全 文 ：［收稿日期］ 20120413(006)
［基金项目］ 贵州省中药现代化项目(黔科合中药字［2010］5029) ;教育部春晖计划项目(Z20110363 号) ;贵阳市科技局项目［筑科合同
(2012204)号］
［第一作者］ 刘超，硕士研究生，从事天然有机化学研究，Tel:13765100283，E-mail:676608687@ qq． com
［通讯作者］ * 张前军，博士，教授，从事天然产物化学研究，Tel:0851-8292313，E-mail:qianjunzhang@ 126． com
小槐花提取物对 α-葡萄糖苷酶抑制活性研究
刘超1，王俊霞2，顾雪竹3，张前军1*
( 1. 贵州大学化学与化工学院，贵阳 550025; 2. 河南大学中药研究所，河南 开封 475004;
3. 中国中医研究院中药研究所，北京 100700)
［摘要］ 目的:评价小槐花 Desmodium caudatum (Thunb．)DC．提取物对 α-葡萄糖苷酶的抑制活性。方法:通过建立体外
α-葡萄糖苷酶抑制模型，对小槐花提取物进行活性筛选。结果:小槐花提取物均有较好的 α-葡萄糖酶抑制作用，其中以乙酸
乙酯部位(DCEA)和石油醚部位(DCPE)活性较好(IC50 = 9. 79，39. 2 mg·L
－1) ，其次为正丁醇部位 (DCBU) (IC50 = 625. 1 mg
·L －1) ，抑制活性均远远大于阳性对照阿卡波糖 (IC50 = 1 103. 01 mg·L
－1)。DCBU 对 α-葡萄糖苷酶抑制活性呈显浓度依赖
性;DCPE和 DCEA对 α-葡萄糖苷酶抑制活性对浓度的变化较灵敏，随浓度的增加而急剧上升。结论:小槐花石油醚部位和乙
酸乙酯部位对 α-葡萄糖苷酶活性抑制非常显著，具有开发治疗糖尿病降血糖药物的价值。
［关键词］ 小槐花;α-葡萄糖苷酶;抑制活性
［中图分类号］ Ｒ284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)20-0091-03
［doi］ 10． 11653 /syfj2013200091
α-Glucosidase Inhibitory Activity of Extracts from Desmodium caudatum
LIU Chao1，WANG Jun-xia2，GU Xue-zhu3，ZHANG Qian-jun1*
(1. School of Chemistry and Chemical Engineer of Guizhou University，Guiyang 550025，China;
2. Institute of Chinese Materia Medica，Pharmaceutical College，Henan University，Kaifeng 475004，China;
3. Institute of Chinese Materia Medica，Traditional Chinese Medical Ｒesearch Institute，Beijing 100700，China)
［Abstract］ Objective: To evaluate α-glucosidase inhibitory activity of extracts from Desmodium
caudatum． Method:By establishing α-glucosidase inhibitory model in vitro，the activity of extracts from D．
caudatum was screened． Ｒesult:The extracts from D． caudatum showed good inhibitory activity． The ethyl acetate
extract and petroleum ether extract had higher inhibitor activity (IC50 = 9. 79 and 39. 2 mg·L
－1) ，which showed far
greater activity than that of acarbose (IC50 = 1 103. 01 mg·L
－1) ，and followed by petroleum ether and n-butanol
extract (IC50 = 625. 1 mg·L
－1)． The α-glucosidase inhibitory activity of DCBU had concentration-dependent
manner． α-Glucosidase inhibitory activity of DCPE and DCEA is sensitive to the change of concentration，which
increased dramatically as the concentration increased． Conclusion:DCPE and DCEA showed very significant
inhibitory activity to α-glucosidase，and could be exploited the diabetes drugs as α-glucosidases inhibitors in future．
