(5
∶ 1)洗脱,最后再经 PTLC(石油醚 /丙酮 2∶ 1)得到化
合物 2(3mg)。I 组分经硅胶(200 ~ 300 目)柱层
析,以石油醚 /乙酸乙酯梯度洗脱,石油醚 /乙酸乙酯
(2∶ 1)洗脱部分合并,再经硅胶(200 ~ 300 目)柱层
析,以氯仿 /丙酮(3∶ 1)洗脱,得到化合物 12(15 mg)
和 1(11 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 无色针晶 (CH3OH);
1H NMR
(CD3OD,500 MHz)δ:7. 34(1H,s,H-1),5. 14(1H,
br s,H-7) ,3. 97(1H,d,J = 10. 0 Hz,H-12) ,3. 87
(2H,m,H-20) ,3. 51(1H,m,H-10) ,3. 30(1H,m,H-
5β) ,2. 74(1H,m,H-4) ,2. 27(1H,dd,J = 15. 2,4. 6
Hz,H-5α) ,2. 10(3H,s,13-OAc) ,1. 95(1H,m,H-
8) ,1. 75(3H,s,Me-19) ,1. 68(1H,m,H-11) ,1. 25
(3H,d,J = 5. 2 Hz,Me-18) ,1. 24(3H,s,Me-16) ,
1. 24(3H,s,Me-17) ,0. 83(1H,d,J = 5. 3 Hz,H-
14) ;13C NMR(CD3OD,125 MHz)δ:214. 5(s,C-3),
175. 5(s,13-OAc) ,159. 4(d,C-1) ,143. 9(s,C-2) ,
137. 3(s,C-6) ,125. 4(d,C-7) ,79. 4(s,C-9) ,75. 6
(d,C-12) ,69. 2(t,C-20) ,68. 9(s,C-13) ,50. 3(d,
C-4) ,48. 6(d,C-10) ,46. 2(d,C-11) ,42. 4(d,C-8) ,
37. 3(d,C-14) ,27. 2(t,C-5) ,26. 3(s,C-15) ,24. 5
(q,C-16) ,21. 1(q,13-OAc) ,16. 7(q,C-17) ,12. 6
(q,C-18) ,10. 2(q,C-19) ;ESI-MS:m/z 413 [M +
Na]+,m/z 803[2M + Na]+。以上数据与文献[8]
报道一致,故鉴定为 4α-去氧-巴豆醇-13-乙酸酯。
化合物 2 白色粉末 (CH3OH);
1H NMR
(CD3OD,600 MHz)δ:4. 96(1H,d,J = 1. 6 Hz,H-
17b),4. 81(1H,d,J = 1. 6 Hz,H-17a) ,3. 83(1H,d,
J = 3. 0 Hz,H-13) ,3. 18(1H,m,H-3) ,2. 69(1H,dd,
J = 6. 3,2. 9 Hz,H-12) ,2. 31(1H,overlapped,H-
7a) ,2. 29(2H,m,H-15) ,1. 91(1H,ddd,J = 14. 3,
11. 5,3. 9 Hz,H-11a) ,1. 78(1H,ddd,J = 14. 3,6. 5,
2. 4 Hz,H-11b) ,1. 65(1H,m,H-1a) ,1. 62(1H,d,J
= 6. 6 Hz,H-9) ,1. 59(2H,overlapped,H-2) ,1. 56
(1H,overlapped,H-6a) ,1. 42(1H,m,H-6b) ,1. 06
(1H,m,H-1b) ,1. 00(3H,s,Me-18) ,0. 94(1H,td,J
= 13. 3,4. 9 Hz,H-7b) ,0. 89(1H,dd,J = 12. 3,2. 2
Hz,H-5) ,0. 77(3H,s,Me-19) ,0. 71(3H,s,Me-
20) ;13C NMR(CD3OD,150 MHz)δ:219. 3(s,C-14),
145. 1(s,C-16) ,110. 8(t,C-17) ,79. 7(d,C-3) ,76. 2
(d,C-13) ,55. 9(d,C-5) ,53. 4(d,C-9) ,48. 7(s,C-
