全 文 ：第 25卷第 3期
2006年 5月 　　　　　　　　　
分析测试学报
FENXI CESH I XUEBAO(Journal of In strum en talAnalysis)　　　　　　　　　
V ol. 25 No. 3
98～ 99
反相高效液相色谱法测定棒柄花中反式-4-(1-丙烯基 )苯酚-β-D-吡喃葡萄糖苷
刘布鸣 , 卢文杰 , 林　霄 , 陈家源 , 牙启康
(广西中医药研究所 , 广西　南宁　530022)
摘　要:用反相高效液相色谱法建立棒柄花中反式-4-(1-丙烯基)苯酚-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量测定方法 , 并
测定其含量。色谱柱 Re liasil-C18(250 mm ×4.6 mm, 5 μm), 流动相乙腈 -水 (体积比 22 ∶78), 流速 1.0
mL /m in, 检测波长 257 nm。结果待测组分在 0.080 4～ 0. 281 4μg范围内与峰面积线性关系良好 , 相关系数为
0. 999 5, 平均加标回收率为 98%, RSD为 1. 8%(n =6)。本法简便 、 快速 、 重复性好 、 结果准确可靠。
关键词:棒柄花;反式-4-(1-丙烯基)苯酚-β-D-吡喃葡萄糖苷;高效液相色谱法
中图分类号:O657. 72　　文献标识码:A　　文章编号:1004 - 4957(2006)03 -0098 - 02
De te rm ination ofTrans-4-(1-propeny l)-pheno l-β-D-g lucopyranoside in
Cleid ion brevipetiolatum Pax etHoffm by Reversed-phase H igh
Performance Liquid Chrom atog raphy
LIU Bu-m ing, LUW en-jie, LIN X iao, CHEN Jia-yuan, YA Q i-kang
(Guangxi Institute of T raditiona lM edica l and Pharm aceutica l Sc iences, N ann ing　530022, China)
Abstract:A reversed-phaseHPLC method was estab lished to determ ine trans-4-(1-propeny l)-pheno l-β-
D-g lucopy ranoside inCleidion brevipetiolatum Pax etHoffm. The chromatographic separa tion w as accom-
plished using a Re liasilC18 column(250mm ×4.6mm , 5μm)w ith aceton itrile -wa ter(22 ∶78 by vo l-
ume) as mobile phase at a flow rate of 1.0mL /m in and a UV de tector atλ257nm. A linear ca libration
curve w as ob tained fo r trans-4-(1-propeny l)-pheno l-β-D-glucopyranoside over the range o f 0.080 4 -
0.281 4μg w ith a co rre lation coefficient of 0.999 5. The ave rage recovery was 98% and the rela tive
standard deviation w as 1.8%(n=6). This me thod is rapid, reliab le, simple and accura te.
Key words:C leidion brevipetiola tum Pax et Ho ffm;Trans-4-(1-propenyl)-phenol-β-D-g lucopy rano-
side;HPLC
棒柄花为大戟科植物棒柄花 (Cleid ion brevipetiolatum Pax etHo ffm. ), 别名大树三台 , 分布于广东 、 广
西 、 贵州 、云南 , 有消炎解表 , 利湿解毒 、通便的功能。用于治疗感冒 、急慢性肝炎 、疟疾 、膀胱炎[ 1] ,
为广西地方习用药材。其化学成分文献报道了糖苷 、 三甲氧基苯酚 、谷甾醇 、 胡萝卜苷 6个化学成分[ 2] ,
药理作用未见报道。本研究小组从棒柄花植物中分离得一苯丙素酚糖苷类化合物 , 鉴定为反式-4-(1-丙烯
图 1　反式-4-(1-丙烯基)-苯酚-β-
D-吡喃葡萄糖苷结构式
F ig.1　Struc ture of trans-4-(1-propeny l)-
pheno l-β-D-g lucopy rano side
基)-苯酚-β-D-吡喃葡萄糖苷 , 英文名:Trans-4-(1-propenyl)-