［Key words］ Desmodium caudatum．;α-glucosidase;Inhibitory activity
小槐花是豆科山蚂蝗属植物，为直立灌木或亚
灌木，产于我国长江以南各省，其味苦，性凉，具有清
热利湿、消积散瘀的功效，主治劳伤咳嗽、吐血、水
肿、小孩疳积、跌打损伤［1-2］。山蚂蝗属植物含有萜
类、黄酮、甾体和生物碱类等成分［3-5］，具有消炎抗
菌［6］、抗氧化［7-8］、保肝［9］和抗肿瘤活性［10］等作用，
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 20
Oct．，2013
常用于治疗泌尿系统感染、结石、胆囊炎、头痛、腹
痛、血栓等疾病。有关小槐花的化学成分及活性的
研究较少，Ueno Akira 等［7］从小槐花中分离得到了
两个生物碱，即蟾毒色胺及其 N -氧化物，药理研究
表明其具有止痛、抗炎、退热［11］和雌激素等作
用［12］。本课题组对山蚂蝗属植物进行了系统的化
学与生物活性的筛选;发现该属植物具有较好的抗
氧化活性和保护 CCl4 诱导的急性肝损伤
［7，9］;又对
小槐花的化学成分及活性进行系统研究，发现其
75%乙醇提取物对 α-葡萄糖苷酶具有较好的抑制
活性。
1 材料
新鲜的小槐花采自贵州省凯里市，经贵阳中医
学院陈德媛教授鉴定为豆科山蚂蝗属小槐花
Desmodium caudatum (Thunb．)DC． 的全草，标本存
放于贵州大学化学与化工学院化学系。
α-葡萄糖苷酶 (α-glucosidase，EC 3. 2. 1. 20) ，
4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(4-N-trophenyl-α-D-
glucopyranoside，PNPG，026 K1516) ，阿 卡 波 糖
(Acarbose，Lot 16869) ，二甲亚砜 (DMSO)均购自
美国 Sigma公司，其他试剂均为分析醇。
Multiskan MK3 型 酶 标 仪 (美 国 Thermo
Electron公司) ，LＲH-150 型 恒温培养箱 (上海一恒
科技有限公司) ，DELTA 320 型 pH 计 (美国Mettler-
Toledo 公司) ，电子天平 (美国 Mettler-Toledo 公
司) ，TGL-16 型高速离心机 (江苏金坛市中大仪器
厂)。
2 方法
2. 1 小槐花浸膏的提取 将小槐花全草阴干，粉
碎，用乙醇室温下浸泡 3 次，每次 7 d，合并提取滤液
后浓缩，得到乙醇总浸膏。总浸膏分散于水中，依次
用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压浓缩得到小
槐花石油醚部位 (DCPE)、乙酸乙酯部位 (DCEA)、
正丁醇部位 (DCBU)。
2. 2 α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定
2. 2. 1 标准曲线制作 根据采用的反应体系，用磷
酸缓冲液(pH 6. 8)配制 1 000 μmol·L －1 PNP，稀释
成 400，300，200，150，100，50，25，5，0 μmol· L －1。
分别取 7 种不同浓度的 PNP 溶液各 160 μL，加入
0. 2 mol·L －1 Na2CO3 溶液 80 μL，混匀，在 405 nm下
测定 A值，测 3 组取平均值。以 A值为纵坐标，对硝
基苯酚浓度为横坐标，做出标准曲线。
2. 2. 2 α-葡萄糖苷酶活力的测定 根据所采用的反
应体系:112 μL磷酸钾缓冲液(pH 6. 8) ，加入 20 μL
0. 2 U·mL －1α-葡萄糖苷酶和 8 μL DMSO，37 ℃恒温
15 min 后加入 2. 5 mmol·L －1 PNPG 20 μL，摇匀，
37 ℃恒温反应 15 min。再加入 80 μL 0. 2 mol·L －1
的 Na2CO3 溶液，于 405 nm波长下测 A值。
酶活力单位定义:37 ℃，pH 6. 8 条件下，每分钟
水解底物所产生 1 μmol对硝基苯酚的酶量，规定为
一个酶活力单位(U)［13］。
2. 2. 3 检测方法 将小槐花各提取物以 DMSO 溶
解，并存储于 4 ℃冰箱中。以张丽［14-16］等建立的 96
微孔板筛选方法，405 nm处检测其 OD值。同时做
相同体系下的样品空白组，不加样品、酶与底物的空
白对照组、不加样品的阴性对照组和以阿卡波糖为
抑制剂的阳性对照组。并用 Origin软件求出相应的
IC50值。
酶活性抑制率 = (A样品阴性 － A样品空白)/(A阴性 － A空白)
× 100%
3 结果与讨论
3. 1 小槐花不同提取部位 α-葡萄糖苷酶抑制活性
比较分析 图 1 显示，初筛时，同一初筛浓度下，小
槐花不同部位 α-葡萄糖苷酶初筛抑制活性从大到
小依次为 DCPE ＞ DCBU ＞ DCEA，且均高于阳性对
照 Acarbose。
图 1 小槐花不同提取部位 α-糖苷酶初筛抑制活性
表 1 显示，在初筛浓度下，各提取部位对 α-葡
萄糖苷酶抑制活性从大到小依次为 DCEA (IC50 =
9. 79 mg·L －1)＞ DCPE (IC50 = 39. 2 mg·L
－1)＞
