免费文献传递   相关文献

白鲜皮的抑菌作用



全 文 :起 , 但此分型尚处于理论阶段 , 需要后期临床研究加以验证 ,
从而使各证型的心身康复更具针对性。
参考文献
[ 1]  潘洪峰 ,叶沐镕.越鞠丸治疗心身疾病的机理浅探.贵阳中医
学院学报, 2006, 28(2):28-29.
[ 2]  施学丽 ,张丽萍.论脾胃与心身疾病的关系.辽宁中医药大学
学报 , 2007, 9(2):42-43.
[ 3]  倪红梅 ,方盛泉 ,何裕民 ,等.试析亚健康状态与心身病症的相
关性.上海中医药大学学报 , 2008, 22(1):13-15.
[ 4]  刘岩 ,李政平 ,赵殿铭.心身疾病与中医诊治.北京中医 , 2003,
22(4):23-25.
[ 5]  赵志付.浅析心身疾病的刚柔辨证.中医杂志 , 2006, 47(2):
146-147.
[ 6]  邵金阶.略论中医对心身疾病的认识.湖北中医杂志 , 2002, 24
(2):9-10.
[ 7]  熊抗美,赵志付 ,王彩凤.中医心身并治法在心身疾病康复中
的应用.中国临床康复 , 2005, 9(8):184-185.
白鲜皮的抑菌作用
付永霞
  作者单位:101200 平谷区中医院药剂科
  白鲜皮为芸香科白鲜属植物白鲜干燥根皮 ,具有清热燥
湿 、祛风解毒 、抗菌抗癌的作用 ,通过正交实验优选白鲜皮的
提取工艺 , 以白鲜碱为指标 , 研究白鲜碱含量与抑菌效果的
关系 , 通过该实验 ,证明了白鲜皮的抑菌作用。
本实验的目的是研究中药白鲜皮的有效成分对细菌 , 真
菌的杀菌 、抑菌作用。我国在中药抑菌实验上的研究已经取
得了一定的成功 [ 1] , 推动了中药事业的发展 , 具有重要的理
论和临床应用价值。
白鲜皮概述:白鲜皮为芸香科白鲜属植物白鲜干燥根
皮。具有清热燥湿 、祛风解毒 、抗菌抗癌的作用。 临床上用
于治疗湿热疮毒 、黄水淋漓 、湿疹等 , 并对心血管及血液病有
一定的疗效 [ 2-3]。
1 化学成分
1.1 生物碱类化合物 白鲜皮的根中含有白鲜碱 ,异白鲜
碱 , 白鲜皮碱 ,茵芋碱 , γ-崖椒碱 , 前茵芋碱 , 异斑佛林草碱 ,
葫芦巴碱 , 胆碱 ,去甲茵芋碱 [ 7] 。
1.2 柠檬苦素类化合物 白鲜皮的根中含有梣酮 ,异白蜡
树酮 , 6β -羟基白蜡树酮 ,柠檬苦素 ,柠檬苦素地噢酚 , 黄柏酮
酸 , 黄柏内酯 ,白鲜脑交酯 , 6-甲氧基异白鲜碱 [ 6] 。
1.3 甾体类化合物 白鲜皮的根中含有孕烯醇酮 ,如忒文 ,
β 谷甾醇 , 菜油甾醇等。
1.4 香豆素和黄酮类化合物 白鲜皮的地上部分含有补骨
酯内酯 , 花椒毒素 , 东莨菪素 , 槲皮素 , 异槲皮素 , 木犀草素 ,
3 -O-甲基花旗松素 , 5-7-4 -三羟基-3 -甲氧基异黄酮 , 汉黄
芩素 [ 8] 。
1.5 倍半萜和倍半萜甙类化合物 白鲜皮的根中含有 β-榄
香醇 , 白鲜甙 A-N, 胸腺嘧啶核苷 ,白鲜甙 A[ 9] 。
1.6 多糖 白鲜皮中含有粗多糖 , 采用硫酸-苯酚比色法测
定白鲜皮粗多糖中总糖含量。白鲜皮粗多糖收率为 9.7%,
总糖含量为 79.20% [ 10] 。
2 药理作用研究概况
2.1 抗炎作用 白鲜皮水提物对半抗原 2, 4, 6-三硝基氯苯
所致的接触性皮炎及颗粒性抗原羊红细胞所致的足拓反应 ,
在抗原攻击前给药有明显的抑制作用 ,同时白鲜皮还明显地
抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀及蛋清所致的小鼠足跖炎症
反应。此外 , 其对小鼠抗羊红细胞抗体的产生有明显的抑制
作用 [ 11-12] 。
2.2 抗肿瘤作用 散结片(主要成分为白鲜皮 、白附子)对
肝癌细胞体内外均有显著杀伤作用 [ 13] 。
2.3 抗菌作用 白鲜皮的水浸剂及乙醇提取物均有抗菌
作用 [ 14-15] 。
2.4 抗生育作用 白鲜皮对家兔及豚鼠的离体子宫有兴奋
作用 , 使子宫平滑肌强力收缩。白鲜皮甲醇提取物对交配后
大鼠口服给药能明显降低生育率。从其甲醇提取物中分离
