免费文献传递   相关文献

白鲜皮水提物对小鼠迟发型变态反应的影响



全 文 :书·论著·
白鲜皮水提物对小鼠迟发型变态反应的影响
丛欢 刘吉成 崔红霞 王晓丽 李文静 简白羽 郭丽娜
【摘要】 目的 观察白鲜皮水提物对小鼠迟发型变态反应的影响。方法 取体重为 18~22 g的昆明
小鼠 60只,雌雄各半,按体重随机分 6 组,即空白对照组、模型对照组、白鲜皮水提物高(11.0 g /kg)、中
(5.5 g /kg)、低(2.8 g /kg)剂量组和阳性对照(地塞米松片 2.22 mg /kg)组,每组 10只,各给药组分别给予相
应浓度的相应药物,空白与模型对照组给予 0.015 ml /g 80%吐温 20-生理盐水溶液,每日 1次,连续给药 3 d
后,除空白对照外,每只鼠腹部用 5%DNCB 溶液均匀涂抹进行致敏,第 4 d 强化一次,于给药后第 9 d,将
5%DNCB溶液均匀涂抹于小鼠右耳进行攻击,空白对照组同样涂耳但未致敏,攻击后 24 h,测定耳肿胀度
和小鼠的脾脏指数和胸腺指数。结果 以耳肿胀度为指标,与模型组相比较,白鲜皮高剂量组、阳性对照
组具有极显著性差异(P<0.01),白鲜皮中剂量组具有显著差异(P<0.05),白鲜皮低剂量组则无显著性差
异;以胸腺指数、脾脏指数为指标,与模型组相比较,白鲜皮高剂量组、白鲜皮中剂量组、阳性对照组具有极
显著性差异(P<0.01),白鲜皮低剂量组胸腺指数较模型组具有显著性差异(P<0.05)。结论 白鲜皮水提
物可抑制 DNCB诱导的小鼠迟发型变态反应(DTH)及抑制小鼠的特异性细胞免疫功能的作用。
【关键词】 白鲜皮; 迟发型变态反应
Effect of cortex dictamni on delayed type hypersensitivity in mice Cong Huan,et al. Qiqihar Medical
University,Qiqihar 161006,China
【Abstract】 Objective To observe the effect of the cortex dictamni on the delayed type hypersensitivity in
mice. Methods 60 Kunming mice weighing 18~ 22g,half female and half male,were randomly and averagely
divided into 6 groups according to weight:blank control group,model control group,the cortex dictamni(11.0g /
kg),in (5.5g / kg)and low (2.8g / kg)dose group and positive control group (dexamethasone tablets 2.22mg /
kg) ,10 rats in each group,The corresponding concentrations of each drug group were given respectively,the
blank and the model control group were given 0.015ml /g 2% Twain 80% saline solution,1 times a day,after 3
days of continuous administration,in addition to the blank control,each mouse abdomen with 5%DNCB solution
was evenly coated for sensitized,fourth days to strengthen once,in ninth days,the 5%DNCB solution evenly
attack on mouse ear,the blank control group also painted ear but not sensitized,after the attack of 24h,
determination of ear swelling degree and the index thymus and spleen. Results In ear swelling as an indicator,
comparing cortex dictamni,high dose group and model group,positive control group with a very significant
difference (P<0.01) ,cortex dictamni dose group were significantly different (P<0.05) ,cortex dictamni leather
low-dose group had no significant difference;thymus and spleen indexes as an indicator,as compared with the
model group cortex dictamni leather high-dose group,cortex dictamni dose group,positive control group with a
very significant difference (P<0.01) ,cortex dictamni on the low-dose group compared with the model group,the
thymus index had significant difference (P<0.05).Conclusions The cortex dictamni can inhibit DNCB induced
murine delayed hypersensitivity (DTH)and has the effect of inhibiting the specific cellular immune function of
mice.
