全 文 :第 28卷 第 5期 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 Vol. 28 No. 5
2008年 10月 Journal o f Central South Univ er sity o f Fo rest ry& Techno log y Oct. 2008
文章编号: 1673- 923X ( 2008) 05- 0089- 04
金橘黄酮提取物对大鼠降血脂功能的影响
黎继烈 ,王 卫 ,曾超珍 ,刘宗敏 ,李忠海
(中南林业科技大学 ,中国湖南 长沙 410004)
摘 要: 以湖南浏阳金橘黄酮提取物 ( FC1)和江西遂川金橘黄酮提取物 ( FC2)为受试药物 ,大鼠为实验对象 ,测定大鼠血清总胆固
醇 ( T C)、甘油三酯 ( T G)、高密度脂蛋白胆固醇 ( HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇 ( LDL-C)指标 ,探讨金橘黄酮提取物的降血脂效果 .
结果表明: 80 mg· k g- 1剂量 FC1、 FC2能显著降低大鼠血清 TG值 (P < 0. 05) ,极显著降低大鼠血清 TC和 LDL-C值 ( P < 0. 01) ; FC2
在 20 mg· k g- 1剂量可显著降低试验组动物的血清 LDL-C值 ( P < 0. 05) ; 160 mg· kg- 1剂量 FC1、 FC2可极显著降低大鼠血清 TG值
(P < 0. 01) .各受试物实验组动物的血清 TC浓度都有显著的下降 ( P < 0. 05) .
关键词: 药物化学 ;金橘 ;黄酮提取物 ;降血脂
中图分类号: R350. 1 文献标志码: A
Effects of Kumquat Flavonoid Extracts on the Blood Lipid Reduction
Of Obese Rats with Hyperlipidemia
LI Ji-lie, WANG Wei, ZENG Chao-zhen, LIU Zong-min, LI Zhong-hai
( Cen tral South Universi ty of Fores t ry& Technolog y, Changsha 410004, Hunan, China)
Abstract: Through a determinat ion of th e level s of serum total choles terol ( TC) , triglycerides ( TG) and high-d ensi ty lipoprotein
choles terol ( HDL-C) , and th e ind ex of low-d ensi ty lipoprotein choles terol ( LDL-C) , in some obese rats wi th hyperlipid emia, a s tudy
was made of the ef fects of Hunan Liuyang kum quat f lavonoid ext ract s ( FC1) and Jiangxi Suichuan on es ( FC2) upon blood lipid
reduction. Th e resul t s sh ow th at compared w i th th e cont rolled rat s, the serum T G values ( P < 0. 05 ) of obes e rat s signif ican tly
decrease at 80 mg· kg- 1dose by FC1 o r FC2 and th ei r valu es of s erum TC and LDL-C ( P < 0. 01) are ex tremely low; that th e LDL-C
values ( P < 0. 05) of th e tes t rats are sig ni ficantly reduced at th e 20 mg· kg- 1 dose by FC2 and fu rth ermo re, th eir serum T G valu es
(P < 0. 01) can be signi fican tly low ered by FC1 o r FC2 at 160 mg· kg- 1 dose; and th at the s erum TC concen t ration of the test rat s
has al so b een signifi cant ly decreas ed ( P < 0. 05) . To sum up, the f lavonoid ex tract s in the k umquats can ef ficien tly lower th e blood
lipid in th e obes e rats w i th hyperlipid emia.
Key words: medicinal ch emis t ry; k umquat; f lav one ex tracts; blood lipid low ering
动脉硬化是动脉的一种非炎症性病变 ,可以使动脉管壁增厚、变硬、失去弹性和管腔变狭 .随着人类饮食结
构的变化 ,这种病的发病率越来越高 ,引起了社会的广泛关注 ,长期以来主要是依赖药物治疗 ,这会给人体带来
很大的副作用 ,并引起药物依赖性 .近几年 ,人们开始研究从天然产物中分离提取一些功能成分 ,如:大豆异黄
酮 [1, 2 ] ,银杏黄酮 [ 3] ,枸杞黄酮 [4, 5 ]等 ,研究它们调节血脂的作用 ,并取得了一定的成效 .