的活性成分梣酮 , 具非雌激素样抗生育活性 [ 16]。
2.5 杀虫作用 白鲜皮甲醇提取物具有较高的活性 , 石油
醚萃取物及苯萃取物均对三龄粘虫有拒食和毒杀活性。其
活性成分为木岑酮 [ 17] 。
3 实验与结果
材料:白鲜皮 、乙醇;仪器:恒温水浴锅 、旋转蒸发仪 、紫
外分光光度仪 、无菌操作台 、摇床 、恒温培养箱。
4 药液的制备
本实验以白鲜碱为指标 , 利用正交实验法优选白鲜皮的
提取工艺。影响白鲜皮有效成分提取率的因素有乙醇用量 、
回流时间 、乙醇浓度。根据初步试验结果拟定三因素四水平
正交试验进行提取工艺考察。见表 1。
表 1 因素水平排列因素
水平 A乙醇浓度(%) B倍数 C回流时间(h)
1 95 5 1
2 85 6 2
3 75 7 3
  取药材 50g置于干燥的圆底烧瓶中 ,按表 2正交试验表
进行操作 , 回流 2次 , 趁热过滤 , 合并两次滤液 , 提取液最后
都挥去乙醇 , 浓缩后减压干燥 .
表 2 L9(34)正交试验表
试验号 乙醇浓度 固液比 回流时间(h) 出膏量(g)
1 1 1 1 2.249
2 1 2 2 2.568
3 1 3 3 4.346
4 2 1 3 3.908
5 2 2 1 3.754
6 3 3 2 5.934
7 3 1 2 5.341
8 3 2 3 6.575
9 3 3 1 4.812
5 白鲜碱含量的测定
5.1 待测样品含量的测定 精密称取 9个待测药品 0.1 g,
用 95%乙醇溶解 , 各加 1滴吐温-80, 超声 ,定容 25 ml容量瓶
内 , 使其充分溶解。 过滤取续滤液 0.25 ml, 定容 10 ml容量
·238· 中国现代药物应用 2010年 3月第 4卷第 6期 ChinJModDrugAppl, Mar2010, Vol.4, No.6DOI :10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2010.06.031
瓶内 , 测吸光度。 95%乙醇做空白溶液。见表 2。
表 3 样品的含量
序号 待测药品(g)吸光度 浓度(ug/ml) 含量(%)
1 0.1004 0.870 2.6415 2.6310
2 0.1065 0.677 1.9973 1.8754
3 0.1024 0.275 0.6555 0.6402
4 0.1027 0.355 0.9226 0.9009
5 0.1026 0.418 1.1328 1.1041
6 0.1018 0.498 1.3999 1.3751
7 0.1015 0.305 0.7557 0.7445
8 0.1056 0.392 1.0461 0.9906
9 0.1001 0.401 1.0761 0.9955
  注:以 1号样品为例 ,含量 =2.6310%
表 4 稳定性试验结果
实验序号 时间(h) 含量(mg/ml) S RSD(%)
1 2 0.7550
2 4 0.7825
3 6 0.7991 0.01915 2.47
4 8 0.7757
5 10 0.7490
6 24 0.7623
  通过实验说明 , 该样品溶液比较稳定。
5.2 样品稳定性试验 将空白对照组样品供试液在间隔 2
h、4 h、6 h、10 h、 24 h的时间用同一测定方法所得到的测定
结果 , 分光光度法是对被测液的吸光度 A值进行考察。见
表 4。
6 抑菌实验
6.1 菌株 大肠杆菌 、金黄色葡萄球菌 、白色念珠菌 、黑
曲霉
6.2 供试药物 中药白鲜皮不同条件的醇提物。
6.3 培养 将大肠杆菌 、金黄色葡萄球菌 、白色念珠菌活化
好后 , 用接种针挑取单个菌落 ,接种到新鲜的液体培养基中 ,
摇床培养至混浊 , 用血球计数法数菌落。
黑曲霉:将液体培养基倒入长有黑曲霉的试管内 , 摇匀 , 把上
面的孢子涮下来 , 倒入灭过菌的锥形瓶内 , 备用。
6.4 菌液的稀释 以大肠杆菌为例:取无菌平皿 6套 , 分别
用记号笔标明 10-4 、10-5各 3套 , 另取 5支盛有 900ul的液体
