全 文 ：· 成分化学 `
栽培与野生天仙藤化学成分研究
辽 宁 省 中 医 研 究 院
辽宁省铁岭市医药总公司
房 圣民
龙献 民
吴孝强
王玉琢
王 非
件如新
伊 霞 侯 政
摘要 人工栽培与野生天仙藤的高效液相色谱 、 紫外光谱基本一致 ;薄 层 层析 图谱有的对应斑 点
颜色不同 , 二者均有与马兜铃酸 D 、 木兰碱 、 日一谷劣醇对应斑点。 经 薄 层扫描测定 , 两者上述三种成
分的相对含量有很大差别 。
天仙藤为马兜铃科 植 物 马 兜 铃 A ir st ot -
c h i a e on t or t
a B g e
. 或 A · d e b i l i s s i e b . e t Z u c c ·
的茎叶 。 近年来马兜铃已由野生转为栽培 , 因而
天仙藤的产量也 日益增多 , 但天仙藤的化学成
分未见详细报道 。 本文通过对栽培与野生天仙
藤的化学成分对比研究 , 为合理利用栽培天仙
藤提供科学依据 , 研究结果报告如下 。
② 乙醚 ; ③饱和 雷 氏 钱 盐 ; ④蒸馏水 , ⑤氯
仿 : 甲醇 : 氨水 ( 7 : 3 : 0 . 5 ) 。 显 色 剂 : ①
2 0% H
ZS o ` 溶液 , ②改良碘化秘钾 。
( 1) 将野生与栽培天仙藤 乙醉提取液与日-
谷街醇对照液点于 薄 层 板 上 , 用展开剂①展
开 , 先后在 3 6 5 n m 紫 外灯下及显色剂①显色 ,
结果见图 1 。
八片é00以彭O
红蓝
口O及习DZ红灰州。OC以U白汽亡1
材 料 及 仪 器
材料 栽培与野生天仙藤为北马 兜铃 .A
c o n t o r t a B s e
·
)的茎叶 , 均采自铁岭同一地区 。
仪 器 日立 6 35 型液相色谱仪 ; U v 一 v is 紫
外分光光度计 ; 岛 津 C S 一 9 20 薄层扫描仪 ; 毛
细管 ( 美国 D r u m m o n d 厂 ) 。
方 法 及 结 果
样品液的制备 : 分别取栽培与野生天仙藤
( 二者茎 、 叶比例基本一致 ) , 粉碎后 , 过 20
目筛棍合均匀 , 分别准确称 取 2 09 , 在索氏提
取器中用乙醇提取 6小时 , 至提取液无色 , 放
置过夜 , 过滤 , 滤液回收 乙醇浓缩 至 2 5m l 于
容量并中 ( 各 5 份 ) , 供点样用 。
总酸提取 : 取栽培与野生品的 乙醇提取液
各一定量 , 按总酸提取方法仁` ’提取总酸 , 供马
兜铃酸 D 的定性定量用 。
( 一 ) 定性分析
1
. 薄层层析
取薄层用硅胶 G ( 青 岛 ) 用 0 . 4%柠檬酸
溶液 ( 含 C M C O . 2% ) 调匀 , 用 手 动 涂布器
制板 , 活化后备用 。展开剂 : ①苯 : 乙醚 ( 5 : 2 ) ;
g
娜沙
红蓝止夕污绿
,红 吕蓝
{万{{犷军`形 “ 。 红爪
1 } ~
`水 l
J卜勺图 1 展开荆①薄层圈汾
1
。 野生 2 . 栽培 5 . 日一谷 苗醉
A
.
3 6 5n m紫外灯下 B . 显 色剂①显 色
从图 1看出两样品薄层中有的对应斑点颜
色不同 , 二者均有与卜谷街醇对应斑点 。
〔2) 将野生与栽培天仙藤 乙醇提取液与木
兰碱苦味酸盐点在同一薄层板上 , 用展开剂②
③④依次先后 3次展开 , 第 4 次用展开剂⑥展
开 ,在 3 65n m 紫 外灯下及显色剂②显色观察 ,
两样品中均有与木兰碱 对 应 斑 点 。 结果见图
2
o
( 3) 将野生与栽培天仙藤的总酸丙酮溶液
与马兜铃酸 D 对照品溶液点在同一薄板 L , 用
中药材第 13 卷第 6 期 1 9 9 0 年 6 月
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 1990. 06. 015
·。· .隧 m秒洲渊洲甲口叮 0 0 . { {, 。 亡 l匕一生 一 ~三 _ 一气 一习 卜一二一立止上一习
的廿.60
.
