全 文 ：长发育 、血液学 、生化 、脏体比及组织病理学有明显
不良影响 。说明受试物 FTAE 长期食用对动物的
生长发育 、造血功能 、肝肾功能均无损害作用 。
其功能学研究及其确切机制尚需进一步探讨 。
参考文献:
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[收稿日期] 2008-12-16
[ 基金项目] 河南科技大学基金项目(编号:13520037);河南省洛阳市“十一五”计划基金资助项目(编号:0602046A-14)　[ 作者简介] 王新胜,
男 ,硕士 ,讲师 ,电话:13703490061 , E-mail:wx s501@gmai l.com
伏牛山区野葛与粉葛中葛根素和大豆苷元含量比较
王新胜1 ,吴艳芳2 ,张延萍1 ,牛睿琪1 　(1.河南科技大学化工与制药学院 ,河南 洛阳 471003;2.新乡医学院药学院 ,河南
新乡 453003)
[ 摘要] 　目的:比较研究伏牛山区野葛与粉葛中葛根素和大豆苷元的含量。方法:采用超声提取法提取野葛与粉葛中的葛根
素和大豆苷元 ,以 HPLC 法同时测定和比较分析葛根素和大豆苷元的含量。结果:野葛与粉葛中葛根素和大豆苷元含量分别
为4.0%, 0.035%, 1.6%, 0.038%。结论:野葛与粉葛中葛根素含量差别较大 , 大豆苷元含量相当 ,野葛与粉葛不能同等应用。
[ 关键词] 　野葛;粉葛;葛根素;大豆苷元
[中图分类号] R927.2　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2010)01-0005-03
Comparison of the puerarin and daidzein content of Radix Puerariae lobatae andRadix Puerar-
iae thomsonii
WANG Xin-sheng1 , WU Yan-fang2 , ZHANG Yan-ping 1 , NIU Rui-qi1(1.Chemical & Pharmaceutical Co llege ,
Henan University of Science and Technology , H enan Luoyang 471003 , China;2.Pharmaceutical College , Xinxiang Medical
Co llege , Henan Xinxiang 453003 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To compare the content of puer arin and daidze from Radi x Puerariae lobatae and Rad ix Puerariae
thomsonii.METHODS　H PLC me thod w as used to de te rmine and ana ly se the content o f pue rarin and daidzein which w ere ex-
tracted by ultr asonic-ext raction.RESULTS　The contents of puer arin and daidzein of them w ere 4.0%、1.6%、0.035% and
0.038% re spectively.CONCLUSION　The differ ence in content of puera rin f rom Radi x Puerarine lobarate and Radi x Puerar-
iae thomsonii was appa rent , the content of the daidzein in the tw o roo ts w as co rresponding.The use o f R adi x Puerariae thom-
sonii should be diffe rent.
KEY WORDS:Radi x P uerariae lobatae;Radi x Puerariae thomsonii;puer arin;daidze
　　葛根为我国常用药材 ,为豆科植物野葛[ Puer-
aria lobata (Willd.)Ohw i]或粉葛(甘葛藤)(Puer-
aria thomsoni i Behth.)的干燥根[ 1] 。现代研究证
实 ,葛根中的主要有效成分为葛根素 、大豆苷 、大豆
苷元等异黄酮类化合物 ,具有抗炎解热 、扩张冠状动
脉血管 、降低血脂血压 、解酒及抗肿瘤等方面的功
效。河南省葛根年产量在 498万吨以上[ 2] 。为进一
步开发和利用该地区葛根的药用价值 ,我们对野葛
和粉葛中葛根素和大豆苷元含量进行了测定和比
较 ,现报道如下。
1　材料
600-2487型高效液相色谱仪(美国 Waters
·5·中国医院药学杂志 2010年第 30卷第 1期 Chin H osp Pharm J , 2010 Jan , Vol 30 , No.01
公司);葛根素对照品(批号 725-200108)、大豆苷
元(批号 200101)购自中国药品生物制品检定所;
葛根药材采自伏牛山区栾川县境内 , 经新乡医学
院药学院药用与生药学教研室鉴定为野葛和粉葛
的根;甲醇为色谱纯;水为注射用水;其他试剂为
分析纯 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件 　色谱柱:SunFireC18(150 mm ×
4.6 mm , 5μm);流动相:水-甲醇梯度洗脱 ,梯度洗
脱条件见表 1;检测波长:250 nm;流速:1.0 mL·
min
-1 ;柱温:35℃。
表 1　梯度洗脱条件
