全 文 ：中国畜牧兽医 ２０１５，４２（１１）：２９６９－２９７６
Ｃｈｉｎａ Ａｎｉｍａｌ Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ ＆Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
ｄｏｉ：１０．１６４３１／ｊ．ｃｎｋｉ．１６７１－７２３６．２０１５．１１．０２２
苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃发酵功能
和纤维降解酶活性的影响
王梦竹１，２，刘艳丰１，２＊，王文奇２，侯广田２，张文举１
（１．石河子大学动物科技学院，石河子８３２０００；２．新疆畜牧科学院饲料研究所，乌鲁木齐８３００００）
摘 要：本试验旨在研究苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃发酵功能和纤维降解酶活性的影响。选择体重为２７．０２ｋｇ±
３．０３ｋｇ、安装有永久性瘤胃瘘管的萨福克羊×小尾寒羊杂交Ｆ１代绵羊（公羊）１２只，采用单因素随机区组试验设
计，分成４组，每组３个重复，每个重复１只。对照组饲喂基础日粮，试验组分别在基础日粮中添加０．１％、０．２％和
０．４％苜蓿黄酮。预试期７ｄ，正试期４１ｄ。结果表明：①与对照组相比，添加苜蓿黄酮１２ｈ后，０．２％组ｐＨ显著升
高（Ｐ＜０．０５），其余各组差异均不显著（Ｐ＞０．０５）；各试验组氨态氮（ＮＨ３－Ｈ）浓度均无显著变化（Ｐ＞０．０５），浓度变
化幅度随剂量增加而变大。②与对照组相比，０．１％和０．４％组乙酸、丙酸、丁酸、戊酸和总挥发性脂肪酸的平均浓
度均提高，０．２％组则相反；添加苜蓿黄酮２ｈ后，０．１％、０．２％组异戊酸浓度显著高于０．４％组（Ｐ＜０．０５）。③与对
照组相比，０．１％和０．２％组木糖酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖酶和纤维素酶活性均下降，０．４％组则升高，但差异均
不显著（Ｐ＞０．０５）。综上所述，日粮中添加苜蓿黄酮可维持杂交绵羊瘤胃发酵功能稳定，不同剂量苜蓿黄酮对纤维
降解酶活性作用不同。在本试验条件下，建议苜蓿黄酮在杂交绵羊日粮中的添加量为０．４％。
关键词：苜蓿黄酮；瘤胃发酵；纤维素降解酶；活性
中图分类号：Ｓ８２６ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７１－７２３６（２０１５）１１－２９６９－０８
收稿日期：２０１５－０６－０３
基金项目：新疆维吾尔自治区公益性科研院所基本科研业务经费资助项目（ＫＹ２０１４００６）；自治区科研院所改革与发展专项资金（２０１５０１５）；国
家现代肉羊产业技术体系 （ｎｙｃｙｔｘ－３９）
作者简介：王梦竹（１９８８－），女，山东聊城人，硕士生，研究方向：动物营养与饲料，Ｅ－ｍａｉｌ：３４９０５７７２４＠ｑｑ．ｃｏｍ
＊通信作者：刘艳丰（１９８１－），男，湖南临湘人，硕士，副研究员，研究方向：饲料资源开发与利用，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕｙａｎｆｅｎｇ５２０＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ａｌｆａｌｆａ Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｏｎ Ｒｕｍｅｎ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ
Ｃｅｌｕｌｏｌｙｔｉｃ Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｃｒｏｓｓｂｒｅｅｄ Ｓｈｅｅｐ
ＷＡＮＧ Ｍｅｎｇ－ｚｈｕ１，２，ＬＩＵ Ｙａｎ－ｆｅｎｇ１，２＊，ＷＡＮＧ Ｗｅｎ－ｑｉ ２，ＨＯＵ Ｇｕａｎｇ－ｔｉａｎ２，ＺＨＡＮＧ Ｗｅｎ－ｊｕ１
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈｉｈｅｚｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｉｈｅｚｉ ８３２０００，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｆｅｅｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｕｒｕｍｑｉ ８３００００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｏｎ ｒｕｍｅｎ ｆｅｒｍｅｎ－
ｔａｔｉｏｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｅｌｕｌｏｌｙｔｉｃ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｃｒｏｓｓｂｒｅｅｄ ｓｈｅｅｐ．Ａ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｒａｎｄｏｍ
ｂｌｏｃｋ ｄｅｓｉｇｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ，ａｎｄ ｔｗｅｌｖｅ ｃｒｏｓｓｂｒｅｅｄ ｓｈｅｅｐ（Ｆ１）Ｓｕｆｆｏｌｋ× Ｓｍａｌ－ｔａｉｌ Ｈａｎ ｓｈｅｅｐ ｗｉｔｈ
ｐｅｒｍａｎｅｎｔ ｒｕｍｅｎ ｆｉｓｔｕｌａｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔ ｏｆ ２７．０２ｋｇ±３．０３ｋｇ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｎｄ ｒａｎｄｏｍｌｙ
ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ４ｇｒｏｕｐｓ ｗｉｔｈ ３ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ ｐｅｒ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ １ｓｉｎｇｌｅ ｓｈｅｅｐ ｐｅｒ ｒｅｐｌｉｃａｔｅ．Ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ
ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｆｅｄ ａ ｂａｓａｌ ｄｉｅｔ ｗｉｔｈｏｕｔ ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｆｅｄ ｔｈｅ
ｂａｓａｌ ｄｉｅｔｓ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ０．１％，０．２％ａｎｄ ０．４％ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｐｒｅ－