9 -
图 2 展开荆⑤薄层图谱 ( 4次展开 )
1
。 野 生 2 . 栽培 5 . 木兰碱
A
.
3 6 5n m 紫外灯观察 B . 喷改良碘化秘钾
展开剂①三次展开后 , 先后在 3 6 5n m 紫外灯下
及显色剂①显色观察 , 样品中均有与马兜铃酸
D 的对应斑点 , R f 、 颜色完全一致 。 结果见图
3 ( 图中除马兜铃酸 D 外 , 其它斑点省略 ) 。
图 4 离效液相色讲
1
。 野生 2 。 栽培
198口日
159口日
。 。 揭 。 褐 {} 。护裁
.`扩尸
31拓
司户了
280
31`
1 _ 2_ S
{ 0 0 二卜一 1一 2一 5
图 3 总酸展开剂①薄层图谱
1
。 野生 2 . 栽培 5 . 马兜铃酸 D
A
.
3 6 5 n m紫 外灯下 B . 显 色剂①显 色
2
. 高效液相色谱
工 作 条 件 : 柱 长 4 x 2 50 m m ; 填 充 料
N u c l e o s i l C : :
,
5林m ;流动相 4 0% 乙睛 + 0 . 0 2%
醋酸 ( 6 0 % ) , 流速 0 . g m l /m i n , 温度室温 ;
检测器 U V ( 2 5 4n m ) 。 结果见图 4 。
3
. 紫外光谱
野生与栽培品 乙醇提取 液 的 紫 外光谱比
较 , 结果见 图 5 。
( 二 ) 定 t 分析
薄层扫描条件 : 外标一点法 , 扫描方式反
射 法 , 锯 齿 扫 描 , s x = 6 , 狭 缝 1 . 2 x l . 2
m刃比。
1
. 木兰碱的含量测定
线性范围经测定 , 木兰碱 在 0 . 25 ~ 2 . 0林g
范围 内呈 线 性 关 系 , 求 得 回 归 方 程 y =
圈 5 策外光图份
1
。 野生 2 。 栽培
4 0 4
.
4 8 2 + 8 1 4
。
9 3 9X
, r = 0
. 只9 3 1 。
稳定性试验 , 荧光斑点在 45 m in 内测定其
斑点面积稳定 。
分别取野生与栽培天仙藤乙醇提取液各 6
份 , 与对照品等量点样在同一薄板上 , 按薄层
定性条件展开后 , 以野生天仙藤提取液中与对
照品对应斑点的扫描面积 为 10 0% , 对相应的
栽培天仙藤提取液的斑点进行扫描测定 , 结果
见表 。
2
. 马兜铃酸 D 的含量测定
线性范围经测 定 , 马 兜 铃 酸 D 在 0 . 2 85
~ 1
.
32 5件g 范围内呈线性关系 , 求得回归方程
y = 1 1 7
。
9 3 + 6 5 6
。
7 5 x
, r = 0
。
9 9 9 3
。
稳定性试验 , 马兜铃酸 D 斑点在 4 5m in 内
. 2 8 . 中药材第 13 卷第 6 期 1 9 9 0 年 6谊
裹 野生与栽培天仙藤成分的相对百分含且
测定结果 ( 相当于野生的 % )
样 品 木兰碱 、 士妇翌瞥” p一谷幽醇又 士 S
仙藤提取液中与对照品的对应斑点的扫描面积
为 10 0%, 对相应的栽培 天 仙藤提取液中斑点
进行扫描测定 , 其结果见表 。
野生
栽培 6 9 。 9 9 士 2 . 2 1 { 5 ·工。 2 3 土 5 . 0 8 7 7 。 6 0 士 2 。 4 1
注 : 表 中数据为测 定三次的平均值 。
测定其斑点面积稳定 。
分别取野生与栽培天仙藤总酸丙酮液与对
照品等量点样在同一薄板上用展开剂①三次展
开 , 以野生天仙藤总酸中与马兜铃酸 D 对照品
的对应斑点的扫描面积 为 10 0% , 对相应的栽
培天仙藤总酸中斑 点进 行 扫描测定 , 结果见
表 。
3
. 日一谷摘醇的含量测定
线性范围经测定 , 日一谷街醇在。 . 12 5~ 2 . 。
拜g范围内呈 线性关系 , 求得回归方程 y = 1 0 9 +
l i i s x
, r = 0
.