金橘 ,系芸香科柑橘属常绿小乔木 ,是热带、亚热带果树 ,果实富含挥发油、黄酮等生物活性成分 ,具有抑
菌、降脂及防治心脑血管疾病等多种功效 [6, 7 ] .除鲜食外还广泛应用于果脯、饮料、中药的生产 ,但总体上对于金
橘的开发研究仍集中在单纯的加工利用方面 ,对其保健功能的研究还不够深入 ,这在一定程度上影响了金橘的
深度开发 .为了更好地利用金橘资源 ,本实验以金橘黄酮提取物作为受试药物 ,探讨其对血脂的调节作用 ,为金
收稿日期: 2008-04-15
基金项目: 国家“十五”科技攻关项目 ( 2001BA535C) .
作者简介: 黎继烈 ( 1959- ) ,女 ,湖南华容人 .教授 ,博士 ,主要从事食品生物技术研究 .
DOI : 10. 14067 /j . cnki . 1673 -923x . 2008. 05. 028
橘深度开发提供实验依据 .
1 材料与方法
1. 1 材料与试剂
金橘黄酮提取物 金橘于 2005年 11月采自湖南浏阳和江西遂川 ,品种为金弹 Fortunel la crassifol ia
Sw ing le.取新鲜金橘皮 ,进行真空冷冻干燥 ,将干燥后的金橘皮粉碎过 40目筛 ,用石油醚脱脂回流 2 h,脱脂后
按 m金橘粉∶m80%乙醇 = 1∶ 20物料比 ,用 MDS-6压力自控密闭微波萃取系统 60℃萃取 30 min,过滤 ,滤液用大孔
树脂吸附 ,洗脱液经真空浓缩即为金橘黄酮提取物 ,测定浏阳金橘黄酮提取物 ( FC1)、遂川金橘黄酮提取物
( FC2)含量分别为 32. 58%和 33. 82% ,使用时配制成所需浓度 [ 6] .
主要药品 高脂饲料 (基础饲料 93. 8% ,胆固醇 1. 0% ,猪油 5. 0% ,胆盐 0. 2% );总胆固醇 ( TC)测试盒 ,甘
油三酯 ( TG)测试盒 ,高密度脂蛋白胆固醇 ( HDL-C)测试盒和低密度脂蛋白胆固醇 ( LDL-C)测试盒 ,均购于浙
江东瓯生物工程有限公司 .
试验动物 雄性大鼠 ,湖南中医药大学实验动物中心购买 ,医动字 20-002号 .饲养环境通风良好 ,相对湿
度 50%~ 70% ,温度 22~ 24℃ ,试验动物自由采水 ,采食 .
1. 2 主要仪器
T G16W微量高速离心机 (长沙平凡仪器仪表有限公司 ) , UV -1700紫外分光光度计 (日本岛津公司 ) .
1. 3 试验方法
1. 3. 1 剂量选择
本试验分别设 3个剂量: 20 mg· kg- 1 (低剂量 ) , 80 mg· kg- 1 (中剂量 ) , 160 mg· kg- 1 (高剂量 ) .
1. 3. 2 肥胖型高血脂模型的建立
取雄性健康大鼠 ,按每组 10只随机分为 8组 ,其中空白对照组 1个 ,模型对照组 1个 ,湖南浏阳和江西遂川
金橘黄酮提取物给药组各 3个 .以基础饲料适应性喂养 4 d后 ,空白对照组继续喂养基础饲料 ,其余各组改用高
脂饲料喂养 .各给药组按所设剂量 ,每天 1次灌胃金橘黄酮提取物溶液 ,空白对照组和模型对照组灌胃等量蒸
馏水 ,灌胃量为 0. 01 mL· g- 1 ,每 2 d称 1次体重 ,连续灌胃 30 d,禁食 12 h,摘眼球取空腹血 ,分离血清 ,测定总
胆固醇 ( TC)、甘油三酯 ( TG)、高密度脂蛋白胆固醇 ( HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇 ( LDL-C)的含量 ,比较模型
对照组和空白对照组的差异显著性 ,若 2组具有显著差异性则说明肥胖型高血脂模型建立成功 .
图 1 金橘黄酮提取物对大鼠体重的影响
Fig. 1 Effect of kumquat f lavonoids extracts on the
body we ight of rats
1. 3. 3 大鼠血清 TC、 TG、 HDL-C、 LDL-C试验
大鼠分组、喂养和灌胃情况同本文 1. 3. 2节 , 30 d
后 ,禁食 12 h,摘眼球取空腹血 ,分离血清 ,分别用测试盒
测定 TC、 TG、 HDL-C、 LDL-C含量 .