Tab 1　Gradient elution conditions
t/min 甲醇/ % 水/ %
25 20 80
55 65 35
60 20 80
2.2　标准曲线的绘制及其线性范围的考察　精密
称定葛根素3.5 mg 及大豆苷元3.3 mg 于 10 mL 量
瓶中 ,用甲醇溶解并定容(为对照品溶液)。分别吸
取上述对照品溶液 2 ,4 ,6 , 8 , 10 μL 进样 ,按上述色
谱条件注入色谱仪 ,以峰面积积分值对对照品进样
量进行线性分析得回归方程 。葛根素:A葛 =3E +
06m-108 181 , r=0.999 8 ,线性范围0.7 ～ 3.5 μg 。
大豆苷元:A大 =5E+06m+150 200 , r=0.999 4 ,线
性范围0.66 ～ 3.3 μg 。
2.3　精密度试验　精密吸取对照品溶液 10 μL ,重
复进样 6次 ,测峰面积积分值 ,分别算出葛根素及大
豆苷元的峰面积积分值的 RSD 分别为 1.6%,
1.9%。
2.4　稳定性试验　精密吸取葛根素及大豆苷元对
照品混合液 10 μL ,分别在 0 , 1 ,4 ,6 ,8 h 进行测定 ,
结果峰面积积分值的 RSD 分别为 1.9%, 2.2%,表
明 8 h内葛根素和大豆苷元稳定性良好。
2.5　重复性试验　对同一批样品(野葛)称取 5 份
测定 ,测得葛根素及大豆苷元峰面积积分值的 RSD
分别为1.4%,0.9%(n=5)。
2.6　回收率试验　利用加样回收法 ,精密称取已测
定含量的干燥野葛粉末0.4 g 和粉葛粉末0.3 g 各 9
份 ,分为低 、中 、高 3组 ,分别加入葛根素 、大豆苷元
对照品 ,按照“2.7”项下方法操作并测定 ,计算回收
率。结果见表 2。同法测定粉葛 ,葛根素平均回收
率99.8%, RSD 为 1.05%, 大豆苷元平均回收率
98.7%, RSD为1.12%。
2.7　供试品溶液的制备　精密称取野葛和粉葛各
0.4 g于 50mL量瓶中 , 加入 3 0%甲醇定容至 5 0
表 2　加样回收率试验结果(野葛)
Tab 2　Result of recovery test(P ueraria lobata)
检测指标 样品含量/m g
加入量
/m g
测得量
/mg
回收率
/ %
均值
/ %
RSD
/ %
16.008 0 0.175 0 16.179 7 98.1
16.040 0 0.175 0 16.209 3 96.7
16.044 0 0.175 0 16.218 3 99.6
16.092 0 0.262 5 16.345 6 96.6
葛根素 16.212 0 0.262 5 16.471 1 98.7 98.5 1.52
16.056 0 0.262 5 16.319 6 100.4
16.112 0 0.350 0 16.452 4 97.3
16.104 0 0.350 0 16.456 3 100.7
16.040 0 0.350 0 16.384 3 98.4
0.105 4 0.165 0 0.263 6 95.9
0.105 1 0.165 0 0.268 9 99.2
0.105 9 0.165 0 0.272 5 101.0
0.106 2 0.247 5 0.342 5 95.5
大豆苷元 0.107 3 0.247 5 0.352 6 99.1 98.4 1.87
0.106 5 0.247 5 0.354 9 100.4
0.106 4 0.330 0 0.429 8 98.0
0.107 1 0.330 0 0.431 2 98.2
0.106 2 0.330 0 0.431 5 98.6
mL。超声提取条件为温度 40 ℃,频率 70 Hz ,时间
30 min 。超声提取后静置 ,补足散失甲醇 ,取上清液
过0.45 μm 微孔滤膜滤过 ,滤液作为供试品溶液。
2.8　葛根素和大豆苷元的含量测定　分别吸取野
葛和粉葛供试品溶液 20 μL 注入色谱仪 ,测定样品
中葛根素和大豆苷元的峰面积积分值 ,标准曲线法
计算其含量 ,结果野葛的葛根素和大豆苷元含量分
别为4.0%,0.035%;粉葛的葛根素及大豆苷元分别
为1.6%,0.038%。葛根素和大豆苷元对照品及葛
根样品的 HPLC色谱图见图 1。
图 1　葛根素 、大豆苷元对照品及葛根样品高效液相图谱
A.对照品;B.样品;1-葛根素;2-大豆苷元
Fig 1　The HPLC ch rom atography of pu erarin and daidze f rom the
reference standard and sam ple.
A.reference standard;B.sample;1- puerarin;2-daidze
3　讨论
实验结果表明 ,伏牛山区野葛与粉葛中葛根素
含量都超过 2005年版中国药典规定 ,大豆苷元含量
相当 ,该结果为进一步研究开发伏牛山区葛根药材
提供了实验依据。
中国药典 2005 年版已经把粉葛和野葛单列
·6· 中国医院药学杂志 2010年第 30卷第 1期 Chin H osp Pharm J , 2010 Jan , Vol 30 , No.01
开来 ,本测定结果也表明野葛与粉葛不能盲目混
用。若生产中以葛根素为指标成分 ,以粉葛代替
野葛应按照实际加大用量 ,以保证生产产品合格 ,
若以大豆苷元为指标成分 ,粉葛可以替代野葛应
用。但能否达到应有的药效 ,还需进一步的药理
学研究证明。试验中我们进行了流动相考察 ,曾
按照文献报道进行试验[ 3-5] ,发现葛根素峰和大豆
苷元峰与其他成分并不能完全分离 ,通过优化 ,最
终选用本实验方法 。
参考文献:
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中国饲料 , 2008 , 10:36-37.