ｔｅｓｔ ｐｅｒｉｏｄ ｌａｓｔｅｄ ｆｏｒ ７ｄａｙｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｔｒｉａｌ ｐｅｒｉｏｄ ｌａｓｔｅｄ ｆｏｒ ４１ｄａｙｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ａｓ ｆｏｌｏｗｓ：
①Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｐＨ ｏｆ ０．２％ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ａｔ １２ｈａｆｔｅｒ
ａｄｄｉｎｇ ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ（Ｐ＜０．０５），ａｎｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｏｔｈｅｒ ｇｒｏｕｐｓ
（Ｐ＞０．０５）；Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ＮＨ３－Ｈ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｍｏｎｇ ａｌ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞
０．０５），ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｏｓｅ ｒｉｓｉｎｇ（Ｐ＞０．０５）．②Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ
中 国 畜 牧 兽 医 ４２卷
ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ａｃｅｔａｔｅ，ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ，ｂｕｔｙｒａｔｅ，ｖａｌｅｒａｔｅ ａｎｄ ＴＶＦＡ ｉｎ
０．１％ａｎｄ ０．４％ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ｗｈｅｒｅａｓ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ０．２％ｇｒｏｕｐ ｓｈｏｗｅｄ ｃｏｎ－
ｔｒａｒｙ ｐａｔｔｅｒｎ．Ｔｈｅ ｉｓｏｖａｌｅｒａｔｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ０．１％ａｎｄ ０．２％ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ
ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ０．４％ｇｒｏｕｐ ａｔ ２ｈａｆｔｅｒ ａｄｄｉｎｇ ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ（Ｐ＜０．０５）．③Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎ－
ｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｘｙｌａｎａｓｅ，ｅｎｄｏｇｌｕｃａｎａｓｅ，ｃｅｌｏｂｉａｓｅ ａｎｄ ｃｅｌｕｌａｓｅ ｉｎ ０．１％ａｎｄ ０．２％
ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｂｕｔ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ０．４％ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗａｓ ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｆｉ－
ｃａｎｔ（Ｐ＞０．０５）．Ｉｎ ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｄｉｅｔａｒｙ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｃｏｕｌｄ ｋｅｅｐ ｔｈｅ ｓｔａｂｉｌｉ－
ｔｙ ｏｆ ｒｕｍｅｎ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｒｏｓｓｂｒｅｅｄ ｓｈｅｅｐ ａｎｄ ｔｈｉｓ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｅ ｈａｄ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｃｅｌｕｌｏｌｙｔｉｃ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｔｈｅ ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｌ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ａｌｆａｌｆａ
ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｗａｓ ０．４％ｉｎ ｄｉｅｔ ｆｏｒ ｃｒｏｓｓｂｒｅｅｄ ｓｈｅｅｐ ｕｎｄｅｒ ｔｈｉｓ ｔｅｓｔ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎ；ｃｅｌｕｌｏｌｙｔｉｃ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ；ａｃｔｉｖｉｔｙ
瘤胃是反刍动物特有的消化器官，可以利用细
菌、真菌、纤毛虫等微生物，将摄取的草料消化成可
吸收利用的营养成分，并将其转化为营养丰富的畜
产品。它主要依靠瘤胃内复杂的微生物系统发挥消
化代谢功能，因此瘤胃发酵功能成为研究反刍动物
消化代谢的重点。近几十年来，为了稳定瘤胃功能，
出现了各种抗生素如莫能菌素［１］、拉沙里菌素［２］等。
由于抗生素会产生细菌抗药性和残留等问题，因此，
寻找一种可代替抗生素的无药物残留、无耐药性、无
副作用的绿色添加剂成为了近年来人们关注的论
题，其中植物提取物是目前的研究热点之一。黄酮
类化合物是普遍存在于豆科植物中的多酚类植物次
生代谢产物，由于其独特的γ－吡喃苯环结构，黄酮
具有多种药理作用，如抗癌［３］、抗氧化［４－５］、抗菌［６］、
促进脂类代谢［７］和雌激素样作用［８］及预防瘤胃酸中
毒［９］等，因其可以促进动物健康和提高生产性能而
受到广泛关注。目前，黄酮研究焦点主要在提取纯
