免费文献传递   相关文献

望江南子的生药学研究



全 文 :中 药
望江南子的生药学研究
*
韩文雯,李天祥
(中国人民解放军第二五四医院,天津 300142)
摘 要 目的:系统地研究望江南子生药学方面的内容,为今后的开发和研究提供生药方面的鉴定依据。方法:通过
性状鉴定、显微鉴定和理化鉴定开展望江南子的生药学研究。结果:描述了望江南子的性状特征,对其粉末及横切片进行
显微鉴定,并绘出微观结构及种子的横切面组织构造。结论:通过理化鉴定验证种子中的成分,初步建立了望江南子鉴别
方法。并为进一步制定其质量标准提供了资料。
关键词 望江南子,显微鉴别,理化鉴别
中图分类号:R282 文献标识码:A 文章编号:1006-5687(2011)03-0049-03
Pharmacognosy research on the Seed of Cassia Occidentalis L
Han Wenwen,Li Tianxiang
(No. 254 Hospital of PLA,Tianjin 300142)
ABSTRACT Objective:to study the pharmacognostic character of Senmen Occidentalis systematically. In order to the drug devel-
opment and research aspects of identification In future. Methods:the Senmen Occidentalis were observed by macroscopic identifica-
tion,microscopic identificationand physicochemical identification. Results:The characters of Semen Occidentalis were described
comprehensively;the microscopic features of the powder and the transverse sections were depicted by both microstructures and
structure of transections. Conclusion:It was verified the constituents by physicochemical identification. the identification method of
Senmen Occidentalis was established.
KEY WORDS Senmen Occidentalis,microscopic identification,physicochemical identification
望江南子为豆科植物望江南(cassia occidentalis L)
的干燥种子,又名野扁豆、喉白草、羊角豆[1],主治目赤
肿痛、头晕头胀、消化不良、胃痛、腹痛、痢疾、便秘
等[2]。望江南子蒽醌类成分功效主要表现在致泻和通
便的作用,而其苷元主要表现在清肝明目作用,其毒性
成分主要为毒性蛋白。由于望江南子的中毒案例逐渐
增多,应加强对望江南子中毒原理的研究。在临床上
望江南子易与决明子混淆,这是导致中毒的关键原因。
本实验可为以后研究望江南子提供了生药学上面依
据,提高生理活性和药理活性研究。
1 实验材料与仪器
1. 1 药材 望江南子来源于本院标本馆,经李天祥老
师鉴定。
1. 2 实验仪器和试剂 显微镜(OLYMPUS BX51)、滑
走切片机(MICROTOME)、Olympus CX41 显微摄像仪
(奥林巴斯株式会社)、电热恒温干燥箱(天津市华北
实验仪器有限公司制造)、XMTB 数显调节恒温水浴锅
(北京长风仪器仪表公司)、KQ -300DV型数控超声波
清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、ZF - 20D 暗箱式
紫外分析仪(上海顾村仪器厂)。石蜡、乙醇、二甲苯、
1%番红乙醇溶液、0. 1%固绿乙醇溶液、乙醚、醋酸镁、
1 ﹪对亚硝基二甲苯胺吡啶。
2 实验方法
2. 1 望江南子显微镜观察的石蜡切片制做程序 软
化→取材→固定→冲洗→脱水→透明→透蜡→包埋→
切片→贴片→脱蜡→染色→透明→封藏。
2. 1. 1 软化 用煮沸冷却法使药材(望江南子)细胞
内充满水分,煮沸时间不宜过长否则会涨破种皮。再
放入 18%氨水中浸泡过夜。
2. 1. 2 取材和样品分割 选取饱满、完整望江南子,
手工切割。
2. 1. 3 固定 用 50%乙醇、冰醋酸、福尔马林(9 ∶
05∶ 05) ,配成 FAA和甘油乙醇(1∶ 1)两种固定液,实
验证明望江南子更适用于甘油乙醇固定。为了更好地
