全 文 ：ＨＰＬＣ法测定苦远志中远志皂苷元含量
顾瑛媛
（常州市中医医院，江苏 常州２１３００１）
摘 要：目的：采用高效液相色谱法测定苦远志中远志皂苷元的含量。方法：色谱柱：ＷａｔｅｒｓμＢｏｎｄａｐａｋ
Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相：甲醇－０．２％磷酸 （７０∶３０）；柱温：３０℃；流速：１ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长
为２１０ｎｍ。结果：远志皂苷元在２．４２～２０．５５μｇ范围内具有良好的线性关系，ｒ＝０．９９９ ０；平均加样回
收率为９９．８２％，ＲＳＤ＝０．９２％。结论：该方法简便、快捷，结果准确，重现性好，可作为苦远志质量控制
方法。
关键词：苦远志；远志皂苷元；含量测定；高效液相色谱法
中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３－２１９７（２０１６）０７－００２１－０３
ＤＯＩ：１０．１１９５４／ｙｔｃｔｙｙ．２０１６０７０１０
收稿日期：２０１５－１２－０８
作者简介：顾瑛媛（１９８３－），女，江苏省常州市中医医院中药师，研究方向为医院药学。
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｉｔｔｅｒ Ｐｏｌｙｇａｌａ Ｓｅｎｅｇｅｎｉｎ ｉｎ ｔｈｅ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｂｙ ＨＰＬＣ
Ｇｕ Ｙｉｎｇｙｕａｎ
（Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ Ｃｏｕｎｔｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ ２１３００１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ Ｐｏｌｙｇａｌａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ｃｏｌｕｍｎ：ＷａｔｅｒｓμＢｏｎｄａｐａｋ Ｃ１８
（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ：ｍｅｔｈａｎｏｌ－０．２％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ（７０∶３０）；ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ：３０℃；ｆｌｏｗ ｒａｔｅ：１ｍＬ／
ｍｉｎ；ｄｅｔｅｃｔｉ－ｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ２１０ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ｓｅｎｅｇｅｎｉｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ ｗａｓ ２．４２～２０．５５μｇ ｔｈｅ ｓｃｏｐｅ ｈａｓ ａ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒ ｒｅ－
ｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ．ｒ＝０．９９９ ０；ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９９．８２％，ＲＳＤ＝０．９２％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｎｅｇｅｎｉｎ
ｃｏｎｔｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｆａｓｔ，ａｃｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ｉｔ ｃａｎ ｂｅ ａｓ ｂｉｔｔｅｒ Ｐｏｌｙｇａｌａ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｍｅｔｈｏｄｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｂｉｔｔｅｒ Ｐｏｌｙｇａｌａ；Ｓｅｎｅｇｅｎｉｎ；Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；Ｈｉｇｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