8) ,47. 4(d,C-12) ,44. 5(t,C-15) ,39. 9(s,C-4) ,
39. 1(s,C-10) ,37. 8(t,C-1) ,32. 3(t,C-7) ,29. 1(q,
C-18) ,27. 7(t,C-2) ,26. 8(t,C-11) ,20. 1(t,C-6) ,
16. 5(q,C-19) ,14. 4(q,C-20) ;ESI-MS:m/z 341[M
+ Na]+。以上数据与文献[9,10]报道一致,故鉴定
为对映-3β,13S-二羟基-16-烯-14-阿替森酮。
化合 物 3 白 色 针 晶 (CHCl3);
1H NMR
(CDCl3,500 MHz)δ:5. 09(1H,m,H-24),3. 24(1H,
dd,J = 11. 7,4. 5 Hz,H-3) ,1. 68(3H,br s,H-27) ,
1. 60(3H,br s,H-26) ,1. 00(3H,s,H-29) ,0. 95
(3H,s,H-19) ,0. 87(3H,s,H-28) ,0. 85(3H,d,J =
6. 3 Hz,H-21) ,0. 80(3H,s,H-18) ,0. 75(3H,s,H-
30) ;13 C NMR(CDCl3,125 MHz)δ:134. 1(s,C-8),
133. 5(s,C-9) ,130. 9(s,C-25) ,125. 2(d,C-24) ,
79. 0(d,C-3) ,51. 0(d,C-5) ,50. 0(s,C-14) ,49. 6
(d,C-17) ,44. 1(s,C-13) ,38. 9(s,C-4) ,37. 3(s,C-
2691 天然产物研究与开发 Vol. 26
10),35. 9(d,C-20) ,35. 4(t,C-1) ,35. 3(t,C-22) ,
30. 9(t,C-15) ,29. 8(t,C-16) ,28. 2(t,C-2) ,28. 1
(q,C-29) ,27. 9(t,C-7) ,27. 7(t,C-12) ,25. 7(q,C-
26) ,24. 8(t,C-23) ,24. 5(q,C-28) ,21. 5(t,C-6) ,
20. 1(q,C-21) ,19. 0(t,C-11) ,18. 9(q,C-19) ,17. 7
(q,C-27) ,15. 6(q,C-18) ,15. 5(q,C-30)。以上数
据与文献[11]报道一致,故鉴定为羊毛甾醇。
化合 物 4 无 色 针 晶 (CHCl3);
1H NMR
(CDCl3,500 MHz)δ:5. 63(1H,d,J = 6. 0 Hz,H-6),
3. 47(1H,br s,H-3) ,1. 16,1. 14,1. 09,1. 04,1. 00,
0. 99,0. 95,0. 85(each 3H,s,8 × CH3);
13 C NMR
(CDCl3,125 MHz)δ:141. 6(s,C-5),122. 1(d,C-6) ,
76. 3(d,C-3) ,49. 7(d,C-10) ,47. 4(d,C-8) ,43. 1
(d,C-18) ,40. 8(s,C-4) ,39. 3(s,C-14) ,39. 0(t,C-
22) ,37. 8(s,C-13) ,36. 0(t,C-19) ,34. 9(s,C-9) ,
35. 1(t,C-16) ,34. 6(t,C-15) ,34. 5(q,C-30) ,33. 1
(t,C-11) ,32. 4(q,C-28) ,32. 0(q,C-29) ,32. 1(t,C-
21) ,30. 4(t,C-12) ,30. 1(s,C-17) ,29. 0(q,C-23) ,
28. 3(s,C-20) ,27. 8(t C-2) ,25. 6(q,C-24) ,23. 7
(t,C-7) ,19. 6(q,C-27) ,18. 4(q,C-26) ,18. 2(t,C-
1) ,16. 2(q,C-25) ;ESI-MS m/z:449 [M + Na]+。
以上数据与文献[12]报道一致,故鉴定为 3-表-粘霉
烯醇。
化合 物 5 白 色 针 晶 (CHCl3);
1H NMR