保存和处理材料,固定时间为 24 h。
2. 1. 4 冲洗 将材料从甘油乙醇固定液中取出后用
滤纸吸干表面残存的液体,置于 10 倍于材料的 50%乙
醇中浸泡 12 h,中途更换乙醇一次,共冲洗两次。
94天津药学 Tianjin Pharmacy 2011 年 第 23 卷第 3 期
* 收稿日期:2011-04-11
2. 1. 5 脱水 冲洗后用 70% ~ 100%的梯度乙醇脱
水,具体操作如下:70%乙醇 →
6 h
85%乙醇 →
过夜
95%乙
醇 →
6 h
无水乙醇 →
1 h
无水乙醇。
2. 1. 6 透明 脱水后按以下步骤透明:无水乙醇 -二
甲苯(2∶ 1) →
1 h
无水乙醇 -二甲苯(1∶ 1) →
1 h
无水
乙醇 -二甲苯(1∶ 2) →
1 h
二甲苯 →
1 h
二甲苯。
2. 1. 7 透蜡 脱水后按以下步骤透蜡:石蜡 -二甲苯
(1∶ 10) →
2 h
石蜡 -二甲苯(1∶ 5) →
2 h
石蜡 -二甲苯
(1∶ 4) →
2 h
石蜡 -二甲苯(1∶ 2) →
2 h
石蜡 -二甲苯
(1∶ 1)。
将已透入石蜡的材料置入蜡杯,并和另外 4 个盛
有新鲜石蜡的蜡杯同时放入 60 ~ 62 ℃恒温箱。待石
蜡熔化后,将材料依次在每个石蜡杯中放置 3 h,即可
常规包埋、切片和贴片。
2. 1. 8 染色 贴片后采用番红 -固绿染色,步骤如
下:二甲苯中脱蜡 →
10 ~ 20 min
无水乙醇 →
3 ~ 5 min
95%乙
醇 →
3 ~ 5 min
85%乙醇 →
3 ~ 5 min
70%乙醇 →
3 ~ 5 min
50%
乙醇 →
3 ~ 5 min
1%番红乙醇溶液(溶解于 50% 乙醇)
→
40 ~ 60 min
70%乙醇 →
3 ~ 5 min
85%乙醇 →
3 ~ 5 min
0. 1%
固绿乙醇溶液(溶解于 95%乙醇) →
20 ~ 40 min
无水乙醇
→
3 ~ 5 min
无水乙醇 -二甲苯(1∶ 1) →
5 min
二甲苯 →
5 min

甲苯 → 封藏。
2. 2 望江南子的性状及其粉末显微鉴别 本实验对
望江南子进行了性状和粉末显微鉴定。通过体视镜观
察其性状特征,并在显微镜下观察其粉末显微特征,其
中包括水合氯醛制片和稀甘油制片。
2. 3 理化鉴别特征 据报道望江南子中含大黄素甲
醚的匀二蒽酮、大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素等多种蒽
醌类化合物及多种脂肪酸、挥发油等[3]。本实验对望
江南子中的蒽醌类物质进行了验证。
3 结果
3. 1 性状特征 望江南子呈扁平状,一端略长,长
3. 5 ~ 4. 5 mm,宽 2. 5 ~ 3. 5 mm厚 1. 0 ~ 1. 5 mm;表面
灰绿色或灰棕色,两平面中央有类椭圆型凹斑;质坚
硬,不易破碎,无臭,味淡。
3. 2 横切显微镜下形态 望江南子种皮外层为一列
表皮细胞,呈栅栏状,壁不均匀加厚,长 65 ~ 70 μm,宽
3 ~ 5 μm,在栅状细胞下方 1 /3 处有一条光辉带。栅状
细胞散开时光辉带有时不显现,栅状细胞表面观为多
角形,种皮外披较厚的角质层,平滑、透明。栅状细胞
下为一列支持细胞,略呈哑铃状,长 25 ~ 28 μm,最宽
处直径为 19 ~ 30 μm,表面观呈类多角形,可见上下两
层同心圆。下层为 4 ~ 6 层营养层细胞,呈扁平状,长 9
~ 12 μm,最宽处直径为 100 ~ 108 μm。最内层为内种
皮,细胞略小,排列整齐。子叶为单面叶,上下表皮为
排列较整齐的薄壁细胞,栅栏组织为两层圆柱状细胞
(有时可见第三层) ,较下层细胞略短,第一层栅状细
胞长 35 ~ 40 μm,宽 8 ~ 10 μm,第二层栅状细胞长 23
~ 28 μm,宽 8 ~ 10 μm,海绵组织细胞类圆形,子叶含
油滴。见图 1 - 3。
图 1 望江南子种皮横切显微镜下观察
图 2 望江南子子叶横切显微镜下观察
图 3 望江南子横切显微镜下观察
3. 3 粉末显微观察结果 望江南子粉末呈黄棕色或
黄绿色。①种皮栅状细胞:细胞排列多成片,无色或淡
黄色,呈长方形,排列稍不整齐,胞腔明显,位于细胞
1 /3 处的光辉带有的可见有的不可见,表面观多成类
多边形,壁较厚,有时可见细胞被较厚的角质层。②种
皮支持细胞:无色或黄棕色,侧面(断面)观多呈哑铃
状,通常两端较膨大,外壁和内壁稍后,表面观呈类圆
形(可见两个同心圆)。③角质层碎片:厚 10 ~ 19 μm,
多透明,光亮。④内胚乳细胞:细胞壁黏液质化,胞腔
内含黄棕色物质。⑤子叶碎片:栅栏组织长圆柱状,海
05 天津药学 Tianjin Pharmacy 2011 年 第 23 卷第 3 期
绵细胞类圆形。见图 4。
A1、A2栅状细胞表面观 B1、B2栅状细胞顶面观 C角质层
D支持细胞 E支持细胞顶面观 F1F2子叶薄壁细胞 G内胚乳细胞