化和抗癌抗氧化作用方面［１０－１１］，对反刍动物瘤胃发
酵功能影响的研究鲜有报道。鉴于此，本试验以萨
福克羊×小尾寒羊杂交Ｆ１代绵羊作为研究对象，
研究苜蓿黄酮对其瘤胃发酵功能和纤维素降解酶活
性的影响，为苜蓿黄酮在反刍动物生产中的应用提
供参考。
１ 材料与方法
１．１ 材料
苜蓿黄酮由陕西森弗生物技术有限公司提供，
为黄色粉末，其中总黄酮含量为５０％，烘干至恒重。
１．２ 试验动物及分组
选取１２只体重为２７．０２ｋｇ±３．０３ｋｇ、安装有
永久性瘤胃瘘管的萨福克羊×小尾寒羊杂交Ｆ１代
绵羊（公羊），采用单因素随机区组试验设计，分为４
组，每组３个重复，每个重复１只。对照组饲喂基础
日粮，试验组分别在基础日粮中添加０．１％、０．２％
和０．４％苜蓿黄酮。预试期７ｄ，正试期４１ｄ。
１．３ 试验日粮与饲养管理
试验日粮参考 ＮＲＣ（２００７）育肥羊标准配制育
肥前期和育肥后期颗粒状配合饲料。日粮组成及营
养水平见表１。预试期与正试期前２０ｄ饲喂育肥前
期颗粒饲料，正试期２１～４１ｄ饲喂育肥后期颗粒饲
料。饲养试验于２０１４年７月１０日至２０１４年９月
１０日在新疆科创畜牧繁育中心进行，试验羊单笼舍
饲，每天０９∶００饲喂１次，自由饮水。试验前统一
驱虫。
１．４ 样品采集与处理
于正试期第９天上午饲喂前和饲喂后２、４、６、８
和１２ｈ使用真空抽提器采集瘤胃液，立即测定ｐＨ。
瘤胃液用纱布过滤后，４ ℃、３ ５００ｒ／ｍｉｎ 离心
１５ｍｉｎ，取上清液，－２０℃冷冻保存，用于测定氨态
氮（ＮＨ３－Ｎ）和挥发性脂肪酸（ＶＦＡ）浓度。上午饲
喂后４ｈ采集瘤胃食糜，用灭菌三角瓶采集瘤胃内
固—液相交界处内容物，取出后迅速用灭菌橡皮塞
塞紧，准确称取５０ｍＬ装于带封口的塑料袋中，加
５０ｍＬ灭菌的磷酸缓冲液（ｐＨ ６．０）迅速封口，用手
适度揉搓５ｍｉｎ（使内容物与磷酸缓冲液充分混合，
并使附着于内容物上的细菌进入液相）后，两层灭菌
纱布过滤，取２０ｍＬ滤液立即在冰浴下进行超声波
细胞破碎处理（超声波钻头Ф６ｍｍ，功率４００Ｗ，
破碎３次，每次３０ｓ，间隔３０ｓ），所得细胞破碎液
（为样品酶活性溶液）用于测定纤维降解酶活性。
０７９２
１１期 王梦竹等：苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃发酵功能和纤维降解酶活性的影响
表１ 日粮组成及营养水平（干物质基础，％）
Ｔａｂｌｅ １ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉｅｔ（ＤＭ ｂａｓｉｓ）
原料
Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ
育肥前期
Ｅａｒｌｙ ｆａｔｔｅｎｉｎｇ
育肥后期
Ｌａｔｅ ｆａｔｔｅｎｉｎｇ
营养水平
Ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｌｅｖｅｌｓ
育肥前期
Ｅａｒｌｙ ｆａｔｔｅｎｉｎｇ
育肥后期
Ｌａｔｅ ｆａｔｔｅｎｉｎｇ
玉米Ｃｏｒｎ ３４．３６ ４３．７５ 总能（ＭＪ／ｋｇ）ＧＥ １７．４４ １７．３８
麸皮 Ｗｈｅａｔ ｂｒａｎ ２．７５ ３．５０ 干物质 ＤＭ ８９．５９ ８９．６２
红花籽粕Ｓａｆｆｌｏｗｅｒ ｓｅｅｄ ｍｅａｌ ５．５０ ７．００ 粗蛋白质ＣＰ １６．２０ １６．６８
葵花粕Ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ ｍｅａｌ ９．６３ １２．２５ 粗灰分 Ａｓｈ ８．５８ ８．９４
食盐 ＮａＣｌ １．３８ １．７５ 非纤维性碳水化合物 ＮＦＣ ２７．６１ ３４．８０
预混料Ｐｒｅｍｉｘ １．３８ １．７５ 粗脂肪 ＥＥ １．８１ １．８０
苜蓿 Ａｌｆａｌｆａ ３３．７５ ２２．５０ 中性洗涤纤维 ＮＤＦ ４５．８０ ３７．７８
稻壳 Ｒｉｃｅ ｈｕｓｋ １１．２５ ７．５０ 酸性洗涤纤维 ＡＤＦ ２３．６４ １７．６０
合计 Ｔｏｔａｌ １００．００ １００．００
①预混料为每千克日粮提供：维生素Ａ ３０ ０００ＩＵ；维生素Ｄ ５ ０００ＩＵ；维生素Ｅ ２００ＩＵ；铜（ＣｕＳＯ４·５Ｈ２Ｏ）１２ｍｇ；锌（ＺｎＳＯ４
·Ｈ２Ｏ）７０ｍｇ；钴（ＣｏＣｌ２·６Ｈ２Ｏ）０．２ｍｇ；锰（ＭｎＳＯ４·５Ｈ２Ｏ）７０ｍｇ；铁（ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ）５５ｍｇ；硒（Ｎａ２ＳｅＯ３）０．２ｍｇ；碘
（ＫＩ）０．５ｍｇ。②营养水平中ＮＦＣ为计算值，其余均为实测值
① Ｔｈｅ ｐｒｅｍｉｘ ｐｒｏｖｉｄｅｄ ｔｈｅ ｆｏｌｏｗｉｎｇ ｐｅｒ ｋｇ ｏｆ ｄｉｅｔ：ＶＡ ３０ ０００ＩＵ；ＶＤ ５ ０００ＩＵ；ＶＥ ２００ＩＵ；Ｃｕ（ＣｕＳＯ４·５Ｈ２Ｏ）１２ｍｇ；Ｚｎ
（ＺｎＳＯ４·Ｈ２Ｏ）７０ｍｇ；Ｃｏ（ＣｏＣｌ２·６Ｈ２Ｏ）０．２ｍｇ；Ｍｎ（ＭｎＳＯ４·５Ｈ２Ｏ）７０ｍｇ；Ｆｅ（ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ）５５ｍｇ；Ｓｅ（Ｎａ２ＳｅＯ３）
０．２ｍｇ；Ｉ（ＫＩ）０．５ｍｇ．② ＮＦＣ ｗａｓ ａ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｖａｌｕｅ，ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒｓ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｖａｌｕｅｓ
１．５ 测定指标与方法
瘤胃液ｐＨ采用便携式ｐＨ 计进行测定；氨态
氮浓度参照冯宗慈等［１２］比色法进行测定；挥发性脂
肪酸浓度采用安捷伦６８９０Ｎ气相色谱仪进行测定，
测定条件为：进样口：２５０ ℃；分流进样，分流比：
１０∶１；进样量：１μＬ；色谱柱：ＤＢ－ＷＡＸ石英毛细管
柱（３０ ｍ×０．２５ ｍｍ×０．２５μｍ）；载 气 流 量：
１．２ｍＬ／ｍｉｎ，程序升温：１２０ ℃ 保 持 １ ｍｉｎ，以
５℃／ｍｉｎ的速率升至２００℃；检测器（ＦＩＤ）：３００℃；
氢气流量：４０ｍＬ／ｍｉｎ；空气流量：４００ｍＬ／ｍｉｎ；尾
吹流量：３０ｍＬ／ｍｉｎ。瘤胃中木糖酶、内切葡聚糖
酶、纤维二糖酶和纤维素酶活性均按照南京建成生
物工程研究所生产的试剂盒测定。
１．６ 数据处理
试验数据采用ＳＰＳＳ ２２．０统计软件中 Ｏｎｅ－
Ｗａｙ ＡＮＯＶＡ程序进行方差分析，各组间采用ＬＳＤ
法进行多重比较，结果以平均值±标准误表示，Ｐ＜
０．０５表示差异显著。
２ 结果与分析
２．１ 苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃发酵功能的影响
２．１．１ 苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃液ｐＨ、氨态氮浓
度的影响 由表２可知，对照组及０．１％、０．２％