9 9 5 5
。 稳定性试验 , 其斑点面积
在 45 分钟内稳定 。
分别取野生与栽培天仙藤乙醇提取液各 5
份 , 与对照 品等量点样在同一薄层板上 , 按薄
层条件展开后 , 喷 20 % H ZS o4 显 色 , 以野生天
讨 论
1
. 从定性分析结果 普出 , 野生与栽培天
仙藤在化学组分上稍有不 同 。 从薄层看有的斑
点在 3 6 5n m 紫外灯下颜色不 同 ; 从高效液相色
谱 、 紫外光谱看 , 二者基本相同 。 但木兰碱 ,
马兜铃酸 D , 日一谷街醇的含量有很大差别 。 这
可能是因生长环境不同有关 。 从提取液也能看
出野生提取液为深绿色 , 栽培为黄绿色 。
2
. 因茎叶含叶绿素较多 , 对薄层有干扰 ,
给木兰碱 、 马兜铃酸 D 的测定带来困难 , 为了
使被测组分清晰不受干扰 , 木兰碱的测定采取
板上分步分离的方法再测定 。 马兜铃酸 D 是将
总酸 3 次展开 , 使酸 D 与其它干扰成分分开再
测定 。
3
. 从 已测定成分的相对百分含量上看出 ,
野生与栽培天仙藤有所差别 , 但药理作用上是
否有差别 , 有待进一步做药理验证 。
参 考 文 做
〔i 〕 李舒养等 : 广西植物 , ( 2 ) : 1 5 , 1 9 8 0
P A N 一O P光度法测定当归中微量锌
广西中医学院
用 P A N 〔 1一 ( 2一毗呢偶氮 ) 一 2一禁 酚 〕显
色 , 以非离子表面活性剂增溶 , 在水相中直接
光度法测定微量锌 , 在金属材料等的分析中已
得到广泛应用 。 我们 以文献 〔` ’ “ ,为基础 , 通过
条件试验 ,在 pH 9 . 0~ 9 . 5的氨性缓冲溶液中 ,
以乳化剂 oP ( 聚 乙二醇辛基苯基醚 )增溶 , 在
水相中直接测定当归〔A n ge l ic a is en sn is (Ol iv )〕
中锌的含量 。 方法简便快速 , 准确度高 , 重现
性好 , 宜于基层单位推广使用 。
一 、 材料及仪器
当归由本院中药鉴定教研室提供 , 产地甘
肃 。
黄毓麟 张毅 贞
72 1型分光光度计 。
氨性缓冲溶液 , p H 9 . 5 ; 0 . 1% P A N 乙
醇溶液 , 20 % O P 水溶液 , 0 . 6% D D T C ( 二
乙胺硫代甲酸钠 ) 乙醇溶液 , 20 %柠檬酸钱溶
液 , 5 % 六偏磷酸钠溶液 ; 0 . 1% 磷菲罗琳溶
液 , 双蒸馏水 。 所用试剂均为分析纯 。
二 、 方法和结果
1
。 标 准曲线
锌标准溶液 : 称取 0 . 2 5 009 高纯锌 , 加盐
酸溶液 ( 1 : 1 ) 10 m l 溶解 。 移入 5 0 m l 容量瓶
中 ,加水定容 ,混匀 。 此为含锌50 0林g / m l的储备
液 。 将此溶液稀释1 0 倍 , 即得含锌 5 . 郊 g /m l的
中药材第 13 卷第 6 期 1 任 9 。年 6 月