全 文 ：Original Experimental Research 实验论著
飞龙掌血生物总碱抗炎镇痛作用的研究
郝小燕1 ,彭　琳1 ,叶　兰2 ,黄能慧2 ,沈月毛3
(1.贵阳医学院药学系分析化学教研室 , 贵州 贵阳 550004;2.贵阳医学院药理学教研室 , 贵州贵阳 550004;3.中国科学院天
然产物化学重点实验室 ,贵州 贵阳 550002)
[ 摘要] 　目的:研究飞龙掌血生物总碱的药理活性及毒性 , 为进一步开发新药提供药理学依据。方法:分别以二甲苯 、琼脂致
肿及羧甲基纤维素钠致小鼠腹腔白细胞游走 ,观察飞龙掌血的抗炎作用;采用扭体法 , 观察飞龙掌血的镇痛作用;观察血清丙
氨酸氨基转移酶(alanine amino transferase , ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspar tate amino transferase , AS T)值 , 计算肝脏系数;
用改良寇氏法计算半数致死量(lethal dose 50 , LD50)及 95%可信限。结果:飞龙掌血生物总碱制剂小鼠灌胃给药能抑制二甲
苯所致耳肿胀和琼脂所致足肿胀 , 抑制羧甲基纤维素钠所致腹腔白细胞游走 , 抑制酯酸所致小鼠扭体反应。给药 2 周后 ,
ALT、AST 值及肝脏系数检测显示 , 给药组与对照组无显著性差异。其 LD50为 1.622 g/ kg , 95%可信限为 1.29 ～ 2.03 g/kg。
结论:飞龙掌血具有抗炎和镇痛作用 , 较长时间给药对肝脏无损伤作用。
[ 关键词] 　飞龙掌血;抗炎作用;镇痛作用;半数致死量
[ 中图分类号] 　R285.5　　[ 文献标识码] 　A　　[ 文章编号] 　1672-1977(2004)06-0450-03
A study on anti-inflammatory and analgesic effects of alkaloids of Toddalia asiatica
HAO Xiao-Yan1 , PENG Lin1 , YE Lang2 , HUANG Neng-Hui2 , SHEN Yue-Mao3
(1.Department of Analytical Chemistry , Guiyang Medical College , Guiyang , Guizhou Province 550004 , China;2.Depar tment of
Pharmacology , Guiyang Medical College , Guiyang , Guizhou Province 550004 , China;3.The Key Laboratory of Chemistry for Nat-
ural Products of Chinese Academy of Sciences , Guiyang , Guizhou Province 550002 , China)
ABSTRACT　Objective:To study the pharmacological activities and toxicity of the crude alkaloids of Toddalia asiatica and to pro-
vide pharmacological data for the further development of this herbal medicine.Methods:We observed the anti-inflamma tory effects of
the crude alkaloids of Toddalia asiatica , using xy lol and agra to induce the turgidness and sodium carboxymethy l cellulose(CMC-Na)
to induce leucocyte strolling in the rats.The analgesic effects were observed by body-distor tion methods.The effects of alkaloids of
Toddalia asiatica on hepatic function were observed by testing the contents of alanine aminotransferase(ALT)and aspar tate amino-
transferase(AST)in serum and calculating the liver index.The LD50 and 95% creditability were calculated w ith developed Karber
Method.Results:The administration of alkaloids of Toddalia asiatica had the function of inhibiting the auricle swelling caused by
xylo l and joint swelling caused by agar and leucocy te mig ration caused by CMC-Na, decreasing the body-disto rtion of the rats.After
two weeks administration , the contents of ALT and AST showed that there w as no obvious difference between administered g roup
and control group.The LD50 of the crude alkaloids of Toddalia asiatica w as 1.622 g/ kg and the 95% creditability was 1.29 ～ 2.03
g/kg.Conclusion:Toddalia asiatica has anti-inflammatory and analg esic effects , and there is no injury to the liver after long-term
administration in rats.