和０．４％ 组 ｐＨ 变化范围分别为 ５．４０～６．７７、
５．５７～６．６０、５．６７～６．８０和５．３７～６．７０，变化幅度
分别为１．３７、１．０３、１．１３和１．３３，０．１％、０．２％和
０．４％组ｐＨ变化幅度均低于对照组。在１２ｈ时，
０．２％组ｐＨ 显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。添加苜
蓿黄酮后瘤胃液氨态氮浓度随着发酵时间呈先升高
后降低的动态变化，其中０．１％和０．４％组氨态氮浓
度在２、４ｈ时均高于对照组，对照组及０．１％、０．２％
和０．４％组氨态氮浓度变化范围分别为０．７９～
２．２４、０．６９～２．３５、０．４５～２．１２和０．６２～２．５８，变化
幅度分别为１．４５、１．６６、１．６７和１．９６。
２．１．２ 苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃液挥发性脂肪
酸浓度的影响 由表３可知，随着发酵时间的
延长，对照组及０．１％、０．２％和０．４％组乙酸、丙
酸、丁酸、戊酸、总挥发性脂肪酸浓度基本呈现先
升高后降低的变化趋势，其中，０．１％、０．４％组乙
酸、丙酸、丁酸、戊酸平均浓度均高于对照组，但组
间差异均不显著（Ｐ＞０．０５）。０．２％组戊酸平均浓
度显著低于对照组（Ｐ＜０．０５）。采食苜蓿黄酮２ｈ
后，０．１％、０．２％组异戊酸浓度显著高于０．４％组
（Ｐ＜０．０５）。２、４、６和８ｈ时，与对照组相比，
０．１％、０．４％组总挥发性脂肪酸浓度升高，总挥发
性脂肪酸平均浓度分别提高了７．６８％和７．３０％。
各组间乙酸／丙酸和乙酸／总挥发性脂肪酸差异均
不显著（Ｐ＞０．０５）。
１７９２
中 国 畜 牧 兽 医 ４２卷
表２ 苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃液ｐＨ、氨态氮浓度的影响
Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｏｎ ｒｕｍｅｎ ｐＨ ａｎｄ ＮＨ３－Ｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｒｏｓｓｂｒｅｅｄ ｓｈｅｅｐ
指标
Ｉｎｄｅｘｅｓ
时间（ｈ）
Ｔｉｍｅ
对照组
Ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ
苜蓿黄酮添加水平 Ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｌ ｌｅｖｅｌｓ
０．１％ ０．２％ ０．４％
ｐＨ ０ ６．７７±０．０３ ６．６０±０．０６ ６．８０±０．０６ ６．７０±０．１０
２ ６．５７±０．０９ ６．６０±０．１５ ６．７３±０．０７ ６．５３±０．１７
４ ６．３７±０．１２ ６．１３±０．２７ ６．２０±０．２１ ６．００±０．３０
６ ５．９０±０．１７ ５．７７±０．０９ ５．７７±０．３７ ５．７３±０．２３
８ ５．５７±０．１７ ５．５７±０．０７ ５．６７±０．３７ ５．３７±０．０７
１２ ５．４０ｂ ５．５７±０．０３ａｂ ６．０７±０．２９ａ ５．５７±０．２２ａｂ
平均值 Ａｖｅｒａｇｅ ６．０９±０．０８ ６．０４±０．０７ ６．２１±０．２２ ５．９８±０．１１
氨态氮 ０ ０．８９±０．１１ ０．８０±０．１１ ０．７１±０．１０ ０．７７±０．１２
（ｍｇ／ｍＬ） ２ １．５６±０．２２ ２．１８±０．２９ １．５９±０．５５ ２．０１±０．３２
ＮＨ３－Ｎ ４ ２．２４±０．０７ ２．３５±０．２３ ２．１２±０．６８ ２．５８±０．３７
６ １．８５±０．１９ ２．０１±０．３９ １．１３±０．３０ １．２８±０．３１
８ １．８２±０．２９ １．７４±０．３０ ０．８６±０．２２ １．２７±０．５７
１２ ０．７９±０．０６ ０．６９±０．１２ ０．４５±０．０２ ０．６２±０．２２
平均值 Ａｖｅｒａｇｅ １．５２±０．０２ １．６３±０．０７ １．１４±０．２６ １．４２±０．０８
同行数据肩标不同字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５）；肩标相同字母或无字母标注表示差异不显著（Ｐ＞０．０５）。下同
Ｉｎ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｒｏｗ，ｖａｌｕｅｓ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｅｔｔｅｒ ｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓ ｍｅａｎ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５）；Ｗｈｉｌｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｏｒ ｎｏ ｌｅｔ－
ｔｅｒ ｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓ ｍｅａｎ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅ ｓａｍｅ ａｓ ｂｅｌｏｗ
表３ 苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃液挥发性脂肪酸浓度的影响（ｍｍｏｌ／Ｌ）
Ｔａｂｌｅ ３ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｏｎ ｒｕｍｅｎ ＶＦＡ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｒｏｓｓｂｒｅｅｄ ｓｈｅｅｐ
指标
Ｉｎｄｅｘｅｓ
时间（ｈ）
Ｔｉｍｅ
对照组
Ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ
苜蓿黄酮添加水平 Ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｌ ｌｅｖｅｌｓ
０．１％ ０．２％ ０．４％
乙酸 ０ ３５．０３±４．６１ ２８．５７±７．６４ ２８．５３±８．１１ ４０．３８±２．３０
Ａｃｅｔａｔｅ ２ ３７．４３±４．０２ ７０．７７±１０．３９ ５０．４４±１１．９７ ６３．０８±１０．９１
４ ７８．５３±１６．１８ ８３．４７±２２．６４ ７０．２８±３０．００ ９１．２１±１１．４３
６ ７３．７７±８．１９ ７８．０３±３０．４０ ６０．６１±１５．３７ ８９．４０±３５．６５
８ ７５．３６±７．５０ ８１．５２±１４．３４ ５３．９６±１５．３７ ８１．２６±１９．６４
１２ ６３．８９±１６．５３ ４７．８５±４．７４ ３０．２６±４．３５ ３２．１７±９．２２
