全 文 :书·论著·
草血竭低极性部位化学成分的气相色谱-质谱法分析
杨艺茜,张 薇,陈海生(第二军医大学药学院,上海200433)
[作者简介] 杨艺茜,硕士研究生.研究方向:中药及天然活性成分
研究.E-mail:blue219sky@hotmail.com
[通讯作者] 陈海生,教授.研究方向:中药及天然活性成分研究.
Tel:(021)81871250;E-mail:haishengc@hotmail.com
[摘要] 目的 研究草血竭(Polygonum paleaceum Wal)低极性部位的主要化学成分。方法 草血竭用乙醇提取,提取
液回收乙醇后用石油醚萃取,采用气相色谱-质谱法(GC-MS)对草血竭低极性部位进行分析测定,与标准谱库进行比较分析,
并用峰面积归一化法计算各成分的质量百分数。结果 共检出40个化学成分,其中主要成分β-瑟林烯和反油酸乙酯含量较
高。结论 草血竭低极性部位主要成分为β-瑟林烯(59.32%)和反油酸乙酯(27.02%),并含有棕榈酸(4.18%)、13,27-cyc-
loursan-3-one(2.55%)、顺式-11-二十碳烯酸(1.31%)等化学成分。
[关键词] 草血竭;低极性部位;气相色谱-质谱联用分析
[中图分类号] R917 [文献标志码] A [文章编号] 1006-0111(2015)05-0434-03
[DOI] 10.3969/j.issn.1006-0111.2015.05.013
Analysis of the low polarity components fromPolygonum paleaceumby GC-MS
YANG Yiqian,ZHANG Wei,CHEN Haisheng(School of Pharmacy,Second Military Medical University,Shanghai 200433,
China)
[Abstract] Objective To investigate the low polarity compounds fromPolygonum paleaceum Wal.Methods The ethyl
alcohol extracts of Polygonum paleaceum Wal were extracted with petroleum ether.The components were separated and iden-
tified by GC-MS and elucidated by the comparison with the standard mass spectral data.The relative contents in percentage
were calculated using the area normalization method.Results 40compounds were identified.Naphthalene and(E)-9-octadece-
noic acid ethyl ester were the main components.Conclusion The low polarity components of Polygonum paleaceum Wal were
mainly consisted of naphthalene and(E)-9-octadecenoic acid ethyl ester(27.02%),along with hexadecanoic acid(4.18%),
13,27-cycloursan-3-one(2.55%)and cis-11-eicosenoic acid(1.31%).
[Key words] Polygonum paleaceum Wal;volatile oil compounds;GC-MS
草血竭 (Polygonum paleaceum Wal)为蓼科
植物草血竭的根茎,有散血止血,下气止痛,收敛止
泻之功效,民间用于治疗菌痢、慢性胃炎、胃十二指
肠溃疡等。国内外对草血竭药材化学成分的研究报
道不多,有文献通过现代分析化学的方法对草血竭
化学成分的分离、纯化、结构分析鉴定、抗氧化活性
及其抗炎镇痛等药理活性进行研究,发现草血竭中
可能含有植物甾醇或甾体皂苷、蒽醌或其苷类以及
糖类、酚类和鞣质类等,初步揭示草血竭清热解毒的
药理基础,对草血竭抗流感病毒有效成分的分离提
供了依据[1]。笔者采用气质联用(GC-MS)法对草
血竭的低极性部分进行分析鉴定,以期对草血竭中
有药用价值成分的开发利用提供科学依据。
1 仪器与材料
Thermo Trace GC Ultra气相色谱-质谱联用仪
(美国赛默飞世尔公司),Xcalibur工作站。
草血竭(药材由云南优克药业公司提供,批号为
20101101,经第二军医大学生药教研室张汉明教授
鉴定为蓼科植物草血竭 Polygonum paleaceum
Wal)。
2 方法与结果
2.1 药材的提取 取草血竭8kg,90%乙醇浸泡
过夜,加热提取3次,减压浓缩,得稠浸膏,用2倍体
积的石油醚(沸程90~110℃)进行多次过夜萃取,
合并萃取液后减压浓缩得石油醚部位,约56g,取适
量置冰箱(温度5℃)密封保存待做GC-MS分析。
2.2 气相色谱-质谱联用分析 色谱柱为 HP-5ms
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药学实践杂志 2015年9月25日第33卷第5期
Journal of Pharmaceutical Practice,Vol.33,No.5,September 25,2015
石英毛细管柱(30m×0.25mm,0.25μm);载气为
氦气,流量为1.0ml/min;柱温升温至40℃(保持