KEY WORDS　 Toddalia asiatica;anti-inflammation;analgesia;lethal dose 50
J Chin Integ r Med , 2004 , 2(6):450-452
　 飞龙掌血(Toddalia asiatica Lam.)是芸香科
飞龙掌血属植物的根或根皮 ,为贵州苗族用药 ,主要
用于治疗风湿性关节炎及止血 、止痛。据报道该药
主要成分为生物碱类和香豆素类[ 1] 。我们对飞龙掌
血中的生物总碱进行了急性毒性 、主要药效学及对
肝脏功能的影响等实验研究 ,现报道如下。
1　材料与方法
1.1　实验材料
1.1.1　动物　昆明种小鼠 ,体重(20±20)g ,雌雄
各半 ,由贵阳医学院实验动物中心提供 。
1.1.2　药物　飞龙掌血的根皮采集于贵阳市郊 ,由
贵州省中药研究所陈德媛研究员鉴定 。将其药材粉
碎后用甲醇提取 ,经生物碱处理 ,得到飞龙掌血生物
总碱(alkaloids of Toddalia asiat ica , ATA),并制备
成棕褐色粉末制剂 ,每克相当于生药 200 g 。临用时
·450· 中西医结合学报 2004年 11月第 2卷第 6期　J Chin In tegr Med , Nov 2004 , Vol.2 , No.6
[作者简介] 　郝小燕(1955-), 女 , 教授.E-mai l:haoxiaoyan@vip.
163.com
Correspondence to:Prof.HUANG Neng-Hui.
以蒸馏水配成所需浓度 , 并以吐温 80 助溶 , 药液
pH5 ～ 6 。
1.1.3　仪器　紫外分光光度计 、电子天平 ,由贵阳
医学院药理学教研室提供;试剂盒由四川省迈克科
技有限责任公司生产 。
1.2　ATA的抗炎作用[ 2 , 3]
1.2.1　对二甲苯及琼脂所致肿胀的影响　取小鼠
60只 ,随机分为 6组:飞龙掌血低(0.08 g/kg)、中
(0.10 g/kg)、高(0.16 g/kg)剂量组 ,阿司匹林对照
组(0.20 g/kg),溶剂对照组(1 ml蒸馏水加0.05 ml
吐温 80 , 下同),生理盐水对照组。每组 10 只 ,均每
日同体积灌胃 1次 ,连续 5 d。(1)末次给药 1 h后 ,
于小鼠右耳廓滴二甲苯 0.02 ml/只致肿 ,15 min后 ,
小鼠脱颈椎处死 ,以直径 8 mm 的打孔器取双耳对
称的耳片 ,电子天平称重 ,以左右耳片重量差作为肿
胀程度的指标。(2)末次给药 2 h后 ,于小鼠右后足
腱膜下注射 2%琼脂 0.03 m l/只致肿 , 4 h后于踝关
节上 0.5 mm 处剪下后足称重 ,以左右后足重量差
异为衡量肿胀度的指标。
1.2.2　对羧甲基纤维素钠所致腹腔白细胞游走的
影响　取小鼠 70只 ,雌雄各半 ,随机分为 7 组:飞龙
掌血低 、中 、高剂量组 ,阿司匹林对照组 ,溶剂对照
组 ,生理盐水对照组 ,模型组。每组 10只 ,前 6组每
日同体积灌胃给药 1次 ,给药剂量同前 ,连续 5 d。
每组末次给药 1 h后 ,每只小鼠腹腔注射 1%的羧甲
基纤维素钠溶液0.5 ml ,30 min后处死动物 ,每鼠腹
腔注射 5 ml生理盐水 ,轻揉腹部 ,抽取腹腔液滴于
白细胞计数板上 ,以加满白细胞计数板为准 ,于镜下
计数白细胞数。
1.3　ATA的镇痛作用[ 3] 　取小鼠 60只 ,随机分为
6组:飞龙掌血低 、中 、高剂量组 ,阿司匹林对照组 ,
溶剂对照组 ,生理盐水对照组 。每日同体积灌胃给
药1次 ,给药剂量同前 ,连续 5 d。末次给药 30 min
后 ,腹腔注射 0.6%冰醋酸 0.2 ml/只 ,观察 10 min
内出现的扭体次数。
1.4 　ATA 对小鼠肝脏功能的影响[ 4] 　取小鼠
40只 ,随机分为 4 组:飞龙掌血低(0.08g/kg)、高
(0.16 g/kg)剂量组 ,溶剂对照组 ,生理盐水对照组。
每日同体积灌胃 1 次 ,连续给药 2周。末次给药后
禁食 20 h ,摘除眼球取血 ,用改良赖氏法测定血清丙
氨酸氨基转移酶(alanine aminot ransferase , ALT)、