平均值 Ａｖｅｒａｇｅ ６０．６７±３．３３ ６５．０４±４．７４ ４９．０１±１２．３０ ６６．２５±８．０２
丙酸 ０ ９．５５±０．５３ ７．９２±２．０５ ７．９８±２．４４ １２．７７±２．３６
Ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ ２ １０．６７±０．８０ ２４．７５±５．２２ １６．４８±４．３０ ２１．８１±５．１１
４ ２５．４５±６．２３ ２９．０１±４．９０ ２４．８８±１０．３２ ３２．２４±８．６９
６ ３０．１４±５．７６ ３３．０９±１０．０７ ２２．７１±６．９９ ３２．６１±１０．７７
８ ３０．７３±２．２６ ３４．３８±７．３６ ２１．５３±８．２８ ３０．３３±６．０２
１２ ２９．９０±９．９７ ２０．３７±２．２３ １１．２８±２．２１ １３．７６±３．８２
平均值 Ａｖｅｒａｇｅ ２２．７４±２．９８ ２４．９２±２．１４ １７．４８±４．９１ ２３．９２±０．９８
丁酸 ０ ６．８５±０．６４ ４．１４±０．９６ ４．４０±１．３４ ５．６５±０．５０
Ｂｕｔｙｒａｔｅ ２ ６．１６±１．２４ ９．４４±１．６７ ７．８３±０．５７ ８．２４±２．６８
４ １０．６４±１．４７ １５．５６±７．５６ ９．８８±３．５９ １３．０２±１．７９
６ １０．２９±０．７９ １２．２４±３．１６ ９．１４±２．３４ １２．５２±４．７３
８ １０．９８±１．２５ １３．６５±３．８９ ９．２７±２．９７ １２．０２±３．８３
１２ １１．６３±２．８１ ８．２１±２．１１ ５．８６±１．２２ ６．６７±２．６４
平均值 Ａｖｅｒａｇｅ ９．４２±０．１０ １０．５４±２．８２ ７．７３±１．３９ ９．６９±１．８６
戊酸 ０ １．１２±０．０７ ０．８９±０．１６ ０．８３±０．１９ １．２６±０．１９
２７９２
１１期 王梦竹等：苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃发酵功能和纤维降解酶活性的影响
指标
Ｉｎｄｅｘｅｓ
时间（ｈ）
Ｔｉｍｅ
对照组
Ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ
苜蓿黄酮添加水平 Ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｌ ｌｅｖｅｌｓ
０．１％ ０．２％ ０．４％
Ｖａｌｅｒａｔｅ ２ １．０７±０．１３ １．８４±０．４０ １．５３±０．１７ １．５４±０．３４
４ １．８０±０．４４ １．８９±０．３４ １．３７±０．４４ ２．２１±０．５１
６ １．５９±０．１９ １．９１±０．３１ １．１７±０．１９ ２．０６±０．６６
８ １．６４±０．１１ １．９８±０．２１ １．１３±０．３５ １．８２±０．４０
１２ １．５３±０．４４ １．１９±０．０４ ０．７２±０．０４ ０．９７±０．３１
平均值 Ａｖｅｒａｇｅ １．４６±０．１１ａ １．６２±０．０１ａ １．１２±０．０９ｂ １．６４±０．０６ａ
异戊酸 ０ ２．９７±０．０９ ２．４４±０．５５ ２．６７±０．６６ ３．１５±０．１４
Ｉｓｏｖａｌｅｒａｔｅ ２ １．７４±０．１７ａｂ ２．０７±０．１６ｂ ２．０４±０．１１ｂ １．４０±０．２７ａ
４ １．８６±０．４４ １．４２±０．１４ ２．００±０．６３ １．５１±０．３４
６ １．１６±０．３３ １．３０±０．６０ １．８３±０．５２ １．９６±１．１５
８ ０．９５±０．３０ １．１６±０．４０ １．４８±０．２７ １．５９±０．７８
１２ １．６１±０．５５ １．０３±０．２５ １．５６±０．３７ １．１６±０．５０
平均值 Ａｖｅｒａｇｅ １．７１±０．２３ １．５７±０．３２ １．９３±０．３７ １．８０±０．５１
总挥发性 ０ ５７．４４±５．６２ ４５．５５±１１．４７ ４６．２０±１２．９７ ６５．４０±４．４４
脂肪酸 ２ ５８．６１±６．４６ １０９．４８±１６．８０ ７７．７２±１６．９２ ９６．６８±１７．８４
ＴＶＦＡ ４ １２０．３１±２４．４９ １３３．０６±２４．０７ １０９．３３±４４．２２ １４１．２８±２１．３０
６ １１６．９４±１４．５５ １２６．５７±３１．８０ ９６．０２±２４．０４ １３８．５５±５２．８２
８ １１９．６６±７．２４ １３２．８５±２２．４８ ７５．５３±２０．６１ １２７．３４±３０．５１
１２ １０８．５６±３０．０９ ７８．６５±７．３１ ５０．２７±６．８３ ５４．７４±１６．３７
平均值 Ａｖｅｒａｇｅ ９６．９２±５．６４ １０４．３６±７．６８ ７５．８４±１８．４３ １０４．００±１１．３８
乙酸／丙酸 ０ ３．６５±０．３５ ３．５８±０．１１ ３．６６±０．１５ ３．３７±０．５６
Ａｃｅｔａｔｅ／ ２ ３．４９±０．１５ ２．９５±０．２３ ３．１８±０．３９ ３．０８±０．４９
Ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ ４ ３．１４±０．２８ ２．９１±０．０９ ３．０４±０．４４ ３．０４±０．４０
６ ２．５７±０．３６ ２．４１±０．０９ ２．９４±０．４９ ２．６２±０．１９
８ ２．５１±０．４０ ２．４０±０．０９ ２．８５±０．４６ ２．６２±０．１５
１２ ２．３４±０．３１ ２．３５±０．０８ ２．８２±０．４４ ２．３３±０．１１
平均值 Ａｖｅｒａｇｅ ２．９５±０．２８ ２．７７±０．０４ ３．０８±０．３４ ２．８４±０．３０
乙酸／总挥发 ０ ０．６１±０．０２ ０．６２±０．０１ ０．６２±０．０１ ０．６２±０．０１
性脂肪酸 ２ ０．６４ ０．６５±０．０１ ０．６４±０．０２ ０．６６±０．０１
Ａｃｅｔａｔｅ／ ４ ０．６５±０．０１ ０．６４±０．０３ ０．６４±０．０２ ０．６５±０．０２
ＴＶＦＡ ６ ０．６３±０．０２ ０．６１±０．０２ ０．６３±０．０２ ０．６４±０．０１
８ ０．６３±０．０３ ０．６１±０．０２ ０．７１±０．０６ ０．６４±０．０１
１２ ０．６０±０．０２ ０．６１±０．０１ ０．６０±０．０１ ０．６０±０．０２
平均值 Ａｖｅｒａｇｅ ０．６３±０．０２ ０．６２±０．０１ ０．６４ ０．６３±０．０１
总挥发性脂肪酸＝乙酸＋丙酸＋丁酸＋戊酸＋异戊酸
ＴＶＦＡ＝ａｃｅｔａｔｅ＋ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ＋ｂｕｔｙｒａｔｅ＋ｖａｌｅｒａｔｅ＋ｉｓｏｖａｌｅｒａｔｅ
２．２ 苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃纤维降解酶活性的
影响
由表４可知，补饲不同剂量苜蓿黄酮对杂交绵
羊瘤胃纤维降解酶活性影响不同。与对照组相比，