pheno l-β-D-glucopyranoside(以下缩写为 PPG), 系首次从该植
物中分离鉴定[ 3] , 结构式如图 1, 对 PPG成分含量测定和药
理作用尚无研究报道 , 据报道苯丙素酚类化合物具有较强的
生理活性 [ 4] 。本文建立棒柄花中 PPG的 HPLC含量测定方
法 , 用于棒柄花药材的质量控制。
1　实验部分
1. 1　仪器与试药
美国W aters 515高效液相色谱仪 , 2487紫外检测器;威玛龙WM2010通用多媒体色谱数据工作站
(北京)。
收稿日期: 2005 - 05 - 26;修回日期:2005 - 09 -26
基金项目:广西科技攻关项目(桂科攻 0322024 - 5A);广西大型仪器协作共用专项资金资助项目(115 -2003 - 51)
作者简介:刘布鸣(1956 -), 男 , 广西南宁人 , 研究员 , Tel: 0771 - 5883405, E -m ai l: liubum ing@ tom. com
第 3期 刘布鸣等:反相高效液相色谱法测定棒柄花中反式-4-(1-丙烯基)苯酚-β-D-吡喃葡萄糖苷
　　PPG对照品 , 从植物棒柄花中提取分离得到 , 经四谱分析鉴定其结构[ 3]与文献一致[ 5] , 纯度为 98%。
棒柄花 (Cleidion brevipetiolatum Pax e tHoffm. )采集于广西天等县 , 由广西中医药研究所赖茂祥副研
究员采集并鉴定 。
乙腈(色谱纯 , Fisher Scien tific);水为蒸馏水经纯水器纯化处理;提取用甲醇 (分析纯 , 北京化
工厂)。
1.2　色谱条件与系统适用性试验
色谱柱:Re liasil C18柱 (250mm ×4.6mm , 5μm), A ICHROM;流动相:乙腈 -水(体积比 22 ∶78),
流速 1.0mL /m in;检测波长:257 nm;进样量:10 μL;理论塔板数以 PPG计不低于 5 000。对照品与样
品色谱图见图 2。
图 2　对照品(A)与样品(B)的高效
液相色谱图
F ig. 2　The ch rom a tog ram s of
refe rence substance(A) and
sam ple(B)
1.3　溶液制备
对照品溶液的制备:精密称取 PPG对照品 10.05mg, 置 100
mL容量瓶中 , 加甲醇溶解定容 , 得 0.100 5 g /L对照品储备溶
液 。精密吸取 1.6mL置 10mL容量瓶中 , 加甲醇溶解定容 , 得
16.08mg /L的对照品溶液 , 0.45 μm微孔滤膜过滤 , 即得。
供试品溶液的制备:取棒柄花粉碎 , 取约 0.5 g, 精密称定 ,
加 20mL甲醇超声提取 2 h, 放冷 , 过滤 , 滤液定量转移至 25
mL容量瓶中 , 加甲醇定容 , 0.45 μm微孔滤膜过滤 , 即得。
2　结果与讨论
2.1　提取时间试验
考察了提取时间分别为 0.5、 1、 1.5、 2、 3 h的提取效果 ,
按供试品溶液制备并测定 , 其含量分别为 0.822 9、 0.880 5、
0.957 1、 1.038 1、 1.055 9 mg /g, 提取 3 h后所测得的 PPG含
量与提取 2 h相比仅增长了 1.7%, 故可以看作 2 h已基本提取
完全 , 为减少分析时间 , 确定提取时间为 2 h。
2. 2　检测波长选择
　　取对照品适量 , 用流动相配成 10mg /L的溶液 , 测得紫外光谱最大吸收为 257 nm , 故选 257 nm为
检测波长。
2.3　标准曲线与检出限
取 PPG对照品储备溶液 , 分别精密量取 0.8、 1.2、 1.6、 2.0、 2.4、 2.8mL, 置于 10 mL容量瓶
中 , 用甲醇定容 。按上述色谱条件测定峰面积 , PPG在 0.080 4 ～ 0.281 4 μg范围与峰面积呈良好线性
关系。以峰面积 (Y )为纵坐标 , 进样量 m (μg)为横坐标 , 求得标准曲线回归方程为:Y =73 508m +
7 902.3, r=0.999 5。
实验条件下 , 以 S /N =3计算棒柄花中 PPG的检出限为 0.001 μg, 以 S /N =10计算 PPG的定量下
限为 0.004 μg。
2.4　重复性与稳定性试验
精密称取同一样品 6份 , 按供试品溶液制备方法进行处理 , 测定 PPG的含量 , 结果 RSD为
1.94%。
取同一供试品溶液 , 室温下放置 , 每间隔 1 h进样一次测定 , 共进样 6次 , 分别测定 PPG峰面积 ,
结果 RSD为 1.21%, 表明样品在 6 h内稳定。
2.5　回收率试验
精密称取已测得含量的样品 6份 , 分别精密加入一定量的对照品溶液 , 按上述方法提取处理 , 测
定 PPG含量 , 结果回收率为 98%, RSD为 1.8%。
(下转第 102页)
99
分析测试学报 第 25卷
图 2　SD、 SM和 SM
2
混合标准品(a)和市售药物样品(b, c)的
毛细管电泳分离谱图
F ig. 2　Capillary e lectropho reg ram s of a m ix ture of SD, SM and SM 2