天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminot ransferase ,
AST),处死小鼠剖腹取肝脏并称重 ,计算肝脏系数。
1.5　ATA急性毒性研究[ 2 , 3] 　取小鼠 50 只 ,雌雄
各半 ,随机分为 5个剂量组 ,各剂量组分别为 0.83 、
1.03 、1.55 、2.07 、3.10 g/kg ,每组 10只。实验前禁
食(不禁水)12 h ,按所设剂量灌胃给药 ,给药 1 h后
恢复供食供水 ,观察 7 d ,并记录实验数据。另取小
鼠50只 ,随机分为 5 个溶剂对照组 , 分别为0.02 、
0.04 、0.06 、0.08 、0.10 ml/kg ,方法同前 ,观察 7 d。
1.6　统计学方法　实验数据以 x ±s表示 ,组间比
较采用 t 检验 。
2　结　果
2.1　A TA抗炎作用
2.1.1　对肿胀的影响　飞龙掌血中剂量组能明显
抑制二甲苯所致耳肿胀 ,与生理盐水对照组比较有
显著性差异(P <0.05);飞龙掌血中 、高剂量组能
明显抑制琼脂所致小鼠足肿胀 ,与生理盐水对照组
比较有显著性差异(P <0.05)。见表 1。
2.1.2　对羧甲基纤维素钠所致腹腔白细胞游走的
影响[ 5] 　飞龙掌血高剂量组能明显抑制羧甲基纤维
素钠所致腹腔白细胞游走 ,与模型组比较有显著性
差异(P <0.05)。见表 2。
2.2　ATA的镇痛作用　飞龙掌血中 、高剂量组均
能明显抑制醋酸所致小鼠的扭体反应 ,与生理盐水
对照组比较有显著性差异(P <0.05)。见表 3 。
2.3　ATA对小鼠肝脏功能的影响 　飞龙掌血组 、
溶剂组给药 2周血清 ALT 、AST 值及肝脏系数检测
显示 ,给药组与对照组无显著差异 ,说明飞龙掌血生
物总碱较长时间给药对小鼠肝脏功能无损伤作用。
见表 4。
表 1　飞龙掌血生物总碱对小鼠耳肿胀 、足肿胀的影响
Tab 1　Effects of alkaloids of Toddalia asiatica on auricle and joint swelling of rats
(x ± s , mg)
　　Group n Weight dif ference of tw o ears Weight dif ference of tw o feet
Normal saline cont rol 10 18.8±9.2 90.0±25.0
Solvent cont rol 10 15.6±8.9 100.4±18.1
Low dose of alkaloids(0.08 g/ kg) 10 16.6±7.1 86.6±28.2
Medium dose of alkaloids(0.10 g/ kg) 10 7.7±4.7＊ 61.0±40.1＊
High dose of alkaloids(0.16 g/ kg) 10 13.4±6.8 93.9±24.0＊
Aspirin(0.20 g/ kg) 10 7.5±4.2＊ 77.0±20.3＊
　　＊P <0.05 , vs normal saline cont rol group
·451·中西医结合学报 2004年 11月第 2卷第 6期　J Chin Integr Med , Nov 2004, Vol.2 , No.6
表 2　飞龙掌血生物总碱对羧甲基纤维素钠所致白细胞游走的影响
Tab 2　Effect of alkaloids of Toddalia asiatica
on leucocyte migration caused by CMC-Na
(x ± s)
　　Group n Leucocytes(×105/ L)
Normal saline control 10 95±20
Model 10149±57
S olvent cont rol 10146±44
Low dose of alkaloids(0.08 g/ kg) 10128±26
Medium dose of alkaloids(0.10 g/ kg) 10111±62
High dose of alkaloids(0.16 g/ kg) 10108±37■
Aspirin(0.20 g/ kg) 10100±24■