０．１％和０．２％组木糖酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖
酶、纤维素酶活性分别下降了３２．８２％和４．６５％、
４４．６７％和４１．３９％、７．５６％和２０．５９％、２９．７０％和
５．０１％，０．４％组木糖酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖
酶、纤维素酶活性则分别提高了５９．０１％、４０．５５％、
３．１１％、５９．３９％，但差异均不显著（Ｐ＞０．０５）。
３７９２
中 国 畜 牧 兽 医 ４２卷
表４ 苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃纤维降解酶活性的影响（ＩＵ／Ｌ）
Ｔａｂｌｅ ４ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｏｎ ｒｕｍｅｎ ｃｅｌｕｌｏｌｙｔｉｃ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｃｒｏｓｓｂｒｅｅｄ ｓｈｅｅｐ
指标
Ｉｎｄｅｘｅｓ
对照组
Ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ
苜蓿黄酮添加水平 Ａｌｆａｌｆａ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｌ ｌｅｖｅｌｓ
０．１％ ０．２％ ０．４％
木糖酶 Ｘｙｌａｎａｓｅ ７．１０±３．７４ ４．７７±２．１８ ６．７７±４．３２ １１．２９±２．８９
内切葡聚糖酶 Ｅｎｄｏｇｌｕｃａｎａｓｅ ２７．１３±１８．１１ １５．０１±３．５４ １５．９０±５．８２ ３８．１３±１１．７２
纤维二糖酶Ｃｅｌｏｂｉａｓｅ ６．７５±０．５９ ６．２４±０．６７ ５．３６±０．２７ ６．９６±１．５７
纤维素酶Ｃｅｌｕｌａｓｅ ５．５９±３．５５ ３．９３±１．３０ ５．３１±３．０９ ８．９１±２．４５
３ 讨 论
３．１ 苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃发酵功能的影响
ｐＨ是评价瘤胃发酵功能的一个重要指标，受
到诸多因素的影响，如日粮结构、营养水平和唾液分
泌量等。本试验结果发现，各组间ｐＨ 差异均不显
著，且均大于５．３，与 Ｋｉｍ 等［１１］研究结果一致。
Ｏｓｋｏｕｅｉａｎ等［１３］在研究黄酮对瘤胃发酵功能、甲烷
产量和微生物菌群时发现，即便是高达４．５％黄酮
也不会对瘤胃ｐＨ产生显著影响。本试验中添加苜
蓿黄酮对瘤胃ｐＨ 无显著影响，表明本试验所设计
的苜蓿黄酮剂量对绵羊瘤胃酸碱内环境未造成不良
影响。
瘤胃液中氨态氮浓度可反映日粮中可降解蛋白
含量和非蛋白氮的降解终产物，也是合成微生物蛋
白的重要原料，瘤胃中适宜的氨态氮浓度有利于微
生物利用无机氮合成微生物蛋白，是瘤胃氮代谢中
最重要的指标之一。瘤胃氨态氮浓度过高或过低都
会对瘤胃微生物的生长繁殖产生不利影响，因此，适
宜的瘤胃氨态氮浓度是微生物蛋白正常合成的必要
条件。本试验结果发现，各组氨态氮浓度差异均不
显著，但在摄入日粮后２和４ｈ时，添加０．１％和
０．４％苜蓿黄酮组的氨态氮浓度均高于对照组，且各
试验组氨态氮浓度的变化范围均大于对照组，表明
日粮添加苜蓿黄酮有更多的蛋白被瘤胃微生物分解
利用，说明苜蓿黄酮可促进瘤胃分解利用蛋白的
功能。
采食日粮后短时间内，０．１％和０．４％苜蓿黄酮
组与对照组相比乙酸浓度上升幅度大，丙酸浓度变
化则和对照组相似，总挥发性脂肪酸浓度均大于对
照组，说明此浓度的苜蓿黄酮有利于瘤胃微生物对
碳水化合物的分解利用，或作为底物供瘤胃微生物
分解［１４］，这与Ｌｏｗｒｙ等［１５］对黄酮在瘤胃中发酵特
性的研究结果一致。在植物体内，黄酮常与糖基结
合形成黄酮类化合物以增加其在生物体内的溶解度
和生物利用度。进入消化道后，黄酮类化合物在根
皮苷乳糖酶水解酶作用下分解成黄酮和糖基，糖基
可作为消化底物［１６］。本试验中０．２％苜蓿黄酮组挥
发性脂肪酸浓度均低于对照组，可能是由于此浓度
的苜蓿黄酮发挥了抑菌作用。Ｏｓｋｏｕｅｉａｎ等［１３］研究
表明，黄酮在抑制瘤胃中微生物菌群数量的同时，可
降低瘤胃液挥发性脂肪酸浓度。
３．２ 苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃纤维降解酶活性的
影响
反刍动物瘤胃纤维降解酶活性受很多因素的影
响，其核心为饲料成分。内切葡聚糖酶作用于长链
纤维素的非结晶区，随机水解β－１，４－糖苷键，生成带
有大量还原性末端的短链纤维素分子。纤维二糖酶
则将纤维二糖水解为葡萄糖分子。木聚糖是植物体
内最重要的半纤维素，主要由木聚糖酶进行主链切
割［１７］。瘤胃中纤维素酶主要是由降解纤维素的细
菌、真菌和纤毛虫分泌的，其对反刍动物消化利用日
粮中纤维素具有重要作用。日粮组成会影响纤维降
解酶在瘤胃内的活性，孙宏选［１７］、孙亚波等［１８］研究
发现，日粮中不同来源的蛋白质和碳水化合物会影
响泌乳奶牛瘤胃中纤维素酶活性，且不同的纤维素
酶对蛋白质和碳水化合物的来源变化敏感性不同。
冯辉［１９］对营养受限羔羊的纤维降解酶活性进行研
究，发现缺乏蛋白质和能量的日粮可显著增强瘤胃
中纤维降解酶的活性。日粮中添加不同的添加剂也
会影响反刍动物瘤胃内纤维降解酶活性。刘大森
等［２０］研究发现，硼砂可增强绵羊瘤胃内纤维素酶活
性。此外，表面活性剂也可提高酶活性，主要是由于
活性剂的疏水结构与微生物细胞膜相互作用，增强
了细胞膜流动性和渗透性，使得胞内酶更容易流向
胞外［２１］。本试验结果发现，日粮中添加苜蓿黄酮会
４７９２
１１期 王梦竹等：苜蓿黄酮对杂交绵羊瘤胃发酵功能和纤维降解酶活性的影响
影响杂交绵羊瘤胃纤维降解酶活性，不同浓度时其
发挥的作用不同，且不同的纤维降解酶对苜蓿黄酮
敏感性有差异，其中０．１％、０．２％苜蓿黄酮组对木
糖酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖酶、纤维素酶活性具
有抑制趋势，而０．４％苜蓿黄酮组则表现出提高的
倾向，这与 Ｏｓｋｏｕｅｉａｎ等［１３］研究结果一致。Ｊｏｈｎ－
ｓｏｎ等［２２］研究了柑橘中的黄酮成分对酶活性的影
响，发现黄酮通过侧基基团与酶活性位点的氨基酸
残基结合，对糖原激酶具有强烈地抑制作用。由于
黄酮具有酚类结构，其苯环上的羟基常与酶活性中
心的金属离子发生螯合作用［２３］，从而抑制酶的活
性。黄酮还可通过疏水基团与酶活性位点周围的疏
水腔结合，与ＮＡＤＰＨ竞争结合位点［２４］。４种酶活
性中，各试验组纤维二糖酶活性相似，表明苜蓿黄酮
对纤维二糖酶活性影响较小。目前，瘤胃纤维素酶
活研究热点主要集中于日粮精粗比、饲料发酵制剂
等，而对植物提取物调节瘤胃发酵功能的报道较少。
如何利用黄酮类化合物等绿色添加剂代替抗生素，
发挥促进动物机体生长发育和提高生产性能作用，
将会成为未来研究的焦点。