1. 3. 4 数据处理方法
试验数据用完全随机设计的独立样本 t检验 ,以均
匀数±标准差 (x± s ,n= 10)表示 ,用 SPSS 13. 0统计软
件处理 ,比较各给药组与模型对照组差别显著性 .
2 结果与分析
2. 1 金橘黄酮提取物对大鼠体重的影响
各组大鼠的体重变化如图 1所示 ,金橘黄酮提取物
对各组大鼠体重有很大影响 ,空白对照组和各给药组大鼠的体重增重均小于模型对照组 ,其中 ,给药组大鼠的
90 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 第 28卷
体重增重随着剂量的增加而减少 ;和模型对照组相比 ,空白对照组具有极显著的差异性 ( P < 0. 01) ,这进一步
验证了高脂营养饲料的配方是成功的 ,能够造成大白鼠的肥胖症 ; FC1、 FC2的中、高剂量组均可显著抑制大鼠
体重的增加 ( P < 0. 05) .
图 2 金橘黄酮提取物对大鼠 TC含量的影响
Fig. 2 Effect of kumquat f lavonoids extracts on the
TC of rats
图 3 金橘黄酮提取物对大鼠 TG含量的影响
Fig. 3 Effect of kumquat f lavonoids extracts on the
TG of rats
2. 2 金橘黄酮提取物对大鼠血清总胆固醇的影响
金橘黄酮提取物对大鼠血清总胆固醇浓度的影响如
图 2所示 ,在灌胃不同剂量的金橘黄酮提取物溶液 30 d
后 ,各组大鼠血清 TC含量均有不同程度下降 ,随着剂量
的增加 , TC含量减少 .与模型对照组相比 , FC1低、中、
高 3个剂量组分别下降了 6. 5% 、 14. 7% 、 21. 6% , FC2
低、中、高 3个剂量组分别下降了 8. 2%、 16. 3%、 24. 1% .
经 t检验 , FC1、 FC2低剂量组能显著降低大鼠血清 TC值
( P < 0. 05) ,而中、高剂量组能极显著降低大鼠血清 TC
值 ( P < 0. 01) .
2. 3 金橘黄酮提取物对大鼠血清甘油三酯的影响
如图 3所示 , FC1、 FC2灌胃剂量与 TG含量呈负相关
的 关 系 . 模 型 对 照 组 大 鼠 血 清 TG 含 量 为
1. 89 mmo l· L- 1 ,和模型对照组相比 , FC1低、中、高剂
量组分别下降了 7. 41%、 12. 12% 、 17. 46% , FC2低、中、
高剂量组分别下降了 8. 99%、 14. 29% 、 20. 10% . 2个中
剂量组可显著降低大鼠血清 TG值 ( P < 0. 05) , 2个高剂
量组可极显著降低大鼠血清 TG值 ( P < 0. 01) .
2. 4 金橘黄酮提取物对大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇
的影响
金橘黄酮提取物对大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇浓
度的影响情况如图 4所示 ,经过灌胃 30 d后 ,各给药组大
鼠血清 HDL-C水平均低于模型对照组 .模型对照组
HDL-C为 1. 825 mmol· L- 1 ,与模型对照组相比 , FC1
低、中、高 3个剂量组分别低了 5. 8% , 9. 6% , 20. 0% , FC2
低、中、高 3个剂量组分别低了 7. 4% , 17. 8% , 21. 6% ,经
t检验 , FC1高剂量组对大鼠血清 HDL-C值有显著影响
( P < 0. 05) , FC2中、高剂量组能显著影响大鼠血清
HDL-C值 (P < 0. 05) .
2. 5 金橘黄酮提取物对大鼠血清低密度脂蛋白胆固醇的影响
如图 5所示 ,各给药组动物血清中 LDL-C浓度均明显低于模型对照组 .模型对照组 LDL-C为
4. 043 mmol· L- 1 ,与模型对照组相比 , FC1低、中、高 3个剂量组分别下降了 11. 6% , 24. 3% , 38. 1% ; FC2低、
中、高 3个剂量组分别下降了 14. 9% , 30. 5% , 48. 6% ,经 t检验 , FC1、 FC2中、高剂量可极显著降低试验组动物
的血清 LDL-C值 , FC2低剂量可显著降低试验组动物的血清 LDL-C值 .