[收稿日期] 2008-12-15
[ 基金项目] 湖北省教育厅重点科研项目(编号:B200501008)　[ 作者简介] 罗毅 ,女 ,硕士 ,副主任药师 ,电话:027-88041911 , luoyi6226@163.
com
益母草总生物碱对小鼠肝 、肾的亚急性毒性作用
罗毅1 ,冯晓东1 ,刘红燕2 ,周本宏1 　(武汉大学人民医院 , 1.药学部;2.肾内科 , 湖北 武汉 430060)
[ 摘要] 　目的:研究益母草总生物碱提取物(AE)对小鼠肝 、肾的亚急性毒性作用。方法:采用毛细管区带电泳法测定 AE 中
水苏碱的含量 ,小鼠灌胃给予 AE(0.615 , 1.23 g·kg-1·d-1),连续给药 15 d ,取血和肝 、肾组织标本 ,测定小鼠血清谷丙转氨酶
(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性和尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的水平 ,观察肝 、肾组织病理学变化。结果:AE 中水苏碱的含量
为21.25%。 AE 高剂量给药组小鼠血清 AST 明显增高 , 其余各肝 、肾功能指标无明显改变 , 低剂量给药组小鼠各指标无明显
异常。给药组小鼠肝 、肾组织均未见明显病理改变。结论:采用毛细管电泳法测定 AE 中水苏碱含量的方法简便 , 结果准确;
AE灌胃给予小鼠未表现明显的肝 、肾毒性 , 仅高剂量时可影响小鼠肝功能。
[ 关键词] 　益母草;生物碱;水苏碱;肝;肾;毒性
[中图分类号] R285　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-5213(2010)01-0007-04
Subacute toxic effects of total alkaloids extracted from Herba leonuri on liver and kidney in mice
LUO Yi1 , FENG Xiao-dong 1 , LIU Hong-yan2 ,ZHOU Ben-hong1(1.Depar tment o f Pha rmacy;2.Department of
Nephro log y , the Renmin Hospital of Wuhan Univer sity , Hubei Wuhan 430060 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To study the subacute tox ic ef fects of to ta l alkalo ids ex tracted f rom Herba leonuri (AE)on the liv-
er and kidney in mice.METHODS　The content o f stachydrine hydrochlo ride in AE w as determined by HPCE.AE w as given
intrag astrically to mice a t the dose of 0.615 , 1.23 g·kg -1·d -1 fo r 15 day s.Blood , liver and kidney we re co llected.The activi-
ties o f ALT , AST and the lev els of BUN , Cr in serum w ere measured.The pa tho log ical changes of the live r and kidney were
obse rved.RESULTS　The content o f stachydrine hydrochlo ride in AE was 21.25%.In the g roup trea ted w ith AE at high do se ,
the re was significant diffe rence in the activity of AST , and no significant diffe rence in the other determined indexes ser ved as
liv er and rena l func tion.There w as no significant difference in the de te rmined indexes in the g roup treated w ith AE at low
do se.The treated gr oup show ed no significant mo rphological changes a s compa red to the control g roup.CONCLUSION　The
quantitative method o f stachydrine hydrochlo ride in AE is simple and accurate.AE given o rally doesnt produce significant hepa-
to tox icity and nephroto xicity in mice , but AE at high dose ha s lighte r to xic effect on liver function.
KEY WORDS:Herba leonuri ;alkaloid;stachydrine hydrochlo ride;live r;kidney;to xicity
　　益母草(Herba leonuri)为唇形科植物益母草
(Leonurus japonicus Houtt .)的干燥地上部分 , 具
有活血调经 、利尿消肿之功效 ,常用于月经不调 、痛
经 、经闭等妇科疾病及急性肾炎水肿等肾脏疾病的
治疗[ 1] ,自 20世纪 80年代末 ,已有一些关于益母草
引起中毒反应的临床报道 ,实验研究也表明益母草
是具有肾毒性的中药[ 2-4] ,但益母草的毒性是源于哪
类成分至今尚不明确。生物碱 、萜类 、酚类等成分是
常见的中药毒性成分结构类型 ,而益母草所含生物
碱类成分具有抗炎 、利尿等活性[ 5] ,被普遍认为是其
·7·中国医院药学杂志 2010年第 30卷第 1期 Chin H osp Pharm J , 2010 Jan , Vol 30 , No.01