４ 小 结
本试验结果表明，日粮中添加苜蓿黄酮可有效
稳定杂交绵羊瘤胃发酵功能，对瘤胃纤维降解酶活
性产生影响，且与剂量有关。综合考虑，建议绵羊日
粮中苜蓿黄酮的适宜添加量为０．４％，但仍需要进
一步的研究以确定苜蓿黄酮的最佳添加量。
参考文献：
［１］ Ｒａｖｖａ Ｓ Ｖ，Ｓａｒｒｅａｌ Ｃ Ｚ，Ｍａｎｄｒｅｌ Ｒ Ｅ．Ａｌｔｅｒｅｄ ｐｒｏｔｏ－
ｚｏａｎ ａｎｄ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ Ｅｓｃｈｅ－
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１５７∶Ｈ７ｉｎ ｍｏｎｅｎｓｉｎ－ｔｒｅａｔｅｄ ｗａｓｔｅｗａｔｅｒ
ｆｒｏｍ ａ ｄａｉｒｙ ｌａｇｏｏｎ［Ｊ］．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，２０１３，８（１）：ｅ５４７８２．
［２］ Ｉｓｈｉｄａ Ｙ，Ｓｈｉｂａｔａ Ｓ．Ｒｅｌａｘｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ
ａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｘ５３７Ａ （Ｌａｓａｌｏｃｉｄ）ｏｎ ｔｈｅ ｔａｅｎｉａ ｏｆ ｔｈｅ
ｇｕｉｎｅａ－ｐｉｇ ｃａｅｃｕｍ［Ｊ］．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，
１９８２，３３３（１）：２９３－３０４．
［３］ Ｋａｗａｋａｍｉ Ｋ，Ｎｉｓｈｉｄａ Ｈ，Ｔａｔｅｗａｋｉ Ｎ，ｅｔ ａｌ．Ｐｅｒｓｉｍ－
ｍｏｎ ｌｅａｆ ｆｌａｖｏｎｏｌｓ ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ ａｎｔｉ－ｃａｎｃｅｒ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ
ｈｅａｖｙ ｉｏｎ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｎ ｍｕｒｉｎｅ ｘｅｎｏｇｒａｆｔ ｔｕｍｏｒｓ［Ｊ］．
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，２０１３，４（７）：１１５０－１１５７．
［４］ Ｂａｄｅｒｓｃｈｎｅｉｄｅｒ Ｂ，Ｗｉｎｔｅｒｈａｌｔｅｒ Ｐ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒ－
ａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｖｅｌ ｂｅｎｚｏａｔｅｓ，ｃｉｎａｒｎａｔｅｓ，ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，
ａｎｄ ｌｉｇｎａｎｓ ｆｒｏｍ ｒｉｅｓｌｉｎｇ ｗｉｎｅ ａｎｄ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ ａｎ－
ｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ
Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００１，４９（６）：２７８８－２７９８．
［５］ Ｈｗａｎｇ Ｊ，Ｈｏｄｉｓ Ｈ Ｎ，Ｓｅｖａｎｉａｎ Ａ．Ｓｏｙ ａｎｄ ａｌｆａｌｆａ
ｐｈｙｔｏｅｓｔｒｏｇｅｎ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｂｅｃｏｍｅ ｐｏｔｅｎｔ ｌｏｗ－ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐ－
ｏｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ａｃｅｒｏｌａ ｃｈｅｒｒｙ
ｅｘｔｒａｃｔ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ－
ｉｓｔｒｙ，２００１，４９（１）：３０８－３１４．
［６］ Ｍａｈｏｍｏｏｄａｌｙ Ｍ Ｆ，Ｇｕｒｉｂ－Ｆａｋｉｍ Ａ，Ｓｕｂｒａｔｔｙ Ａ Ｈ．
Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ａｎｄ ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｏｆｉｌｅｓ ｏｆ
ｅｎｄｅｍｉｃ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔｓ ｏｆ ｍａｕｒｉｔｉｕｓ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａ－
ｃｅｕｔｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００５，４３（３）：２３７－２４２．
［７］ 高清萍，李俊立．血清低密度脂蛋白胆固醇水平的影
响因素 分 析 ［Ｊ］．实 用 医 技 杂 志，２００８，１５（２３）：
３０３９－３０４０．
［８］ 谭仁祥．植物成分分析［Ｍ］．北京：科学出版社，２００４．
［９］ Ｂａｌｃｅｌｓ Ｊ，Ａｒｉｓ Ａ，Ｓｅｒｒａｎｏ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｎ ｅｘ－
ｔｒａｃｔ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ（Ｂｉｏｆｌａｖｅｘ）ｏｎ ｒｕｍｅｎ ｆｅｒ－
ｍｅｎｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｉｎ ｈｅｉｆｅｒｓ ｆｅｄ ｈｉｇｈ－ｃｏｎｃｅｎ－
ｔｒａｔｅ ｄｉｅｔｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０１２，
９０（１３）：４９７５－４９８４．
［１０］ 董晓宁，赵海福，赵 强，等．航天紫花苜蓿中黄酮的
提取及抑菌活性［Ｊ］．草业科学，２０１４，４：７７１－７７５．
［１１］ Ｋｉｍ Ｅ Ｔ，Ｇｕａｎ Ｌｅ Ｌ，Ｌｅｅ Ｓ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｆｌａ－
ｖｏｎｏｉｄ－ｒｉｃｈ ｐｌａｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｒｕｍｉｎａｌ ｍｅｔｈａ－
ｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ［Ｊ］．Ａｓｉａｎ－Ａｕｓｔｒａｌａｓｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１５，２８（４）：５３０－５３７．
