免费文献传递   相关文献

凤尾丝兰子房离体培养中的激素效应研究



全 文 :第 1 5卷
] 9 94 年
第 1期
3月
四川林业科技
Sic h ua n F o r e s t r y Se i e n ce a n d T e e h n o l o g y
V o l
.
1 5
,
M a r
,
N O
.
l
1 9 9 4
凤尾丝兰子房离体培养中的激素效应研究
朱家骏 王运煌
( 四川省林业学校 )
摘 要
用 M s 培养基配方 为基本培养基 , 附加 K T 、 6一 B ^ 、 2 . 刁一 D 、 N ^ ^ 及 I B A 等 5 种壮 肠散素 ,
按不同水平与组合方式 , 以风尾丝兰 离体于房为试脸对 象 ,研究其在培养过程 中各分比阶技 的激
素效应 . 结果衣明 :脱分化 、 再分化及生根诱导各阶段 , 细胞激动 素与生长素的种类 、 性质 、 绝对浓
度及配合比例至 关重妥 。 K T 3~ 5 m s / L + 2 . 月一 D 0 . 1~ 0 . 2 m s / L 可 诱导愈伤组 织产 生 , 但 以
x T 4 m g / L + 2
. `一 n 0 . 1 m g L/ 效果轰好 ; 6一 B ^ > 一 9 m g /叶 N A A 0 . 1 5~ 0 . 2 m g / L 可诱 导 出芽 , 以 6一 B ^ s m s / L + N ^ ^ 0 . 2 m 8 /L 诱导率最高 , I B ^ 1一 Z m g / L 可诱 导生根 。
关键词 风尾丝兰 子房 离体培养 激素效应
前 全 `口
凤尾丝兰 ( Y o c ca 9 1 , 勿` )属丝兰属植物 ,原产北美 ,常绿灌木 。 花大 , 乳白色 。 花柄下垂 , 圆
椎花序 ,高大挺拔 ,亭亭玉立 ,是名贵的庭园观赏植物 。 凤尾丝兰的叶呈剑形 , 长可达 8 0 。 m , 富
含纤维 , 亦可制绳索或织物 。该物种引入我国后未见结实 , 习惯用根部产生的分粟与茎芽繁殖 。
繁殖量少 , 远不能满足园林观赏及城市绿化的需要 , 因而利用植物组织培养手段进行大量繁
殖 , 则势成必然 。
M ur as h论e , T . 41[ 19 7 4 年报道了用丝兰属的一个种 (Y 。 ca sP . ) ,以苗端为外植体 ,诱导了
不定苗及无性胚的发生 ,此外未见其它报道 。 我们 lj[ 利用凤尾丝兰子房为外植体进行离体培养
研究 , 完成了器官发生 、 植株再生及大 田移栽的全过程 。 在植物组织培养过程中激素的调节作
用虽有不少研究结果 , 但对凤尾丝兰子房离体培养 ,特别是在其分化过程中的激素效应尚未见
报道 ,本文 旨在这方面的研究结果作一专题报道与讨论 。
材料与方法
. 材料来源 本校校园内根萦繁殖 8 年生植株花蕾 。
. 培养墓 以 M s ( M u r a s h is e ,和 s k o o g , 19 6 2 )培养基配方为基本培养基 。 附加 L H (水
l期 朱家骏等 :凤尾丝兰子房离体培养中的激素效应研究 9
解乳蛋白 ) 40 0 m g / L, 蔗糖 : 愈伤组织诱导 4% ,分化诱导 3% 。 琼脂 7 . 5一 9 . 0 9 / L 。 以及不同
浓度 、 组合 的 K T (细胞激 动素 ) 、 6 一 B A (6 一节氨基 嗦吟 ) 、 2 . 4 一 D ( 2 . 4一二氯苯氧 乙 酸 ) 、
N A A (蔡乙酸 )及 BI A (叫噪丁酸 )等 ,调整 p H 值 5 . 5一 6 . 0 。 1 . 2 大气压消毒 15 分钟 。
3
. 材料处理 于 8 月中下旬剪取处于抱原细胞时期的花蕾 。 此时子房长度约为 0 . 6~
0
.
