全 文 ：白鲜皮洗剂的质量标准研究
谭晓亮 1 , 　李瑞海 2
(1.沈阳市中医院 ,辽宁 沈阳 110004;2.辽宁中医药大学 ,辽宁 沈阳 110032)
收稿日期:2007-11-26
作者简介:谭晓亮(1973～ ),男 ,主管中药师 ,研究方向:中药制剂 ,电话:13900056807, E-mail:liruihai@lnutcm.edu.cn。
关键词:白鲜皮;金银花;百部;牡丹皮;绿原酸
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2008)06-附 18-02
　　白鲜皮洗剂具有清热泻火解毒 、止痒去屑的作用 ,是我
院的医院制剂 , 为治疗头痒头屑的临床有效方剂 , 为了有效
控制其质量 , 本实验对其进行了质量标准研究。用薄层色谱
法对白鲜皮 、金银花 、百部 、牡丹皮进行定性鉴别 , 斑点清晰 ,
可作为质量控制的定性鉴别指标 ,以高效液相色谱法测定金
银花中绿原酸含量 , 方法可靠 , 重复性强 ,可作为质量控制的
定量指标。
1.1　仪器与试药
仪器:ZF-2三用紫外分析仪(上海安亭电子仪器厂);安
捷伦(LC1100)液相色谱仪;安捷伦色谱工作站;KQ3200超
声波清洗器(江苏昆山)。
材料:硅胶 G, 硅胶 GF
254
(青岛海洋化工厂);绿原酸(批
号 110753-200212, 供含量测定用 , 纯度≥ 98%), 白鲜皮 、牡
丹皮 、金银花 、百部对照药材均由中国药品生物制品检定所提
供;实验所用药材经鉴定均为正品。乙腈为色谱纯, 液相所用
水为二次蒸馏水。其他所用试剂均为分析纯 ,水为蒸馏水。
2　薄层色谱鉴别
2.1　白鲜皮的 TLC鉴别　取本品 5 mL, 加 95%乙醇 100
mL,回流提取 30 min, 滤过 , 浓缩至干 , 再加水 20 mL溶解 ,
滤过 , 氯仿 20 mL萃取 , 回收氯仿层 , 滤过 , 浓缩 , 加 5 mL甲
醇溶解 , 作为供试品溶液。另取白鲜皮对照药材 1 g,同法制
成对照品溶液。再取按处方除去白鲜皮 ,按工艺和供试品制
备方法制备阴性样品。照薄层色谱法(中国药典 2005年版
一部附录 VIB)试验 , 分别吸取上述 3种溶液各 5μL, 分别点
于同一硅胶 G薄层板上 , 以石油醚(60 ～ 90 °C)-醋酸乙酯
(10∶6)为展开剂 , 展开 ,取出 , 晾干 , 用 10%硫酸乙醇显色 ,
110℃烘至斑点显色。在与对照品药材相应的位置上显相
同颜色的斑点 , 而阴性溶液无干扰 [ 1] 。
2.2　金银花的TLC鉴别　取本品 5mL, 加醋酸乙酯 20mL,
振摇提取 , 分取醋酸乙酯液 , 蒸干。 残渣加乙醇 2 mL使溶
解 , 作为供试品溶液。 另取金银花对照药材 1 g, 加水 20 mL
煮沸 ,滤过 ,取滤液同法制成对照药材溶液。再取按处方除去
金银花 ,按工艺和供试品制备方法制备阴性样品。照薄层色
谱法(中国药典 2005年版一部附录Ⅵ B)试验 ,分别吸取供试
品溶液 、对照品溶液各 10 μL与对照药材溶液 5μL, 分别点于
同一硅胶 G薄层板上, 以醋酸丁酯-甲酸-水(7∶2.5∶2.5)的上
层溶液为展开剂 , 展开 ,取出, 晾干 , 置紫外光灯 365 nm下检
视。结果供试品色谱中 ,在与对照药材色谱相应的位置上 , 显
相同颜色的斑点 ,阴性对照液无相应的斑点 [ 2] 。
2.3　牡丹皮的 TLC鉴别　取本品 5mL,加甲醇 40 mL,回流
提取 1h,提取液浓缩至 2 mL, 作为供试品溶液。另取牡丹
皮对照药材 1 g, 加甲醇 40 mL煮沸 , 滤过 , 取滤液同法制成
对照药材溶液。再取按处方除去牡丹皮 , 按工艺和供试品制
备方法制备阴性样品。 照薄层色谱法(中国药典 2005年版
一部附录 VIB)试验 ,吸取供试品溶液 、对照品溶液各 5μL与
对照药材溶液 5 μL, 分别点于同一硅胶 GF254薄层板(105℃
活化 10 min), 以氯仿-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-甲酸(20∶ 4
∶4∶5∶1)的上层溶液为展开剂 , 展开 , 取出 , 晾干 , 置紫外
光灯 254 nm下检视。结果供试品色谱中 , 在与对照药材色
谱相应的位置上 ,显相同颜色的斑点 ,阴性溶液无干扰 [ 3] 。
2.4　百部的 TLC鉴别 　取本品 5mL, 加盐酸-甲醇(1:100)
溶液 10 mL, 回流处理 20 min,滤过 , 滤液作为供试品溶液。
另取百部对照药材 1 g, 加水 20 mL煮沸 ,滤过 ,取滤液同法
制成对照药材溶液。再取按处方除去百部 , 按工艺和供试品
制备方法制备阴性样品。照薄层色谱法(中国药典 2005年
版一部附录 VIB)试验 ,分别吸取上述 3种溶液各 5μL, 分别
点于同一以含 1%氢氧化钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合
剂的硅胶 G薄层板上 , 以氯仿-甲醇(10:0.5)为展开剂 , 展
开 ,取出 , 晾干 ,喷以 0.5%茚三酮乙醇溶液 , 置 105 ℃烘至
斑点清晰 ,结果供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置
上 ,显相同的斑点。阴性溶液无干扰 [ 3] 。
3　含量测定
3　含量测定　色谱柱:用十八烷基键合硅胶为填充剂;乙
