全 文 ：中国二继续医 学烫穿育 第尸着 弟 2夕裂尹 31
表 1 第 1 组及第 2组小鼠外周血中 1 h T7 、 T reg 及 T reg /1 h T7 的细胞水平
G r oL J Ps
月干转移小鼠组 ( n= 4 0)
空 白组 ( n= 2 0)
尸
h T门了细胞
3门4 8士 O 了门
4 62门士 8 05
< 0 05
Te rg 细胞
8 6门 8士 门 9 3 9
4 9 6了士 门O了
< 0 05
Te rg / h T门了
门 8了 8士 4 0 0
门 62门士 0 3门
< 0 05
表 2第 1 、 2组肝转移瘤中 1 h T7 细胞 、 IL 一 17 、 T reg 细胞水平
与对照组比较
G r oL J Ps IL 门了 ( ng /L ) Te rg 细胞 ( % ) h T门了细胞 ( % )
门 6天组 5 5 6了士 门门 8 6门 0 0 6士 8 3 62 5了士 8 0 9
2 3天组 8 9 6 6士 65 2 2门 9 65士 8 5 8 8 8 6士 35
空白组 2 92 3士 2门4 0 32 2士 24 了 门 02士 05 9
瘤细胞 。 T7 h l细胞是一种新发现的辅助性 T细胞亚群 , 分化发
育机制独特 , 可分泌相关细胞因子 lL 一 17 、 lL 一 21 等 。 在肿瘤的发
生发展中发挥重要的作用 。 K ry cz ek 等 l] 发现 T h l7 细胞具有抗肿
瘤效应 , 而与肿瘤浸润 的 rT e g 细胞负相关 。 c he n 等 l2] 发现 lL 一 17
存在于肺癌组织中 , 在晚期患者组织中的表达更高 。 研究发现 l3]
lL 一 17 主要起到促进肿瘤生长作用 。 本次研究结果表明 , T h l7 细
胞在结肠癌肝转移微环境中的聚集发生在肿瘤的早期阶段 , 随着
病程进展 , T h l7 细胞的聚集程度逐步降低 ; lL 一 17 的细胞水平与
肝转移瘤进展呈正相关 。 rT e g 细胞在人类肿瘤微环境中数量增多 ,
发挥着一定的促进肿瘤生长的作用 。 小鼠实验模型中发现 rT e g 细
胞可抑制肿瘤浸润 的淋巴结及外周血效应 T 细胞群 的免疫应答 。
通过抗体抑制 rT e g 细胞 的表面分子来抑制 T re g 的功能或数目能够
增强机体抗肿瘤活性 , 进一步证明了 rT e g 在肿瘤免疫系统中的负
向调节作用 。 可考虑从免疫治疗的角度控制肿瘤的进展 , 负向调
节 T re g 细胞是非常重要的治疗靶点 。
总之 , 本研究通 过免疫组织化学方法证实 了 rT e g 细胞 、
lL
一
17 在大肠癌肝转移瘤中表达增加 , 且与肝转移瘤进展呈正
相关 , 这可能对评估病情进展有一定意义 。 且早期肝转移瘤中
T h l7 细胞增高 , 并具有抗肿瘤活性 , 这可能是大肠癌免疫治疗
的新策略 。
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鹿霍水提取物抗雄性小鼠生育作用研究
向秋玲 蒋锐 姜海斌
【摘要 】目的 研究鹿着水提取物的抗雄性 小鼠生育作用 的影响 。 方法
雄性小鼠分为 4 组 , 给药 , 然后与雌鼠合笼 交配 , 观察雌鼠给药 70 d 、
停药 20 d 妊娘率 。 结果 用 药 70 d 作用较明显 。 停药 20 d , 与阴 性对
照组结果非常接近 。 结论 鹿着水提取物具有良好的抗生育作用 , 停药
后 不影响后 续生育能力 。
l关键词 】鹿着水提取物 ; 抗生育作 用 ; 附辜 ; 精子
【中图分类号 】R 3 64 . 7 [文献标识码 】B
[文章编号 ] 2 67 4 一 93 0 8 ( 2 0 2三 ) 29 一 00 3 1一 0 2
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3 9 6 9 j/
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作者单位 : 4巧 0 0 常德职业技术学院 医学系
基金项 目 : 湖南省普通高等学校科学研究项 目 ( N o : 1 1c 01 64 )
鹿霍 ( R hy n e h o s i。 v o l u b i li 、 L o u r ) 是我国避孕经验方中的一味
主药 。 王建刚等 ! `}用鹿霍根 4 种提取物对大鼠灌胃进行实验 , 发
现对雄性大鼠有抗生育及抗菌作用 。 本实验深人研究鹿霍根水提
取物的抗生育作用 , 为将其开发为新型外用避孕药提供实验依据 。
1 材料
1
.
1 药品与试剂
鹿霍根 (购于湖南怀化 , 由吉首大学陈功锡教授鉴定 ) ; 醋
酸棉酚 (北京中棉紫光生物技术有限责任公司 , 批号 0 6 1 1 16 ) 。
32 C 力们日 C n ojr fi u们 a 八夕e d z乙日 / 石d 臼C亡刁j fon . }入〕人 尺周口
,
2 9
1
.
2 动物
成年雌 、 雄性小 鼠 ( 湖南斯莱克景达实验动物有 限司提
供 , 动物许可证号 : S c x K ( 湘 ) 2 0 13一 0 004 , 动物合格证号 :
N O 4 3 0 0 4 7 0 0 0 0 6 14 0 )
。
2 方法
2
.