　　■P <0.05 , vs m odel group
表 3　飞龙掌血生物总碱对小鼠镇痛作用的影响(扭体法)
Tab 3　Analgesic effect of alkaloids of Toddalia
asiatica on rats(Body-distortion Procedure)
( x ±s)
　Group n Body-distortion(Distortions/ 10 min)
Normal saline cont rol 10 17.4±9.4
Solvent cont rol 10 16.7±8.2
Low dose of alkaloids(0.08 g/ kg) 10 13.4±10.4
Medium dose of alkaloids(0.10 g/ kg) 10 11.7±4.7＊
High dose of alkaloids(0.16 g/ kg) 10 9.3±7.4＊
Aspirin(0.20 g/ kg) 10 6.0±5.0＊
　　＊P<0.05 , vs normal saline cont rol group
表 4　飞龙掌血生物总碱对小鼠肝脏功能的影响
Tab 4　Ef fect of alkaloids of Toddalia asiatica on hepatic function of rats
( x ±s)
　　Group n ALT (U/ L) AST (U/ L) Liver index(mg/ g)
Normal saline cont rol 10 66.80±5.72 67.41±6.25 55.8±8.7
Solvent control 10 69.12±9.43 68.97±10.23 53.9±2.8
Low dose of alkaloids(0.08 g/ kg) 10 65.15±4.21 70.00±8.85 55.3±9.0
High dose of alkaloids(0.16 g/ kg) 10 70.94±6.76 72.59±9.54 61.6±7.7
2.4　ATA急性毒性研究　用寇氏法计算半数致死
量(lethal dose 50 , LD50)为 1.622 g/kg ,相当于原生
药 324.4 g/kg , 95%可信限为 1.29 ～ 2.03 g/kg 。
5个溶剂对照组观察 7 d ,结果各组均无动物死亡 ,
说明溶剂对动物并无影响 。
3　讨　论
通过对飞龙掌血生物总碱进行有关的药效学研
究 ,实验结果表明飞龙掌血生物总碱具有抗炎作用 ,
能抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀 、抑制琼脂所致小鼠
足肿胀 、抑制羧甲基纤维素钠所致白细胞游走;同时
具有镇痛作用 ,能减少冰醋酸所致小鼠扭体反应的
次数 。
飞龙掌血除含有生物碱外 ,还含有较大量的香
豆素类化合物。由于考虑香豆素可能对肝脏有损伤
作用 ,所以本实验采用飞龙掌血生物总碱提取物灌
胃给药 2周 ,测定其血清 ALT 、AST 值以及肝脏系
数 ,结果表明飞龙掌血生物总碱提取物对肝脏无损
伤作用 。关于飞龙掌血的其他药效及其作用机制有
待进一步研究。
(本研究工作得到贵阳医学院药学系张旭硕士
的大力支持 ,特此致谢 !)
[ 参考文献]
1　全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[ M ] .北京:人民卫生
出版社 , 1990.903.
2　陈　奇.中药药理研究方法学[ M] .北京人民卫生出版社 ,
1994.834.
3　徐叔云.药理实验方法学[ M] .第 2版.北京:人民卫生出版社 ,
1991.253.
4　中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指南[ S] .
1992.87.
5　何立望.生物化学实验[ M] .贵阳:贵州科学技术出版社 , 1994.
138.
[ 收稿日期] 　2003-06-20　　[ 本文编辑] 　白玉金
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