(CDCl3,500 MHz)δ:5. 63(1H,d,J = 5. 8 Hz,H-
11),5. 53(1H,d,J = 5. 8 Hz,H-12) ,1. 26,1. 17,
1. 12,1. 07,1. 00,0. 90,0. 89,0. 88(each 3H,s,8 ×
CH3);
13C NMR(CDCl3,125 MHz)δ:217. 7(s,C-3),
152. 3(s,C-9) ,147. 7(s,C-13) ,120. 6(d,C-12) ,
117. 5(d,C-11) ,51. 8(d,C-5) ,47. 3(s,C-4) ,46. 9
(t,C-19) ,45. 6(d,C-18) ,43. 0(s,C-14) ,40. 7(s,C-
8) ,38. 2(s,C-10) ,37. 8(t,C-22) ,37. 0(t,C-1) ,
34. 6(t,C-21) ,34. 6(t,C-2) ,33. 2(q,C-29) ,32. 2
(s,C-17) ,32. 1(s,C-20) ,31. 3(t,C-7) ,28. 7(q,C-
28) ,27. 2(t,C-15) ,26. 9(q,C-23) ,25. 7(t,C-16) ,
25. 3(q,C-27) ,23. 7(q,C-30) ,21. 3(q,C-24) ,20. 6
(q,C-25) ,19. 7(q,C-26) ,19. 6(t,C-6)。以上数据
与文献[13]报道一致,故鉴定为齐墩果烷-9(11),12-
二烯-3-酮。
化合物 6 白色粉末 (CHCl3);
1 H NMR
(CDCl3,500 MHz)δ:5. 20(1H,t,J = 3. 5 Hz,H-
12),1. 14(3H,s,Me-27) ,1. 09(3H,s,Me-23) ,1. 07
(3H,s,Me-26) ,1. 05(3H,s,Me-25) ,1. 02(3H,s,
Me-24) ,0. 87(6H,s,Me-29,30) ,0. 84(3H,s,Me-
28) ;13 C NMR(CDCl3,125 MHz)δ:217. 6(s,C-3),
145. 2(s,C-13) ,121. 5(d,C-12) ,55. 3(d,C-5) ,
47. 4(d,C-9) ,47. 3(d,C-18) ,46. 9(s,C-4) ,46. 8
(t,C-19) ,41. 8(s,C-14) ,39. 8(s,C-8) ,39. 3(t,C-
1) ,36. 9(t,C-22) ,36. 6(s,C-10) ,34. 7(t,C-21) ,
34. 2(t,C-2) ,33. 4(q,C-29) ,32. 5(s,C-17) ,32. 2
(t,C-7) ,31. 1(s,C-20) ,28. 4(t,C-15) ,26. 9(q,C-
28) ,26. 5(t,C-16) ,26. 1(q,C-23) ,25. 9(q,C-27) ,
23. 7(q,C-30) ,23. 6(t,C-11) ,21. 5(q,C-24) ,19. 7
(t,C-6) ,16. 7(q,C-26) ,15. 2(q,C-25) ;ESI-MS m/
z:447[M + Na]+。以上数据与文献[14]报道一致,
故鉴定为 β-香树烯酮。
化合 物 7 白 色 粉 末 (CHCl3);
1H NMR
(CDCl3,500 MHz)δ:4. 86(1H,s,H-19),1. 10(3H,
s,Me-26) ,1. 07(3H,s,Me-23) ,1. 03(3H,s,Me-
24) ,1. 02(3H,s,Me-28) ,0. 96(3H,s,Me-25) ,0. 94
(6H,s,Me-29,30) ,0. 74(3H,s,Me-27) ;13 C NMR
(CDCl3,125 MHz)δ:218. 1(s,C-3),142. 5(s,C-
18) ,129. 9(d,C-19) ,54. 8(d,C-5) ,50. 5(d,C-9) ,
47. 2(s,C-4) ,43. 3(s,C-14) ,40. 6(s,C-8) ,39. 8(t,
C-1) ,38. 5(d,C-13) ,37. 6(t,C-22) ,37. 4(t,C-16) ,