腈-0.4%磷酸水溶液(13:87)为流动相;检测波长为 327nm,
理论塔板数按绿原酸色谱峰计算应不低于 3 000。
3.2　方法学考察　
3.3　检测波长的选择　取绿原酸甲醇溶液于紫外分光光度
计上绘制紫外吸收光谱 , 波长范围 200 ～ 400 nm, 根据测定
结果 ,最大吸收波长为 327 nm。
3.4　供试品制备　取本品 0.5 mL, 精密称定 , 置具塞锥形
18附
2008年 6月
第 30卷　第 6期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
June2008
Vol.30　No.6
瓶中 , 加 50%甲醇 50 mL, 超声处理 30 min, 放冷 , 摇匀 , 滤
过 , 精密称取续滤液 5 mL, 置 25 mL棕色量瓶中 , 加 50%甲
醇至刻度 , 摇匀 ,即得。
3.5　阴性对照试验　取除去金银花以外的其它药材 ,按供
试品制备方法制成 , 依文中方法测定。结果阴性色谱图中与
绿原酸对照品相应保留时间附近无干扰 [ 4] ,见图 1 ～ 3。
图 1　绿原酸对照品 HPLC图谱
1.绿原酸
图 2　供试品 HPLC图谱
1.绿原酸
图 3　阴性液 HPLC图谱
3.6　线性范围考察　精密称取绿原酸对照品 0.016 7 mg/
mL,精密吸取 5.0, 7.5, 10.0, 12.5, 15.0 mL, 置 25 mL量瓶
中 , 加 50%乙醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀。分别精密吸取对
照品溶液各 10μL溶液 , 注入液相色谱器仪中 , 测定色谱峰
面积 , 测定结果以进样量为横坐标 , 色谱峰面积为纵坐标 , 绘
制标准曲线 , 经线性回归 ,回归方程为:Y=10 494 X+4.4 r
=0.999 8。 由测定结果提示 , 绿原酸进样量在 0.033 4 ～
0.100 2 μL范围内线性关系良好。
3.7　稳定性试验考察　精密吸取本品 0.5 mL, 按 3.4项下
制备供试液 , 精密吸取同一供试液 , 按 0, 2, 4, 6, 8 h时间间
隔 , 分别进样分析 ,测定色谱峰面积 , RSD为 1.18%, 测定结
果提示:绿原酸在 8 h内测定基本稳定 。
3.8　精密度试验考察　精密吸取本品 0.5 mL, 按 3.4项下
制备供试液 , 精密吸取同一供试液 ,分别精密吸取 10μL, 连
续进样 5次 ,按前述色谱条件进样分析 , 测定色谱峰面积 ,结
果 RSD为 1.35%。
3.9　重复性试验考察　取同一批号样品 , 依法独立测定 5
次 ,结果 RSD为 1.29%, 表明本方法重现性良好。
3.10　回收率试验考察　取 5份样品各精密吸取 0.5 mL
(批号:20061116,含量 1.774 2 mg/mL)5份 , 分别精密加入
绿原酸对照品 0.9mg,按 3.1项和 3.4项下测定方法操作 ,
测定结果见表 1。
表 1　 回收率试验测定结果
取样量
/mL
样品含
量 /mg
对照品加
入量 /mg
实测总
量 /mg
回收率
/%
平均回
收率%
RSD
/%
0.5 0.887 1 0.898 2 1.778 0 99.2
0.5 0.887 1 0.915 6 1.811 6 100.9
0.5 0.887 1 0.912 4 1.820 0 102.2 100.6 1.51
0.5 0.887 1 0.895 4 1.711 7 98.8
0.5 0.887 1 0.919 6 1.822 1 101.7
3.11　样品含量测定结果　经采用 3.1项和 3.4项下方法 ,
测定 3批供试品中绿原酸含量 ,测定结果见表 2。
表 2　 3批样品含量测定结果
批号 测定 1 /mg/mL 测定 2/mg/mL 平均含量 /mg/mL
20061116 1.774 1 1.774 2 1.774 2
20061117 1.815 4 1.815 5 1.815 4
20061118 1.889 3 1.889 2 1.889 3
4　讨论
4.1　本品为洗剂 , 且是浓缩液 ,供临床患者稀释后使用。在
鉴别中加入溶剂 ,如 95%乙醇 、甲醇等会出现不同程度的沉
淀 ,为了提高提取的效率 ,故回流处理。
4.2　本实验含量测定中还对提取方法进行了考察 , 分别将
样品加 50%甲醇 50 mL, 50%乙醇 50 mL, 各超声 30 min,结
果加 50%甲醇含量相对高 ,且杂质相对较少;再取 3份样品
分别加 50%甲醇 50 mL, 分别超声 20, 30, 40 min提取 , 结果
表明:30 min和 40min测得绿原酸含量较高 ,由于二者提取
绿原酸含量相近 ,故选择 30min提取。
5　结论
5.1　本实验对白鲜皮 、金银花 、百部 、牡丹皮进行了 TLC鉴
别 ,方法可靠 , 重复性强 ,可作为质控指标。
5.2　由于方中君药成分不甚明确 , 故选用绿原酸作为定量
检测指标。经方法学考察 , 方法的重复性 、稳定性 、精密度 、
回收率试验均符合有关规定。因此可选绿原酸作为定量检
测指标。
参考文献:
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19附
2008年 6月
第 30卷　第 6期
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