全 文 ：[收稿日期 ] 2008-12-18
[基金项目 ] 海南自然科学基金资助项目(批准号 30628)
[作者简介 ] 姜月霞(1977-),女 ,山东烟台人,讲师 ,硕士。
青牛胆急性毒性实验性研究
姜月霞 ,张俊清 ,刘明生
(海南医学院药学系 ,海南 海口　571101)
　　[摘要 ] 目的:采用海南青牛胆茎提取物 ,通过对小鼠急性毒性实验及安全性研究 ,作出初步评价 。方
法:取 KM小鼠 50只 ,雌 、雄各半 , 10只做预试验 ,另 40只按同性别随机分为雌 、雄空白对照组(蒸馏水
组)和药物组 ,每组各 20只 。对小鼠空腹经口灌胃给予青牛胆提取物分别为人临床用量的 200倍 、400
倍和 600倍剂量 ,观察小鼠出现的毒性反应及有无死亡 。结果:观察 7 d,未见小鼠死亡 ,所有受试小鼠
毛色光洁 ,活动 、饮食和二便正常 ,两组经 t检验 ,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:海南青牛胆未
见有明显毒性反应 ,表明本品安全性较高 。
[关键词 ] 青牛胆;提取物;急性毒性实验;海南省
[中图分类号 ] R285.5　[文献标识码 ] A　[文章编号 ] 1007-1237(2009)04-0306-02
ExperimentalstudyonacutetoxicitytestofTinosporahainanensis
JIANG　Yue-xia, ZHANG　Jun-qing, LIU　Ming-sheng
(DepartmentofPharmacology, HainanMedicalColege　Haikou571101, China)
[ ABSTRACT] Objective:Toevaluatethesafetyoftinosporahainanensis.Methods:200, 400 and600
timesofclinicaldosageoftinosporahainanensisextractionwereadministeredtoratsbyintragastricadministration.
Acutetoxicityreactionsanddeathwererecorded.Results:During7 daysofadministration, alratsate, anddis-
chargednormaly, keptnormalfigureandmovement.Nodeathwasobserved.Thereisnosignificantdiferencebe-
tweenthedispersingliverandimprovingeye-sightandthedistiledwatergroup(P>0.05).Conclusion:Noob-
vioustoxicityreactionswereobservedandtinosporahainanensisispretysafe.
[ KEYWORDS] Tinosporahainanensis;Extraction;Acutetoxicitytest;HainanProvince
　　海南青牛胆 (TinosporahainanensisH.S.Loet
Z.X.Li)系防己科青牛胆属植物 ,为海南特有种 [ 1] ,
在民间广泛用以治疗关节疼痛和筋骨损伤 。具有镇
痛 、松筋 、抗炎和抗菌的功效[ 2] 。近年来海南青牛
胆药效物质的研究已取得重大进展。通过经典柱色
谱的分离 ,结合体外细胞学实验研究 ,确定了该复方
有效部位为植物总甾酮类化合物 ,既可显著地抑制
钙的流失和促进成骨细胞的形成 ,亦可改善因钙流
失或成骨细胞合成受阻而造成的骨质疏松[ 3] 。为
进一步挖掘海南青牛胆的药用价值 ,确保其安全性 ,
根据中药临床前毒理学评价的指导原则 ,笔者对海
南青牛胆提物进行了急性毒性试验研究 , 为开发利
用海南青牛胆资源提供了科学根据 。
1　材料与方法
1.1　实验材料
1.1.1　药物来源 　实验用药为醇提海南青牛胆 。
以 95%乙醇回流 3次 ,合并提取液后浓缩 ,产率为
20.13%。
1.1.2　动物　KM小鼠 50只 ,体重 18～ 22 g,雌雄
各半 ,由长沙市开福区中创实验动物科技服务部提
供。湖南省实验动物质量合格证第 002478号。
1.2　方法
306
　海南医学院学报　 2009, 15(4)JournalofHainanMedicalColege
DOI :10.13210/j .cnk i.jhmu.2009.04.008
1.2.1　预实验剂量确定　为探讨其急性毒性 ,在
预试灌胃测不出 LD50的情况下 ,进行了小鼠最大耐
受试验最低剂量组定为 6 g/kg,用 10只小鼠(雌雄
各半)做预试 ,经观察后 ,小鼠无一例死亡 ,也未出
现任何中毒现象 。故此剂量为安全剂量 ,经计算可
得 ,此剂量为成人日用量的 100倍。将最大浓度溶