36. 9(s,C-10) ,34. 3(s,C-17) ,34. 0(t,C-2) ,33. 8
(t,C-7) ,33. 3(t,C-21) ,32. 4(s,C-20) ,31. 4(q,C-
29) ,29. 2(q,C-30) ,27. 5(t,C-15) ,26. 9(q,C-23) ,
26. 2(t,C-12) ,25. 3(q,C-28) ,21. 7(t,C-11) ,20. 9
(q,C-24) ,19. 7(t,C-6) ,16. 6(q,C-25) ,15. 9(q,C-
26) ,14. 5(q,C-27) ;ESI-MS m/z:447[M + Na]+。
以上数据与文献[15]报道一致,故鉴定为齐墩果烷-
18-烯-3-酮。
化合 物 8 无 色 针 晶 (CHCl3);
1H NMR
(CDCl3,500 MHz)δ:1. 18(3H,s,Me-28),1. 05(3H,
s,Me-27) ,1. 01(3H,s,Me-26) ,1. 00(3H,s,Me-
30) ,0. 95(3H,s,Me-29) ,0. 88(3H,d,J = 7. 0 Hz,
Me-23) ,0. 87(3H,s,Me-25) ,0. 73(3H,s,Me-24) ;
13C NMR(CDCl3,125 MHz)δ:213. 4(s,C-3),59. 5
(d,C-10) ,58. 2(d,C-4) ,53. 1(d,C-8) ,42. 8(d,C-
18) ,42. 2(s,C-5) ,41. 5(t,C-2) ,41. 3(t,C-6) ,39. 7
(s,C-13) ,39. 3(t,C-22) ,38. 3(s,C-14) ,37. 5(s,C-
9) ,36. 0(t,C-16) ,35. 6(t,C-11) ,35. 4(t,C-19) ,
35. 0(q,C-29) ,32. 8(t,C-21) ,32. 4(t,C-15) ,32. 1
(q,C-28) ,31. 8(q,C-30) ,30. 5(t,C-12) ,30. 0(s,
C-17) ,28. 2(s,C-20) ,22. 3(t,C-1) ,20. 3(q,C-
3691Vol. 26 王 莉等:绿玉树化学成分研究
26),18. 7(q,C-27) ,18. 2(t,C-7) ,18. 0(q,C-25) ,
14. 7(q,C-24) ,6. 8(q,C-23) ;ESI-MS m/z:449 [M
+ Na]+。以上数据与文献[16]报道一致,故鉴定为
无羁萜。
化合 物 9 无 色 油 状 (CHCl3);
1H NMR
(CDCl3,500 MHz)δ:5. 72(1H,s,H-4),1. 18(3H,s,
Me-19) ,0. 91(3H,d,J = 6. 1 Hz,Me-21) ,0. 83(9H,
overlapped,Me-29,26,27) ,0. 71(3H,s,Me-18) ;13 C
NMR(CDCl3,125 MHz)δ:199. 7(s,C-3),171. 7(s,
C-5) ,123. 8(d,C-4) ,56. 0(d,C-14) ,55. 9(d,C-
17) ,53. 8(d,C-9) ,45. 8(d,C-24) ,42. 4(s,C-13) ,
39. 6(t,C-12) ,38. 6(s,C-10) ,36. 1(d,C-20) ,35. 7
(t,C-1) ,35. 6(d,C-8) ,34. 0(t,C-2) ,33. 9(t,C-
22) ,32. 9(t,C-6) ,32. 1(t,C-7) ,29. 7(t,C-16) ,
29. 2(d,C-25) ,28. 2(t,C-23) ,26. 1(t,C-15) ,24. 2
(t,C-28) ,23. 1(t,C-11) ,21. 0(q,C-26) ,19. 8(q,C-
27) ,19. 0(q,C-19) ,18. 7(q,C-21) ,17. 4(q,C-18) ,
12. 0(q,C-29) ;ESI-MS m/z:435 [M + Na]+。以
上数据与文献[17]报道一致,故鉴定为 4-豆甾烯-3-
酮。