苦远志来源于远志科Ｐｏｌｙｇａｌａｃｅａｅ植物苦远志Ｐｏ－
ｌｙｇａｌａ ｓｉｂｉｒｉｃａ Ｌｉｎｎ．ｖａｒ．ｍｅｇａｌｏｐｈａ Ｆｒ．的全草［１］。苦远志
始载于明·兰茂氏《滇南本草》，其根、茎、叶均可入药，全株
用于咽喉炎、扁桃腺炎、血栓性脉管炎、淋巴腺炎、疮疔脓
疡［２］。可治疗跌打损伤昏迷、尿路感染、小便不利［３］，还可用
于湿疹溃烂、斑疹瘙痒［４］等。苦远志为云南多民族常用药，
其资源较为丰富，西南地区许多少数民族长期使用均有较
好的疗效，具有较高的开发利用价值［５］。苦远志为多年生
草本，茎丛生，直立或斜生，茎表面有时呈紫红色，具有稀疏
的细毛。单叶互生，近革质，叶片卵状披针形，夏季开花，小
总状花序假顶生或腋生［６］。蒴果倒卵形而扁，果色淡绿，花
果期５－８月份［７］。
本实验采用高效液相色谱分析方法，以远志皂苷元为
对照品，
对苦远志药材中远志皂苷元的含量测定方法进行
医医院前辈铁命老师经验改良的自制蒙药，由草乌、贯众等
十种药材配伍制成。其性凉，味辛、苦，有燥协日乌苏、杀
黏、消食、止痛、解毒清热等功效。本次研究在蒙医辨证理
论的指导下配合以上蒙药治疗一段时间后，患者症状改善，
躯体运动功能和日常生活活动能力改善，疗效明显优于对
照组。表明了蒙药贴日很萨银－１治疗萨病疗效确切，有很
好的应用前景，值得临床推广应用。
参考文献：
［１］ 蒙医学编委会．中国医学百科全书·蒙医学（汉文版）［Ｍ］．
上海：上海科学技术出版社，１９９２：９２．
［２］ 乌兰．蒙医病证诊断疗效标准［Ｍ］．北京：民族出版社，２００７．
［３］ 国家中医药管理局．中药新药临床研究指导原则［Ｍ］．北京：
中国医药科技出版社，２０１０．
（责任编辑：魏 晓）
—１２—
了研究，为苦远志的质量标准控制提供依据。
１ 仪器与试剂
高效液相色谱仪（Ｗａｔｅｒｓ Ａｌｉａｎｃｅ ２６９０），ＸＳ－１２５Ａ电
子分析天平（瑞士），甲醇，０．２％磷酸溶液，甲醇为色谱纯
（美国Ｆｉｓｈｅｒ公司），其他试剂均为分析纯（天津化工厂），水
为超纯水（１８．２ΩＰａ），０．４５μｍ滤膜（安捷伦公司）。
远志皂苷元（批号：１１１５７２－２００７０２，中国食品药品检定
研究院），纯度为９８．７％。
２ 方法与结果
２．１ 对照品溶液制备
精密称取对照品远志皂苷元１０．２６ｍｇ于１０ｍＬ容量瓶
中，加 甲 醇 溶 解，摇 匀，定 容 至 刻 度，即 得 浓 度 为
１．０２６ｍｇ／ｍＬ的远志皂苷元对照品溶液。
２．２ 色谱条件
色谱柱：ＷａｔｅｒｓμＢｏｎｄａｐａｋ Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，
５μｍ），流动相：甲醇－０．２％磷酸（７０∶３０），柱温：３０℃，流
速：１ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长：２１０ｎｍ，进样量：１０μＬ
在此条件下，标准品的保留时间约为２０．９ｍｉｎ，且分离
效果良好。见图１、图２。
２．３ 标准曲线绘制
精密称取对照品２０．５５ｍｇ置于１０ｍＬ容量瓶中。加甲
醇溶解，并定容，制得浓度为２．０５５ｍｇ／ｍＬ的溶液。精密量
取７ｍＬ对照品溶液置１０ｍＬ容量瓶中加甲醇稀释至刻度，
摇匀，制成含远志皂苷元１．４３８ ５ｍｇ／ｍＬ的溶液。依此法，
再制成浓度分别为１．００７ ０、０．７０４ ９、０．４９３ ４、０．３４５ ４、
０．２４１ ８ｍｇ／ｍＬ的溶液，依次注入液相色谱仪，分别进样
１０μＬ，按上述色谱条件测定峰面积。以进样浓度为横坐标，
峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程如下，远志皂苷
元：Ｙ＝１Ｅ＋０６Ｘ－１ ９６７，相关系数ｒ＝０．９９９ ０，实验结果
表明，远志皂苷元在进样量为２．４２～２０．５５μｇ范围内具有
良好的线性关系。见图３。
图１ 远志皂苷元ＨＰＬＣ图谱
图２ 苦远志样品ＨＰＬＣ图谱
—２２—
图３ 远志皂苷元标准曲线
２．４ 样品溶液制备
根据最佳工艺，取苦远志粉末（过四号筛）１．０２３ｇ，精密
称定，加甲醇２０ｍＬ，加热回流２ｈ后，过滤，滤渣加甲醇
２０ｍＬ同样加热回流２ｈ后过滤，合并两次滤液，滤液蒸干，
残渣加１０％ＨＣｌ溶液２０ｍＬ。超声使溶解，水浴中加热水解
２ｈ，取出，放冷，滤过。沉淀用水洗涤至中性。残渣加甲醇
溶解并转移至１０ｍＬ容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
２．５ 仪器精密度试验