8 c m
。 在自来水下冲洗 10 分钟后 , 于 75 % 的酒精中稍加浸洗 ,然后用 0 . 1% 的 H g cl Z溶液
浸泡消毒 5 分钟 ,再用无菌水冲洗 3一 4 次 ,在超净工作台上剥去花被 ,取 出子房 。 将整块子房
横植于脱分化培养基上诱导子房启动 。待子房肿胀及愈伤组织产生后 ,经更换培养基完成再分
化诱导 。
4
. 培养条件 培养室温度在 2 4一 28 ℃ 之间 , 每天人工光照 10 ~ 12 小时 ,光照强度 2 0 0
L x

试验结果
1
. 植物激素对愈伤组织诱导的影响
试验过程中 , 我们在脱分化阶段诱导愈伤组织发生时 , 曾对 K T 、 6一 B A 、 2 . 4一 D 及 N A A
等分别与 M s 基本培养基配合使用 , 没有使子房启动 ; 改用 6一 B A 十 N A A 或 K T + N A A 或 6
一 B A 十 2 . 4一 D 与 M s 配合 ,还是未使子房启动并诱导出愈伤组织 。 当使用 K T + 2 . 4一 D 与
M s 配合后 ,则产生了不同程度的效应 。 接种 30 日后观察统计结果如下表 1 所示 :
表 1 植物激紊不同种类 、浓度及组合比例对愈伤组织诱导的影响 (浓度单位 : m g L/ )
编 号 月 B C D 刀 尸 , 口 I I J K L 万 N O
激 素 K T 2 2 2 3 3 3 4 4 4 5 5 5 6 6 6
种 类
2
, 4一 D 0 I n fl 。 1 5 0 . 2 0 0 . 1 0 0 . 1 5 0 . 2 0 0 . 1 0 0 . 1 5 0 . 2 0 0 . 1 0 0 . 1 5 0 . 2 0 0 . 1 0 0 . 15 0 2 0
接种数 (瓶 ) 4 0 4 0 4 0 4 0 4 0 4 0 4 0 4 0 4 0 4 0 4 0 4 0 4 0 40 4 0
愈伤组织产生数 (瓶 ) 0 0 0 2 4 1 8 1 0 3 7 3 0 2 4 2 8 2 3 2 l 1 1 0 0
诱 导率 ( % ) 0 0 0 6 0 45 2 5 9 2 . 5 75 6 C 7 0 5 7 . 5 52 。 5 2 7 . 5 0 0
表 1 中反映的试验结果说明 :
( 1 ) 培养基配方从 “ ` ” 号 ( M S + K T 4 m g / L + 2 . 4一 D O. , m g / L )最好 , 诱导率可达 9 2 . 5 % 。
接种在这一配方的培养基上的子房 , 5 天后即由乳黄色逐渐变为黄绿色并开始启动 ,逐渐增大
呈肿胀态 。 在 40 天时 , 由 0 . 8 。 m 增至 3 。 m ,个别的可达 4 c m ,并有不规则突起产生 ( 图 1 ) ,呈
绿色略带浅黄褐色 。 经切块更换培养基后 ,肿胀块仍可继续增殖 , 并形成结构致密的愈伤组织
(图 2 ) , 同时出现芽原基分化 (图 3 ) ,且有很高的分化率 。 这是最理想的愈伤组织结构 。
(2 ) 从激 素的组合比例看 . 其用量 K T 可在 3一 5 m g / L 之间 , 2 , 4一 D 可在 0 . 1~ 0 . 2 m g /



l期 朱家骏等 :凤尾丝兰子房离体培养中的激素效应研究 1 3
系的研究结果 ,具有一定的规律性和普遍性 ,为进一步深入研究提供了可靠的基础 。 同时植物
细胞 、 组织和器官等培养的研究中已发现 ,细胞分化和形态发生受着各种因素的影响 ,特别是
细胞激动素与生长素的拮抗作用等方面多但情况复杂而且有些现象甚至相互矛盾 . 尚有一些
植物目前还不能用已知的手段控制其脱分化与再分化过程 . 凡此种种 , 尚待进一步研究 。
参 考 文 献
1 朱家胶 . 王运煌等 . 凤尾丝兰子房离体培养的器官发生与植株再生 . 武汉植物学研究 , 19 91 ; 9 : 2“ ~ 2 7峨
2 崔激 . 植物激素与细胞分化及形态发生的关系 。 细胞生物学杂志 , 1 9 8 3 ; 2 ( 5 ) : l ~ 6
3 w
. 巴尔茨等 . 植物组织培养及其在生物技术上的应用 。 科学出版社 , 1 9 8 3 , 2 5 ~ 2 36
4 M
u r as h堪e , T , 1 9 7 4 : A n n . R e v . P la n t p h yS 协 l , . 2 5 . 13 5 ~ 1 6 6 .