2min),再以10℃/min的速率升至280℃(保持
2min),最后以5℃/min的速率升至300℃(保持
20min);汽化温度为250℃;分流比为10∶1;进样
量为1.0μl;质谱监测器:EI源;电子能量70eV;离
子源温度250℃;标准库:NIST02质谱图库。
2.3 分析方法 气质联用仪检出40个峰(其总离
子流图见图1),利用所配 NIST02库进行自动检
索,按60%以上匹配率(SI和RSI均大于600,最大
值为1 000),并结合质谱裂解规律确定其化学成分,
共鉴定出31个化合物。同时运用峰面积归一法,通
过Xcalibur化学工作站数据处理系统,测得各化学
成分在石油醚部位中的质量百分数,见表1。
图1 草血竭低极性部位GC-MS总离子流图谱
3 讨论
3.1 本研究从草血竭的低极性部位共鉴定化合物
31个,占出峰物质总量的99.7%,主要为长链脂肪
酸及其内酯类和甾醇类。其中β-瑟林烯是草血竭石
油醚部位中检出的含量最高的组分,约占低极性成
分总量的59.32%,其质谱图见图2,其次为反式油
酸乙酯(27.02%),其质谱图见图3。长链脂肪酸及
脂肪酸酯为首次从草血竭中分离得到。
3.2 据文献报道,草血竭醇提物能清除OH-,有抗
脂质过氧化作用。白细胞受酵母多糖等刺激可引发
呼吸暴发,释放O2·
-,参与杀菌及抗肿瘤等作用。草
血竭醇提物能诱导并增强酵母多糖诱发的中性白细
胞释放O2·
-,这可能是其药理作用的基础[2]。另据
报道,草血竭提取物能延长正常小鼠的排便反射时
间,延缓胃排空,增加胃内酚红残留量,抑制小鼠肠
内容物推进。在体外,草血竭提取物对乙酰胆碱刺
激兔离体肠管的收缩无明显影响,说明草血竭对胃
肠功能的影响不是通过直接对抗胆碱能神经而引起
的,其对排便反射有明显抑制作用,说明草血竭对胃
表1 草血竭低极性部位化学成分及相对含量
序号
保留
时间
(t/min)
化合物名称 分子式
相对
分子
质量
相对
含量
(%)
1 4.04 3-甲基正己烷 C7H16 100 0.13
2 4.58 2-甲基辛苯 C15H24 204 0.01
3 8.76 枞油烯 C10H16 136 0.33
4 13.65 异松香芹醇 C10H16O 152 0.01
5 14.3
cyclohexane, 1-ethe-
nyl-1-methyl-2,4-bis
(1-methylethenyl)-
C15H24 204 0.01
6 14.84 石竹烯 C15H24 204 0.2
7 15.42 α-石竹烯 C15H24 204 0.02
8 16.02 β-瑟林烯 C15H24 204 59.32
9 16.61 蓝胺醇 C15H26O 222 0.06
10 18.57 2-己基-1-辛醇 C14H30O 214 0.03
11 19.2 十四酸乙酯 C16H32O2 256 0.03
12 20.27 13-甲基十四酸乙酯 C17H34O2 379 0.03
13 20.68 12-甲基十四酸甲酯 C16H32O2 256 0.06
14 21.3 棕榈酸乙酯 C18H36O2 284 4.18
15 22.2 14-甲基十六酸乙酯 C19H38O2 298 0.05
16 22.61
estra-1,3,5(10)-trien-
17á-ol
C18H24O 256 0.13
17 23.19 反式油酸乙酯 C20H38O2 310 27.02
18 24.39 9-甲基十七烷 C23H48 324 0.04
19 24.92 14-甲基十六酸乙酯 C19H38O2 298 0.06
20 25.21 9-甲基十七烷 C23H48 324 0.05
21 25.85 脱氢枞酸甲酯 C21H30O2 314 0.01
22 26.02
3-乙基-5(2-乙基)丁基
十八烷
C26H54 366 0.04
23 26.59 山嵛酸乙酯 C24H48O2 368 0.02
24 29.19 顺式-11-二十碳烯酸 C20H38O2 310 1.31
25 30.38 17-三十五烯 C35H70 490 0.01
26 31.57 芥酸 C22H42O2 338 0.18
27 41.87 13,27-cycloursan-3-one C30H48O 424 2.55
28 42.94
9,19-cycloergost-24(28)-
en-3-ol,4,14-dime-
thyl-,acetate,(3á,
4à,5à)-
C32H52O2 468 1.19
29 43.25
2-亚甲 基-3α,5β-胆 甾
烷醇
C28H48O 400 0.4
30 46.19
20-ethynyl-4-pregnene-
20-ol-3-one
C23H32O2 340 1.18
31 47.64
2-乙 烯 基-5β-胆 甾-3α-
醇
C28H48O 400 1.04
图2 β-瑟林烯质谱图
肠功能影响的机制可能是中枢性的[3]。目前对于草
(下转第444页)
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图3 甘油/二甘醇体系的HQI曲线
注:图示箭头表示的是二甘醇掺杂的质量分数
5 结论
拉曼光谱法结合优化光谱范围的移动窗口相关
系数法成功地提高了药物辅料中有毒掺杂物的检测
灵敏度,且优于近红外光谱的检测效果。在接下来
的工作中,需要结合一些更先进的化学计量学方法,
使该方法成长为现场快速检测药物辅料的备选
方法。
【参考文献】
[1] Khalique MA,Michael PM,Jean N,et al.Fourier transform
infrared and near-infrared spectroscopic methods for the de-