【Key words】 Cortex Dictamni; Delayed type hypersensitivity
白鲜皮为芸香科多年生草本植物白鲜和狭叶白
鲜的根皮。主产于辽宁、河北、四川、江苏等地。春、
秋两季采挖根部,除去泥沙及粗皮,剥取根皮,切片,
干燥。作为一种常见的皮肤科用药,功能主治风热
湿毒所致的风疹、湿疹、疥癣、黄疸、湿热痹等症[1],
尤其是治疗湿疹中,白鲜皮多以君药出现,这与其效
清热燥湿,祛风解毒有关,至于其深入作用机制,至
今仍无定论,多认为其具有多种机制,主要机制便是
基金项目:黑龙江省自然科学基金(D201207)
作者单位:161006 黑龙江,齐齐哈尔医学院
通信作者:郭丽娜,Email:723269830@ qq.com
抑制迟发型变态反应[2],本文探讨白鲜皮是否具有
抑制 DNCB诱导小鼠迟发型变态反应(DTH)及抑制
小鼠的特异性细胞免疫功能的作用。
材料与方法
1.实验动物:18~22 g昆明种小鼠(雌雄各半)60
只,齐齐哈尔医学院动物实验中心提供。
2.试药试剂:地塞米松片,丙酮,橄榄油,2,4-二
硝基氯苯 DNCB,白鲜皮水提物(齐齐哈尔医学院中
药教研室提供)。
3.实验方法:取 60只 18~22 g 昆明小鼠,雌雄各
半,随机分为 6 组,即白鲜皮水提物高剂量组、白鲜
·1473·齐齐哈尔医学院学报 2016年第 37卷第 30期 Journal of Qiqihar University of Medicine,2016,Vol.37,No.30
皮水提物中剂量组、白鲜皮水提物低剂量组、阳性对
照组、模型组、空白组(80%吐温 20-生理盐水溶液)。
制备白鲜皮的 80%吐温 20-生理盐水混悬液,给
药剂量为:阳性对照组地塞米松 2.22 mg /kg(根据人
与小鼠的简单换算公式),给药组 11.0 g /kg、5.5 g /
kg、2.8 g /kg,模型组、空白组 0.015 ml /g 80%吐温 20-
生理盐水溶液,灌胃给药,按剂量每组每日一次,给
药 3 d后,剪去小鼠腹部绒毛,利用 5%DNCB 橄榄油
丙酮溶液(橄榄油 ∶ 丙酮= 1 ∶ 1)涂于小鼠腹部裸露
皮肤处大剂量致敏,第 4 天强化一次,于给药后第
9 d,用同上抗原(5%DNCB 橄榄油丙酮溶液)涂于每
只小鼠右耳两面进行攻击,于左耳两面涂于橄榄油
丙酮溶液进行对照比较,24 h 后,剪下小鼠左右耳
壳,用直径 6 mm打孔器打孔,称重,左右耳之差即为
肿胀度,摘取胸腺、脾脏,记录胸腺指数、脾指数。
胸腺指数=胸腺重量(mg)/体重(g)×10
脾指数=脾脏重量(mg)/体重(g)×10
耳肿胀度=右耳重量(mg)-左耳重量(mg)
4.统计学方法:采用 SPSS 17.0进行统计分析,实
验数据采用均数±标准差(珋x±s)表示实验结果,单因
素方差分析,组间比较采用 LDS 检验,P<0.05 为差
异显著,P<0.01为差异极为显著。
结 果
结合表 1可知,与空白组比较,模型组耳肿胀度
呈显著性差异,说明模型组造模成功。另以耳肿胀
度为指标,与模型组相比较,白鲜皮高剂量组、阳性
对照组具有极显著性差异(P<0.01),白鲜皮中剂量
组具有显著差异(P<0.05),白鲜皮低剂量组则无显
著性差异,说明白鲜皮高、中剂量组可以在体内对抗
昆明小鼠的Ⅳ型变态反应。
结合表 1 可知,以胸腺指数、脾脏指数为指标,
与模型组相比较,白鲜皮高剂量组、白鲜皮中剂量
组、阳性对照组具有极显著性差异(P<0.01),白鲜皮
低剂量组胸腺指数较模型组具有显著性差异(P <
0.05),说明白鲜皮可能通过抑制免疫器官的功能起
到对抗迟发型变态反应的作用。阳性对照组脾脏指
数、胸腺指数较模型组和空白组均有显著降低,说明
了阳性药物地塞米松磷酸钠注射液显著影响脾脏、