［１２］ 冯宗慈，高 民．通过比色测定瘤胃液氨氮含量方法
的改进［Ｊ］．畜牧与饲料科学，２０１０，３１（６－７）：３７．
［１３］ Ｏｓｋｏｕｅｉａｎ Ｅ，Ａｂｄｕｌａｈ Ｎ，Ｏｓｋｏｕｅｉａｎ Ａ．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ
ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｏｎ ｒｕｍｅｎ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｍｅｔｈａｎｅ
ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ａｎｄ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏｍｅｄ Ｒｅ－
ｓｅａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２０１３，２０１３：３４９１２９．
［１４］ Ａｎｄｒｏｕｔｓｏｐｏｕｌｏｓ Ｖ Ｐ，Ｐａｐａｋｙｒｉａｋｏｕ Ａ，Ｖｏｕｒｌｏｕｍｉｓ Ｄ，
ｅｔ ａｌ．Ｄｉｅｔａｒｙ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ ａｎｄ ｐｒｅｖｅｎ－
ｔｉｏｎ：Ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０
ＣＹＰ１ｅｎｚｙｍｅｓ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２０１０，
１２６（１）：９－２０．
［１５］ Ｌｏｗｒｙ Ｊ Ｂ，Ｋｅｎｎｅｄｙ Ｐ Ｍ．Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｌｓ
ｂｙ ｒｕｍｅｎ ｏｒｇａｎｉｓｍｓ［Ｊ］．Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ａｎｉ－
ｍａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，１９９６，２１：３６６．
５７９２
中 国 畜 牧 兽 医 ４２卷
［１６］ Ｄａｙ Ａ Ｊ，Ｃａňａｄａ Ｆ Ｊ，Ｄíａｚ Ｊ Ｃ，ｅｔ ａｌ．Ｄｉｅｔａｒｙ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ
ａｎｄ ｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ａｒｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｌａｃ－
ｔａｓｅ ｓｉｔｅ ｏｆ ｌａｃｔａｓｅ ｐｈｌｏｒｉｚｉｎ ｈｙｄｒｏｌａｓｅ［Ｊ］．ＦＥＢＳ Ｌｅｔ－
ｔｅｒｓ，２０００，４６８（２）：１６６－１７０．
［１７］ 孙宏选．不同来源的蛋白质和非结构性碳水化合物对
泌乳奶牛瘤胃微生物酶活性的影响［Ｄ］．北京：中国
农业科学院，２００６．
［１８］ 孙亚波，边 革，刘玉英，等．饲喂不同种类粗饲料的
辽宁绒山羊瘤胃酶活性及气体组成的研究［Ｊ］．现代
畜牧兽医，２０１３，５：３０－３３．
［１９］ 冯 辉．日粮营养限制及补偿对蒙古羔羊瘤胃内环境
及细菌多样性的影响［Ｄ］．呼和浩特：内蒙古农业大
学，２０１２．
［２０］ 刘大森，单安山，张 鹏．硼砂对绵羊瘤胃微生物数
量、酶活性及血液生化指标的影响［Ｊ］．东北农业大学
学报，２００４，５：５８４－５８９．
［２１］ 丛智慧，谭支良．非离子表面活性剂对反刍动物瘤胃
发酵及生产性能的影响研究进展［Ｊ］．华北农学报，
２００７，Ｓ１：２１８－２２２．
［２２］ Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｊ Ｌ，Ｒｕｐａｓｉｎｇｈｅ Ｓ Ｇ，Ｓｔｅｆａｎｉ Ｆ，ｅｔ ａｌ．Ｃｉｔｒｕｓ
ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｌｕｔｅｏｌｉｎ，ａｐｉｇｅｎｉｎ，ａｎｄ ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔ ｇｌｙ－
ｃｏｇｅｎ ｓｙｎｔｈａｓｅ ｋｉｎａｓｅ－３βｅｎｚｙｍａｔｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ｌｏｗｅｒｉｎｇ
ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｅｎｅｒｇｙ ｗｉｔｈｉｎ ｔｈｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｃａｖｉｔｙ［Ｊ］．Ｊｏｕｒ－
ｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｆｏｏｄ，２０１１，１４（４）：３２５－３３３．
［２３］ Ｍｉｓｈｒａ Ａ，Ｓｈａｒｍａ Ａ Ｋ，Ｋｕｍａｒ Ｓ，ｅｔ ａｌ．Ｂａｕｈｉｎｉａ
ｖａｒｉｅｇａｔａｌｅａｆ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｅｘｈｉｂｉｔ ｃｏｎｓｉｄｅｒａｂｌｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅ－
ｒｉａｌ，ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ，ａｎｄ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｍｅｄ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２０１３，２０１３：９１５４３６．
［２４］ Ｔｒｉｔｓｃｈ Ｄ，ＺｉｎｇｌéＣ，Ｒｏｈｍｅｒ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ：
Ｔｒｕｅ ｏｒ ｐｒｏｍｉｓｃｕｏｕｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ？Ｔｈｅ ｃａｓｅ
ｏｆ ｄｅｏｘｙｘｙｌｕｌｏｓｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｒｅｄｕｃｔｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ［Ｊ］．
Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１５，５９：１４０－１４４．
（责任编辑 武江利）
６７９２