tection of toxic diethylene glycol(DEG)contaminant in glyc-
erin based cough syrup[J].Spectrosc,2010,24:601-608.
[2] Lin BL,Zhao ZX,Chong YT,et al.Venous diethylene gly-
col poisoning in patients with preexisting severe liver disease
in China[J].World J Gastroenterol,2008,14:3236-3241.
[3] Yua H,Cornettb C,Larsenb J,et al.Reaction between drug
substances and pharmaceutical excipients:formation of esters
between cetirizine and polyols[J].J Pharm Biomed Anal,
2010,53:745-750.
[4] Liltorp K,Larsenb TG,Wilumsenb B,et al.Solid state
compatibility studies with tablet excipients using non thermal
methods[J].J Pharm Biomed Anal,2011,55:424-428.
[5] Ali EMA,Edwards HGM,Scowen IJ.In-situ detection of
single particles of explosive on clothing with confocal Raman
microscopy[J].Talanta,2009,78:1201-1203.
[6] Lyndgaard LB,van den BF,de Juan A.Quantification of
paracetamol through tablet blister packages by Raman spec-
troscopy and multivariate curve resolution-alternating least
squares[J].Chemom Intel Lab Syst,2013,125:58-66.
[7] Rodriguez JD,Westenberger BJ,Buhse LF,et al.Quantita-
tive evaluation of the sensitivity of library-based Raman spec-
tral correlation methods[J].Anal Chem,2011,83:4061-
4067.
[8] Kim J,Hwang J,Chung H.Comparison of near-infrared and
Raman spectroscopy for on-line monitoring of etchant solu-
tions directly through a Teflon tube[J].Anal Chim Acta,
2008,629:119-127.
[9] Chu XL,Xu YP,Tian SB,et al.Rapid identification and as-
say of crude oils based on moving-window correlation coeffi-
cient and near infrared spectral library[J].Chemom Intel
Lab Syst,2011,107:44-49.
[10] Du YP,Liang YZ,Jiang JH,et al.Spectral regions selection
to improve prediction ability of PLS models by changeable size
moving window partial least squares and searching combina-
tion moving window partial least squares[J].Anal Chim Ac-
ta,2004,501:183-191.
[11] Ruzicka CMG,Arzhantsev S,Pelster LN,et al.Multivari-
ate calibration and instrument standardization for the rapid
detection of diethylene glycol in glycerin by Raman spectros-
copy[J].Appl Spectrosc,2011,65:334-341.
[收稿日期] 2015-05-29 [修回日期] 2015-07-26
[本文编辑] 顾文华
(上接第435页)
图3 反式油酸乙酯质谱图
血竭低极性部位检出的含量较高的β-瑟林烯的药理
活性研究甚少,有待进一步深入研究。
【参考文献】
[1] 罗 凡,侯 炜.草血竭抗流感病毒的研究[J].武汉大学学报
(医学版),2006,27(1):72-73.
[2] 李文广,张小郁.草血竭抗肿瘤作用的实验研究[J].中药药理
和临床,2001,17(6):31-32.
[3] 张小郁.草血竭提取物对胃肠功能的影响[J].中药材,2002,
25(3):192-193.
[收稿日期] 2014-08-23 [修回日期] 2014-11-07
[本文编辑] 顾文华
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