1 提取及实验用药的配制
干燥鹿霍根 10 k g , 粉碎 , 加人 30 L 纯净水 , 60 ℃浸泡 24 h ,
提取 2次 , 过滤 , 减压蒸馏浓缩 , 制得鹿霍水提取物浸膏 , 保存备用 ,
实验时用生理盐水稀释成 4% 的溶液 。
2 2 抗生育实验
7 O d 雄性小 鼠 80 只 , 体重 ( 28 . 2 士 L 4 ) g 左右 , 分为 4 组 :
阴性对照组 ( 生理盐水 ) , 阳性对照组给予醋酸棉酚 4 50 m酬 k g · d) ,
鹿霍水提取物低 、 高剂量的水浸膏 1 50 , 4 50 m g / ( k g · d) 组 , 每
组 20 只 , 给药组每次 o .ol m雌 , 灌胃 , 阴性对照组给予相同剂量
的生理盐水灌胃 , 每天 1次 , 连续给药 7 o do
2 3 妊娠率和妊娠抑制率
雄鼠给药 Z O d 后与雌性小 鼠 1 : 1合笼 , 合笼期间继续给雄
鼠灌药 , 以雌鼠阴道涂片检查 出精子为妊娠第 1 天 , 70 d 后分笼 ,
解剖雌 鼠 , 计算妊娠率 、 平均活胎数 、 死胎数和着床点数 。 根据
以上方法 , 记录给药 70 d 、 停药 10 d 时实验结果 。
2 4 统计学方法
所得数据使用 s P s s 巧 . 0 统计学软件进行分析 , 计量数据采用
( 均数 士 标准差 ) (牙士 、 )表示 , 采用 t检验 , 计数资料采用 % 表示 ,
采用 x Z检验 , 尸 < 0 . 05 , 差异具有统计学意义 。
3 结果
3
.
1 用药后对雌 鼠妊娠抑制的结果
用药 7 O d 后 , 药物组抑制妊娠效果较用药 20 d 时降低 , 但仍
很明显 , 尤其是高剂量组 。 见表 1 。
3
.
2 停药后对雌鼠妊娠抑制的结果
停药 20 d 后 , 妊娠率与生理盐水组接近 , 尤其是低剂量组 ,
与生理盐水组 比较 , 尸 > 0 . 05 , 差异不具有统计学意义 。 见表 2 。
4 讨论
精子 的发生主要包括精原细胞 的增殖分化 , 精母细胞 的减
数分裂 和精子细胞的发育过程 。 而精子的成熟则依赖于 附肇微
环境 ! 2] , 抗生育药物可作用于以上任一环节 。 从上述结果可看出 ,
连续用 药后 , 鹿霍水提取物即能抑制妊娠率 , 尤其是连续用药
ZO d 后 , 雌鼠妊娠率降低 , 说明鹿霍水提取物对雄性小 鼠具有抗
生育作用 l3] 。 用药后小 鼠生育率降低 , 精子总数减少 , 可以推测
鹿霍跟水提取物能够抑制肇丸精子 的产生 。 从实验结果又可以看
出用药后精子活动受到影响 , 说明鹿霍抗雄性小 鼠生育在也附肇
部位 , 影响了精子的成熟 。 研究发现 l4] , 日一 甲基 2 , 4一二 甲氧基 -
毗喃岩藻糖普可能在附肇即与岩藻糖普转移酶或岩藻糖普酶结合 ,
继而干扰在雌鼠体内的精卵结合 。 同时不排除鹿霍其他成分的作
用或多种成分共同作用 l5] 。 对用药后肇丸及附肇组织进行观察 ,
发现鹿霍水提取物对肇丸及附肇仅有轻微影响 , 且从停药后的各
项数据可知 , 鹿霍抗生育作用维持时间短 , 易恢复 。 因此 , 停药
后不会影响雄性小鼠的生育能力 。
综上所述 , 鹿霍水提取物抗雄性小 鼠生育能力强 , 毒性小 ,
对肇丸影响很弱 , 不会影响生育能力 , 是安全有效的抗雄性生育
能力的药物 , 且试验证明鹿霍提取物对生殖道常见致病微生物也
有较好的抑制作用 l6] 。 对于鹿霍抗生育作用 的深人研究及化学成
分的进一步分析 , 有可能发现比较理想的男性避孕药 。
平均活胎数 (只 ) 平均死胎数 (只 )
门32门428 3门6了
组别 剂量
生理盐水组 一
醋酸棉酚组 4 5 0 m g / ( kg
低剂量组 门5 0 m g / ( kg
高剂量组 4 5 0 m g / ( kg
注 : 与生理盐水组比较 , * *尸 < 0 0 5 。
表 1 用药 7 0 d 对小鼠妊娠的影响
妊娠率 ( % ) 妊娠抑制率 ( % )
8 门3 8 4 6
门3 3* * 8 6 了
4 6 8
* *
5 3 2
3 8 门* * 6 门g
表 2 停药 2 0 d 对小鼠妊娠的影响
组别
生理盐水组
酉昔酸棉酚组
低剂量组
高剂量组
剂量 女王娠率 (% )
了8 3
2门了
了5 8
6 6 3
妊娠抑制率 (% )
2门了
了8 3
2 4 2
3 3 了
平均活胎数 ( 只 ) 平均死胎数 ( 只 )
O
门é
489了2门
4 5 0 m g / ( k g
门5 0 m g / ( k g
4 5 0 m g / ( k g
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