全 文 ：第 20卷总第 33 期　　　　　　　　　　西北 民族 学院 学报(自然科学版) Vol.20 , No.4
1 9 9 9 年 1 2 月　　　　　Journal of Northwest Minorities University(Natural Science)　　Dec.,1999
杂交酸模超氧化物歧化酶的活性测定
牛　锋1 ,陈吉祥2 ,李　倬1
(1.西北民族学院 动物科学系 ,甘肃 兰州 730030;2.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研
究所农业部新兽药工程重点实验室 ,甘肃 兰州 730050)
摘　要:采用改进后的连苯三酚自氧化法测定了不同品系 、不同物候期杂交酸模鲜茎叶中超氧化物歧化
酶(SOD)的活性 ,并且对其影响测定的条件进行了分析。
关键词:杂交酸模;连苯三酚;超氧化物歧化酶
中图分类号:Q814　　　文献标识码:A　　　文章编号:1009-2102(1999)04-0028-02
　　杂交酸模是我国这几年从国外引进种植
的多年生草本植物新种。杂交酸模具有耐盐
碱 、耐旱 、耐寒 、速生 、高产 、高蛋白等生物学特
性 ,能在 pH 值 8以上的轻重盐碱地上生长 ,
其蛋白质含量高达 38.94%,并含丰富的氨基
酸 、维生素和矿物质 ,是替代粮食加工饲料的
一场革命[ 1].为此 ,我们对杂交酸模超氧化物
歧化酶(SOD)的活性进行了测定 ,其目的在于
开发这一新型物种的 SOD酶原 ,拓宽杂交酸
模的综合利用价值.
1　材料与方法
1.1　试剂及仪器
杂交酸模(由西北民族学院杂交酸模课题
组提供);邻苯三酚(AR ,遵义市第二化工厂);
其他试剂均为国产分析纯;UV—256FW 紫外
分光度计(Shimadzu产品).
1.2　操作方法
SOD的测定 ,根据文献[ 2] .称 0.5g 杂交
酸模鲜茎叶 ,冰浴 ,以 5ml预冷的50mmol/ lpH
7.8 Na2HPO4·12H2O-NaH2PO4·2H2O缓冲
液在匀浆机中制成匀浆 , 离心 3000r/min ,
15min ,上清液保存于 4℃,作为 SOD 测定的
酶粗提液.
连苯苯三酚自氧化系统:在试管中加入
pH8.2 的 50mmTris -HCl 缓冲液 3ml , 于
25℃保温 20min ,然后加入预热的连苯三酚
7μl ,迅速摇匀倒入 1cm 比色杯 ,在 325nm 下 ,
每隔 30sec测定吸收度一次 .自氧化速率为
0.073.O.D/min.
SOD活力测定系统:取 SOD 粗提液 ,同
上进行操作 ,同时设立空白对照系统.
酶活力单位定义:在本实验条件下 ,每分
钟抑制连苯三酚自氧化速率达 50%时酶量定
收稿日期:1999-10-08
基金项目:甘肃省科委 1998年农业攻关计划项目(GS982-A41-027), 国家民委 1999 年重点科研资助
项目(1999-018-D8).
作者简介:牛锋(1960-),青海化隆人 ,现任西北民族学院动物科学系副教授 , 主要从事动物生产和农业
生态学的教学和科研工作。
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DOI :10.14084/j.cnki.cn62-1188/n.1999.04.005
为一个活力单位(u).
单位体积活力(u/ml)=
0.073-样液速率
0.073 ×100%
50% ×反应液总体
积×样液稀释倍数样液体积 .
总活力(u)=单位体积活力(u/ml)×原
液总体积.
蛋白质含量测定:采用微量凯氏定氮法.
2　结果
　　依据邻苯三酚自氧化法测得的杂交酸模
不同品系 、不同物候期的 SOD活力结果见下
表.
杂交酸模不同品系 、不同物候期 SOD活力结果
品 别
结 果 活力(u/ml)
蛋白量
(mg/ ml)
总活力
(u)
比活
(u/mg-pro)
野生巴天酸模(成熟期) 65.2 32.05 3912 2.03鲁梅克斯 K-1(成熟期) 57.5 31.46 3450 1.82鲁梅克斯 K-1(苗　期) 67.0 32.88 4020 2.04杂交酸模 F1(苗　期) 70.1 30.36 4200 2.31杂交酸模原种(苗　期) 70.4 34.56 4212 2.04
3　讨论
　　超氧化物歧化酶能催化超氧阴离子(O-2·)
自由基的歧化反应:O-2·+O-2·+2H+ SOD　 H2O2
+O2.具有消除O-2·自由基的能力 , O-2·与生物
体内的生理现象及病理变化有密切的关系.
现已证明 , SOD 具有抗炎 、抗病毒感染 、抗肿
瘤 、抗衰老等作用 ,其这些重要作用引起了医
药界和生化界的极大关注.SOD 作为含金属
辅因子的酶普遍存在于动植物体中 ,并被提纯
和应用.而杂交酸模这种具有耐盐碱 、耐旱 、
速生 、高产 、高产 、高营养等生物学特性的新物
种 ,其 SOD活性如何? 还未见有报道.为此
我们采用改进后的连苯三酚自氧化法测定了
部分品系 、不同特候期杂交酸模鲜嫩茎叶中的
SOD活性 ,旨在全面了解其营养价值和扩大
开发利用前景.
从测定结果看 ,不同品系 、不同物候期杂
交酸模的活力 、蛋白量 、总活力和比活之间结
果无太大差异 ,且比较稳定.而且比活均在
1.8 u/mg-pro 以上 ,这与有关报道的其它动
植物 SOD活性比较[ 3] [ 4] ,杂交酸模中 SOD含
量甚高 ,优于其它动植物的 SOD ,很有可能成
为新的 SOD酶源 ,同时测定过程中苗期的酶
粗提液在 4℃-10℃下存放了较长时间(1月
半),其酶活力保持稳定不变 ,这无疑为其大规
模的开发提供了良好的贮运 、加工条件.
用邻苯三酚在pH 8环境中即可发生自氧
化作用 ,在 pH 8.2的 Tris-HCl缓冲液中 ,在
25℃恒温下用 325nm 波长测定 ,可提高自氧
化灵敏度 、准确度[ 5].因杂交酸模本身 PH 值
较低 ,为满足测定条件 ,当改变缓冲液的 PH
值 ,使最终测定浓度 PH 达到 8 时 ,对其 SOD
测定结果的影响较大 ,究其原因 ,还有赖于进
一步的探讨.
总之 ,本文仅测定了杂交酸模中的 SOD
粗略含量 ,其目的在于扩大杂交酸模的推广价
值和为医学 、营养学者扩大开发 SOD资源提
供依据.至于更深层次的纯化和性质研究还
有待于今后进一步工作.
参考文献:
[ 1] 牛锋等.一种极富开发推广价值的新物种 杂交酸模[ J].西北民院学报 , 1999.20:(1), 48-53.
[ 2] 谢卫华 ,姚菊芳 ,袁勤生.连苯三酚自氧化法测定 SOD活性的改进[ J] .医药工业 , 1988.19:(5), 217-
219.
[ 3] 侯淦泉 , 王厚行.十八种动植物及其制剂 SOD含量探讨[ J].生化药物杂志 , 1991.56:(2), 25-26.[ 4] 刘丰 , 王祝鸣 ,黄立.大豆 SOD的含量[ J] .生化药物杂志 , 1991 , 57:(3), 17-18.[ 5] 魏宜琴.SOD的活力测定法[ J].中国生化药物杂志 , 1992 , 60:(2), 24-25.
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