培养基离心管 , 依次标是 10-1、10-2 、10-3、10-4 、10-5。
6.5 抑菌圈的测定 ①纸片的制备:用打孔机打成直径约
为 6 mm的纸片 ,每张纸片可吸水 10ul。纸片经高压灭菌 ,烘
干备用;②抑菌圈:用无菌镊子摆放纸片 , 采用逐片滴加的方
法 , 滴加不同浓度的纸片 ,中间放空白对照 , 平放于实验台上
1 ~ 2 h,使药液渗入培养基表层 , 然后倒置 37℃恒温培养箱
中培养 24h,观察结果 , 测量抑菌圈直径 , 重复 3次。见表 5。
表 5 药液对大肠杆菌 、金黄色葡萄球菌 、白色念珠菌 、黑曲霉产生的抑菌圈(mm)
菌种 稀释倍数 1 2 3 4 5 6 7 8 9
大肠杆菌 10-4 5.0 7.1 6.2 7.2 8.3 6.2 10.2 10.0 7.5
10-5 5.2 6.8 7.3 10.0 6.5 6.0 7.2 7.5 5.5
金黄色葡萄球菌 10-4 8.3 8.0 7.1 6.3 9.2 6.0 10.0 / 8.2
10-5 7.2 7.3 6.0 6.7 7.3 5.7 6.8 / 7.4
白色念珠菌 10-4 -
10-5
黑曲霉 10-4 -
10-5
  通过抑菌实验发现 , 白鲜皮提取物对大肠杆菌和金黄色
葡萄球菌有抑菌效果 , 对白色念珠菌和黑曲霉无明显抑菌效
果。 7号白鲜皮提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌
效果比较好。
7 结论
白鲜皮 7号提取物(乙醇浓度 75%、固液比 1:5、回流时
间 2 h)对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有较好的抑制作用 ,其
白鲜碱含量是 0.7835%。
参考文献
[ 1]  王振岭.中药抑菌实验和应用研究获成果.中国中医药报 ,
2007, 4, 25.
[ 2]  黄泰康.常用中草药成分与药理手册(上册).北京:中国医药
科技出版社 , 1994:62.
[ 3]  宝鸡市卫生局.太白山本草志.陕西科学技术出版社 ,
1993:542.
[ 4]  朱亚民.内蒙古植物药志(三).内蒙古人民出版社 , 2000, 12:
15-17.
[ 5]  杜程芳 ,杨欣欣 ,屠鹏飞.白鲜皮的化学成分研究.中国中药杂
志 , 2005, 30(21):1663-1666.
[ 6]  胡昌奇 ,韩建伟 ,赵建纲 ,等.狭叶白鲜皮中的柠檬苦素类成
分.植物学 , 1989, 31(6):453-458.
[ 7]  常新全,丁丽霞.中药活性成分分析手册(上册).北京:北京学
苑出版社 , 2002, 6.
[ 8]  王红萍.白鲜皮的化学成分研究(2).中国现代应用药学杂志 ,
2006, 23(3):200-201.
[ 9]  昌军.四种中草药水溶性成分和生物活性的研究.中国科学院
上海药物研究所博士论文 , 2002, 4.
[ 10]  李淑惠 ,纪耀华.白鲜皮粗多糖提取与总糖含量测定.时珍国
医国药 , 2000, 11(1):14.
[ 11]  谭家莉 ,谢艳华 ,匡威.白鲜皮抗炎作用的实验研究.中国新
医药 , 2004, 3(8):35-36.
[ 12]  王蓉, 徐强 ,徐丽华.白鲜皮的免疫药理研究.中国药科大学
学报 , 1992, 23(4):234.
[ 13]  刘今方 ,脱朝伟.中药散结片抗肿瘤作用的实验研究.中西医
结合杂志 , 1990;10(7):429-432.
[ 14]  康胜利 ,王素贤 ,朱廷儒.中药白鲜皮活性成分的研究.沈阳
药学院学报 , 1983, 18(6):11.
[ 15]  曹仁烈 ,等.中药水浸剂在试管内抗皮肤真菌的观察.中华皮
肤科杂志 , 1957, 5(4):286.
[ 16]  江苏新医学院.中药大词典上册.上海:上海科学技术出版
社 , 1998:737-738.
[ 17]  卫粉艳 ,原春兰.白鲜皮杀虫活性成分的分离.
·239·中国现代药物应用 2010年 3月第 4卷第 6期 ChinJModDrugAppl, Mar2010, Vol.4, No.6