5 S ko g
, F
.
a n d C
.
T s u i , 1 9 4 8
, C h e m k万 I co n t r o l 成 ` r o w t h a n d bdu 加 r m a t沁n 加 t o b aC co s t . m 胎 g m e n t s a n d c a ”此 e ul t ur e
自 V诉0 . A m e r . J . B o t , 3 5 , 7 8 2 or 7 8 7
6 S k o g
, F
.
a n d F
.
0
.
M il e r
,
1 9 5 7
, C b e m晚 l r e g u aI t fo n o f g r o w t h a n d or g a n ot r m a t句 n 切 p场 n t t is s u e s e u lt u r e 自 V 心,o ·
S ym P
·
S ce E x p
·
B il o , 1 1
:
1 18一 1 3 0 .
7 T e r r e y , J
.
G
.
a n d D
.
E
.
F os k e t
,
19 7 0
, A m e r J
.
oB t
,
5 7
,
1 07 2 ~ 1 08 0
.
8 5加 p s o n , s . F . a n d T e r r e y , J . G . 1 9 7 7 , P . n t p h y s沁 l , 5 9 , 4 ~ 9 ·
9 eZ r o n i
,
M
.
a n d M
.
A H a U , 1 9 8 0
,
N e w s
o r让 s , 9 , 5 11 ~ 5 8 6 .
10 C u r肠 o n , P . S . , D 口砂 . , O “ 口 ` . , 1 9 79 , 1 : 3~ 12 .
R e s e a T C h e S o n E f f e C t o f H o r m o n e s i n I S 0 l a t e d
e u l t u r e o f o va
r i e s o f 丫比ca g l a d 仪姐
Z h u J沮 j u n W a n g Y u n h u a n g
( S ic h u a n F o r e s t r y S e h o l )
A b s t r a c t M S e u l t u r e m e d u im w a s
P la n t h o r m o n e s s u e h a s K T , 6 一 B A , 2 .
e o m P o u n d e d
4 一 D , N A A
a s a b a s i C C u l t u t e m e d iu m
.
F i v e k in d s o f
a n d I B A w e r e a d d e d t o t h e b朋 ic e u l t u r e
m ed in m
.
T h e n a e e o r d i n g t o d if f e r e n t l e ve ls a n d e o m b ln a t fo n s o f e u lt u r e m e d iu m s
, e x P e r加 e n t s
w e r e ca
r r ie d o u t o n is o l a t ed o var 油 o f Y u ca 9 1沂~ , ia m ln g t o m a k e r es e a r c h in t o e fe e t o f h o r
-
m o n e s in d月资e r e n t i a t i o n s t a g e s o f e u l t u r e P r oc es s ·
K e y wo
r d s : Y林c a 9 1砰匆刃 , o v a r y , 15 0扭 t e d e u l t u r e , e f e e t o f h o r m o n e