图 4 粉末显微特征
3. 4 理化鉴别结果 称取望江南子粉末 1 g,放在锥
形瓶中,加入 70%乙醇 100 ml,超声提取 30 min,过滤,
以供显色试验。
3. 4. 1 Feigl反应 醌类衍生物在碱性条件下经加热
能迅速与醛类及林二硝基苯反应生成紫色化合物。取
样品溶液,加入 25%碳酸钠水溶液、4%甲醛及 5%邻
二硝基苯的苯溶液 1 d,水浴加热 1 ~ 4 min,颜色逐渐
加深,最后呈紫色。验证可能含有蒽醌类化合物。
3. 4. 2 Borntrager反应 羟基醌类在碱性溶液中发生
颜色变化,多呈橙、红、紫红及蓝色。取少量粉末,加
10%硫酸水溶液 5 ml,置水浴锅上加热 2 ~ 10 min趁热
过滤,滤液冷却后加乙醚 2 ml 振摇,静置后分取乙醚
层,加入 5%氢氧化钠水溶液 1 ml 振摇。加入碱后水
层变为红色,醚层有黄色变为无色。验证可能含有蒽
醌类化合物。
3. 4. 3 与金属离子的反应 在蒽醌类化合物中,如有
ɑ -酚羟基或邻二酚羟基结构时,则可以与 Pb2 +、Mg2
+等金属离子形成有颜色的络合物。取样品溶液 2
ml,加入醋酸镁后颜色变红,验证可能含有 ɑ -酚羟基
或邻二酚羟基结构。
3. 4. 4 三氯化铁反应 取样品溶液 1 ml 于试管中。
加入三氯化铁溶液数滴,液变为蓝黑色。验证种子中
可能还有鞣质。
参考文献
1 中国科学院植物研究所主编. 中国高等植物图鉴(第二册).北京:科
学出版社,1972:339
2 王强,杨竟雄. 望江南子中蒽醌类化合物的含量测定. 福建药学杂
志,1990 ,2(3) :1
3 刘娟,邹纯才,孙佐富.决明子及其代替品望江南子的比较鉴定.黑龙
江医药科学. 2006. 29(2) :
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
63
(上接第 6 页)
3 讨论
AD作为老年人痴呆的一种特殊类型越来越受到
人们的关注。祖国医学认为,肾与脑紧密相关,肾虚是
衰老的基础,是许多老年性疾病发生的主要原因,若肾
亏髓枯,脑失所养,则出现记忆、智能、精神等方面的障
碍,进而影响全身的生理功能。针对 AD肾精不足,气
血亏虚,痰凝血瘀的病机,根据中医基本理论,经科学
组方,提出了滋肾方。
本实验采用 D -半乳糖所致亚急性衰老合并鹅膏
蕈氨酸化学损毁 Meynert 核所致复合痴呆动物模型,
观察和分析滋肾方对大鼠学习记忆能力的影响。
结果表明:造模后大鼠的学习成绩与记忆成绩均
低于造模前,给予滋肾方煎剂灌胃治疗 20 d 后,行为
学测试数据表明,中药滋肾方可明显改善痴呆大鼠的
学习和记忆障碍,学习和记忆成绩明显提高,与治疗前
比较差别有显著性,具有统计学意义(P < 0. 01)。
中药滋肾方作为一种新的治疗手段,其具有更为
广阔的发展前景。
参考文献
1 David M A Mann,田金洲,时晶,等.阿尔茨海默病患者脑淀粉样血
管病变.中华老年医学杂志,2003,22(11) :708
2 Cacabelos R. The application of functional genomics to Alzheimer’s
disease. Pharmcaogenomics,2003,4(5) :597
3 何明大,刘运林.脑灵汤对阿尔茨海默病模型鼠调亡调控基因的影
响.中国现代医学杂志,2005,15(22) :3398
4 Paxinos G,Watson C. The rat brain in stereotaxic coordinates. Sydney:
Academic Press,1988:17
5 马涤辉,刘晓亮,张昱,等.实验性 Alzheimer模型鼠脑组织 5 -羟色
胺含量改变的研究.中风与神经疾病杂志,1996,13(3) :150
6 李亚明,张春燕,林水淼. 调心方对 D -半乳糖合鹅膏蕈氨酸致痴
呆大鼠学习记忆、脑磷酸化 tau 蛋白水平的影响. 黑龙江中医药,
2000,3:52.
7 李仪奎主编.中药药理实验.上海:上海科学技术出版社,1991:36,
171
8 皮明钧,刘莺,陈力,等.加味温胆汤对亚急性衰老大鼠血 GSH - Px
及肝、脑 MAO、LPF的影响.中国中医基础医学杂志,1999,5(2) :14
9 尹兆宝,王健,杨新平,等. D -半乳糖诱导拟衰老动物模型的记忆
行为改变.中国老年学杂志,2000,20(1) ,33
10 徐叔云,卞如濂,陈修主编. 药理实验方法学. 北京:人民卫生出版
社,2002:179 - 181,202 - 204,769 - 772,826
11 任汝静,陈生弟.阿尔茨海默病的治疗现状和展望. 中国现代神经
病学杂志,2005,5(3) :147
15天津药学 Tianjin Pharmacy 2011 年 第 23 卷第 3 期