全 文 ：野生保护抚育杠板归药材的品质评价研究
田莉1，3，陈华国1，4，周欣1，4* ，谭济苍2，薛静2
(1. 贵州师范大学 天然药物质量控制研究中心，贵州 贵阳 550001;
2. 贵州远程制药有限责任公司，贵州 贵阳 550002;
3. 贵州师范大学 化学与材料科学学院，贵州 贵阳 550001;
4. 贵州省山地环境信息系统与生态环境保护重点实验室，贵州 贵阳 550001)
［摘要］ 目的:采用 HPLC测定不同年份贵州省野生护育杠板归药材的指纹图谱，期望能够有效地评价其质量，为杠板
归药材的 GAP种植提供科学的依据。方法:色谱柱 Lichrospher C18(4. 6 mm × 250 mm，5 μm)柱，流速 1 mL·min
－1，检测波长
为 340 nm，以乙腈-0. 2%醋酸溶液为流动相梯度洗脱。结果:2011 年所测产地的杠板归药材比 2010 年的药材更趋于一致，品
质更好;其中大方县的药材在这 2 年内是最稳定的，贵定县样品 GBG-(GD)002 和龙里县样品 GBG-(LL)003 来源地种植的杠
板归药材相对其他来源地品质更稳定，基地生产更成熟。结论:建立 HPLC指纹图谱的方法来评价各产地杠板归药材的质量
与稳定性是可行的，能够从整体上全面而有效地评价杠板归药材的质量，为杠板归药材的 GAP种植提供一定的科学依据。
［关键词］ 野生抚育;杠板归;指纹图谱;品质评价
［稿件编号］ 20111228004
［基金项目］ 国家自然科学基金项目(81060340) ;国家科技支撑
计划项目(2009BAI74B02-4) ;贵州省科技创新人才团队建设项目
［黔科合人才团队(2011)4008］;贵阳市科学技术计划项目( ［2010］
筑科计合同字第 3-重-1 号，［2010］筑科成合同字第 1-创 27 号) ;贵
阳市科技计划大学生科技创业项目( ［2011］09) ;贵州省中药现代
化科技产业研究开发专项项目(黔科合社字［2009］5019 号)
［通信作者］ * 周欣，教授，博士，Tel: (0851 )6702167，E-mail:al-
ice9800@ sina. com
［作者简介］ 田莉，硕士研究生，Tel:15286046582，E-mail:tian-
li889900@ 163. com
杠板归为蓼科植物杠板归 Polygonum perfolia-
tum L. 干燥地上部分，其疗效确切，全株可入药，具
有抗炎抑菌、止咳、抗病毒及抗癌作用［1-4］，对带状疱
疹和烧伤有明显的疗效［5-6］，收载于《中国药典》
(2010 年版)［7］。在《中国药典》中，是以咖啡酸为
对照进行薄层色谱鉴别、槲皮素为对照进行 HPLC
定量，用其控制杠板归药材的质量，不能客观、准确
地评价杠板归的品质，其质量控制研究方面的薄弱，
会严重制约杠板归药材及其相关制剂的深度开发利
用，会制约杠板归药材的保护抚育研究和相关品种
退化问题;为了更好地评价杠板归药材的品质，就需
要建立一种科学合理的质量评价模式。
中药指纹图谱能够全面、综合地反映中药内在
化学成分的相对关系，较好地体现中药成分的复杂
性和相关性，进而反映中药的品质。所以，本文利用
HPLC指纹图谱方法对贵州省杠板归生产基地 2 年
的药材进行质量评价分析，为药材质量标准建立及
GAP种植提供了参考依据，为其深度开发利用也提
供一定的科学依据。
1 材料
1. 1 仪器与试剂
Agilent-1100 高效液相色谱仪(美国 Agilent 公
司) ;AL-204 电子天平(梅特勒一托利多仪器，上海
有限公司)。乙醇、甲醇、冰醋酸均为分析纯(国药
集团化学试剂有限公司) ;乙腈为高效液相级(TE-
DIA，美国) ;乐百氏纯净水。对照品槲皮素-3-O-β-
D-葡萄糖醛酸由课题组成员分离纯化得到，经 IR，
ESI-MS，1H-NMR 及13 C-NMR 图谱数据确定其为槲
皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸。
1. 2 药材来源
30 批杠板归药材，采自贵州修文、贵州贵定、贵
州龙里、贵州毕节、贵州大方及贵阳水田镇，样品来
源见表 1(药材 1-15 号采于 2010 年，16-30 号药材采
于 2011 年)。
2 方法与结果
2. 1 供试品溶液的制备
取不同批次本品粉末各约 1 g，精密称定，置于
150 mL具塞锥形瓶中，加入 70%乙醇 80 mL，置于
80 ℃水浴中加热回流 3 h，冷却，滤过，取续滤液，水
浴挥干，浸膏用甲醇定容至 25 mL 量瓶中，用
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表 1 杠板归样品来源
Table 1 The collected regions of Polygonum perfoliatum samples
No. 样品编号 药材来源 No. 样品编号 药材来源
1 GBG-(DF)001 贵州大方 16 GBG-(DF)001 贵州大方