胸腺两个免疫器官,在对抗迟发型变态反应的同时,
对免疫器官呈现一定的抑制作用。
讨 论
迟发型变态反应使得模型组小鼠胸腺指数增
加,胸腺中为初始 T 淋巴细胞,致敏过程又发生在外
表 1 白鲜皮各剂量组对Ⅳ型变态反应昆明小鼠免疫器官
及耳肿胀度影响(珋x±s)
组别 n 脾脏指数 胸腺指数 耳肿胀(mg)
白鲜皮高剂量组 10 22.4±4.0** 18.4±1.5** 3.06±0.45**
白鲜皮中剂量组 10 26.4±4.0** 22.6±2.7** 5.64±0.17*
白鲜皮低剂量组 10 29.1±4.0 25.8±9.9* 5.89±0.28
阳性对照组 10 7.1±2.1** 4.6±2.9** 2.70±0.56**
模型组 10 40.9±3.1△△ 33.3±4.7△△ 6.21±0.66△△
空白组 10 35.1±3.6 30.8±7.6 1.89±0.20
注:与空白组比较△△P<0.01;与模型组比较**P<0.01,* P<0.05
周免疫器官,所以胸腺中 T 淋巴细胞不参加变态反
应过程,胸腺的增重也与变应原的刺激无直接关系。
T淋巴细胞在胸腺中发育过程分为双阴性、双阳性和
单阳性三个阶段,实验研究表明在迟发型变态反应
过程中小鼠胸腺 CD4+ CD8+双阳性细胞较空白组显
著升高[3],正常情况下大部分双阳性细胞不能与抗
原肽-MHCⅠ /Ⅱ有效结合或结合亲和力过高而在胸
腺皮质中凋亡,但在迟发型变态反应过程中外周免
疫器官内效应 T淋巴细胞产生大量 IL-2,IL-2反作用
于中枢免疫器官胸腺内的早期 T 淋巴细胞,诱导早
期 T淋巴细胞向 CD8+单阳性细胞转化[4],使凋亡的
双阳性细胞减少,进而使胸腺增重,另 CD4+ CD8+双
阳性细胞的增加可能与迟发型变态反应过程中的
IL-7分泌有关,此过程尚待研究。
迟发型变态反应对脾脏也具有一定的影响,模
型组脾脏指数较空白组显著增加,经过皮肤内的变
应原呈递细胞(朗格汉斯细胞)呈递后[5],大量初始
T淋巴细胞同时识别特异性变应原及免疫相关分子
发生活化效应,此时效应 T 淋巴细胞在朗格汉斯细
胞和角质形成细胞分泌的 IL-1 的作用下,产生多种
淋巴因子,包括 IL-2,刺激淋巴细胞在几天内大量增
殖,增殖的细胞主要是 CD4+T细胞,此过程多在外周
免疫器官中发生,所以 T 淋巴细胞的大量增殖会造
成相应的脾脏重量增加,使得脾脏指数变大。
参 考 文 献
[1] 刘阳,关华锋,罗昌铭.白鲜皮汤治疗湿热型疮疡[J].河南中医
学院学报,2003,18:108.
[2] 王蓉,徐强,徐丽华.白鲜皮的免疫药理学研究Ⅰ.对细胞免疫和
体液免疫的影响[J].中国药科大学学报,1992,23(4):234-238.
[3] 郑咏梅,魏伟,戴敏,等.木瓜总苷抑制小鼠接触性超敏反应及对
其胸腺 T 淋巴细胞亚型的调节作用[J].中国药理学通报,
2004,20(9):1016-1017.
[4] 席云平,王华梁.T细胞在胸腺中的阳性选择及其意义[J].国外
医学免疫学分册,2007,2:79-81.
[5] Chang J,Xuan LJ,Xu YM,et al. Cytotoxic terpenoid and immuno
suppressive phenolic glycosides from the root bark of Dictamnus
dasycarpus[J]. Planta Med,2002,68(5):425-429.
(收稿日期:2016-08-20)
(本文编辑:赵丹)
·2473· 齐齐哈尔医学院学报 2016年第 37卷第 30期 Journal of Qiqihar University of Medicine,2016,Vol.37,No.30