化合物 10 白色针晶(CHCl3);其 TLC 与标准
品对照,鉴定为 β-谷甾醇。
化合物 11 黄色粉末(CH3OH);
1H NMR
(CD3OD,500 MHz)δ:7. 70(2H,d,J = 8. 2 Hz,H-2,
6),6. 90(2H,d,J = 8. 2 Hz,H-3,5) ,6. 28(1H,br
s,H-8) ,6. 13(1H,br s,H-6) ,5. 36(1H,d,J = 7. 5
Hz,H-1) ,4. 25(1H,br s,H-2) ,3. 75(1H,m,H-
3) ,3. 34(1H,m,H-4) ,3. 30(1H,m,H-5) ,0. 93
(3H,d,J = 6. 1 Hz,H-6) ;13 C NMR(CD3OD,125
MHz)δ:179. 4(s,C-4),166. 5(s,C-7) ,162. 9(s,C-
5) ,161. 5(s,C-4) ,159. 1(s,C-9) ,158. 4(s,C-2) ,
136. 1(s,C-3) ,131. 9(d,C-2,6) ,122. 6(s,C-1) ,
116. 5(d,C-3,5) ,105. 7(s,C-10) ,103. 4(d,C-
1) ,100. 2(d,C-6) ,95. 1(d,C-8) ,73. 3(d,C-3) ,
72. 1(d,C-5) ,72. 0(d,C-4) ,72. 0(d,C-2 ) ,
17. 7(q,C-6) ;ESI-MS m/z:431 [M-H]-。以上数
据与文献[18]报道一致,故鉴定为山奈酚-3-O-α-L-鼠
李糖苷。
化合物 12 无色针晶(CH3OH);
1H NMR
(CD3OD,500 MHz)δ:7. 87(1H,d,J = 9. 4 Hz,H-4),
7. 12(1H,s,H-5) ,6. 79(1H,br s,H-8) ,6. 22(1H,
d,J = 9. 4 Hz,H-3) ,3. 93(3H,s,OCH3);
13 C NMR
(CD3OD,125 MHz)δ:162. 6(s,C-2),151. 5(s,C-
9) ,150. 0(s,C-7) ,145. 7(s,C-6) ,144. 7(d,C-4) ,
111. 2(d,C-3) ,110. 1(s,C-10) ,108. 6(d,C-5) ,
102. 6(d,C-8) ,55. 4(q,OCH3);ESI-MS m/z:191
[M-H]-。以上数据与文献[19]报道一致,故鉴定为
东莨菪内酯。
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4691 天然产物研究与开发 Vol. 26
直接作用于膜结构上的不饱和脂肪酸,诱发脂质过
氧化,从而导致细胞代谢紊乱。超氧阴离子(O-·2 )
产生的形式有非酶和酶促反应两种,在体内可直接
导致 DNA损伤并使过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物
酶和肌酸激酶失活[6]。因此,对活性氧清除作用的
研究有重要意义。H2O2 所致神经元的氧化损伤已
成功建立了细胞氧化损伤模型[10]。本实验中,采用
浓度为 200 μM H2O2 处理星形胶质细胞 24 h,可引
起细胞生长率显著下降,说明星形胶质细胞内抗氧
化机制可能失衡,氧化胁迫对细胞的损伤增加。
本文结果表明,H2O2 处理星形胶质细胞,其细
胞生长率明显下降,而预先加入大麦提取物保护后,
观察细胞形态显示,随着提取物浓度的增加,细胞突
起增多并逐渐接近对照细胞,说明提取物对细胞氧
化损伤具有保护作用。SRB法检测细胞生长率的实
验结果表明,大麦提取物从 100 到 1600 μg /mL保护
时,提高了 H2O2 处理后的 AS 细胞生长率,并呈现
浓度依赖性。说明大麦提取物对由 H2O2 引起的星
形胶质细胞因氧化损伤导致的生长率降低有一定的
保护作用。其机制可能与大麦提取物清除超氧阴离
子和羟自由基,并保护细胞膜的脂质过氧化有
关[6],其他机理有待进一步研究。
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