2 GBG-(DF)002 贵州大方 17 GBG-(DF)002 贵州大方
3 GBG-(QX)002 贵州黔西 18 GBG-(QX)002 贵州黔西
4 GBG-(QX)004 贵州黔西 19 GBG-(QX)004 贵州黔西
5 GBG-(DP)001 贵州毕节地区 20 GBG-(DP)001 贵州毕节地区
6 GBG-(BJ)001 贵州毕节地区 21 GBG-(BJ)001 贵州毕节地区
7 GBG-(BJ)002 贵州毕节地区 22 GBG-(BJ)002 贵州毕节地区
8 GBG-(ST)001 贵州贵阳 23 GBG-(ST)001 贵州贵阳
9 GBG-(ST)002 贵州贵阳 24 GBG-(ST)002 贵州贵阳
10 GBG-(GD)001 贵州贵定 25 GBG-(GD)001 贵州贵定
11 GBG-(GD)002 贵州贵定 26 GBG-(GD)002 贵州贵定
12 GBG-(XW)001 贵州修文 27 GBG-(XW)001 贵州修文
13 GBG-(XF)001 贵州熄峰 28 GBG-(XF)001 贵州熄峰
14 GBG-(LL)002 贵州龙里 29 GBG-(LL)002 贵州龙里
15 GBG-(LL)003 贵州龙里 30 GBG-(LL)003 贵州龙里
0. 45 μm滤膜滤过，取续滤液，即得。
2. 2 对照品溶液的制备
分别精密称取槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸对照
品适量，置于 10 mL 量瓶中，分别加入甲醇定容，即
得对照品溶液。
2. 3 色谱条件
Lichrospher C18色谱柱(4. 6 mm × 250 mm，5
μm)柱，流速 1mL · min －1，检测波长 340 nm，柱温
30 ℃。流动相为梯度洗脱程序，以乙腈(B)-0. 2%
醋酸溶液为流动相，具体如下 0 ～ 10 min，10% ～
15% B;10 ～ 40 min，15% ～ 25% B;40 ～ 55 min，
25% ～35% B;55 ～ 75 min，35% ～ 50% B;75 ～ 76
min，50% ～90% B;76 ～ 85 min，90% B。
3 结果与讨论
3. 1 药材指纹图谱测定及色谱峰的指认
取 30 批杠板归药材及对照品，按 2. 1 项下
方法制备供试品液和 2. 2 项下方法制备对照品
溶液，按 2. 3 项下方法测定样品及对照品的
HPLC 指纹图谱。采用国家药典委员会中药指纹
图谱相似度评价系统(2004 A)对 2010 年的 15
批药材、2011 年的 15 批次药材及 2 年内的 30 批
药材的图谱进行分析，分别建立了共有模式，并
计算了各样品指纹图谱与共有模式对照图谱 R
之间的相似度。以 2010 年 GBG-(XF)001 样品
的指纹图谱为例，对槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸
进行指认，见图 1。
a. 槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸。
图 1 2010 年 GBG-(XF)001 样品 HPLC图
Fig. 1 The HPLC fingerprint of GBG-(XF)001 sample in
2010
3. 2 药材指纹图谱分析
3. 2. 1 2010 年 15 批药材指纹图谱分析 将 2010
年采集的 15 批药材 HPLC指纹图谱的结果导入“中
药色谱指纹图谱相似度评价系统 A版”，采用“中位
数法”导出 15 批药材的共有模式，见图 2;并得各批
药材的相似度，见表 2。除样品 GBG-(BJ)001 外，
其他批次样品指纹图谱相似度均在 0. 90 以上。表
明贵州省 GAP基地种植杠板归药材相对较稳定;从
图谱对比，可知样品 4，5，6，8，9 图谱与对照图谱差
别相对较大，且其相似度结果均小于 0. 93，其他批次
药材均大于 0. 95。2010 年 15 批药材中，龙里县的 2
批药材的相似度在 0. 99 以上，此产地的杠板归药材
很稳定，相对于其他产地更适合种植杠板归药材。
3. 2. 2 2011 年 15 批药材指纹图谱分析 将 2011
年采集的 15 批药材 HPLC指纹图谱的结果导入“中
药色谱指纹图谱相似度评价系统 A版”，采用“中位
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图 2 2010 年 15 批杠板归药材的 HPLC指纹图谱
Fig. 2 The HPLC fingerprint of 15 batches of Polygonum perfo-
liatum samples in 2010
表 2 2010 年 15 批杠板归药材的相似度
Table 2 The similarity values of 15 batches of Polygonum per-