standard sam ples(a), the comm ercia l su lfadiazine tablet(b) and
the comm ercial su lfam e thazine powder(c)
condi tion s:uncoated fu sed-silica cap illary(50 cm ×50μm);2. 0 mm ol /L
Na2HPO4 - 0. 6 mm ol /L NaH2 PO 4 as the runn ing bu ffer;+12 kV separation
voltage;conductivity detection
2.4　样品分析及加标回收实验
取市售复方磺胺嘧啶片 (主成分
为磺胺嘧碇和甲氧苄啶 )和复方磺胺
二甲嘧啶散 (又名小儿安散 , 主成分为
磺胺二甲嘧碇和磺胺咪 , 河北保定制
药厂 ), 研匀后准确称取 0.15 g, 加
10 mL甲醇超声萃取 10 m in。高速离
心分离 , 移取上层清液 , 用水稀释
250倍后进样分析 , CE谱图如图 2b、
c所示 , 图 2a是混合标准品的图谱。
2种药物样品中均未检出 SM , 按回归
方程计算 SD、 SM 2的含量 , 结果与标
示值相符。同时进行加标回收率试验 ,
结果如表 2所示 。
表 2　复方磺胺(二甲)嘧啶药物中 SD、 SM 2含量的测定结果和加标回收率
Tab le 2　Determ ina tion resu lts o f SD and SM 2 in the com pound sulfonam ide m ed icines
Sam ple
Nom inalm g /Pecs.
SD SM 2
Found m g /Pecs.
SD SM 2
Recovery
R /%
RSD(n=6)
sr /%
C om pound su lfad iazine tab lets 400 - 405. 3 - 101 3. 1
C om pound su lfam ethazine powd er 150 - 154. 3 - 102 3. 8
参考文献:
[ 1] 　郑　虎. 药物化学 [ M ] . 北京:人民卫生出版社 , 2000:348 - 350.
[ 2] 　陈　义. 毛细管电泳技术与应用 [M ] . 北京:化学工业出版社 , 2000:1 -7.
[ 3] 　汪尔康. 21世纪的分析化学 [M ] . 北京:科学出版社 , 2001:1 -10.
[ 4] 　王桂芳 , 张守尧 , 王秉钧. 毛细管区带电泳法测定复方磺胺嘧啶片中两组分的含量 [ J] . 华西药学杂志 , 2001,
16(2):124 - 125.
[ 5] 　L IN E C, CHANG C C, LINW C. M ig ration behavior and separa tion of su lfonam ides in capillary zone e lectropho resis[ J] .
J Chroma tog r, A, 1997, 759:203 - 209.
[ 6] 　谢天尧 , 郑一宁 , 莫金垣 , 等. 一种简易型毛细管电泳电导检测装置及其应用 [ J] . 分析测试学报 , 2000, 19
(3):5 - 7.
　 (上接第 99页)
2.6　样品含量测定
取药材分枝 、叶 , 精密称取不同的药材样品各约 0.5 g(精确到 0.000 1 g), 以上述方法进行含量
测定 , 结果如表 1。由样品含量测定得出 , 棒柄花叶中 PPG的含量高于枝 , 可为药材及制剂的质量控
制提供参考 。
表 1　样品含量测定结果
Tab le 1　Ana ly tica l re su lts o f samp le
Sam p le Leaf 1 Leaf 2 Leaf 3 Leaf 4 Branch 1 B ranch 2
Am oun tw /10 - 3 1. 058 3 1. 059 9 1. 057 2 1. 059 8 0. 408 1 0. 418 4
参考文献:
[ 1] 　冉先德. 中华药海 [ M ] . 哈尔滨:哈尔滨出版社 , 1993:1856.
[ 2] 　李翠红 , 周红娇 , 羊晓东 , 等. 棒柄花的化学成分研究 [ J] . 天然产物研究与开发 , 2004, 16(6):514 -515.
[ 3] 　刘布鸣 , 卢文杰 , 牙启康 , 等. 棒柄花中反式-4-(1-丙烯基)-苯酚-β-D-吡喃葡萄糖苷的化学结构分离鉴定 [ J] .
广西科学 , 2005, 12(3):214 - 215.
[ 4] 　王宪揩. 天然药物化学 [M ] . 北京:人民卫生出版社 , 1993:325 - 328.
[ 5] 　NAKANNO K, NIS IHZAWA K, TAKEMOTO I, e t a.l F lavono l and pheny lpropano id g lycoside s from lilium corda tum
[ J] . Phy tochem istry, 1989, 28(1):301 - 303.
102