DCBU (IC50 = 625. 1 mg·L
－1) ，DCPE 和 DCEA 对
α-葡萄糖苷酶抑制活性均远远大于阳性对照阿卡波
糖 (IC50 = 1 103. 01 mg·L
－1) ，分别为阿卡波糖的
28. 14，112. 67 倍。可见，小槐花不同溶剂提取部位
对 α-葡萄糖苷酶抑制活性有一定的差别。初筛抑
制率和 IC50值评价各提取部位对 α-葡萄糖苷酶抑制
活性结果不一致，仅从抑制率评价其活性并不可靠，
采用较为客观的 IC50值作为指标。
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表 1 小槐花提取部位 α-葡萄糖苷酶抑制活性
提取物
初筛浓度
/mg·L －1
抑制率
/%
IC50
/mg·L －1
石油醚部位 (DCPE) 1 500 98. 57 39. 2
乙酸乙酯部位 (DCEA) 1 500 93. 73 9. 79
正丁醇部位 (DCBU) 1 500 94. 05 625. 1
阿卡波糖 (Acarbose) 1 500 57. 26 1 103. 01
注:阿卡波糖为阳性对照。
3. 2 提取物浓度对 α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响
图 2 显示，DCBU 对 α-葡萄糖苷酶抑制活性随浓
度的增加而缓慢增加，呈显浓度依赖性;DCPE 和
DCEA对 α-葡萄糖苷酶抑制活性随浓度的增加而急
剧直线上升，与对浓度的稍微变化较灵敏，在相同的
浓度下，DCEA 对 α-葡萄糖苷酶抑制活性大于
DCPE。
图 2 提取物浓度对 α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响
［参考文献］
［1］ 中国科学院植物研究所． 中国植物志［M］． 北京:科
学出版社，2005:17.
［2］ 《中华本草》编写委员会． 中华本草． 第 11 卷［M］．
上海:上海科学技术出版社 1999:451.
［3］ 李传宽，张前军，陈青，等． 饿蚂蝗化学成分研究
［J］．中国中药杂志，2010，35 (18) :2420．
［4］ 吴颖，张前军，陈青，等． 尖叶长柄山蚂蝗化学成分
研究［J］． 中成药，2010，32(3) :465.
［5］ Ueno A，Ikeya Y，Fukushima S，et al． Studies on the
Constituents of Desmodium caudatum DC［J］． Chem
Pharm Bull，1978，26(8) :2411.
［6］ Yadava Ｒ N，Ｒeddy K，Indra Sena． Novel bioactive
flavonol glycoside from Desmodium gangeticum DC［J］．
Indian Chem Society，2003，80(12) :1179.
［7］ 张前军，刘瑜新，康文艺，等． 饿蚂蝗抗氧化活性研
究［J］． 2010，32(11) :1980．
［8］ 毛少春，李竹英，李聪． 山蚂蝗属 3 种植物的抗氧化
性能研究［J］．云南大学学报，2007，29(4) :393.
［9］ 张前军，于海林，李传宽，等． 饿蚂蝗对四氯化碳致
急性肝损伤小鼠保护作用研究［J］． 中成药，2011，
33(11) :1993.
［10］ 干宁，杨欣，李天华，等．毛排钱草的化学成分及其对
肿瘤细胞的细胞毒活性研究［J］． 中国中药杂志，
2008，33(18) :2070.
［11］ Ma K J，Zhu Z Z，Yu C H，et al． Analgesic，anti-
inflammatory，and antipyretic activities of the ethanol
extract from Desmodium caudatum［J］． Pharmaceutical
Biology，2011，49(4) :403.
［12］ YOO H H，Kim T，Ahn S，et al． Evaluation of the
estrogenic activity of leguminosae plants［J］． Biol Pharm
Bull，2005，28(3) :538.
［13］ Kang W Y， Song S L， Zhang L． a-Glucosidase
inhibitory and antioxidant properties and antidiabetic
activity of Hypericum ascyron L［J］． Med Chem Ｒes，
2011，20:809.
［14］ 张丽，李晓梅，李彩芳，等． 加拿大蓬 α-葡萄糖苷酶抑
制作用研究［J］． 河南大学学报:医学版，2008，27
(4) :39．
［15］ 康文艺，王金梅，张丽．河南产连翘叶抑制 α-糖苷酶
活性 成 分 研 究［J］． 中 国 中 药 杂 志，2010，35
(9) :1156.
［16］ 康文艺，张丽，宋艳丽．滇丁香中抑制 α-葡萄糖苷酶
活性成分研究［J］． 中国中药杂志，2009，34
(4) :406.
［责任编辑 顾雪竹］
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刘超，等:小槐花提取物对 α-葡萄糖苷酶抑制活性研究