取浓度为１．０２６ｍｇ／ｍＬ的远志皂苷元对照品溶液，连
续进行５次测定，记录峰面积值（Ｓ），计算ＲＳＤ值，ＲＳＤ＝
１．１４％，表明仪器精密度良好。
２．６ 稳定性试验
在１０ｈ内对样品溶液每间隔２ｈ测定１次，考察样品溶
液的稳定性。记录峰面积，计算ＲＳＤ值，ＲＳＤ值为０．８６％，
表明样品溶液在１０ｈ内稳定。
２．７ 重现性试验
取同一月份采集的样品药材，照样品方法处理测定结
果，ＲＳＤ＝０．３６％，表明该方法重现性良好。
２．８ 加样回收率试验
按样品溶液制备项下的方法制备同一样品６份，其中５
份精密加入远志皂苷元对照品，１份用于空白对照，按样品
测定项下操作，计算回收率。结果平均回收率为９９．８２％，
ＲＳＤ为１．０３％。见表１。
表１ 回收率测定结果
样品含远志
皂苷元（ｍｇ）
加入远志皂
苷元（ｍｇ）
实测量
（ｍｇ）
回收率
（％）
平均回
收率（％）
ＲＳＤ
（％）
０．５０１２ ０．５１３０ １．０２２１ ９９．２３
０．４９９７ ０．５１３０ １．００５１ １００．７６
０．５１０７ ０．５１３０ １．０１２２ １０１．１４ ９９．８２ ０．９２
０．５１２２ ０．５１３０ １．０３７１ ９８．８５
０．５２１４ ０．５１３０ １．０３８３ ９９．６２
０．５０２５ ０．５１３０ １．０２２２ ９９．３４
２．９ 样品测定
取样品１０μＬ进样，按上述色谱条件进行测定，记录峰
面积，以外标法计算含量，结果见表２。
表２ ＨＰＬＣ法测定远志皂苷元含量结果 （％）
样品 １ ２ ３ ４ 平均含量
武定 ０．１０１ ０．０９９ ０．０９８ ０．０９８ ０．０９９
建水 ０．１９６ ０．１９６ ０．１９７ ０．１９５ ０．１９６
大理 ０．１０７ ０．１１７ ０．１１４ ０．１１５ ０．１１３
３ 讨论
关于远志属植物的定量评价，文献报道有以远志皂苷
元（ｓｅｎｅｇｅｎｉｎ）为对照品，采用 ＨＰＬＣ法测定药材中远志皂
苷元含量［８］，亦有以从远志中分得的去羟基远志皂苷元（ｄｅ－
ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｅｓｅｎｅｇｅｎｉｎ）为对照品，采用 ＵＶ法测定总皂苷含
量［９］，采用ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定远志药材中去羟基远志皂苷元
含量［１０］等。
由于特殊的酯链结构，远志皂苷类成分的性状多不稳
定，单体成分不易获得，而且单一成分在药材中含量比较
低，所以选择一个或多个远志皂苷类成分作为质量控制指
标比较困难。但远志皂苷有相同的苷元，因此可以考虑以
远志皂苷元作为远志的质量控制指标。远志皂苷水解产物
多样，实验中必须严格控制水解条件才能保证得到稳定的
水解产物。据文献报道，将远志皂苷彻底水解后所得的远
志皂苷元相对比较稳定，可以考虑以此化合物作为对照品
对远志中的皂苷类成分进行间接测定。从测定结果可知，
苦远志药材中远志皂苷元的含量：建水＞大理＞武定。
考虑到仪器使用的可行性，用高效液相色谱法测远志
皂苷元的含量，能及时测定，结果相对准确可靠。测定波长
为２１０ｎｍ，远志皂苷元在进样量为２．４２～２０．５５μｇ范围内
具有良好的线性关系，ｒ＝０．９９９ ０；平均加样回收率为
９９．８２％，ＲＳＤ＝０．９２％。该方法测定远志皂苷元的含量方
法简便、快捷，结果准确，重现性好，故可作为苦远志质量控
制方法。
参考文献：
［１］ 朱兆云，韦群辉．云南民族药志［Ｍ］．昆明：云南民族出版社：
２０１．
［２］ 云南省方志编纂委员会．云南省志［Ｍ］．昆明：云南人民出版
社，２００３：５１８．
［３］ 云南省药品检验所．云南民族药名录［Ｚ］．昆明：云南省药品
检验所，１９８２．
［４］ 王正坤．哀牢本草［Ｍ］．太原：山西科学技术出版社，１９９１．
［５］ 张晓萍．远志的药理活性研究［Ｊ］．黑龙江医药，２００４，１７（２）：
１３９．
［６］ 兰茂．滇南本草第三卷［Ｍ］．第１版．昆明：云南人民出版社，
１９７８：８８－９０．
［７］ 廖心荣，张大年．苦远志和瓜子金的生药鉴定及临床运用
［Ｊ］．云南中医杂志，１９８５（３）：３６．
［８］ 杨国红，孙晓飞．反相高效液相色谱法测定远志中远志皂苷
元的含量［Ｊ］．药物分析杂志，２００１，２１（４）：２６０－２６３．
［９］ 刘友平，万德光，刘涛，等．分光光度法测定不同产地远志总
皂甙的含量［Ｊ］．成都中医药大学学报，２０００，２３（２）：４６－４７．
［１０］ 刘友平，万德光，宋英．ＨＰＬＣ法测定远志中去羟基远志皂
苷元含量［Ｊ］．中草药，２００１，３２（９）：７８６－７８７．
（责任编辑：魏 晓）
—３２—