全 文 ：科研口农业科学 年第 期 下半月
宝华玉兰根际微生物分离及菌根结构观察
孙 莉
江苏农林职业技术学院 , 江苏句容
【摘 到 通过对宝华玉兰根际微生物分 离及菌根 结构观察分析 , 发现宝华玉兰根际土壤微生物都是 以 酵母菌和 细菌为主要种类 , 并伴随有少量的丝状真菌和放线菌。 得出宝华玉兰 生长过程中酵母菌和真菌都起着非常重要的 作用的 结论。
【关键词 」 宝华玉 兰 根际微生物 菌根结构 分离
【中图分类号」 文献标识码 」 文章编号
宝华玉兰 为我国特有树种 , 属木兰科木
兰属植物 , 野生种仅分布于江苏镇江宝华山国家森林公园 。 迄
今为止 , 对该种的研究仅见对其花粉形态 、 自然分布状况和群
落学调查的简要描述 , 而对于宝华玉兰根际微生物种群世界
范围内无人研究 。
一 、 材料与分析
材料
宝华玉兰根的收集
收集根样是时候需注意不要破坏宝华玉兰主根 , 实验选
取的是根部的须根 , 将须根与其周围部分土壤一同装入无菌
袋中 , 带回实验室后将须根周围的土壤稍微清理后放入 已配
好的 固定液中置于 ℃冰箱保存 、 备用 。 放入 固定
液时要保证所有的须根全部没入固定液中 。
固定液的配制
每 耐 固定液需 量取 甲醛 , 冰 醋酸和
耐 的 酒精 , 将这三种试剂 置 于瓶中摇匀 , 并且将瓶
口密封 。
宝华玉兰根际土壤的收集
从宝华玉兰的主要栽植区 , 采用三点取样法采集宝华玉
兰根际土壤 。 具体步骤 采样时 ,铲去表土 , 深挖 , 将
宝华玉兰根系及豁附其上的根际土壤一同装入无菌袋 中 , 并
且注明采集地点 、 日期 、 土样号 , 置 ℃冰箱保存 , 备用 。
供试培养基的配制
固定培养基 , 用于根际细菌培养 牛肉膏 , 蛋
白陈 , 氯化钠 分子式 , 琼脂 , 蒸馏水
耐 , 一
高氏一号培养基 , 用于根际放线菌培养 可溶性淀
粉 , 氯化钠 分子式 , 硝酸钾 分子式
, 磷酸氢钾 分子式 筑 · 玩。 , 硫酸镁 分子式
· , 硫酸亚铁 分子式 · , 琼
脂 一 , 蒸馏水
培养基 , 用于根际真菌的培养 去皮马铃薯
水煮 分钟 , 蔗糖 , 琼脂 一 , 蒸馏水 。
方法
宝华玉兰菌根鉴定
采用染色镜检法对菌根进行鉴定 , 将采回来的菌根用 自
来水洗净 , 剪成 长的小段 , 置于 耐 的试管中 。 剪完后
往试管中加入 的氢氧化钾并置于 ℃水浴锅中加热
分钟 。 取出样品后用清水将碱液洗净 。 洗净后将根放入 的
盐酸酸化 分钟 , 洗净后用 的酸性品红溶液对根进行
染色 。 用镊子捏取 一 根根段放在载玻片上 , 盖上盖玻片放在
显微镜下观察 。
一 一 一
宝华玉兰根际微生物的分离
称取 宝华玉兰根际土壤 , 放入装有 耐 无菌水的
摇瓶 加入适 量玻璃珠 , 室温下 · 皿 一 , 振荡
, 静置 皿 后 , 取上清液逐级稀释至 一 、 一 、
一 , 取 一 、 一 及 一 稀释液 涂布于供试培养基
平板上 , 重复 次 , ℃培养 。 三天后对这些培养基进行观
察 , 得出根际土壤中微生物的种类和数量 。
二 、 结果与分析
宝华玉兰根际微生物种群分离
对采集回来的三种土样进行土壤分离实验 , 共分离出真
菌 株 , 酵母菌 株 , 细菌 株 , 放线菌 株 , 并
纯化培养获得真菌 株 , 酵母菌 株 , 细菌 株 , 放线
菌 株 。 从整体来看 , 三个地点酵母菌的分离率都是最高的 ,
其次是细菌 , 详细数据见表 。
表 宝华玉兰根际微生物种群分离数据表
采集地点
菌落 宝华山 自然林 树木园 混交林 园区 纯林 合计
丝状真菌 数量分离率
酵母菌 数量 员 员分离率
细菌 数量
分离率
放线菌 数量分离率
宝华玉兰根际真菌侵染数据分析
在自然生长情况下 , 宝华玉兰生长情况非常好 , 这与其菌
根化有直接关系 , 详细数据见表 。
表 宝华玉兰根际菌根测定数据表
玻片标号 宝华山 自然林
采集地点
园区 纯林 树木园 混交林
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三 、 结论
从宝华玉兰根际土壤微生物种群分离数据表明 , 无论是
自然林还是纯林或者混交林 , 宝华玉兰根际土壤微生物都是
以酵母菌和细菌为主要种类 , 并伴随有少量的丝状真菌和放
线菌可以看出在宝华玉兰生长过程中酵母菌和真菌都起着非
常重要的作用 。 自然林中宝华玉兰根际侵染率很高 , 纯林较
高 , 混交林较少 , 虽然三种不 同的地方真菌侵染率各不相 同 ,
但是也能说明宝华玉兰存在根际共生真菌 , 即菌根 , 而且这些
侵染都能够促进宝华玉兰的生长 。
一农民致富之友 一