91第 5期 黎继烈等 :金橘黄酮提取物对大鼠降血脂功能的影响
图 4 金橘黄酮提取物对大鼠 HDL-C含量的影响
Fig. 4 Ef fect of kumquat f lavonoids extracts on the
HDL-C of rats
图 5 金橘黄酮提取物对大鼠 LDL-C含量的影响
Fig. 5 Ef fect of kumquat flavones extracts on the
content of LDL-C of rats
3 结论与讨论
( 1)本实验的各给药组动物的血清 TC浓度都有显著的下降 ( P < 0. 05) ; 80 mg· kg- 1剂量 FC1、 FC2能显
著降低大鼠血清 TG值 (P < 0. 05) ,极显著降低大鼠血清 TC和 LDL-C值 ( P < 0. 01) ; FC2在 20 mg· kg- 1剂量
可显著降低试验组动物的血清 LDL-C值 ( P < 0. 05) ; 160 mg· kg- 1剂量 FC1、 FC2可极显著降低大鼠血清 TG
值 ( P < 0. 01) .说明金橘黄酮提取物具有调节血脂和防止动脉硬化的作用 ,能降低试验动物的冠心病发病率 .
( 2)金橘黄酮提取物能够调节血脂 ,这可能是因为金橘黄酮竞争性抑制合成胆固醇的限速酶 ,减少肝脏胆固
醇的合成 ,通过抑制胰脂肪酶的作用降低了胆固醇的吸收 ;另外 ,通过提高胆固醇降解酶的活性 ,促进肝细胞的代
谢功能 ,促使胆固醇分解成胆酸 ,从胆小管中流入胆囊 ,然后通过消化道排出体外 ,降低了血胆固醇的含量 .
( 3)促酰化蛋白 ( acyla tion stimula ting pro tein, ASP)是从人血浆分离出的一种小分子蛋白质 ,能显著促进
脂肪细胞合成 TG,金橘黄酮可能通过降低促酰化蛋白的活性 ,还可以通过非竞争性地抑制线粒体及微粒体乙
酰胆碱酶的活性 ,减少 TG的合成 .通过增加血液以及动脉壁内环状腺嘌呤单核苷酸的含量 ,促进脂类分解代
谢 ,减少脂质在血管壁的沉积 .同时刺激肝细胞表面 LDL-C受体活性 ,促进血浆 LDL-C的清除 ,影响胆固醇和
甘油三酯在体内的代谢 ,从而降低血清 TC、 T G、 LDL-C含量以及肝脏的脂肪沉积 .
( 4)本研究从动物实验的角度进一步验证了金橘黄酮提取物具有降血脂及防止动脉硬化的作用 ,通过实验可
以发现 , FC2在调节血脂功效方面优于 FC1,这可能是两地产的金橘黄酮提取物组成稍有差异 ,建议在以后的同
类实验中将金橘黄酮提取物分离为单体 ,深入探讨金橘黄酮单体化合物的结构与药理保健之间的效应关系 .
参考文献:
[1 ] 江志平 ,肖立中 .大豆异黄酮抑制去势兔动脉粥样硬化形成的实验研究 [ J ].中西医结合心脑血管病杂志 , 2004, 2( 9): 532- 534.
[2 ] 陆志科 ,谢碧霞 .大孔树脂对竹叶黄酮的吸附分离特性研究 [ J].经济林研究 , 2003, 21( 3): 1- 4.
[3] Sand ra Stojanovic, Helmu t Sprin z. Ef ficiency and M ech anism of the An tioxidant Action of t rans-Resveratrol and i ts Analogu es in th e
Radical Lipos ome Oxidation [ J ]. Archives of Bioch emist ry and Biophysics, 2001, 391( 1): 79- 89.
[4 ] 凌关庭主编 .抗氧化食品与健康 [M ] .北京:化学工业出版社 , 2004: 191.
[5 ] 潘一峰 ,瞿伟菁 .越柑果渣中黄酮类成分抗氧化活性的研究 [ J].食品科学 , 2005, 26( 10): 206- 210.
[6 ] 黎继烈 ,李忠海 ,钟海雁 ,等 .金柑黄酮对小鼠血糖的影响 [ J].中药药理与临床 , 2007, ( 3): 56- 58.
[7 ] 黎继烈 ,刘宗敏 ,钟海雁 ,等 .金橘总黄酮对小鼠胃肠吸收功能的影响 [ J ].中南林业科技大学学报 , 2007, 27( 2): 50- 53.
[本文编校:吴 毅 ]
92 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 第 28卷