foliatum samples in 2010
No. 相似度 No. 相似度 No. 相似度
1 0. 988 6 0. 876 11 0. 997
2 0. 997 7 0. 952 12 0. 992
3 0. 974 8 0. 929 13 0. 967
4 0. 930 9 0. 911 14 0. 991
5 0. 924 10 0. 990 15 0. 995
数法”导出 15 批药材的共有模式，见图 3;并得各批
药材的相似度，见表 3。根据相似度系统软件对
2011 年 15 批杠板归药材进行评价的结果可知，除
样品 GBG-(GD)002 在保留时间为 41 min 左右时，
多了 2 个色谱峰外，其他药材指纹图谱“构型”基本
一致。相似度结果表明，2011 年这 15 批次杠板归
药材的相似度均高于 0. 94。与 2010 年的药材相
比，2011 年贵州省内的野生护育杠板归药材更具稳
定性。
图 3 2011 年 15 批杠板归药材的 HPLC指纹图谱
Fig. 3 The HPLC fingerprint of 15 batches of Polygonum perfo-
liatum samples in 2011
表 3 2011 年 15 批杠板归药材的相似度
Table 3 The similarity values of 15 batches of Polygonum per-
foliatum samples in 2011
No. 相似度 No. 相似度 No. 相似度
1 0. 991 6 0. 971 11 0. 995
2 0. 999 7 0. 986 12 0. 997
3 0. 989 8 0. 982 13 0. 988
4 0. 969 9 0. 985 14 0. 947
5 0. 946 10 0. 962 15 0. 999
3. 2. 3 2 年 30 批药材指纹图谱分析 将 2010 年
和 2011 年采集的 30 批药材 HPLC 指纹图谱的结果
导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统 A版”，采
用“中位数法”导出 30 批药材的共有模式，见图 4;
并得各批药材的相似度，见表 4 (药材编号同表 1)。
图 4 30 批杠板归药材的 HPLC指纹图谱
Fig. 4 The HPLC fingerprint of 30 batches of Polygonum perfo-
liatum samples
表 4 30 批杠板归药材的相似度
Table 4 The similarity values of 30 batches of Polygonum per-
foliatum samples
No. 相似度 No. 相似度 No. 相似度
1 0. 991 11 0. 993 21 0. 974
2 0. 995 12 0. 986 22 0. 987
3 0. 969 13 0. 962 23 0. 979
4 0. 93 14 0. 982 24 0. 982
5 0. 927 15 0. 995 25 0. 958
6 0. 868 16 0. 991 26 0. 992
7 0. 957 17 0. 998 27 0. 995
8 0. 917 18 0. 987 28 0. 989
9 0. 909 19 0. 971 29 0. 943
10 0. 994 20 0. 951 30 0. 998
将 2 年内 30 批药材图谱比较，发现这 2 年各个
产地的的药材都存在一定的差别。2010 年毕节地
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区样品 GBG-(BJ)001 的相似度为 0. 868，其他批次
相似度均在 0. 9 以上，其中大方的样品 GBG-(DF)
001 和 GBG-(DF)002，在 2010 年分别为 0. 991，
0. 995，在 2011 年分别为 0. 991，0. 998，贵州省大方
县种植的杠板归药材在 2 年内较稳定，差别较小;贵
定县样品 GBG-(GD)002 在 2010 年和 2011 年的相
似度为 0. 993，0. 992，龙里县样品 GBG-(LL)003 在
2010，2011 年的相似度为 0. 995，0. 998，表明贵定县
样品 GBG-(GD)002 和龙里县样品 GBG-(LL)003
来源地种植的杠板归药材相对其他来源地更稳定，
基地生产更成熟。
4 结论
分别比较同批次药材和不同批次药材的指纹图
谱结果，发现 2011 年这些产地的杠板归药材比
2010 年的药材更趋于一致，品质更好，较稳定。通
过 2 年的药材比较，发现大方县药材在这 2 年内是
最稳定的，差别不大;且贵定县样品 GBG-(GD)002
和龙里县样品 GBG-(LL)003 来源地种植的杠板归
药材相对其他来源地品质更稳定，基地生产更成熟，
但总体上来说，贵州省内杠板归药材的 GAP种植技