液(能够用灌胃针头注射为标准)的浓度定为最高
剂量组 36g/kg。
1.2.2　急性毒性实验　取 KM小鼠 40只 ,雌雄各
半 ,随机分成空白组与药物组(按同性别分组), 采
用空腹经口灌胃给药 ,各组药物浓度不同 , 灌胃体
积相同 , 均为每只给药 0.5 mL, 一次性给药 ,灌胃
前禁食 12h, 但不禁水。蒸馏水作为空白对照 。每
日 3次给药 ,间隔 8h,然后观察小鼠的死亡 、中毒及
活动情况 ,并记录小鼠的体重 、饮食变化。连续观察
1周。
1.2.3　观察指标　给药后密切观察 12 h,并详细
记录观察结果 ,以后每天上午 8～ 9时及下午 3 ～ 4
时各观察1 h, 并记录观察结果 ,对其中死亡的动物
立即进行尸体解剖检查。连续观察 7 d,神经系统方
面:(1)行为及反应(包括不正常叫声 、烦躁 、不安
等);(2)运动(包括肌肉抽搐 、僵硬 、强迫运动等);
(3)瞳孔及分泌物(瞳孔有无缩小或放大 、流泪等);
(4)呼吸及心血管:呼吸急促或过缓 、鼻分泌 、触心前
区心率快慢等;(5)胃肠方面:腹部胀气或收缩 、大便
坚硬或湿等;(6)泌尿生殖系统:阴唇 、乳腺肿胀 、会阴
部肮脏;(7)皮肤和毛:颜色 、完整性 、有否充血 、发疹
等;(8)眼:眼睑下垂 、眼球突出 、震颤等。每天称食
量。
1.3　统计学处理
数据的比较采用 t检验 ,检验水准 α=0.05。
2　结果
给药后 ,连续观察 7 d,小鼠无出现死亡情况 。
其中前 2 d大便略稀 ,活动较弱 ,以后恢复正常 。其
他未出现明显的中毒现象。处死后解剖观察其心 、
肝 、脾 、肺 、肾 ,均无特殊改变。我们记录了小鼠每天
的饮食和体重的变化情况 ,具体数据见图 1、2、3和
表 1。
经检验 ,雄性 、雌性小鼠体重空白组与给药组差
异均无统计学意义(P>0.05),小鼠的体重和饮食
均增长 ,可见此药对小鼠并无明显的毒副作用 。由
实验可知 ,海南青牛胆以最大给药量给药 ,小鼠不出
现死亡和明显的中毒情况 ,此时 ,小鼠的日用剂量为
36 g/kg,相当于生药 180 g/kg,为临床成人日用剂
量 600倍以上 ,故海南青牛胆的安全性较高。
表 1　最大给药量(MTD)测定
剂量
(g/kg)
动物数
♀ ♂
死亡率
(%)
MTD值测定
(g/kg)
12.0 5 5 0 36.0
24.0 5 5 0
36.0 5 5 0
图 1　不同给药剂量 10d后雄鼠体重变化
图 2　不同给药剂量 10d后雌鼠体重变化
图 3　小鼠饮食变化
3　结论
对海南青牛胆所进行的急性毒性实验表明 ,该
药的毒性作用极小 。用LD50已不能测出其毒性 ,故
(下转第 310页)
307姜月霞 ,等.青牛胆急性毒性实验性研究　
溶液呈透明红色 ,发生溶血现象 。其余各管溶液的
上层液体均无色澄明 ,试管底部可见红细胞全部下
沉 ,将试管振摇能使下沉的红细胞均匀分散 。结果
表明 ,注射用头孢呋辛钠各试管均无溶血现象 ,也
未发生红细胞凝集 ,试验结果符合规定。
3　讨论
头孢呋辛是第二代头孢菌素 ,具有抗菌谱广 、
对多种 β -内酰胺酶稳定 、疗效好 、不良反应低的优
点 [ 3] 。头孢呋辛对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌
均具有良好的抗菌活性 ,对厌氧菌也有一定作用 。
对敏感菌所致的呼吸道感染 、泌尿道感染 、胆道感
染 、败血症以及其他组织器官的感染等疗效较好 。
如头孢呋辛能显著降低白内障外科术后发生眼内
炎的危险性 [ 4] ,常被推荐作为心胸外科手术后手术
部位感染的抗生素预防用药[ 5] 。
本研究通过全身过敏性试验 、血管刺激试验 、
肌肉刺激试验和溶血性试验对注射用头孢呋辛钠
进行了安全性考察 。结果表明注射用头孢呋辛钠
对豚鼠无全身过敏反应 ,静脉 、肌内注射对血管 、肌
肉不产生刺激反应 ,也不具有溶血作用 ,提示注射
用头孢呋辛钠符合注射剂安全用药要求。
尽管头孢呋辛临床用药疗效确切 、不良反应少
而轻[ 3, 6] 、有良好的安全性 [ 4, 5] 、价格低廉 [ 5] ,易被患
者接受 。但是 ,在临床用药过程中仍然要注意避免
头孢呋辛的大剂量给药[ 7] ,以防止出现二重感染 ,
如艰难梭状芽胞杆菌所致的伪膜性肠炎 ,并防止细
菌耐药性的产生 。
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(责任编辑　崔蓉)
(上接第 307页)
只能以最大给药量代之 。最大给药量的耐受倍数
反映了该药的安全性 ,本药的最大给药量的耐受倍
数相当于临床拟用日剂量的 600倍以上 ,表明其毒
副作用已相当微弱 ,从毒副作用的角度来看 ,该药
是安全的 ,为临床的安全使用提供了科学依据 。
参考文献
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(责任编辑　崔蓉)
310 　海南医学院学报 Vol.15No.4Apr.2009