术还有一定的发展空间。
建立 HPLC指纹图谱的方法来评价各产地杠板
归药材的质量与稳定性是可行的，不仅能够从整体
上全面而有效地评价杠板归药材的质量，而且能够
为杠板归药材的 GAP种植提供科学依据。
［参考文献］
［1］ 黄鹤飞，张长城，袁丁，等 . 杠板归抗炎及抑菌活性部位研究
［J］. 安徽医药，2008，12(7) :59.
［2］ 隆万玉，李玉山 . 杠板归抗炎止咳作用的实验研究［J］. 临床
合理用药，2010，3(18) :34.
［3］ 张长城，黄鹤飞，周志勇，等 . 杠板归提取物抗单纯疱疹病毒-
Ⅰ型的药理作用研究［J］. 时珍国医国药，2010，21(11) :
2835.
［4］ 章永红 . 抗癌中药大全［M］. 南京:江苏科学技术出版社，
2000:217.
［5］ 林裕韬 . 杠板归煎剂治疗烧伤残余创面 21 例报告［J］. 福建
医药杂志，2001，23(2) :82
［6］ 李嫣，林文谋 . 杠板归外敷加围针治疗带状疱疹［J］. 海峡药
学，1997，9(3) :75
［7］ 中国药典 . 一部［S］. 2010:155.
Quality evaluation of wildlife tending Polygonum perfoliatum
TIAN Li1，3，CHEN Huaguo1，4，ZHOU Xin1，4* ，TAN Jicang2，XUE Jing2
(1. The Research Center Quality Control of Natural Medicine，Guizhou Normal University，Guiyang 550001，China;
2. Yuancheng Pharmaceutical Company，Guiyang 550002，China;
3. Chemical and Material Science College，Guizhou Normal University，Guiyang 550001，China;
4. Key Laboratory for Information System of Mountainous Areas and Protection of Ecological Environment，Guiyang 550001，China)
［Abstract］ Objective:To evaluate the quality of Polygonum perfoliatum collected from GAP planting base efficiently so as to
provide scientific evidence for its GAP tending plant by HPLC fingerprinting method. Method:Analysis was performed on a reserved-
phase column Lichrosher-C18 column (4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，A linear gradient elution of 0. 2% aqueous acetic acid and acetoni-
trile was used for the separation. Result:Wildlife tending P. perfoliatum was relatively stable. The chromatograms of the samples from
2011 were more accordant than those from 2010. Samples in Dafang were the most stable and had little differences during the two
years. The quality of P. perfoliatum planted in the regions of sample GBG-(GD)002 in Guiding and sample GBG-(LL)003 in Longli
were more stable and better than those from other regions. Conclusion:It is a feasible method that can be used to evaluate the quality
of P. perfoliatum for GAP planting.
［Key words］ wildlife tending;Polygonum perfoliatum;fingerprinting method;quality evaluation
doi:10． 4268 /cjcmm20120903
［责任编辑 吕冬梅］
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